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文檔簡介

1、高考生物全國通用二輪專題突破課件:專題八現(xiàn)代生物科技專題1.基因工程的誕生基因工程的誕生()。2.基因工程的原理及技術(shù)基因工程的原理及技術(shù)()。3.基因工程的應(yīng)用基因工程的應(yīng)用()。4.蛋白質(zhì)工程蛋白質(zhì)工程()。5.植物的組織培養(yǎng)植物的組織培養(yǎng)()。6.動物的細胞培養(yǎng)與體細胞克隆動物的細胞培養(yǎng)與體細胞克隆()。7.細胞融合與單克隆抗體細胞融合與單克隆抗體()。考綱要求考綱要求基因工程和細胞工程基因工程和細胞工程第第 講講1構(gòu)建網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建網(wǎng)絡(luò)欄目索引欄目索引 考點一考點一基因工程基因工程 考點二考點二細胞工程細胞工程考點一考點一基因工程基因工程u重點提煉重點提煉u命題視角命題視角 題組題組對基因工

2、程的操作工具與操作步驟綜合考查對基因工程的操作工具與操作步驟綜合考查重點提煉重點提煉1.基因工程的基本工具基因工程的基本工具限制酶限制酶DNA連接酶連接酶載體載體作用作用切割目的基切割目的基因和載體因和載體拼接拼接DNA片段,形片段,形成重組成重組DNA分子分子攜帶目的基因進攜帶目的基因進入受體細胞入受體細胞作用作用部位部位兩核苷酸的脫氧核糖與磷酸間形兩核苷酸的脫氧核糖與磷酸間形成的磷酸二酯鍵成的磷酸二酯鍵作用特作用特點點(條件條件)(1)識別特定的識別特定的核苷酸序列;核苷酸序列;(2)在特定位點在特定位點上切割上切割DNA分分子子(1)EcoliDNA連連接酶只能連接黏接酶只能連接黏性末端

3、;性末端;(2)T4DNA連接酶連接酶能連接黏性末端能連接黏性末端和平末端和平末端(1)能在宿主細胞能在宿主細胞內(nèi)穩(wěn)定存在并大內(nèi)穩(wěn)定存在并大量復(fù)制;量復(fù)制;(2)有一個至多個有一個至多個限制酶切割位點;限制酶切割位點;(3)具有特殊的標具有特殊的標記基因記基因2.基因工程的操作程序基因工程的操作程序(1)目的基因的獲取目的基因的獲取從基因文庫中獲取。從基因文庫中獲取。利用利用PCR技術(shù)擴增:其實質(zhì)是在體外對目的基因進行大技術(shù)擴增:其實質(zhì)是在體外對目的基因進行大量復(fù)制。量復(fù)制。用化學方法人工合成用化學方法人工合成a.對于核苷酸序列已知的直接人工合成。對于核苷酸序列已知的直接人工合成。b.可通過反

4、轉(zhuǎn)錄法獲取,即可通過反轉(zhuǎn)錄法獲取,即mRNA逆轉(zhuǎn)錄酶逆轉(zhuǎn)錄酶單鏈單鏈DNADNA聚合酶聚合酶雙鏈雙鏈DNA。(2)基因表達載體的構(gòu)建基因表達載體的構(gòu)建基因表達載體的組成:目的基因啟動子終止子標基因表達載體的組成:目的基因啟動子終止子標記基因復(fù)制原點。記基因復(fù)制原點。基因表達載體的構(gòu)建方法基因表達載體的構(gòu)建方法(3)將目的基因?qū)胧荏w細胞將目的基因?qū)胧荏w細胞生物種類生物種類植物細胞植物細胞動物細胞動物細胞微生物細胞微生物細胞常用方法常用方法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法、花粉管通因槍法、花粉管通道法等道法等顯微注射技術(shù)顯微注射技術(shù)感受態(tài)細胞感受態(tài)細胞法法(Ca2處處理法理法)受體細胞受

5、體細胞體細胞體細胞受精卵受精卵原核細胞原核細胞(4)目的基因的檢測與鑒定目的基因的檢測與鑒定類型類型步驟步驟檢測內(nèi)容檢測內(nèi)容方法方法結(jié)果顯示結(jié)果顯示分子分子檢測檢測第一步第一步目的基因是否進目的基因是否進入受體細胞入受體細胞DNA分子雜交分子雜交(DNA和和DNA之間之間)是否成功顯示是否成功顯示出雜交帶出雜交帶第二步第二步目的基因是否轉(zhuǎn)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出錄出mRNA分子雜交技術(shù)分子雜交技術(shù)(DNA和和mRNA之之間間)是否成功顯示是否成功顯示出雜交帶出雜交帶第三步第三步目的基因是否翻目的基因是否翻譯出蛋白質(zhì)譯出蛋白質(zhì)抗原抗原抗體雜交抗體雜交是否成功顯示是否成功顯示出雜交帶出雜交帶個體個體水平

6、水平鑒定鑒定做抗蟲或抗病的接種實驗,以確定是否有做抗蟲或抗病的接種實驗,以確定是否有抗性以及抗性的程度;基因工程產(chǎn)品與天抗性以及抗性的程度;基因工程產(chǎn)品與天然產(chǎn)品的功能進行活性比較,以確定功能然產(chǎn)品的功能進行活性比較,以確定功能是否相同是否相同1.攜帶鏈霉素抗性基因受體菌的篩選必須通過分子檢攜帶鏈霉素抗性基因受體菌的篩選必須通過分子檢測測(2014天津,天津,4A)( )2.轉(zhuǎn)基因抗蟲棉植株抗蟲效果的鑒定必須通過分子檢轉(zhuǎn)基因抗蟲棉植株抗蟲效果的鑒定必須通過分子檢測測(2014天津,天津,4C)( )3.一種限制性核酸內(nèi)切酶只能識別一種特定的脫氧核一種限制性核酸內(nèi)切酶只能識別一種特定的脫氧核苷酸

7、序列苷酸序列(2007全國全國,4A)( )4.用限制性核酸內(nèi)切酶切割煙草花葉病毒的核酸用限制性核酸內(nèi)切酶切割煙草花葉病毒的核酸(2010浙江,浙江,2A)( )錯混診斷錯混診斷5.每個重組質(zhì)粒至少含一個限制性核酸內(nèi)切酶識別位點每個重組質(zhì)粒至少含一個限制性核酸內(nèi)切酶識別位點(2011浙江,浙江,6B)( )6.自然界中天然存在的噬菌體自行感染細菌后其自然界中天然存在的噬菌體自行感染細菌后其DNA整整合到細菌合到細菌DNA上,屬于基因工程上,屬于基因工程(2010大綱全國大綱全國,5D)( )7.轉(zhuǎn)抗蟲基因的植物,不會導(dǎo)致昆蟲群體抗性基因頻率轉(zhuǎn)抗蟲基因的植物,不會導(dǎo)致昆蟲群體抗性基因頻率增加增加

8、(2010江蘇,江蘇,18B)( )8.重組質(zhì)粒與探針能進行分子雜交是因為重組質(zhì)粒與探針能進行分子雜交是因為DNA分子脫氧分子脫氧核糖和磷酸交替連接核糖和磷酸交替連接(2013安徽,安徽,6C)( )9.應(yīng)用應(yīng)用DNA探針技術(shù),可以檢測轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株中探針技術(shù),可以檢測轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株中目的基因的存在及其完全表達目的基因的存在及其完全表達(2011四川,四川,5D)( )10.動物的生長激素基因轉(zhuǎn)入植物后不能表達動物的生長激素基因轉(zhuǎn)入植物后不能表達(2010江蘇,江蘇,18C)( )命題視角命題視角題組題組對基因工程的操作工具與操作步驟綜合考查對基因工程的操作工具與操作步驟綜合考查1.(

9、2014重慶,重慶,4)下圖是利用基因工程培育抗蟲植物的示意下圖是利用基因工程培育抗蟲植物的示意圖。以下相關(guān)敘述,正確的是圖。以下相關(guān)敘述,正確的是()A.的構(gòu)建需要限制性核酸內(nèi)切酶和的構(gòu)建需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA聚合酶參與聚合酶參與B.侵染植物細胞后,重組侵染植物細胞后,重組Ti質(zhì)粒整合到質(zhì)粒整合到的染色體上的染色體上C.的染色體上若含抗蟲基因,則的染色體上若含抗蟲基因,則就表現(xiàn)出抗蟲性狀就表現(xiàn)出抗蟲性狀D.只要表現(xiàn)出抗蟲性狀就表明植株發(fā)生了可遺傳變異只要表現(xiàn)出抗蟲性狀就表明植株發(fā)生了可遺傳變異解析解析A項,項,為重組為重組Ti質(zhì)粒,其構(gòu)建需要限制性核質(zhì)粒,其構(gòu)建需要限制性核酸內(nèi)切酶和酸

10、內(nèi)切酶和DNA連接酶。連接酶。B項,含重組項,含重組Ti質(zhì)粒的農(nóng)桿菌侵染植物細胞后,重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌侵染植物細胞后,重組Ti質(zhì)粒上的目的基因整合到受體細胞質(zhì)粒上的目的基因整合到受體細胞()的染色體上,的染色體上,而并非整個重組而并非整個重組Ti質(zhì)粒整合到質(zhì)粒整合到的染色體上。的染色體上。C項,目的基因?qū)胧荏w細胞后不一定能進行表達,項,目的基因?qū)胧荏w細胞后不一定能進行表達,所以抗蟲基因?qū)胫参锛毎?,培育成的植株也不一所以抗蟲基因?qū)胫参锛毎螅嘤傻闹仓暌膊灰欢ň哂锌瓜x性狀。定具有抗蟲性狀。D項,轉(zhuǎn)基因抗蟲植株是否培育成功,可以從個體水項,轉(zhuǎn)基因抗蟲植株是否培育成功,可以從個體水平上進行

11、檢測,即觀察植株是否具有抗蟲性狀,如果平上進行檢測,即觀察植株是否具有抗蟲性狀,如果具有抗蟲性狀則說明發(fā)生了可遺傳變異具有抗蟲性狀則說明發(fā)生了可遺傳變異(基因重組基因重組)。答案答案D2.(2014海南,海南,31)下面是將某細菌的基因下面是將某細菌的基因A導(dǎo)入大腸桿導(dǎo)入大腸桿菌內(nèi),制備菌內(nèi),制備“工程菌工程菌”的示意圖。的示意圖。請據(jù)圖回答:請據(jù)圖回答:(1)獲得獲得A有兩條途徑:一是以有兩條途徑:一是以A的的mRNA為模板,在為模板,在_的催化下,合成互補的單鏈的催化下,合成互補的單鏈DNA,然后,然后在在_作用下合成雙鏈作用下合成雙鏈DNA,從而獲得所,從而獲得所需基因;二是根據(jù)目標蛋白

12、質(zhì)的需基因;二是根據(jù)目標蛋白質(zhì)的_序列,推序列,推測出相應(yīng)的測出相應(yīng)的mRNA序列,然后按照堿基互補配對原則,序列,然后按照堿基互補配對原則,推測其推測其DNA的的_序列,再通過化學方法序列,再通過化學方法合成所需基因。合成所需基因。(2)利用利用PCR技術(shù)擴增技術(shù)擴增DNA時,需要在反應(yīng)體系中添加時,需要在反應(yīng)體系中添加的有機物質(zhì)有的有機物質(zhì)有_、_、4種脫氧核苷酸和種脫氧核苷酸和耐熱性的耐熱性的DNA聚合酶,擴增過程可以在聚合酶,擴增過程可以在PCR擴增儀中擴增儀中完成。完成。(3)由由A和載體和載體B拼接形成的拼接形成的C通常稱為通常稱為_。(4)在基因工程中,常用在基因工程中,常用Ca

13、2處理處理D,其目的是,其目的是_。解析解析(1)利用反轉(zhuǎn)錄法合成目的基因的過程是:以利用反轉(zhuǎn)錄法合成目的基因的過程是:以mRNA為模板,在逆轉(zhuǎn)錄酶的催化作用下合成單鏈為模板,在逆轉(zhuǎn)錄酶的催化作用下合成單鏈DNA,然后在,然后在DNA聚合酶的作用下,合成雙鏈聚合酶的作用下,合成雙鏈DNA分子;根據(jù)蛋白質(zhì)工程合成目的基因的過程是:根據(jù)分子;根據(jù)蛋白質(zhì)工程合成目的基因的過程是:根據(jù)目標蛋白質(zhì)的氨基酸序列,推測相應(yīng)的目標蛋白質(zhì)的氨基酸序列,推測相應(yīng)的mRNA序列,序列,然后按照堿基互補配對原則,推測然后按照堿基互補配對原則,推測DNA中脫氧核苷酸中脫氧核苷酸的排列順序,通過化學方法合成。的排列順序,

14、通過化學方法合成。(2)PCR過程中需要酶、底物、模板、引物和能量等條過程中需要酶、底物、模板、引物和能量等條件。件。(3)目的基因和載體結(jié)合,形成基因表達載體。目的基因和載體結(jié)合,形成基因表達載體。(4)在利用大腸桿菌做受體細胞時,需要先用在利用大腸桿菌做受體細胞時,需要先用Ca2處理,處理,使之成為感受態(tài)細胞,有利于其吸收重組使之成為感受態(tài)細胞,有利于其吸收重組DNA分子。分子。答案答案(1)逆轉(zhuǎn)錄酶逆轉(zhuǎn)錄酶DNA聚合酶聚合酶氨基酸氨基酸脫氧核苷脫氧核苷酸酸(2)引物引物模板模板(A基因基因)(3)基因表達載體基因表達載體(4)使使其成為感受態(tài)細胞,有利于吸收重組其成為感受態(tài)細胞,有利于吸

15、收重組DNA分子分子總結(jié)提升總結(jié)提升比較限制酶、比較限制酶、DNA連接酶、連接酶、DNA聚合酶和解旋酶聚合酶和解旋酶項目項目限制酶限制酶DNA連接酶連接酶DNA聚合酶聚合酶解旋酶解旋酶作用作用底物底物DNA分子分子 DNA分子片段分子片段 脫氧核苷酸脫氧核苷酸DNA分子分子作用作用部位部位磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵磷酸二磷酸二酯鍵酯鍵堿基對間堿基對間的氫鍵的氫鍵作用作用結(jié)果結(jié)果形成黏性末形成黏性末端或平末端端或平末端形成重組形成重組DNA分子分子形成新的形成新的DNA分子分子形成單鏈形成單鏈DNA分分子子考點二考點二細胞工程細胞工程u重點提煉重點提煉u命題視角命題視角 題組一題組

16、一從植物細胞工程進行命題從植物細胞工程進行命題 題組二題組二從動物細胞工程展開命題從動物細胞工程展開命題重點提煉重點提煉1.細胞工程的幾個流程圖比較細胞工程的幾個流程圖比較細胞工程技術(shù)細胞工程技術(shù)技術(shù)過程圖示技術(shù)過程圖示植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)動物細動物細胞培養(yǎng)胞培養(yǎng)植物體細植物體細胞雜交胞雜交動物細胞動物細胞的融合的融合核移植核移植單克隆單克隆抗體的抗體的制備制備2.容易混淆的三種細胞容易混淆的三種細胞雜種細胞、重組細胞和雜雜種細胞、重組細胞和雜交細胞交細胞(1)雜種細胞:植物體細胞雜交過程中,兩種細胞去掉雜種細胞:植物體細胞雜交過程中,兩種細胞去掉細胞壁之后形成的原生質(zhì)體融合,融合的原生質(zhì)

17、體出細胞壁之后形成的原生質(zhì)體融合,融合的原生質(zhì)體出現(xiàn)細胞壁之后形成的細胞叫雜種細胞?,F(xiàn)細胞壁之后形成的細胞叫雜種細胞。(2)重組細胞:體細胞的細胞核移植到去核卵母細胞之重組細胞:體細胞的細胞核移植到去核卵母細胞之后形成的細胞叫重組細胞。后形成的細胞叫重組細胞。(3)雜交細胞:動物細胞融合形成的細胞常稱為雜交細雜交細胞:動物細胞融合形成的細胞常稱為雜交細胞。胞。3.從結(jié)果來分析原理從結(jié)果來分析原理(1)植物體細胞雜交:植物體細胞雜交包含兩個過程,植物體細胞雜交:植物體細胞雜交包含兩個過程,一是植物細胞融合,二是雜種細胞的植物組織培養(yǎng)。一是植物細胞融合,二是雜種細胞的植物組織培養(yǎng)。其最終結(jié)果是形成

18、雜種植株,產(chǎn)生了一個生物體,因其最終結(jié)果是形成雜種植株,產(chǎn)生了一個生物體,因此其原理是:細胞膜的流動性和細胞的全能性。此其原理是:細胞膜的流動性和細胞的全能性。(2)動物細胞融合:動物細胞融合形成雜交細胞,雜交動物細胞融合:動物細胞融合形成雜交細胞,雜交細胞進行細胞培養(yǎng),獲得大量的克隆細胞,但沒有形細胞進行細胞培養(yǎng),獲得大量的克隆細胞,但沒有形成生物體,因此動物細胞融合的原理是細胞增殖和細成生物體,因此動物細胞融合的原理是細胞增殖和細胞膜的流動性,不包含細胞全能性。胞膜的流動性,不包含細胞全能性。4.對細胞核移植技術(shù)的分析對細胞核移植技術(shù)的分析(1)細胞核移植技術(shù)形成重組細胞并發(fā)育成一個新個體

19、,細胞核移植技術(shù)形成重組細胞并發(fā)育成一個新個體,體現(xiàn)了細胞核的全能性而非動物細胞的全能性。體現(xiàn)了細胞核的全能性而非動物細胞的全能性。(2)克隆屬于無性繁殖,產(chǎn)生新個體的性別、絕大多數(shù)性克隆屬于無性繁殖,產(chǎn)生新個體的性別、絕大多數(shù)性狀與供核親本一致。狀與供核親本一致。(3)核移植技術(shù)獲得的動物與供核動物性狀不完全相同的核移植技術(shù)獲得的動物與供核動物性狀不完全相同的原因:原因:克隆動物絕大部分克隆動物絕大部分DNA來自于供體細胞核,但來自于供體細胞核,但其線粒體中的其線粒體中的DNA來自于去核卵細胞。來自于去核卵細胞。性狀受基因與性狀受基因與環(huán)境共同影響。環(huán)境共同影響。在個體發(fā)育過程中有可能發(fā)生基

20、因突在個體發(fā)育過程中有可能發(fā)生基因突變,產(chǎn)生供核動物沒有的性狀。變,產(chǎn)生供核動物沒有的性狀。1.產(chǎn)生抗人白細胞介素產(chǎn)生抗人白細胞介素8抗體的雜交瘤細胞的篩選必抗體的雜交瘤細胞的篩選必須通過分子檢測須通過分子檢測(2014天津,天津,4B)( )三體綜合征的診斷必須通過分子檢測三體綜合征的診斷必須通過分子檢測(2014天津,天津,4D)( )3.培育草莓脫毒苗所采用的主要技術(shù)是組織培養(yǎng)培育草莓脫毒苗所采用的主要技術(shù)是組織培養(yǎng)(2012廣東,廣東,2A)( )4.去除植物細胞的細胞壁和將動物組織分散成單個細去除植物細胞的細胞壁和將動物組織分散成單個細胞均需酶處理胞均需酶處理(2008全國全國,5B

21、)( )錯混診斷錯混診斷5.培養(yǎng)保留接觸抑制的細胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層培養(yǎng)保留接觸抑制的細胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細胞細胞(2010浙江,浙江,4A)( )6.動物雜交瘤細胞產(chǎn)生單克隆抗體體現(xiàn)了細胞的全能動物雜交瘤細胞產(chǎn)生單克隆抗體體現(xiàn)了細胞的全能性性(2012江蘇,江蘇,22C)( )7.體細胞雜交技術(shù)可用于克隆動物和制備單克隆抗體體細胞雜交技術(shù)可用于克隆動物和制備單克隆抗體(2011江蘇,江蘇,14B)( )8.單克隆抗體技術(shù)可以用于治療老年癡呆癥單克隆抗體技術(shù)可以用于治療老年癡呆癥(2010江蘇,江蘇,17C)( )命題視角命題視角題組一題組一從植物細胞工程進行命題從植物細胞工程進行命

22、題(1)培育胚狀體利用了培育胚狀體利用了_這一項生物技術(shù),這一項生物技術(shù),胚狀體再繼續(xù)培養(yǎng),則可培育出完整的植株,這體現(xiàn)了胚狀體再繼續(xù)培養(yǎng),則可培育出完整的植株,這體現(xiàn)了_。培養(yǎng)基中除了含有一定的營養(yǎng)外,還必須。培養(yǎng)基中除了含有一定的營養(yǎng)外,還必須含有含有_等植物激素,還需要對培養(yǎng)基進行嚴格等植物激素,還需要對培養(yǎng)基進行嚴格的的_。(2)如果愈傷組織是三七葉肉細胞培養(yǎng)產(chǎn)生的,若為了獲得三如果愈傷組織是三七葉肉細胞培養(yǎng)產(chǎn)生的,若為了獲得三七的細胞產(chǎn)物,則只需要培養(yǎng)到七的細胞產(chǎn)物,則只需要培養(yǎng)到_;若為了獲;若為了獲得三七的人工種子,則需要培養(yǎng)到得三七的人工種子,則需要培養(yǎng)到_。如果愈。如果愈傷組

23、織是棉花葉肉細胞培養(yǎng)產(chǎn)生的,通過基因工程要獲取抗蟲傷組織是棉花葉肉細胞培養(yǎng)產(chǎn)生的,通過基因工程要獲取抗蟲棉,目的基因?qū)朊藁ㄓ鷤M織細胞常用的方法是棉,目的基因?qū)朊藁ㄓ鷤M織細胞常用的方法是_法。法。(3)從葉片的葉肉細胞到獲得胚狀體的過程中,必須要從葉片的葉肉細胞到獲得胚狀體的過程中,必須要經(jīng)過經(jīng)過_。無絲分裂無絲分裂有絲分裂有絲分裂減數(shù)分裂減數(shù)分裂原代培養(yǎng)原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)植物體細胞雜交植物體細胞雜交細胞融合細胞融合脫脫分化分化再分化再分化解析解析(1)離體植物細胞通過脫分化形成愈傷組織,通離體植物細胞通過脫分化形成愈傷組織,通過再分化形成具有根和芽的胚狀體,再通過細胞分裂、過再分

24、化形成具有根和芽的胚狀體,再通過細胞分裂、分化發(fā)育成一個完整的植株。該技術(shù)稱為植物組織培分化發(fā)育成一個完整的植株。該技術(shù)稱為植物組織培養(yǎng),其原理為植物細胞的全能性。培養(yǎng)基的成分為水、養(yǎng),其原理為植物細胞的全能性。培養(yǎng)基的成分為水、無機鹽、維生素、氨基酸、蔗糖、植物激素無機鹽、維生素、氨基酸、蔗糖、植物激素(生長素和生長素和細胞分裂素等細胞分裂素等)等;培養(yǎng)基要求進行嚴格的滅菌。等;培養(yǎng)基要求進行嚴格的滅菌。(2)三七的細胞產(chǎn)物為細胞的代謝產(chǎn)物,將三七葉肉細三七的細胞產(chǎn)物為細胞的代謝產(chǎn)物,將三七葉肉細胞培養(yǎng)到愈傷組織即可;獲得人工種子需培養(yǎng)至胚狀胞培養(yǎng)到愈傷組織即可;獲得人工種子需培養(yǎng)至胚狀體;

25、棉花為雙子葉植物,導(dǎo)入抗蟲基因常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)體;棉花為雙子葉植物,導(dǎo)入抗蟲基因常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法?;?。(3)離體葉肉細胞培養(yǎng)到胚狀體的過程中必須經(jīng)過脫分離體葉肉細胞培養(yǎng)到胚狀體的過程中必須經(jīng)過脫分化和有絲分裂形成愈傷組織,再分化和有絲分裂形成化和有絲分裂形成愈傷組織,再分化和有絲分裂形成具有根和芽的胚狀體。具有根和芽的胚狀體。答案答案(1)植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)植物細胞的全能性植物細胞的全能性細胞分細胞分裂素、生長素裂素、生長素滅菌滅菌(2)愈傷組織愈傷組織胚狀體胚狀體農(nóng)桿菌農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)化(3)2.下圖是細胞融合示意圖,請據(jù)圖回答下列問題:下圖是細胞融合示意圖,請據(jù)圖回答下列問題:(1)過程過

26、程應(yīng)使用應(yīng)使用_處理細處理細胞,以去除植物細胞壁。胞,以去除植物細胞壁。(2)如果將已去除細胞壁的植物細胞放入等滲溶液中,如果將已去除細胞壁的植物細胞放入等滲溶液中,細胞呈現(xiàn)什么形狀?細胞呈現(xiàn)什么形狀?_。(3)過程過程的誘導(dǎo)方法有的誘導(dǎo)方法有_和和_兩大兩大類。類。(4)過程過程是細胞壁的再生過程,與此過程密切相關(guān)的是細胞壁的再生過程,與此過程密切相關(guān)的細胞器是細胞器是_。(5)過程中進行的細胞分裂方式是過程中進行的細胞分裂方式是_,該過程,該過程先誘導(dǎo)細胞分裂形成先誘導(dǎo)細胞分裂形成_,再由它分化形成雜種植,再由它分化形成雜種植物幼苗。物幼苗。(6)融合的細胞需要在培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)。人工合成

27、的融合的細胞需要在培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)。人工合成的培養(yǎng)基中除水、蔗糖、維生素、有機添加物、無機物質(zhì)培養(yǎng)基中除水、蔗糖、維生素、有機添加物、無機物質(zhì)外,外,_是植物細胞培養(yǎng)成雜種植物幼苗不是植物細胞培養(yǎng)成雜種植物幼苗不能缺少的調(diào)節(jié)物質(zhì)。能缺少的調(diào)節(jié)物質(zhì)。解析解析(1)過程過程應(yīng)使用纖維素酶和果膠酶去除細胞應(yīng)使用纖維素酶和果膠酶去除細胞壁獲得原生質(zhì)體。壁獲得原生質(zhì)體。(2)去除細胞壁的原生質(zhì)體是球形的,在等滲溶液中,去除細胞壁的原生質(zhì)體是球形的,在等滲溶液中,細胞形態(tài)不變。細胞形態(tài)不變。(3)用物理法和化學法可誘導(dǎo)過程用物理法和化學法可誘導(dǎo)過程完成原生質(zhì)體融合。完成原生質(zhì)體融合。(4)高爾基體與植物細

28、胞壁的形成有關(guān)。高爾基體與植物細胞壁的形成有關(guān)。(5)雜種植株形成雜種幼苗的過程中進行的是有絲分裂,雜種植株形成雜種幼苗的過程中進行的是有絲分裂,該過程先經(jīng)過脫分化形成愈傷組織,再由它分化形成該過程先經(jīng)過脫分化形成愈傷組織,再由它分化形成雜種植物幼苗。雜種植物幼苗。(6)植物組織培養(yǎng)基中除水、蔗糖、維生素、有機添加植物組織培養(yǎng)基中除水、蔗糖、維生素、有機添加物、無機物質(zhì)外,還需要加入植物激素物、無機物質(zhì)外,還需要加入植物激素(或生長調(diào)節(jié)物或生長調(diào)節(jié)物質(zhì)質(zhì)),誘導(dǎo)愈傷組織完成再分化過程,形成雜種植物幼,誘導(dǎo)愈傷組織完成再分化過程,形成雜種植物幼苗。苗。答案答案(1)纖維素酶、果膠酶纖維素酶、果膠

29、酶(2)球形球形(3)物理法物理法化學法化學法(4)高爾基體高爾基體(5)有絲分裂有絲分裂愈傷組織愈傷組織(6)植物激素植物激素(或生長調(diào)節(jié)物質(zhì)或生長調(diào)節(jié)物質(zhì))易錯警示易錯警示1.雜種細胞形成的標志:新的細胞壁的生成。雜種細胞形成的標志:新的細胞壁的生成。2.雜種植株遺傳物質(zhì)的變化:雜種植株的變異類型屬雜種植株遺傳物質(zhì)的變化:雜種植株的變異類型屬于染色體變異,雜種植株的染色體數(shù)目通常是兩親本于染色體變異,雜種植株的染色體數(shù)目通常是兩親本細胞染色體數(shù)目之和,雜種植株屬于異源多倍體。細胞染色體數(shù)目之和,雜種植株屬于異源多倍體。命題視角命題視角題組二題組二從動物細胞工程展開命題從動物細胞工程展開命題

30、3.動物細胞體外培養(yǎng)時,通常要在培養(yǎng)基中補充一定濃度動物細胞體外培養(yǎng)時,通常要在培養(yǎng)基中補充一定濃度的某些物質(zhì)。如圖是血清對正常細胞和癌細胞培養(yǎng)的影響的某些物質(zhì)。如圖是血清對正常細胞和癌細胞培養(yǎng)的影響的實驗結(jié)果。據(jù)圖回答下列問題:的實驗結(jié)果。據(jù)圖回答下列問題:(1)與體細胞的增殖相比,癌細胞的細胞周期與體細胞的增殖相比,癌細胞的細胞周期_(填填“較長較長”“”“較短較短”或或“不變不變”)。(2)在動物細胞培養(yǎng)時,通常在合成培養(yǎng)基中加入適量血清,在動物細胞培養(yǎng)時,通常在合成培養(yǎng)基中加入適量血清,其原因是其原因是_。(3)細胞培養(yǎng)應(yīng)在含細胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進行,的恒溫培養(yǎng)箱中進

31、行,CO2的作的作用是用是_。(4)在兩種細胞生長過程中,正常細胞鋪滿瓶壁時,其生長在兩種細胞生長過程中,正常細胞鋪滿瓶壁時,其生長_。藥物實驗需要大量細胞,兩種細胞頻繁傳代,。藥物實驗需要大量細胞,兩種細胞頻繁傳代,癌細胞比正常細胞可以傳代的次數(shù)更癌細胞比正常細胞可以傳代的次數(shù)更_。(5)為了防止細胞培養(yǎng)過程中細菌的污染,可向培養(yǎng)液中加為了防止細胞培養(yǎng)過程中細菌的污染,可向培養(yǎng)液中加入適量的入適量的_。解析解析(1)與體細胞相比較,癌細胞分裂速度更快,細胞周與體細胞相比較,癌細胞分裂速度更快,細胞周期較短。期較短。(2)動物細胞培養(yǎng)時通常要在培養(yǎng)基中加入血清等物質(zhì),血動物細胞培養(yǎng)時通常要在培

32、養(yǎng)基中加入血清等物質(zhì),血清含有多種未知的促細胞生長因子及其他活性物質(zhì),能促清含有多種未知的促細胞生長因子及其他活性物質(zhì),能促進細胞的生長、增殖。進細胞的生長、增殖。(3)向培養(yǎng)基中通入一定濃度的向培養(yǎng)基中通入一定濃度的CO2以維持培養(yǎng)液的以維持培養(yǎng)液的pH。(4)正常細胞鋪滿瓶壁時,會出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象,使其生長正常細胞鋪滿瓶壁時,會出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象,使其生長停止;因為癌細胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生改變,能無限增殖,因停止;因為癌細胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生改變,能無限增殖,因此傳代次數(shù)更多。此傳代次數(shù)更多。(5)動物細胞培養(yǎng)過程中,應(yīng)向培養(yǎng)液中加入適量的動物細胞培養(yǎng)過程中,應(yīng)向培養(yǎng)液中加入適量的抗生素以防止細胞培

33、養(yǎng)過程中細菌的污染??股匾苑乐辜毎囵B(yǎng)過程中細菌的污染。答案答案(1)較短較短(2)血清可以補充合成培養(yǎng)基中缺乏血清可以補充合成培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì)的物質(zhì)(3)維持培養(yǎng)液的維持培養(yǎng)液的pH(4)停止停止多多(5)抗生抗生素素4.(2014新課標新課標,40)某研究者用抗原某研究者用抗原(A)分別免疫分別免疫3只同種小鼠只同種小鼠(X、Y和和Z),每只小鼠免疫,每只小鼠免疫5次,每次免次,每次免疫一周后測定各小鼠血清抗體的效價疫一周后測定各小鼠血清抗體的效價(能檢測出抗原能檢測出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù)抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù)),結(jié)果如下圖所示。,結(jié)果如下圖所示。若要制備雜交瘤細胞,需取

34、免疫后小鼠的若要制備雜交瘤細胞,需取免疫后小鼠的B淋巴細胞淋巴細胞(染色體數(shù)目為染色體數(shù)目為40條條),并將該細胞與體外培養(yǎng)的小鼠,并將該細胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細胞骨髓瘤細胞(染色體數(shù)目為染色體數(shù)目為60條條)按一定比例加入試管按一定比例加入試管中,再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細胞融合,經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗中,再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細胞融合,經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測,得到不斷分泌抗體檢測,得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細胞??贵w的雜交瘤細胞?;卮鹣铝袉栴}:回答下列問題:(1)制備融合所需的制備融合所需的B淋巴細胞時,所用免疫小鼠的血清淋巴細胞時,所用免疫小鼠的血清抗體效價需達到抗體效價需達到16000以上,則小鼠最

35、少需要經(jīng)過以上,則小鼠最少需要經(jīng)過_次免疫后才能有符合要求的。達到要求后的次免疫后才能有符合要求的。達到要求后的X、Y、Z這這3只免疫小鼠中,最適合用于制備只免疫小鼠中,最適合用于制備B淋巴細胞的淋巴細胞的是是_小鼠,理由是小鼠,理由是_。(2)細胞融合實驗完成后,融合體系中除含有未融合的細胞融合實驗完成后,融合體系中除含有未融合的細胞和雜交瘤細胞外,可能還有細胞和雜交瘤細胞外,可能還有_,體系中出現(xiàn)多種,體系中出現(xiàn)多種類型細胞的原因是類型細胞的原因是_。(3)雜交瘤細胞中有雜交瘤細胞中有_個細胞核,染色體數(shù)目個細胞核,染色體數(shù)目最多是最多是_條。條。(4)未融合的未融合的B淋巴細胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活,淋巴細胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活,原因是原因是_。解析解析(1)據(jù)圖分析可知,第四次注射后據(jù)圖分析可知,第四次注射后X、Y、Z小小鼠的血清抗體效價幾乎都達到鼠的血清抗體效價幾乎都達到16000以上,小鼠以上,小鼠Y的的血清抗體效價最高,最適合用于制備單克隆抗體。血清抗體效價最高,最適合用于制備單克隆抗體。(2)融合體系中除了未融合的細胞和雜交瘤細胞之外,融合體系中除了未融合的細胞和雜交瘤細胞之外,還有骨髓瘤細胞的自身融合細胞和還有骨髓瘤細

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