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文檔簡介
1、植物組織培養(yǎng)試題 一、名詞解釋 1. 外植體 2.愈傷組織培養(yǎng)3. 單倍體育種4. 液體懸浮培養(yǎng)5. 玻璃化現(xiàn)象 1、外植體:在植物組織培養(yǎng)過程中,由植物體上切取的根、莖、葉、花、果、種子等器官以及各種組織、細(xì)胞或原生質(zhì)體等統(tǒng)稱為外植體。2、熱處理脫毒:利用病毒和植物細(xì)胞對高溫忍耐性不同,選擇適當(dāng)?shù)母邷靥幚砣静≈仓辏怪仓牦w內(nèi)的病毒部分或全部失活,而植株本身仍然存活。3、平板培養(yǎng)法:是把單細(xì)胞懸浮液與融化的瓊脂培養(yǎng)基均勻混合,平鋪一薄層在培養(yǎng)基底上的培養(yǎng)方法。4、消毒:指殺死、消除或充分抑制部分微生物,使之不再發(fā)生危害作用。5、玻璃化現(xiàn)象:在長期的離體培養(yǎng)繁殖時,有些試管苗的嫩莖、葉片呈現(xiàn)半透
2、明水漬狀,這種現(xiàn)象稱為玻璃化。1、脫毒苗:是指不含該種植物的主要危害病毒,即經(jīng)檢測主要病毒在植物內(nèi)的存在表現(xiàn)陰性反應(yīng)的苗木。2、滅菌:是指用物理或化學(xué)的方法,殺死物體表面和孔隙內(nèi)的一切微生物或生物體,即把所有生命的物質(zhì)全部殺死。3、褐變:是指外植體在培養(yǎng)中體內(nèi)的多酚氧化酶被激活,使細(xì)胞里的酚類物質(zhì)氧化成棕褐色的醌類物質(zhì),有時使整個培養(yǎng)基變褐,從而抑制其他酶的活性,影響材料的培養(yǎng)。4、紙橋培養(yǎng):將培養(yǎng)基中放入濾紙,再將材料置于濾紙上進(jìn)行培養(yǎng)稱為紙橋培養(yǎng)。5、微尖嫁接:指在人工培養(yǎng)基上培養(yǎng)實生砧木,嫁接無病毒莖尖以培養(yǎng)脫毒苗的技術(shù)。主要程序:無菌砧木培養(yǎng)莖尖準(zhǔn)備嫁接嫁接苗培養(yǎng)移栽。1. 植物細(xì)胞全
3、能性:一個生活的植物細(xì)胞,只要有完整的膜系統(tǒng)和細(xì)胞核,它就會有一整套發(fā)育成一個完整植株的遺傳基礎(chǔ),在適當(dāng)?shù)臈l件下可以通過分裂、分化再生成一個完整的植株。2. 人工種子:將組織培養(yǎng)產(chǎn)生的體細(xì)胞胚或不定牙包裹在能提供養(yǎng)分的膠囊里,再在膠囊的外面包上一層具有保護功能和防止機械損傷的外膜,形成一種類似自然種子的結(jié)構(gòu)。3. 試管苗馴化:植物組織培養(yǎng)中獲得的小植株,長期生長在試管或三角瓶內(nèi),體表幾乎沒有保護組織,生長勢弱,適應(yīng)性差,要露地移栽成活,完成由“異養(yǎng)”到“自養(yǎng)”的轉(zhuǎn)變,需要一個逐漸適應(yīng)的馴化過程。4. 微體嫁接:指將0.1-0.2mm 的莖尖作為接穗,嫁接到由試管中培養(yǎng)出來的無菌實生砧木上,繼續(xù)
4、進(jìn)行試管培養(yǎng),愈合成為完整的的植株。5. 器官培養(yǎng):植物的根、莖、葉、花器(包括花藥、子房)和幼小果實的無菌培養(yǎng)。6.玻璃化現(xiàn)象: 玻璃化現(xiàn)象指當(dāng)植物材料不斷地進(jìn)行離體繁殖時,有些培養(yǎng)物的嫩莖、葉片往往會呈透明水浸狀的現(xiàn)象。 1,快速繁殖(微繁殖): 用組織培養(yǎng)的方法,使植物的部分器官,組織迅速擴大培養(yǎng),并移植到溫室或農(nóng)田繁殖出大量幼苗的繁殖方法. 2,脫分化:將已分化組織的已停止分裂的細(xì)胞從植物體的抑制性影響下解脫出來,恢復(fù)細(xì)胞的分裂活性.一個成熟的細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)榉稚鸂顟B(tài)的過程叫脫分化. 3,原生質(zhì)體融合(體細(xì)胞雜交):就是使分離下來的不同親本的原生質(zhì)體,在離體條件下通過誘導(dǎo)發(fā)生的質(zhì)膜融合進(jìn)而細(xì)
5、胞核融合,像性細(xì)胞受精作用那樣互相融合成一體的現(xiàn)象. 4,脫毒苗:是指不含該種植物的主要危害病毒,即經(jīng)檢測主要病毒在植物內(nèi)的存在表現(xiàn)陰性反應(yīng)的苗木. 5,愈傷組織培養(yǎng):是指將母體植株上的外植體,接種到無菌的培養(yǎng)基上,進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo),生長和發(fā)育的一門技術(shù).1、細(xì)胞全能性:即植物體的每一個細(xì)胞都攜帶有一套完整的基因組,并具有發(fā)育成為完整植株的潛在能力。2、脫分化:將已分化組織的已停止分裂的細(xì)胞從植物體的抑制性影響下解脫出來,恢復(fù)細(xì)胞的分裂活性。一個成熟的細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)榉稚鸂顟B(tài)的過程叫脫分化。3、馴化:試管苗移植前可將培養(yǎng)瓶移到自然光照下鍛煉310d,讓試管苗接受自然光的照射,感受自然溫度的晝夜溫差現(xiàn)
6、象,使其壯實,然后再開瓶移植,經(jīng)過較低溫、濕度的處理,以適應(yīng)自然溫、濕度條件。4、微尖嫁接:指在人工培養(yǎng)基上培養(yǎng)實生砧木,嫁接無病毒莖尖以培養(yǎng)脫毒苗的技術(shù)。主要程序:無菌砧木培養(yǎng)莖尖準(zhǔn)備嫁接嫁接苗培養(yǎng)移栽。5、褐變:是指外植體在培養(yǎng)中體內(nèi)的多酚氧化酶被激活,使細(xì)胞里的酚類物質(zhì)氧化成棕褐色的醌類物質(zhì),有時使整個培養(yǎng)基變褐,從而抑制其他酶的活性,影響材料的培養(yǎng)。1、MS培養(yǎng)基 2、無病毒苗 3、細(xì)胞培養(yǎng)周期 4、花藥培養(yǎng) 5、繼代培養(yǎng)1、 植物組織培養(yǎng)2、 細(xì)胞全能性3、 愈傷組織培養(yǎng)4、 固體培養(yǎng)5、 污染6、 褐變7、器官培養(yǎng)8、試管苗的移植(移栽)9、脫分化10、外植體二、填空題1. 植物組
7、織培養(yǎng)按培養(yǎng)對象分為_、_、_、_、_等幾種類型。2. 一個已停止分裂的成熟細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)榉稚鸂顟B(tài),并形成未分化的愈傷組織的現(xiàn)象稱為"_"3. 不同的滅菌劑其滅菌的機理一般不一樣,次氯酸鈣和次氯酸鈉都是利用分解產(chǎn)生_來殺菌的;升汞是靠_來達(dá)到滅菌目的。4. 去除植物病毒的主要方法是_和_兩種方法,當(dāng)把二者結(jié)合起來脫毒效果最好5. 在通過微莖尖培養(yǎng)脫毒時,外植體的大小應(yīng)以成苗率和脫毒率綜合確定,一般以_mm、帶_個葉原基為好。6. White培養(yǎng)基_濃度低,適合生根培養(yǎng)。7. 一個已停止分裂的成熟細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)開狀態(tài),并形成_的現(xiàn)象稱為"脫分化"。8. BA /
8、NAA的高低決定了外植體的發(fā)育方向,比值低時促進(jìn)_的生長,這時_占主導(dǎo)地位;比值高促進(jìn)_的生長,這時_占主導(dǎo)地位。9. 進(jìn)行植物組織培養(yǎng)最基本的前提條件是_。 1、植物組織培養(yǎng)的理論基礎(chǔ)是植物細(xì)胞全能性。2、組織培養(yǎng)實驗室必要的設(shè)備有 超凈工作臺、 高壓滅菌器 、 空調(diào)機 、 天平 、 顯微鏡 、 蒸餾水發(fā)生器等。3、糖在植物組織培養(yǎng)中是不可缺少的,它不但作為離體組織賴以生長的 碳源
9、;,而且還能維持 培養(yǎng)基滲透壓 4、培養(yǎng)基滅菌一般在 101 kPa的壓力下,鍋內(nèi)溫度達(dá) 121 ,維持 20-30 min。5、在離體葉培養(yǎng)中,6-BA和KT利于芽 的形成;2,4-D利于愈傷組織 的形成6、在離體葉組織脫分化和再分化培養(yǎng)中,莖和芽的分化主要有4個途徑:直接產(chǎn)生不定芽、由愈傷組織產(chǎn)生不定芽、胚狀體形成、形成球狀體或小鱗莖等途徑。7、目前培育無病毒苗最廣泛和最重要的一個途徑是莖尖培養(yǎng)脫毒 。8、花藥培養(yǎng)前的預(yù)處理:低溫冷藏 是最常用的方法。1、植物組織培養(yǎng)的發(fā)展分為三個階段:萌芽階段 、 奠基階段 和 快速發(fā)展和應(yīng)用階段 。2、培養(yǎng)
10、基最常用的碳源是 蔗糖,使用濃度在1%-5% 常用 3 %。3、培養(yǎng)基的種類按其態(tài)相不同分為 固體培養(yǎng)基 與 液體培養(yǎng)基 ,其滅菌方法一般采用 濕熱消毒 滅菌方法。4、pH的大小會影響瓊脂的凝固能力,一般當(dāng)pH大于6.0時,培養(yǎng)基將會 變硬 ,低于5.0時,瓊脂 不能很好地凝固 。5、一般情況下,生長素/細(xì)胞分裂素的比值高,有利于 根的形成和愈傷組織 的形成;比值低,有利于 芽 的形成。6、選擇外植體時應(yīng)選擇 選擇優(yōu)良的種質(zhì)、選健壯的植株 、選最適的時期 和選取適宜的大小 。7、花藥和發(fā)粉培養(yǎng)的共同特點是利用花粉 (小孢子)染色體數(shù)目的單倍性,培育出單倍體植株。8、原生質(zhì)體的分離方法有機械分離
11、法和酶法分離法。 填空題 1植物組織培養(yǎng)按培養(yǎng)對象分為()、( )、( )、()、( )等幾種類型。 2一個已停止分裂的成熟細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)椋?)狀態(tài),并形成( )的現(xiàn)象稱為"脫分化"。 3 植物組織培養(yǎng)按培養(yǎng)過程中是否需要光,可分為( )培養(yǎng)和()培養(yǎng)。 4 植物組織培養(yǎng)按培養(yǎng)的方式分為()培養(yǎng)和( )培養(yǎng)。 5 目前植物組織培養(yǎng)應(yīng)用最廣泛的方面是( )和()。 6 由脫分化的細(xì)胞再分化出完整植株有兩種途徑,一種叫做(),另一種叫做( )。 7 不同組織培養(yǎng)類型之間的相同點是()。 8 進(jìn)行植物組織培養(yǎng)時,外植體可以是 ()、( ) 、() 、( ) 。 9 組織培養(yǎng)植株的再生
12、途徑有兩條:一是()發(fā)生,另一是()發(fā)生。 10 細(xì)胞的全能性,可以通過成熟細(xì)胞的()和()過程得以體現(xiàn)。 11植物組織培養(yǎng)的理論基礎(chǔ)是() 。 12 細(xì)胞全能性是指植物的每個細(xì)胞都具有該植物的( )和()的能力。 13 植物組織培養(yǎng)的特點是:()、( )、( )。 14 ( )和( )是目前植物細(xì)胞組織培養(yǎng)應(yīng)用最多.最有效的方面。 15 ( )培養(yǎng)和組織培養(yǎng)、器官培養(yǎng)并稱為三種最基本的、傳統(tǒng)的離體培養(yǎng)方式。 16 單細(xì)胞分離的方法有( )、() 。 17 常從離體培養(yǎng)的()組織分離單細(xì)胞。 18 浮培養(yǎng)根據(jù)培養(yǎng)的目的分為()和()兩種方式。 19 懸浮培養(yǎng)根據(jù)繼代培養(yǎng)時是否將培養(yǎng)細(xì)胞轉(zhuǎn)移到另
13、一容器分為()和()。 20 外植體器官發(fā)生的三種途徑包括()、()、( )。 21 幼胚培養(yǎng)與成熟胚培養(yǎng)在培養(yǎng)基成分上最大的不同點是( ) 。 22 進(jìn)行再生培養(yǎng)(如葉片)時,通過誘導(dǎo)培養(yǎng)基誘導(dǎo)出愈傷組織后應(yīng)更換分化培養(yǎng)基,分化培養(yǎng)基的特點是細(xì)胞分裂素的濃度應(yīng)比誘導(dǎo)培養(yǎng)基(23 ( )控制著植物離體器官的發(fā)育方向。 24 種子培養(yǎng)時打破休眠可在培養(yǎng)基中添加 (),或在接種前進(jìn)行()處理。 25 大多數(shù)植物花藥培養(yǎng)所要求的花粉發(fā)育適宜時期是在( ) 。 26 花藥培養(yǎng)屬()培養(yǎng),花粉培養(yǎng)屬于()培養(yǎng),但二者的培養(yǎng)目的一樣,都是要誘導(dǎo)花粉細(xì)胞發(fā)育成單倍體細(xì)胞,最后發(fā)育成()。 27 分離花粉的方
14、法有(),( ),()。 28 在無毒苗的組織培養(yǎng)中,外植體的大小與其成活率成(),而與脫毒效果成()。 29 去除植物病毒的主要方法是()和()兩種方法,當(dāng)把二者結(jié)合起來脫毒效果最好。30 莖尖培養(yǎng)根據(jù)培養(yǎng)目的和取材大小分為( )和()兩種類型。 31 脫毒苗鑒定與檢測的主要方法有() 、() 、( ) 、() 。 32應(yīng)用微尖嫁接技術(shù)進(jìn)行脫毒培養(yǎng)無病毒苗,主要程序為() ( ) () () ()。 33 “微型扦插”的主要原理是利用()來抑制植物原有的頂端優(yōu)勢,而使側(cè)芽和頂芽能共同生長,因為這種方法不通過()而再生,是最能使無性系后代保持原品質(zhì)特性的一種方法。 34 莖尖微繁殖過程一般包括
15、五個階段,即() 、() 、() 、( ) 、( ) 。 35 莖尖分生組織培養(yǎng)的目的主要是( ),其莖尖一般?。?) 毫米。為了使脫毒效果更好,可以將莖尖分生組織培養(yǎng)與() 結(jié)合起來。脫毒處理的試管苗,在用于生產(chǎn)之前,必須進(jìn)行( )。 36 莖尖外植體的大小與脫毒效果成() 。 37 危害植物的病毒主要是靠()的作物。 38 無性繁殖的種類由于病毒通過()進(jìn)行傳遞,在母株內(nèi)逐代積累。 39 溫湯浸漬處理是在()左右的溫水中浸漬 10 分鐘至數(shù)小時。 1、組織培養(yǎng)植株再生的途徑: 體細(xì)胞胚胎發(fā)生途徑 和 器官發(fā)生途徑 。2、培養(yǎng)基的主要成分包括 無
16、機營養(yǎng)成分(大量元素、微量元素和鐵鹽) 、 有機營養(yǎng)成分(包括維生素、氨基酸等) 、 植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì) 、 碳水化合物 、 其它物質(zhì) 。3、在固體培養(yǎng)時瓊脂是使用最方便、最好的 凝固劑和支持物 ,一般用量為 6-10gL 之間。4、一般情況下,生長素/細(xì)胞分裂素的比值高,有利于 根的形成和愈傷組織 的形成;比值低,有利于 芽 的形成。5、試管苗的生態(tài)環(huán)境: 高溫且恒溫 、 高濕 、 弱光 、 無菌 。6、愈傷組織的形態(tài)發(fā)生方式主要有&
17、#160; 不定芽方式 和 胚狀體 方式。7、無病毒苗的保存分:隔離保存和長期保存兩種方法。8、壓片染色法是檢測劃分發(fā)育時期的簡便有效方法,常用染色劑為醋酸洋紅。1、在植物組織培養(yǎng)中, 多用于誘導(dǎo)外植體脫分化,但當(dāng)誘導(dǎo)再分化,即誘導(dǎo)體細(xì)胞胚時,則應(yīng)去除培養(yǎng)基中的 ,而選用 、 、 。2、 和 的比值大時,有利于 的形成,比值小時,則促進(jìn) 的形成。(激素模式)。3、1902年德國植物生理學(xué)家Haberlandt提 概念。1962年,Murashige和Skoog發(fā)表的一種改良培養(yǎng)基,后來被稱為 培養(yǎng)基,現(xiàn)已經(jīng)廣泛應(yīng)用于植物組織培養(yǎng)。4、普通培養(yǎng)室要求每日光照 h,光照強度
18、 lx,溫度 之間。5、植物組織培養(yǎng)的三大難題: 、 、 。6、培養(yǎng)基的成分主要包括 、 、 、 等。1、植物熱處理脫毒有兩種方法:一種是_處理;另一種是_處理。 2、大多數(shù)植物組織培養(yǎng)的適宜溫度范圍是_,培養(yǎng)基的pH值范圍是_。3、原生質(zhì)體培養(yǎng)方法:_、_和_。4、在組織培養(yǎng)中,不耐熱的物質(zhì)用_法除菌,而培養(yǎng)基常用_法滅菌。5、原生質(zhì)體的分離方法有_分離法和_分離法。 6、6-BA / NAA的高低決定了外植體的發(fā)育方向,比值_可促進(jìn)根的生長;比值_可促進(jìn)芽的生長。 7、植物種質(zhì)保存的方式:_和_。 8、White培養(yǎng)基中_濃度低,適合試管苗的_培養(yǎng)。 9、單倍體細(xì)胞培養(yǎng)包括3方面:_、_和
19、_培養(yǎng)。三、單項選擇題 1、1974年我國朱至清等設(shè)計了( B )培養(yǎng)基,目前廣泛應(yīng)用在花藥培養(yǎng)中。A、馬鈴薯-2號 B、N6 C、W14 D、c172、組培室應(yīng)建立在安靜、清潔,并且在該地長年主風(fēng)向的( A )方向。A、上風(fēng) B、下風(fēng) C、左風(fēng) D、右風(fēng)3、制作每升固體培養(yǎng)基常用瓊脂的用量為( B )克。A、46 B、610 C、1015 D、15204、下列培養(yǎng)類型不屬于液體培養(yǎng)的是( D )A、旋轉(zhuǎn)培養(yǎng) B、紙橋培養(yǎng) C、振蕩培養(yǎng) D、看護培養(yǎng)5 、進(jìn)行莖尖培養(yǎng)脫毒時,通常以帶 1-3 個幼葉原基的莖尖作外植體較合適。則莖尖的長度約為( B )。 A 、 0.1-0.3mm B 、 0.
20、3-0.5mm C 、 0.4-0.6mm D 、 0.6-0.8mm6、下列現(xiàn)象中不屬于離體培養(yǎng)容易出現(xiàn)的三大問題的是( C )。A、污染 B、褐變 C、黃化 D、玻璃化7、超低溫種質(zhì)保存的溫度為( C )。 A、015; B、-80; C、-196; D、-2808、在植物組織培養(yǎng)表面滅菌時,常用的酒精濃度為( A )。A、70%-75% B、80%-85% C、90%-95% D、100%9、一般來說,在愈傷組織培養(yǎng)時,幼年細(xì)胞和組織比成年細(xì)胞和組織( B )。A、困難 B、容易 C、一樣 D、
21、不一定10、利用花粉或花藥培養(yǎng),進(jìn)行單倍體育種選育一個新品種只需( C )年。A、1-3 B、2-4 C、3-5 D、4-61、細(xì)胞工程、( B )、酶工程、發(fā)酵工程是生物技術(shù)的主要范疇。A、蛋白質(zhì)工程 B、基因工程 C、微生物工程 D、生化工程2、配制( B )溶液時應(yīng)先用10%的HCl溶解,再加蒸餾水定容。A、2,4-D B、BA C、GA3 D、IAA3、煉苗的環(huán)境開始時和( A )相似,后期類似于田間栽培條件。A、培養(yǎng)室條件 B、無菌界室條件 C、緩沖間條件 D、準(zhǔn)備室條件4、離體培養(yǎng)常用的誘導(dǎo)生根的生長調(diào)節(jié)物質(zhì)主要是( A )。A、生長素 B、細(xì)胞分裂素 C、脫落酸 D、乙烯5、植物
22、組織培養(yǎng)實驗室需要定期用( A )進(jìn)行熏蒸。A、高錳酸鉀和甲醛 B、酒精和洗液 C、高錳酸鉀和酒精 D、高錳酸鉀和洗液6、進(jìn)行無菌操作前,工作人員可以不必( A )。A、洗臉 B、換拖鞋 C、穿工作服 D、洗手7、電子天平的感量一般在( C )范圍。A、0.1g或0.01g B、0.01g或0.001g C、0.001g或0.0001g D、0.1g或0.0001g8、進(jìn)行干熱滅菌時,應(yīng)在150時保持( B )分鐘。A、30 B、60 C、90 D、1209、適合雙子葉植物花藥培養(yǎng)的培養(yǎng)基是( A )。 A 、 MS 培養(yǎng)基 B 、 B 5 培養(yǎng)基 C 、 N 6 培養(yǎng)基 D 、 White
23、培養(yǎng)基 10、下列不屬于原生質(zhì)體培養(yǎng)的是( D )A 、平板培養(yǎng) B 、液體淺層培養(yǎng) C 、懸滴培養(yǎng) D 、糖培養(yǎng) 1、根據(jù)培養(yǎng)器官的不同,植物組織培養(yǎng)的分類下列哪項除外?()A、花藥培養(yǎng) B、光培養(yǎng) C、根培養(yǎng) D、葉培養(yǎng)2、大量元素中,不包括下列哪種元素? ()A、氮 B、磷 C、鉀 D、鋅3、細(xì)胞分裂素的生理作用,下列哪項除外? ()A、促進(jìn)細(xì)胞分裂和擴大 B、誘導(dǎo)芽的分化C、抑制衰老,減少葉綠素的分解 D、促進(jìn)細(xì)胞伸長,脫分化4、培養(yǎng)基的PH大都要求在5.65.8的條件下,但經(jīng)高溫高壓滅菌后,培養(yǎng)基的PH會下降()個單位。 ()A、0.20.8 B、12 C、34 D、565、母液的配
24、制和保存時,下列哪兩項需要單獨配制? ()A、CaCl2和KH2PO4 B、MgSO4和CaCl2C、KNO3和KH2PO4 D、KNO3和CaCl26、鐵鹽容易發(fā)生沉淀,需要單獨配制,一般與下列哪種物質(zhì)相互配? ()A、Na2-EDTA B、KNO3 C、CaCl2 D、KH2PO47、95%的純酒精可以溶解下列哪兩種物質(zhì)? ()A、6-BA 和2,4-D B、IAA和KT C、NAA和ZT D、KT和ZT8、植物生長物質(zhì)不包括下列哪項? ()A、NAA B、2,4-D C、6-BA D、VB69、在培養(yǎng)室和操作室中,一年中要定期進(jìn)行一兩次熏蒸,使用的藥品是 ()A、甲醛和高錳酸鉀 B、酒精
25、和次氯酸鈉 C、紫外燈和酒精 D、升汞和酒精10、玻璃化產(chǎn)生的主要原因,不包括在內(nèi)的是 ()A、激素濃度 B、苗太大 C、瓊脂用量 D、離子水平1、下列實驗中可能獲得單倍體植株的是_。A、 小麥的莖尖培養(yǎng); B、番茄花藥培養(yǎng); C、玉米胚乳培養(yǎng); D、煙草葉片培養(yǎng) 2、外植體接種時,刀、剪、鑷子等用具一般在使用前浸泡在( )中,用時在火焰上灼燒滅菌,冷卻后使用。 A、70%酒精; B、85%酒精; C、95%酒精; D 、0.1% 升汞 3、第一次提出植物細(xì)胞具有全能性的理論概念的科學(xué)家是_: A、Morel; B、 Haberland; C、 Schleiden; D、 White4、進(jìn)行莖
26、尖培養(yǎng)脫毒時,通常以帶12個幼葉原基的莖尖作外植體較合適;則莖尖的長度約為( )。A、0.10.3mm; B、0.20.5mm; C、0.40.6mm; D、 0.60.8mm5、下列不屬于細(xì)胞分裂素類的植物激素是_。A、 6-BA; B、 NAA; C、 Zt; D、 Kt6、油菜的生根培養(yǎng)基配方為:MS+NAA 0.1mg/L。已知NAA的母液濃度為 2mg/mL;如配制500mL的生根培養(yǎng)基,需加入的NAA母液的量為( ) A、0.2mL; B、0.1mL; C、0.05mL; D、0.5mL7、瓊脂在固體培養(yǎng)基中的用量一般為( )g/L。 A、610; B 0.61.0; C、26;
27、D、0.20.6 8、在進(jìn)行花藥和花粉培養(yǎng)時,最適宜的花粉發(fā)育時期是( )。 A、成熟花粉粒; B、單核花粉期; C、二核花粉期; D、三核花粉期 9、適合豆科和十字花科植物花藥培養(yǎng)的培養(yǎng)基是( )。 A、MS培養(yǎng)基; B、B5培養(yǎng)基; C、N6培養(yǎng)基; D、White培養(yǎng)基 10、超低溫種質(zhì)保存的溫度為( )A、015; B、-800; C、-196; D、-2801、為了減少污染,一般選擇培養(yǎng)材料的大小,在( A )之間。A、0.1-0.5cm B、0.5-1.0cm C、1.0-1.5cm D、1.5-2.0cm2、世界上首次提出植物細(xì)胞具有全能性的理論概念的科學(xué)家是( B )。 A、
28、Morel B、Haberlandt C、 Schleiden D、 White3、在植物組織培養(yǎng)表面滅菌時,常用的氯化汞濃度為( A )。A、0.1-1% B、0.2-2% C、0.3-3% D、0.4-4%4 、在細(xì)胞懸浮液成批培養(yǎng)過程中,細(xì)胞數(shù)目會不斷發(fā)生變化,其中細(xì)胞數(shù)目迅速增加,增長速率保持不變的是( C )。 A 、減慢期 B 、延遲期 C 、對數(shù)生長期 D 、靜止期 5、下列不屬于原生質(zhì)體培養(yǎng)的是( D )A 、平板培養(yǎng) B 、液體淺層培養(yǎng) C 、懸滴培養(yǎng) D 、糖培養(yǎng) 6、在愈傷組織培養(yǎng)時,一般雙子葉植物比單子葉植物誘導(dǎo)愈傷組織( B )。A、困難 B、容易 C、一樣 D、不一
29、定7、在進(jìn)行花藥和花粉培養(yǎng)時,最適宜的花粉發(fā)育時期是(B )。 A 、成熟花粉粒 B 、單核花粉期 C 、二核花粉期 D 、三核花粉期 8、植物組織培養(yǎng)中大多數(shù)植物都適用的培養(yǎng)基是( A )培養(yǎng)基。A、MS B、N6 C、White D、B59、下列現(xiàn)象中不屬于離體培養(yǎng)容易出現(xiàn)的三大問題的是( C )。A、污染 B、褐變 C、黃化 D、玻璃化10、配制微量元素母液時,濃縮了200倍保存在1升容量瓶內(nèi),當(dāng)制作4升培養(yǎng)基時,應(yīng)取用鐵鹽母液( D )ml。A、50 B、40 C、30 D、20四、單或多項選擇題 1. 下列不屬于細(xì)胞分裂素類的植物激素是_。 A BA; B NAA; C ZT; D
30、KT2. 植物組織培養(yǎng)的特點是_:A培養(yǎng)條件可人為控制;B生長周期短,繁殖率高;C管理方便;D產(chǎn)量大、誘導(dǎo)試管苗生根,培養(yǎng)基的調(diào)整應(yīng) A加大生長素的濃度 B加大分裂素的濃度 C加活性炭 D 降低鹽的濃度4. 下列不屬于大量元素的鹽是_。 A NH4NO3;B KNO3;C ZnSO4.7H2O; D MgSO4.7H2O5. 培養(yǎng)休眠的植物材料時必需加入的激素是: A GA; B IAA; C NAA; D ZT1.AC 2.A 3.ED 4.D 5.B五、判斷題1. 在MS的培養(yǎng)基成分中,MgSO4.7H2O屬于微量元素。2. 試管苗生長細(xì)長有愈生組織化是生長素過高3. 固體培養(yǎng)基可加進(jìn)活性
31、炭來增加通氣度,以利于發(fā)根。4. 生根培養(yǎng)中加入GA3可提高生根率。5. 用于外植體、手、超凈臺等的表面消毒酒精濃度越大,消毒效果越好越好。1、PH增高不利于原生質(zhì)體的再生。( × )2、剝離法是植物離體培養(yǎng)中花粉分離的一種方法。( × )3、莖尖培養(yǎng)一般采用半固體培養(yǎng)基,也可使用液體培養(yǎng)基。( )4、培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分越復(fù)雜、營養(yǎng)成分越豐富,植板細(xì)胞的臨界密度越低。( )5、晴天下午取材在一定程度上可以減輕污染。( )6、細(xì)胞懸浮培養(yǎng)的培養(yǎng)基中氧濃度低于臨界水平時,利于根的形成。( × )7、植物組織培養(yǎng)有利于快速繁殖稀有植物并挽救瀕臨滅絕得植物。( )8、培養(yǎng)室
32、的試管苗瓶內(nèi)濕度在80%左右。( × )9、愈傷組織繼代培養(yǎng)中銨態(tài)氮的含量一般不能高于8mmol/L。( )10、“脫毒苗”是指不含該種植物的主要危害病毒。( )1、葉柄和葉脈的切口處不能形成愈傷組織和分化成苗( × )。2、在植物組織培養(yǎng)過程中,所用外植體是指植物體上的根、莖、葉、花、果、種子。( × )3、植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基使用前須經(jīng)過高壓滅菌。( )4、離體葉培養(yǎng)中,消毒后的葉片應(yīng)整理切割成5×5mm大小。( )5、一般來說單葉子植物的愈傷組織培養(yǎng)比雙子葉植物容易。( × )6、連續(xù)培養(yǎng)是植物脫毒的常用方法。( × )7、試管
33、苗與常規(guī)苗相比,莖、葉綠色,光合作用更強。( × )8、莖尖培養(yǎng)主要用于消除病毒,也可消除植物體中其他病原菌,包括類病毒、類菌質(zhì)體、細(xì)菌和真菌。( )9、細(xì)胞懸浮培養(yǎng)的培養(yǎng)基中氧濃度低于臨界水平時,利于形成胚狀體。( )10、漂浮釋放法是植物離體培養(yǎng)中花粉分離的一種方法。( )1、 環(huán)境的相對濕度可以影響培養(yǎng)基的水分蒸發(fā),一般要求8090的相對濕度。2、幼年的細(xì)胞和組織比成年的細(xì)胞和組織誘導(dǎo)愈傷組織更容易。3、一般地說,PH值高于6.5時,培養(yǎng)基易變硬;低于5時,瓊脂不能很好地凝固。4、在配制6-BA母液時,要先加少量的1mol的NaOH溶解,再加溫蒸餾水定容。5、在MS的培養(yǎng)基成分
34、中,化合物MgSO4.7H2O中含有微量元素Mg。 1、植物組織培養(yǎng)屬于有性繁殖范疇。( × )2、莖尖分生組織主要是指對莖尖長度不超過0.1mm的莖尖進(jìn)行培養(yǎng)。( )3、外植體是指用于組培接種用的離體植物材料。( )4、懸浮培養(yǎng)屬固體培養(yǎng)的一種。( × )5、植物離體培養(yǎng)中細(xì)菌污染的特點是污染部分長有不同顏色的霉菌。( × )6、試管苗的莖葉呈綠色,光合作用弱。( )7、大多數(shù)植物組織培養(yǎng)要求的PH范圍是4.0-7.0。( × )8、植株進(jìn)行一次病毒鑒定未發(fā)現(xiàn)病毒,就可確定該植株不帶病毒。( × )9、大多數(shù)外植體組織培養(yǎng)的溫度要求在25
35、177;2。( )10、IAA/KT高,利于芽分化。( × )六、問答題1、 如何在香蕉組培的各個環(huán)節(jié)中減少和防止產(chǎn)生變異。2、 闡述培養(yǎng)基配制的全過程(己配制好母液)。3、 培養(yǎng)材料的取材有哪些原則和要求?1.無病毒苗培育的意義?答:從根本上消除只靠種苗傳播的病毒病的危害。無病毒栽培可改善果樹品質(zhì),提高豐產(chǎn)性,抗逆性及利用砧木的優(yōu)良性狀減少農(nóng)藥的使用,降低生產(chǎn)成本,減少或避免對環(huán)境的污染。2.組培苗基質(zhì)選配的原則?答:需具有良好的物理特性,通氣性好。需具有良好的化學(xué)特性,不含有對植物和人類有毒的成分,不與營養(yǎng)液中的鹽類發(fā)生化學(xué)反應(yīng)而影響苗正常生長。需對鹽類要有良好的緩沖能力,維持穩(wěn)
36、定,適且植物生長的PH值。選用基質(zhì)還需物美價廉,便于就地取材。3. 褐化現(xiàn)象的產(chǎn)生原因和預(yù)防措施各是什么?答:褐變的主要原因:植物品種;生理狀態(tài);培養(yǎng)基成分;培養(yǎng)條件不當(dāng)。預(yù)防措施:選擇合適的外植體;合適的培養(yǎng)條件;使用抗氧化劑;連續(xù)轉(zhuǎn)移。 4.在植物組織培養(yǎng)中,造成組培材料污染的因素都有哪些?如何采取相應(yīng)的措施防止或降低污染?答:造成污染的原因:培養(yǎng)基滅菌不徹底;外植物體表面消毒滅菌不徹底;操作不當(dāng)。防止污染的措施是:培養(yǎng)基正確滅菌,外植體沖洗充分,消毒滅菌徹底,嚴(yán)格無菌操作。5.花藥和花粉培養(yǎng)在育種學(xué)方面的作用是什么?答:花藥培養(yǎng)和花粉培養(yǎng)使單個花粉粒發(fā)育成完整的單倍體植株,經(jīng)過染色體的加
37、倍處理成為正常結(jié)實的二倍體植株,其后代屬于真正的純系??梢源蟠罂s短育種年限。MS固體培養(yǎng)基的制作步驟如下: 母液取出。適量蒸餾水放入加熱容器,接通電源加熱。加入稱量好的瓊脂至完全溶化,稱取相應(yīng)量的蔗糖至溶解,將母液混合液加入混勻,最后用蒸餾水定容至所需體積。測試培養(yǎng)基溶液的PH值(5.8-6.0),調(diào)整。1.無病毒苗培育的意義?答:從根本上消除只靠種苗傳播的病毒病的危害。無病毒栽培可改善果樹品質(zhì),提高豐產(chǎn)性,抗逆性及利用砧木的優(yōu)良性狀減少農(nóng)藥的使用,降低生產(chǎn)成本,減少或避免對環(huán)境的污染。2.組培苗基質(zhì)選配的原則?答:需具有良好的物理特性,通氣性好。需具有良好的化學(xué)特性,不含有對植物和人類有毒的
38、成分,不與營養(yǎng)液中的鹽類發(fā)生化學(xué)反應(yīng)而影響苗正常生長。需對鹽類要有良好的緩沖能力,維持穩(wěn)定,適且植物生長的PH值。選用基質(zhì)還需物美價廉,便于就地取材。3. 褐化現(xiàn)象的產(chǎn)生原因和預(yù)防措施各是什么?答:褐變的主要原因:植物品種;生理狀態(tài);培養(yǎng)基成分;培養(yǎng)條件不當(dāng)。預(yù)防措施:選擇合適的外植體;合適的培養(yǎng)條件;使用抗氧化劑;連續(xù)轉(zhuǎn)移。 4.在植物組織培養(yǎng)中,造成組培材料污染的因素都有哪些?如何采取相應(yīng)的措施防止或降低污染?答:造成污染的原因:培養(yǎng)基滅菌不徹底;外植物體表面消毒滅菌不徹底;操作不當(dāng)。防止污染的措施是:培養(yǎng)基正確滅菌,外植體沖洗充分,消毒滅菌徹底,嚴(yán)格無菌操作。5.花藥和花粉培養(yǎng)在育種學(xué)方
39、面的作用是什么?答:花藥培養(yǎng)和花粉培養(yǎng)使單個花粉粒發(fā)育成完整的單倍體植株,經(jīng)過染色體的加倍處理成為正常結(jié)實的二倍體植株,其后代屬于真正的純系??梢源蟠罂s短育種年限。1、簡述MS培養(yǎng)基、White培養(yǎng)基、B5培養(yǎng)基的特點?2、外植體的選擇的主要原則?3、外植體滅菌的一般程序?4、試管苗的生態(tài)環(huán)境的特點?七、論述題1.請闡明大花蕙蘭通過組織培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)的過程是什么?培養(yǎng)基的配方的確定:誘導(dǎo)培養(yǎng)基: MS+BA4-10mg/L+NAA0.1-1mg/L (花梗) MS+BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L (種子萌發(fā))增殖培養(yǎng)基: MS+BA3mg/L+NAA1.0mg/L 生根培養(yǎng)基:1/2M
40、S+IBA1.5mg/L +2%蔗糖操作步驟:.選材 : 選擇健壯無病蟲害、性狀優(yōu)良、生長120天以上、未開裂的蝴蝶蘭蒴果。 .滅菌:蝴蝶蘭蒴果 流水沖洗 75%酒精浸泡2030秒0.1%升汞810分鐘 無菌水沖洗35遍 用無菌濾紙吸干水分。 .接種與初代培養(yǎng):把滅過菌蝴蝶蘭蒴果放在無菌培養(yǎng)皿中,并用解剖刀切開果皮使種子散出,放入種子萌發(fā)培養(yǎng)基中培養(yǎng)。60天后,種子萌發(fā)成4高、 23片真葉的無菌苗。 繼代培養(yǎng):取無菌苗接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基中,30天后長出愈傷組織,繼續(xù)培養(yǎng)形成原球體。 . 增殖培養(yǎng):將原球體切割成小塊,接種到增殖培養(yǎng)基中,40天后,每個原球體形成1315個原球莖芽,然后再切割培養(yǎng),
41、周而復(fù)始的進(jìn)行。 .生根培養(yǎng) :將增殖培養(yǎng)中的健壯芽接種到生根培養(yǎng)基中,20天后芽基小根,40天后根變得健壯生根率95%以上。 .馴化和移栽 選擇基質(zhì):苔蘚或樹皮。 馴化:置于煉苗室內(nèi)自然光下培養(yǎng)1周。 移栽:洗根,用500倍托布津水溶液浸泡苗根數(shù)秒后移栽到苔蘚或樹皮基質(zhì)中。 移栽后管理:注意溫、光、濕度(89%)、肥、水和防病蟲害的管理。2.簡述通過小葉嫁接法鑒定草莓病毒的操作步驟。從被鑒定的草莓采集長成不久的新葉,除去兩邊的小葉,中央的小葉帶11.5cm的葉柄,把它削成楔形作接穗。將指示植物除去中間的小葉,在葉柄的中央用刀切入11.5cm,再插入接穗,用線把接合部位包扎好。為了防止干燥,在
42、接合部位涂上少量的凡士林。觀察。約經(jīng)2周時間,撤去塑料袋。若帶有病毒,嫁接后12個月,在新展開的葉、匍匐莖或老葉上會出現(xiàn)病癥。1、請你設(shè)計一個組培實驗室,說明你設(shè)計組培實驗室的各分室及其所需的儀器設(shè)備。2、目前植物病毒的鑒定和檢測方法有哪些?各有何特點?3、誘導(dǎo)試管苗生根時應(yīng)注意哪些問題?八、操作題 制作配方為MS+6-BA0.5mg/ L的培養(yǎng)基2L (大量元素母液為10×,微量元素母液、鐵鹽母液、有機物母液均為100×,激素母液濃度為1mg/ml)(1)按配方移取各母液:大量元素母液為200ml,微量元素母液、鐵鹽母液、有機物母液均為20ml,6-BA激素母液為1ml。
43、(2)定容:用蒸餾水定容至2L。 (3)稱量蔗糖和瓊脂:蔗糖5060g,瓊脂1416g。(4)培養(yǎng)基熬制:加入蔗糖和瓊脂后進(jìn)行培養(yǎng)液熬制,直至瓊脂全部融化。 (5) 調(diào)PH值:先用PH計或PH試紙測量后再用0.1MNaOH或HCl調(diào)PH值為5.86.0。(6)二次定容:當(dāng)培養(yǎng)基熬制后總體積少于2L時要定容至2L。(7)分裝并扎瓶口:趁熱分裝,100ml的三角瓶約裝入3040ml, 35瓶/L。(8)高壓滅菌:及時滅菌,121-123條件下保持2030分鐘。(9)冷卻:待接種。高壓濕熱滅菌程序培養(yǎng)瓶及培養(yǎng)器械放入高壓滅菌鍋。滅菌鍋加水至淹沒電熱絲,封閉高壓滅菌鍋各出氣口,接通電源。加壓
44、至49kPa(0.5MPa),打開排氣閥,排冷氣至壓力為0 kPa。繼續(xù)加壓至108kPa(,即121),當(dāng)壓力至108kPa(,即121)時,穩(wěn)壓在此壓力15-20min。關(guān)閉電源,自然冷卻至壓力為0 kPa,取出培養(yǎng)基和器械冷卻,貯存于30以下室內(nèi)。四、計算題(每題5分)1、培養(yǎng)基的配方是1/2MSBA0.5IBA1.02.5%糖,要配制1000ml, MS母液的濃度分別是:大量元素20倍,微量元素500倍,鐵鹽100倍,有機物50倍,BA1 mg/ml ,NAA0.1mg/ml。要吸取各種母液各多少ml?糖稱取多少克。 2有一培養(yǎng)基的NAA濃度是2.5mg/L ,問其mol/L和ppm濃
45、度各是多少?(分子量 186.2)一、選擇題1植物組織培養(yǎng)是指( )A離體的植物器官或細(xì)胞培育成愈傷組織 B愈傷組織培育成植株C離體的植物器官、組織或細(xì)胞培養(yǎng)成完整植物體D愈傷組織形成高度液泡化組織2植物體細(xì)胞雜交要先去除細(xì)胞壁的原因是( )A.植物體細(xì)胞的結(jié)構(gòu)組成中不包括細(xì)胞壁 B.細(xì)胞壁使原生質(zhì)體失去活力C.細(xì)胞壁阻礙了原生質(zhì)體的融合 D.細(xì)胞壁不是原生質(zhì)的組成部分3植物體細(xì)胞雜交的結(jié)果是( )A.產(chǎn)生雜種植株B產(chǎn)生雜種細(xì)胞 C原生質(zhì)體融合 D形成愈傷組織4科學(xué)家把天竺葵的原生質(zhì)體和香茅草的原生質(zhì)體進(jìn)行誘導(dǎo)融合,培育出的驅(qū)蚊草含有香茅醛,能散發(fā)出一種特殊的達(dá)到驅(qū)蚊且對人體無害的
46、效果。下列關(guān)于驅(qū)蚊草培育的敘述中,錯誤的是 ( )A驅(qū)蚊草的培育屬于細(xì)胞工程育種,其優(yōu)點是能克服遠(yuǎn)源雜交不親和的障礙B驅(qū)蚊草培育過程要用到纖維素酶果膠酶、PEG等試劑或離心、振動、電刺激等方法C驅(qū)蚊草培育過程是植物體細(xì)胞雜交,不同于植物組織培養(yǎng)無愈傷組織和試管苗形成D驅(qū)蚊草不能通過天竺葵和香茅草雜交而獲得是因為不同物種間存在生殖隔離5(2005,上海)將胡蘿卜韌皮部細(xì)胞培養(yǎng)成幼苗時,下列條件中不需要的是 ( )A、具有完整細(xì)胞核的細(xì)胞 B、一定的營養(yǎng)物質(zhì)和植物激素C、離體狀態(tài) D、導(dǎo)入指定基因6植物體細(xì)胞雜交的目的中錯誤的是 ( )A.把兩個植物體的優(yōu)良性狀集中在雜種植株上B.獲得雜種植株C.
47、克服遠(yuǎn)源雜交不親和的障礙D.實現(xiàn)原生質(zhì)體的融合7植物組織培養(yǎng)的用途中不正確的是 ( )A.快速繁殖 B.生產(chǎn)新品種 C生產(chǎn)生物堿 D生產(chǎn)白細(xì)胞介素28A種植物的細(xì)胞和B種植物細(xì)胞的結(jié)構(gòu)如右圖所示(僅 顯示細(xì)胞核),將A、B兩種植物細(xì)胞去掉細(xì)胞壁后,誘導(dǎo)二者的原生質(zhì)體融合,形成單核的雜種細(xì)胞,若經(jīng)過 組織培養(yǎng)后得到了雜種植株,則該雜種植株是( ) A二倍體;基因型是DdYyRr B三倍體;基因型是DdYyRrC四倍體;基因型是DdYyRr D四倍體;基因型是DDddYYyyRRrr9以下關(guān)于原生質(zhì)的敘述,正確的是( )A、原生質(zhì)泛指細(xì)胞內(nèi)的基質(zhì) B、原生質(zhì)就是細(xì)胞質(zhì)C、一個動物細(xì)胞就是一團原生質(zhì)
48、D、細(xì)胞膜、細(xì)胞核和細(xì)胞壁是原生質(zhì)10不能人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法是 ( )A.振動 B.電刺激 C.PEG試劑 D重壓11植物細(xì)胞表現(xiàn)出全能性的必要條件是 ( )A.給予適宜的營養(yǎng)和外界條件 B.導(dǎo)入其他植物細(xì)胞的基因C.脫離母體后給予適宜營養(yǎng)和外界條件 D.將成熟篩管細(xì)胞核移植到去核的卵細(xì)胞內(nèi)12細(xì)胞具有全能性的原因是 ( )A.生物體細(xì)胞具有使后代細(xì)胞形成完整個體的潛能B.生物體的每一個細(xì)胞都具有全能性C.生物體的每一個細(xì)胞都含有個體發(fā)育的全部基因D.生物體的每一個細(xì)胞都是由受精卵發(fā)育來的13植物組織培養(yǎng)過程中的脫分化是指 ( )A.植物體的分生組織通過細(xì)胞分裂產(chǎn)生新細(xì)胞B未成熟的種子經(jīng)過處理培育出幼苗的過程C植物的器官、組織或細(xì)胞,通過離體培養(yǎng)產(chǎn)生愈傷組織的過程D.取植物的枝芽培育成一株新植物的過程14.下
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