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文檔簡介
1、Determination of a、保健食品中a -亞麻酸丫 -亞麻酸的測定-linolenic acids in health food1. 范圍本方法規(guī)定了保健食品中a -及丫 -亞麻酸的測定方法。本方法適用于油脂保健食品中a -及丫 -亞麻酸含量的測定。本標準還適用于油脂保健食品中C16C22不飽和脂肪酸含量的測定。本方法最低檢出量:Y -亞麻酸為0.050卩g、a -亞麻酸為 0.030 卩 g o本方法最佳線性范圍:00.50mg/mL2. 原理將油脂試樣(或試樣提取的脂肪),經(jīng)氫氧化鉀皂化,在三氟化硼存在下甲醇酯化,然后用氣相色譜儀分析,采用外標法定量。3. 試劑所用試劑除注明外
2、均為分析純3.1正己烷:沸點68.7 C3.2氫氧化鉀甲醇溶液:C(KOH)為 0.5mol/L。稱取 28g KOH容于1000mL純水。3.3三氟化硼甲醇溶液(1 + 4):取40%三氟化硼乙醚溶液1 份,加甲醇4份,混勻即可。3.4 a -亞麻酸甲酯 >99.0%3.5 丫 -亞麻酸甲酯 >99.0%3.6標準儲備液稱0.0250g的a-亞麻酸甲酯及 0.0250mg的Y -亞麻酸甲酯標準品,分別用正己烷溶解,并定容于25mL容量瓶中,混均,濃度分別為1.0mg/mL 3.7標準使用液 分別取a -亞麻酸甲酯及丫 -亞麻酸甲酯標Et星優(yōu)脂就裝置準儲備液各5.0mL置于10mL
3、的容量瓶中,混均,a -亞麻酸甲酯和丫-亞麻酸甲酯的含量為 0.5mg/mL。4. 儀器與設備 4.1氣相色譜儀,附氫火焰(FID )檢測器。4.2數(shù)據(jù)處理機,或積分儀。4.3分析天平:1/10000。4.4分析天平:1/1000。4.5加熱式磁力攪拌器。4.6標準磨口燒瓶(50mL)和直形冷凝管。5. 分析步驟 5.1試樣制備脂肪的提取 按GB/T 5009.6中規(guī)定的方法提取。皂化稱取0.100g油脂(或脂肪)和磁力攪拌子一并放入50mL磨口燒瓶中(見圖1)加入4mL0.5mol/L氫氧化鉀甲醇溶液, 上部連接回流冷凝管,并固定于磁力攪拌器上,由冷凝管上 口向溶液中導入氮氣;使反應瓶中始終
4、充滿氮氣。開啟磁力 攪拌器,并加熱使反應液保持65 ± 5 C,攪拌回流約15min。甲脂化從冷凝管上部加入4mL三氟化硼甲醇溶液,攪拌 (65 ±5C ),回流約2min,冷至室溫,從冷凝管上部加入5mL正己烷繼續(xù)攪拌5min,移去冷凝管,加入 5mL飽和氯化鈉水 溶液,搖動數(shù)分鐘,轉(zhuǎn)移至25mL分液漏斗中分離水與有機相,再加3mL正己烷洗水相,分離,棄水相,合并有機相并 定容至10mL(濃度低時吹氮濃縮至 I.OmL)。供測定用。5.2氣相色譜參考條件5.2.1 色譜柱:FFAP (改性聚乙二醇 20M , 30m x 0.25mm i.d.0.25 卩 m)。柱箱溫度
5、:215 C。進樣口溫度:250 C。檢測器溫度:260 C。5.2.5 氮氣:50mL/min , 30 : 1 分流;氫氣:45mL/min ;空氣:500mL/min 。5.3定性分析在上述儀器條件下,分析取標準使用液和試樣測定液1.0卩L,注入氣相色譜儀,以保留時間來確定a -及丫 -亞麻酸甲酯。5.4定量分析試樣中a或丫 -亞麻酸甲酯色譜峰面積或峰高與標準的比 較定量。5.分析結果試樣中a或丫 -亞麻酸測定結果按(1)式計算6.1計算A172X (%) =X 0.952 X100%mx 1000(1 )式中:X a或丫 -亞麻酸含量,% ;A1試樣中a或丫 -亞麻酸甲酯色譜峰面積或峰高;A 2 標準使用液色譜峰面積或峰高;標準使用液濃度,mg/mL ;m試樣質(zhì)量,g;丫 -亞麻酸和a -亞麻0. 952亞麻酸換算系數(shù)。脂肪試樣再換算
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