微生物第四章微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上第四章 微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基一、名詞解釋C/N比：微生物培養(yǎng)基中所含碳源中的C原子的摩爾數(shù)與氮源中的N原子的摩爾數(shù)之比。EMB培養(yǎng)基：伊紅美藍(lán)乳糖培養(yǎng)基。氨基酸自養(yǎng)型微生物：不需要利用氨基酸作氮源的微生物，它們能把尿素、銨鹽、硝酸鹽甚至氮氣等簡單氮源自行合成所需要的一切氨基酸。單純擴(kuò)散：指疏水性雙分子層細(xì)胞膜（包括孔蛋白在內(nèi)）在無載體蛋白參與下，單純依靠物理擴(kuò)散方式讓許多小分子、非電離分子尤其是親水性分子被動通過的一種物質(zhì)運送方式。單細(xì)胞蛋白：單細(xì)胞蛋白，也叫蛋白，它是用許多工農(nóng)業(yè)廢料及石油廢料人工培養(yǎng)的微生物菌體。氮源：凡能提供微生物生長繁殖所需氮元素的營養(yǎng)源。光能

2、自養(yǎng)型：光為能源，無機(jī)物為氫供體，基本碳源是CO2的微生物?；墚愷B(yǎng)型：有機(jī)物為能源，有機(jī)物為氫供體，基本碳源是有機(jī)物的微生物。化能自養(yǎng)型：無機(jī)物為能源，無機(jī)物為氫供體，基本碳源是CO2的微生物?；九囵B(yǎng)基：僅能滿足微生物野生型菌株生長需要的培養(yǎng)基。基團(tuán)移位：指一類既需要特異性載體蛋白的參與，又需耗能的一種物質(zhì)要運送方式。鑒別培養(yǎng)基：一類在成分中加有能與目的菌的無色代謝產(chǎn)物發(fā)生顯色反應(yīng)的指示劑，從而達(dá)到只須用肉眼辨別顏色就能方便地從近似菌落中找出目的菌菌落的培養(yǎng)基。培養(yǎng)基：指由人工配制的、含有六大營養(yǎng)素、適合微生物生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物用的混合營養(yǎng)料。生長因子：是一類對調(diào)節(jié)微生物正常代謝所必需

3、，但不能用簡單的碳、氮源自行合成的微量有機(jī)物。水活度：在天然或人為環(huán)境中，微生物可實際利用的自由水或游離水的含量。速效氮：可以直接被植物根系吸收的氮。碳源：一切能滿足微生物生長繁殖所需碳元素的營養(yǎng)源。天然培養(yǎng)基：是指一類利用動、植物或微生物包括用其提取物制成的培養(yǎng)基。微生物營養(yǎng)：生物體從環(huán)境吸取和利用營養(yǎng)物質(zhì)，滿足自身生理需要的過程。無機(jī)營養(yǎng)型微生物：靠氧化無機(jī)物獲得能量來生存的微生物。選擇性培養(yǎng)基：一類根據(jù)某微生物的特殊營養(yǎng)要求或?qū)ζ浠瘜W(xué)、物理因素抗性的原理而設(shè)計的培養(yǎng)基。營養(yǎng)物：指具有營養(yǎng)功能的物質(zhì)，在微生物學(xué)中，它還包括非常規(guī)物質(zhì)形式的光輻射能在內(nèi)。有機(jī)營養(yǎng)型微生物：指對有機(jī)物氧化、分解

4、而進(jìn)行獲得能量的反應(yīng)來生活、生殖的微生物。主動運送：指一類須提供能量并通過細(xì)胞膜上特異性載體蛋白構(gòu)象的變化，而使膜外環(huán)境中低濃度的溶質(zhì)運入膜內(nèi)的一種運送方式。組合培養(yǎng)基：是一類按微生物的營養(yǎng)要求精確設(shè)計后用多種高純化學(xué)試劑配制成的培養(yǎng)基。單功能營養(yǎng)物：光輻射能。雙功能營養(yǎng)物：還原態(tài)無機(jī)物。多功能營養(yǎng)物：氨基酸類。PTS系統(tǒng)：磷酸轉(zhuǎn)移酶系統(tǒng)，即磷酸烯醇式丙酮酸己糖磷酸轉(zhuǎn)移酶系統(tǒng)。營養(yǎng)缺陷型：因喪失合成某些生活必需物質(zhì)的能力，不能在 上生長的，突變型菌株。原養(yǎng)型：指營養(yǎng)缺陷型突變株經(jīng)回復(fù)突變或重組后產(chǎn)生的菌株，其營養(yǎng)要求在表現(xiàn)型上與野生型相同。二、填空題1.根據(jù)微生物利用碳源和能源的不同可將微生物

5、分成為 自養(yǎng)型、異養(yǎng)型、光能營養(yǎng)型 和 化能營養(yǎng)型 四種類型，2.按照營養(yǎng)物質(zhì)在機(jī)體中生理作用不同可將其分為6種營養(yǎng)要素即 碳源、氮源、能源、生長因子、無機(jī)鹽 和 水 。3.凡是必須利用 有機(jī)碳源 作為主要碳源的微生物為異養(yǎng)微生物，凡是以 無機(jī)碳源 作為主要碳源的微生物為自養(yǎng)微生物。4.根據(jù)利用碳源不同，微生物可以分為 異養(yǎng)微生物 和 自養(yǎng)微生物 等類群。根據(jù)利用能源不同，微生物可以分為 化能營養(yǎng)型微生物 和 光能營養(yǎng)型微生物 等類群。5.微生物吸收營養(yǎng)物質(zhì)的四種運輸方式為 單純擴(kuò)散、促進(jìn)擴(kuò)散、主動運送 和 基團(tuán)移位 ；在營養(yǎng)物質(zhì)的四種運輸方式中，只有 基團(tuán)移位 運輸方式改變了被運輸物質(zhì)的化學(xué)

6、組成。能逆濃度梯度方向進(jìn)行營養(yǎng)物運輸?shù)倪\輸方式是 主動運送 、 基團(tuán)移位 ，既消耗能量又需要載體的運輸方式是 主動運送、基團(tuán)移位 。6.根據(jù)物理性狀不同，微生物的培養(yǎng)基可以分為 液體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基 等，根據(jù)物質(zhì)成分不同，微生物的培養(yǎng)基可以分為 天然培養(yǎng)基、組合培養(yǎng)基、半組合培養(yǎng)基 等。7.既能作為碳源又能作為能源的營養(yǎng)物稱為 雙功能營養(yǎng)物 。8.微生物細(xì)胞的主要組成元素是 蛋白質(zhì)、核酸、類脂和碳水化合物 ，細(xì)菌細(xì)胞的碳、氮比為 4：1 。9.廣義的生長因子除了維生素外，還包括 堿基、卟啉及其衍生物、甾純、胺類、C4C6的分支或直鏈脂肪酸 和 氨基酸營養(yǎng)缺陷型突變株所需要的氨基

7、酸 。10.大腸桿菌細(xì)胞參與基團(tuán)移位的特異蛋白載體稱為_，運輸某營養(yǎng)物至少需要_、_、_和_4種蛋白質(zhì)，葡萄糖通過基團(tuán)移位的方式進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，分子結(jié)構(gòu)發(fā)生_變化。11.一般好氧微生物生長需要的的氧化還原電勢為 +0.3+0.4V ，兼性厭氧菌在氧化還原電勢高于 +0.1V 進(jìn)行呼吸產(chǎn)能，低于 +0.1V 進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)能，厭氧菌只能生活在氧化還原電勢低于 +0.1V 的環(huán)境中。12.培養(yǎng)基配置的時候，C/N比通常為_，測定培養(yǎng)基中的氧化還原電勢用 刃天青 作為指示劑。13.光能異養(yǎng)菌以 光 作能源，以 CO2 為碳源，以 有機(jī)物 作供氫體將 CO2合成細(xì)胞有機(jī)物，化能自養(yǎng)菌以 氧化有機(jī)物 取得能量，

8、以 有機(jī)碳化物 作碳源合成細(xì)胞有機(jī)物。14.一般將化合物水解時釋放自由能在5.0千卡（20.9千焦）以上的稱為高能化合物。15.光能自養(yǎng)型微生物含_，主要以無機(jī)物如水，H2S、硫代硫酸鈉等作為供氫體還原 CO2 。16.化能自養(yǎng)型微生物的能源十分獨特，可以利用一些 還原態(tài)無機(jī)物 ，如NH4+，S，H2S，NO2-，H2，F(xiàn)2+等作為能源。三、選擇題1. PDA培養(yǎng)基屬于（ B ）。A、合成培養(yǎng)基 B、 半合成培養(yǎng)基 C、鑒別培養(yǎng)基 D、天然培養(yǎng)基2. 半固體培養(yǎng)基中瓊脂使用濃度為（ B ）。A、10-20% B、0.2-0.7% C、1.5-2.0% D、5-10%3. 從土壤中分離得到的微生

9、物的營養(yǎng)類型屬于（ D ）。A、 光能自養(yǎng) B、 光能異養(yǎng) C、 化能自養(yǎng) D、 化能異養(yǎng)4. 蛋白胨水培養(yǎng)基屬于（ D ）。A、合成培養(yǎng)基 B、 半合成培養(yǎng)基 C、鑒別培養(yǎng)基 D、天然培養(yǎng)基5. 高氏一號培養(yǎng)基屬于（ A ）。A、合成培養(yǎng)基 B、 半合成培養(yǎng)基 C、鑒別培養(yǎng)基 D、天然培養(yǎng)基6. 光能無機(jī)營養(yǎng)型微生物不以下列哪種物質(zhì)作為電子供體，以CO2作為生長的唯一碳源或主要碳源。（ A ） A、NO3- B、 S C、H2 D、H2S7. 紅螺菌科細(xì)菌的營養(yǎng)類型屬于（ B ）。A、光能自養(yǎng) B、 光能異養(yǎng) C、化能自養(yǎng) D、 化能異養(yǎng)8. 基團(tuán)轉(zhuǎn)位和主動運輸?shù)闹饕顒e是（ D ）。A、需

10、要載體參與 B、物質(zhì)從低濃度向高濃度運輸C、需要消耗能量 D、被運輸物質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)發(fā)生變化 9. 酵母菌屬于（ C ）微生物。A、好氧型 B、厭氧型 C、兼性厭氧型 D、微厭氧型10. 金黃色葡萄球菌屬于（ D ）型的微生物。A、光能無機(jī)自養(yǎng) B、光能有機(jī)異養(yǎng) C、 化能無機(jī)自養(yǎng) D、化能有機(jī)異養(yǎng)11. 可利用無機(jī)物為電子供體而以有機(jī)物為碳源屬于（ B ）型的微生物。A、 兼養(yǎng)型 B、異養(yǎng)型 C、 自養(yǎng)型 D、 原養(yǎng)型12. 藍(lán)細(xì)菌和藻類細(xì)菌的營養(yǎng)類型屬于（ A ）。A、光能自養(yǎng) B、 光能異養(yǎng) C、化能自養(yǎng) D、 化能異養(yǎng)13. 馬鈴薯培養(yǎng)基屬于（ B ）。A、合成培養(yǎng)基 B、 半合成培養(yǎng)基

11、 C、鑒別培養(yǎng)基 D、天然培養(yǎng)基14. 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基屬于（ D ）。A、合成培養(yǎng)基 B、 半合成培養(yǎng)基 C、鑒別培養(yǎng)基 D、天然培養(yǎng)基15. 培養(yǎng)真菌時，不可采用下列哪種措施防止細(xì)菌污染（ D ）。A、培養(yǎng)基中加抗生素 B、培養(yǎng)基中加入乳酸 C、培養(yǎng)基中加入合適的染料 D、降低培養(yǎng)溫度16. 培養(yǎng)真菌時，為防止細(xì)菌污染，通?？梢约尤肟股?，下列哪種抗生素可以進(jìn)行高壓蒸汽滅菌（ C ）。 A、青霉素 B、磷霉素 C、鏈霉素 D、氯霉素17. 配置培養(yǎng)基時通常加入（ A ）作為備用堿進(jìn)行pH內(nèi)源調(diào)節(jié)。A、CaCO3 B、氨水 C、生物堿 D、K2PO418. 實驗室培養(yǎng)放線菌常用的培養(yǎng)基是（

12、 B ）。A、PDA培養(yǎng)基 B、高氏一號培養(yǎng)基C、營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基 D、 EMB培養(yǎng)基19. 實驗室培養(yǎng)細(xì)菌常用的培養(yǎng)基是（ A ）。A、 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 B、 馬鈴薯培養(yǎng)基C、 高氏一號培養(yǎng)基 D、 查氏培養(yǎng)基20. 實驗室培養(yǎng)細(xì)菌常用的培養(yǎng)基是（ D ）。A、PDA培養(yǎng)基 B、高氏一號培養(yǎng)基 C、營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基 D、 EMB培養(yǎng)基21. 實驗室培養(yǎng)真菌常用的培養(yǎng)基是（ A ）。A、PDA培養(yǎng)基 B、高氏一號培養(yǎng)基 C、營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基 D、EMB培養(yǎng)基22. 實驗室制作固體培養(yǎng)基時，最常使用的凝固劑為（ B ）。A、明膠 B、瓊脂 C、纖維素 D、硅膠23. 試劑公司出售的糖發(fā)酵基礎(chǔ)培養(yǎng)基

13、和LB培養(yǎng)基屬于（ A ）。A、液體培養(yǎng)基 B、 合成培養(yǎng)基 C、脫水培養(yǎng)基 D、天然培養(yǎng)基24. 碳源和能源來自同一有機(jī)物的是微生物屬于（ D ）。A、光能自養(yǎng)型 B、化能自養(yǎng)型 C、光能異養(yǎng)型 D、化能異養(yǎng)型25. 微生物生長所需要的生長因子（生長因素）是（ E ）。A、卟啉和甾醇 B、氨基酸和堿基 C、維生素D、C4C6的分支或直鏈脂肪酸 E、以上都是26. 微生物細(xì)胞中的C素含量大約占細(xì)胞干重的（ C ）。A、 10% B、 30% C、 50% D、70%27. 細(xì)菌中存在的一種主要運輸方式為（ D ）。A、 單純擴(kuò)散 B、 促進(jìn)擴(kuò)散 C、 主動運輸 D、 基團(tuán)轉(zhuǎn)位28. 下列不屬于

14、主動運輸特點的是（ B ）。A、逆濃度 B、不需載體 C、需能量 D、運輸速度有飽和性 29. 下列哪項不是難養(yǎng)菌（ C ）。A、類支原體 B、類立克次氏體 C、動物病毒 D、寄生性真菌30. 下列哪項說法是錯誤的（ D ）。A、無機(jī)的氮源物質(zhì)一般不為微生物提供能量，有機(jī)的氮源物質(zhì)則提供能源。B、生長因子主要是構(gòu)成酶的輔基或輔酶，是某些酶的活性所必須的成份。C、微生物可以通過水合作用與脫水作用控制由多亞基組成的結(jié)構(gòu)如酶、微管、鞭毛與病毒等的裝配與解離。D、酵母菌最適生長的aw值比細(xì)菌最適aw值高（低），霉菌一般比其他微生物更耐干燥，生長的aw值通常在0.80左右。 31. 下列哪種培養(yǎng)基不屬于

15、選擇性培養(yǎng)基的是（ D ）。A、Ashby無氮培養(yǎng)基 B、Martin培養(yǎng)基 C、酵母菌富集培養(yǎng)基 D、高氏一號培養(yǎng)基32. 下列哪種培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基的是（ A ）。A、EMB培養(yǎng)基 B、Martin培養(yǎng)基 C、Czapek培養(yǎng)基 D、McClary培養(yǎng)基33. 下列哪種微生物不屬于化能無機(jī)營養(yǎng)型微生物的是（ E ）。A、硝化細(xì)菌 B、硫化細(xì)菌 C、鐵細(xì)菌 D、氫細(xì)菌 E、紫色非硫細(xì)菌34. 下列培養(yǎng)基哪種是半合成培養(yǎng)基（ B ）。A、 豆芽汁培養(yǎng)基 B、 PDA培養(yǎng)基 C、 米曲汁培養(yǎng)基 D、 察氏培養(yǎng)基35. 下列培養(yǎng)基哪種是合成培養(yǎng)基（ D ）。A、 LB培養(yǎng)基 B、 PDA培養(yǎng)基

16、C、 米曲汁培養(yǎng)基 D、 高氏一號培養(yǎng)基36. 下列物質(zhì)，哪一項是微生物通過基團(tuán)移位進(jìn)行運輸?shù)模?D ）。A、氧、二氧化碳、甘油、乙醇、某些離子等小分子物質(zhì)和親脂性分子 B、氨基酸、單糖、維生素及無機(jī)鹽等。C、有機(jī)離子、無機(jī)離子和氨基酸、乳糖等糖類。D、糖、糖的衍生物，嘌呤、嘧啶、堿基37. 下列物質(zhì)，哪一項是微生物通過主動運輸進(jìn)行運輸?shù)模?C ）。A、氧、二氧化碳、甘油、乙醇、某些離子等小分子物質(zhì)和親脂性分子 B、氨基酸、單糖、維生素及無機(jī)鹽等。C、有機(jī)離子、無機(jī)離子和氨基酸、乳糖等糖類。D、糖、糖的衍生物，嘌呤、嘧啶、堿基38. 以高糖培養(yǎng)酵母菌，其培養(yǎng)基類型為（ C ）。A、加富培養(yǎng)基

17、B、鑒別培養(yǎng)基 C、選擇培養(yǎng)基D、完全培養(yǎng)基39. 用來分離固氮菌的培養(yǎng)基中缺乏氮源，這種培養(yǎng)基是一種（ C ）。A、 基礎(chǔ)培養(yǎng)基 B、 加富培養(yǎng)基 C、 選擇培養(yǎng)基 D、 鑒別培養(yǎng)基40. 用玉米粉作培養(yǎng)基能為微生物提供（ C ）。A、 C源 B、 N源 C、 生長因素 D、 以上都提供41. 在培養(yǎng)基中加入蛋白胨主要為微生物提供（ C ）。A、生長因子 B、C 源 C、N 源 D、能源42. 紫硫細(xì)菌和綠硫細(xì)菌的營養(yǎng)類型屬于（ A ）。A、光能自養(yǎng) B、 光能異養(yǎng) C、化能自養(yǎng) D、 化能異養(yǎng)四、判斷題1.HPr對糖的吸有專一性。（ × ）2.KNO3作為氮源培養(yǎng)微生物被稱為生理

18、堿性鹽。（ ）3.pH通過影響營養(yǎng)物質(zhì)的電離程度而影響進(jìn)入細(xì)胞的能力。（ ）4.PTS系統(tǒng)的酶I和HPr是存在于細(xì)胞質(zhì)中，是特異性的蛋白質(zhì)。（ × ）5.Vit作為微生物的生長因子其主要作用是作為輔基和輔酶參與新陳代謝，是某些酶活性所必須的成份。（ ）6.半固體培養(yǎng)基可以用來觀察細(xì)菌的運動性以及產(chǎn)生硫化氫等生理特征。（ × ）7.不同的糖進(jìn)行基因轉(zhuǎn)移（基因移位）時，都有自已獨特的PTS系統(tǒng)，他們之間的差異主要是在酶II和酶III。一般HPr的酶I是相同的。（ ）8.不同的微生物對各種碳源的利用能力不同。（ ）9.不同微生物對生長因子的需求種類和數(shù)量不同。（ ）10.促進(jìn)擴(kuò)散

19、必須借助于特異載體蛋白和能量。（ × ）11.大多數(shù)微生物可以合成自身所需的生長因子，不必從外界攝取。（ × ）12.氮源一般只提供合成細(xì)胞質(zhì)和其他結(jié)構(gòu)的原料，不作能源，但少數(shù)自養(yǎng)微生物能利用銨鹽、硝酸鹽作為氮源和能源。（ × ）13.當(dāng)培養(yǎng)基中有葡萄糖和乳糖時，大腸桿菌和傷寒沙門氏菌通常優(yōu)先利用乳糖。（ × ）14.對含葡萄糖的培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌時可在121.3加熱20min即可。（ × ）15.紅螺細(xì)菌即紫色非硫細(xì)菌能利用異丙醇作為供氫體還原二氧化碳，并積累丙酮。（ ）16.化能自養(yǎng)型微生物絕大多數(shù)是好氧菌，能量來自無機(jī)物氧化的化學(xué)能，

20、以二氧化碳或碳酸鹽為碳源。（ ）17.藍(lán)細(xì)菌和弗蘭克氏菌都能用氮氣作氮源。（ × ）18.每種微生物都有最適的和最低的aw值，一般細(xì)菌的aw值比霉菌的高。（ ）19.培養(yǎng)細(xì)菌的培養(yǎng)基中通常需要加入較多氮源，而培養(yǎng)真菌則加入較多氮源。（ ？ ）20.生長因子是微生物生長代謝所必需的，但微生物本身又不能合成的微量的特殊營養(yǎng)物。（ ）21.生理酸性鹽、生理堿性鹽被微生物吸收后會造成培養(yǎng)基的PH收生變化。對微生物生長造成不到影響。（ × ）22.嗜鹽古細(xì)菌可以利用紫膜進(jìn)行光能轉(zhuǎn)換。（ ）23.同一種微生物在不同的生長時期所需要的aw值不同，如細(xì)菌形成芽孢時比正常生長時需要更高的aw

21、值。（ ）24.微生物的碳源物質(zhì)既提供碳素營養(yǎng)，又提供微生物代謝能量。（ ）25.微生物對含氮化合物的吸收利用速率通常是NH4+比NO3-慢。（ ）26.微生物進(jìn)行營養(yǎng)物質(zhì)促進(jìn)擴(kuò)散時，通過專一性載體蛋白運輸相應(yīng)的物質(zhì)，但有些微生物對同一種物質(zhì)的運輸有兩種或兩種以上的載體。（ ）27.微生物利用碳源物質(zhì)具有選擇性，不同微生物對不同糖類物質(zhì)利用有差別，如果幾種糖同時存在會形成分解代謝抑制。（ ）28.溫度通過影響營養(yǎng)物質(zhì)的溶解度、細(xì)胞膜的流動性以及運輸系統(tǒng)的生理活性而影響微生物的吸收能力。（ ）29.物質(zhì)進(jìn)行單純擴(kuò)散的能力和速率與該物質(zhì)的性質(zhì)膜內(nèi)外的該物質(zhì)濃度差、胞外pH值、以及離子強(qiáng)度，溫度有關(guān)

22、。（ ）30.細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)N素含量大概是絲狀真菌的3倍，而CN素含量大體相等。（ × ）31.許多的碳源物質(zhì)如葡萄糖等屬于雙功能營養(yǎng)物質(zhì)。（ × ）32.一般來說分子量小，極性小，脂溶性的物質(zhì)容易吸收。（ × ）33.有些微生物不能合成脂肪酸、甾醇、肌醇和膽堿等類脂物質(zhì)，必須從外界攝取。（ ）34.在不同生長條件下，微生物的營養(yǎng)類型會發(fā)生改變，有利于提高微生物對環(huán)境的適應(yīng)能力。（ ）35.在有些微生物中與物質(zhì)運輸有關(guān)的酶只有膜電勢存在的情況下才有最大活性。（ ）36.主動運輸?shù)倪\輸過程需消耗能量，運輸速度對細(xì)胞質(zhì)膜內(nèi)外物質(zhì)的濃度差有一定的依賴性。（ × ）

23、37.主動運輸系統(tǒng)的能量來自于膜內(nèi)外質(zhì)子的濃度差和電位差，使膜處于充能狀態(tài)，形成能化膜。（ × ）38.自養(yǎng)型微生物和異養(yǎng)型微生物的主要差別是所需碳源不同。（ ）39.自養(yǎng)型微生物以二氮化碳作為主要或唯一碳源。（ ）40.組成微生物細(xì)胞的各類化學(xué)元素的比例不是一成不變的，常因微生物種類、培養(yǎng)條件，菌齡的不同而在一定范圍內(nèi)發(fā)生變化。（ ）五、問答題1.簡述固體培養(yǎng)基的配制和滅菌方法。配制：加熱，將瓊脂融化；如果是要做試管，就加分裝3ml培養(yǎng)基到試管，塞上試管塞；如果是做平板，就將培養(yǎng)基倒入錐形瓶中；按照培養(yǎng)基規(guī)定的滅菌方式滅菌；如果是斜面，則將滅菌后的試管放成一個梯度，是培養(yǎng)基形成一個

24、斜面；如果是平板，就趁培養(yǎng)基凝固前將其倒入平板中，每個大約25ml，平板放置5min左右凝固后即可。滅菌方法：加熱滅菌：干熱滅菌與濕熱滅菌；過濾滅菌；輻射滅菌：放射線輻照滅菌與紫外線滅菌；化學(xué)藥品滅菌。2.敘述微生物的六大營養(yǎng)要素及其生理作用。碳源：碳素化合物是構(gòu)成機(jī)體 C骨架；構(gòu)成代謝產(chǎn)物的C骨架；提供能量。氮源：組成蛋白質(zhì)和核酸的主要元素 ；在細(xì)胞內(nèi)合成氨基酸和堿基，進(jìn)而合成蛋白質(zhì)、核酸等細(xì)胞成分，以及含氮的代謝產(chǎn)物；無機(jī)的氮源物質(zhì)一般不提供能量，有機(jī)的氮源物質(zhì)提供能源。能源：為微生物生命活動提供最初能量來源的營養(yǎng)物質(zhì)或輻射能。生長因子：輔酶或酶活化所需。無機(jī)鹽：構(gòu)成微生物細(xì)胞的成分；參與

25、并維持生物體的代謝活動：調(diào)節(jié)和維持酶活性；維持生物體內(nèi)的平衡：調(diào)節(jié)滲透壓、pH 、Eh；為化能自養(yǎng)微生物提供能源。水：好的溶劑；維持生物分子結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性；保證和參與生物化學(xué)反應(yīng)。3.舉例說明微生物在生長過程中培養(yǎng)基pH值可能發(fā)生的變化，并提出解決方法。微生物在生長繁殖和積累代謝產(chǎn)物的過程中，培養(yǎng)基的pH會發(fā)生如下變化：如微生物在含糖基質(zhì)上生長，會產(chǎn)酸而使pH下降；微生物在分解蛋白質(zhì)和氨基酸時，會產(chǎn)NH3而使pH上升；以（NH4）2SO4作氮源，會過剩SO42-，而使pH下降；分解利用陽離子化合物如：NaNO3,會過剩Na+而使pH上升。為了維持培養(yǎng)基pH值的相對恒定，常常在培養(yǎng)基中加入緩沖物質(zhì)

26、如磷酸鹽、碳酸鹽等，以緩和pH的劇烈變化。4.培養(yǎng)基中各營養(yǎng)要素的含量間一般遵循何種順序？為什么？在大多數(shù)化能異養(yǎng)微生物培養(yǎng)基中，除水分外，碳源含量最高，其后依次是氮源、大量元素和生長因子，它們間大體存在著十倍序列的遞減趨勢。5.什么叫單功能營養(yǎng)物、雙功能營養(yǎng)物和多功能營養(yǎng)物？試各舉一例。只具有一種營養(yǎng)功能的營養(yǎng)物稱為單功能營養(yǎng)物，如光輻射能源；同時具有兩種營養(yǎng)功能的稱為雙功能營養(yǎng)物，如銨根離子；同時具有三種營養(yǎng)功能的營養(yǎng)物稱為三功能營養(yǎng)物，如氨基酸。6.什么叫氮源？試從元素水平、分子水平和培養(yǎng)基原料水平列出微生物的氮源譜。凡能提供微生物生長繁殖所需氮元素的營養(yǎng)源稱為氮源。微生物的氮源譜如下：

27、類型 元素水平化合物水平培養(yǎng)基原料水平有機(jī)氮N·C·H·O·X復(fù)雜蛋白質(zhì)、核酸及其水解物等牛肉膏、酵母膏、餅粕粉、蠶蛹粉等N·C·H·O尿素、一般氨基酸、簡單蛋白質(zhì)等尿素、蛋白胨、明膠等無機(jī)氮N·HNH3、銨鹽等(NH4)2SO4等N·O硝酸鹽等KNO3等NN2空氣7.試述細(xì)菌通過基團(tuán)轉(zhuǎn)位吸收糖進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的分子機(jī)制。其機(jī)制分兩步：HPr被PEP激活；糖經(jīng)磷化而進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。8.什么叫能源？試以能源為主、碳源為輔對微生物的營養(yǎng)類型進(jìn)行分類。能為微生物生命活動提供最初能量來源的營養(yǎng)物質(zhì)或輻射能稱為能源?；茏责B(yǎng)

28、、化能異養(yǎng)、光能自養(yǎng)、光能異養(yǎng)。9.什么叫生長因子？它包括哪幾類化合物？微生物與生長因子的關(guān)系有哪幾類？試舉例說明。生長因子是一類對調(diào)節(jié)微生物正常代謝所必需，但不能用簡單的碳、氮源自行合成的微量有機(jī)物。廣義的生長因子包括維生素、堿基、卟啉及其衍生物、甾醇、胺類、C4C6的分支或直鏈脂肪酸，有時還包括氨基酸營養(yǎng)缺陷突變株所需要的氨基酸在內(nèi)。而狹義的生長因子一般僅指維生素。生長因子與微生物的關(guān)系有一下3類：生長因子自養(yǎng)型微生物：它們不需要從外界吸收任何生長因子，多數(shù)真菌、放線菌和不少細(xì)菌，如E.coli等。生長因子異養(yǎng)型微生物：它們需要從外界吸收多種生長因子才能維持正常生長，如各種乳酸菌、動物致病

29、菌、枝原體和原生動物等。生長因子過量合成型微生物：其代謝活動中，能合成并大量分泌某些維生素等生長因子的微生物，如各種生產(chǎn)維生素的菌種。10.什么叫水活度（aw）？它對微生物的生命活動有何影響？對人類的生產(chǎn)實踐和日常生活有何意義？水活度表示在天然或認(rèn)為環(huán)境中，微生物可實際利用的自由水或游離水的含量。其定量含義為：某溶液的蒸氣壓與純水蒸氣壓之比。影響：生長繁殖在水活度高的微生物代謝旺盛，在水活度低的范圍內(nèi)生長的微生物抗逆性強(qiáng)。意義：了解各類微生物生長的水活度，不僅有利于設(shè)計培養(yǎng)基，而且還對防止食物的霉腐具有指導(dǎo)意義。11.什么叫碳源？試從元素水平、分子水平和培養(yǎng)基原料水平列出微生物的碳源譜。凡可提

30、供構(gòu)成細(xì)胞物質(zhì)或代謝產(chǎn)物中碳素來源的營養(yǎng)物質(zhì)稱為碳源。微生物的碳源譜如下：類型元素水平 化合物水平 培養(yǎng)基原料水平有機(jī)碳C·H·O·N·X復(fù)雜蛋白質(zhì)、核酸等牛肉膏、蛋白胨、花生餅粉等C·H·O·N多數(shù)氨基酸、簡單蛋白質(zhì)等一般氨基酸、明膠等C·H·O糖、有機(jī)酸、醇、脂類等葡萄糖、蔗糖、各種淀粉、糖蜜等C·H烴類天然氣、石油及其不同餾份、石蠟油等無機(jī)碳C(?)C·OCO2CO2C·O·XNaHCO3、CaCO3等NaHCO3、CaCO3、白堊等12.什么叫自養(yǎng)微生物？它

31、們有幾種主要生理類型？舉例說明。以無機(jī)碳作為主要或唯一的碳源的微生物稱為自養(yǎng)微生物。生理類型：光能自養(yǎng)型：藍(lán)細(xì)菌、紫硫細(xì)菌、綠硫細(xì)菌、藻類；化能自養(yǎng)型：硝化細(xì)菌、硫化細(xì)菌、鐵細(xì)菌、氫細(xì)菌、硫黃細(xì)菌等。13.什么是氨基酸自養(yǎng)微生物？試舉一些代表菌，并說明其在實踐上的重要性。不需要利用氨基酸做氮源，能把尿素、銨鹽、硝酸鹽、甚至氮氣等簡單單氮源自行合成所需要的一切氨基酸，為氨基酸自養(yǎng)微生物。如根瘤固氮菌，能直接利用空氣中的氮氣合成自身所的氨基酸，直接或間接地為人類提供蛋白質(zhì)。14.試比較營養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入微生物細(xì)胞的幾種方式的基本特點。比較項目 單純擴(kuò)散 促進(jìn)擴(kuò)散 主動運輸 基團(tuán)移位 特異載體蛋白 無 有 有 有 運送速度 慢 快 快 快 溶質(zhì)運送方向 由濃至稀 由濃至稀 由稀至濃 由稀至濃 平衡時內(nèi)外濃度 內(nèi)外相等 內(nèi)外相等 內(nèi)部高 內(nèi)部高 運送分子 無特異性 特異性 特異性 特異性 能量消耗 不需要 需要 需要 需要 運送前后溶質(zhì)分子 不變 不變 不變 改變 載體飽和效應(yīng) 無 有 有 有 與溶質(zhì)類似物 無競爭性 有競爭性 有競爭性 有競爭性 運送抑制劑 無 有 有 有 運送對象舉例 水、甘油、乙醇、鹽類、O2 、 CO2 糖（真核生物）、 SO42-、PO43- 氨基酸、乳糖等糖類，Na、K等無機(jī)