尿液儀器分析

1、一、檢測項目一、檢測項目二、儀器檢測原理二、儀器檢測原理三、測試項目原理三、測試項目原理四、質量控制四、質量控制 尿液干化學分析 尿液沉渣檢驗 自動化、智能化檢測尿液檢驗的內容不斷增多、檢測速度更快，臨尿液檢驗的內容不斷增多、檢測速度更快，臨床實用信息越來越多床實用信息越來越多一、檢測項目一、檢測項目（一）用于初診患者和健康體檢用的（一）用于初診患者和健康體檢用的 811聯(lián)組合試帶。聯(lián)組合試帶。（二）用于已確診疾病的療效觀察的（二）用于已確診疾病的療效觀察的 組合型試帶。組合型試帶。 pH 酸堿反應酸堿反應 Pro 蛋白質蛋白質 Glu 葡萄糖葡萄糖 Ket 酮體酮體 Nit 亞硝酸鹽亞硝酸鹽

2、 Uro 尿膽原尿膽原 Bld或或OB 紅細胞紅細胞 Bil 膽紅素（膽紅素（8項）項） Leu或或WBC 白細胞（白細胞（9項）項）SG 比重比重 （10項）項） VitC或或ASG 維生素維生素C（11項）項）（一）用于初診患者和健康體檢用的（一）用于初診患者和健康體檢用的811聯(lián)組合試帶。聯(lián)組合試帶。（二）用于已確診疾病的療效觀察的（二）用于已確診疾病的療效觀察的 組合型試帶。組合型試帶。腎病型腎病型4聯(lián)試帶：聯(lián)試帶： PH、蛋白、隱血、比密；蛋白、隱血、比密；糖尿病型糖尿病型5聯(lián)試帶：聯(lián)試帶： PH、蛋白、葡萄糖、酮體、比密；蛋白、葡萄糖、酮體、比密；肝臟病型肝臟病型2聯(lián)試帶：膽紅素、

3、尿膽原。聯(lián)試帶：膽紅素、尿膽原。二二、尿液分析儀、尿液分析儀儀器檢測儀器檢測原理原理 此類儀器一般用微電腦了控制，采用球面積分儀接受雙波長此類儀器一般用微電腦了控制，采用球面積分儀接受雙波長反射光的方式測定試帶上的顏色變化進行半定量測定。試劑帶反射光的方式測定試帶上的顏色變化進行半定量測定。試劑帶上有數(shù)個含各種試劑的試劑墊，各自與尿中相應成分進行獨立上有數(shù)個含各種試劑的試劑墊，各自與尿中相應成分進行獨立反應，而顯示不同顏色，顏色的深淺與尿液中某種成分反應，而顯示不同顏色，顏色的深淺與尿液中某種成分的含量的含量成成比例關系，試劑帶中還有另一個比例關系，試劑帶中還有另一個“補償墊補償墊”，作為尿液

4、本底，作為尿液本底顏顏色，了對有色尿及儀器變化待所主生的誤差進行補償。色，了對有色尿及儀器變化待所主生的誤差進行補償。 將吸附有尿液的試劑帶放在儀器比色槽內，試劑帶將吸附有尿液的試劑帶放在儀器比色槽內，試劑帶上已產(chǎn)生化學反應的各種試劑墊被光源照射，其反射光上已產(chǎn)生化學反應的各種試劑墊被光源照射，其反射光被球面積分儀接收，球面積分儀的光電管被反射的雙波被球面積分儀接收，球面積分儀的光電管被反射的雙波長光（通過濾片的測定光和一束參考光）照射，各波長長光（通過濾片的測定光和一束參考光）照射，各波長的選擇由檢測項目決定。的選擇由檢測項目決定。 其中亞硝酸鹽、酮體、膽紅素、尿膽原的測定波長其中亞硝酸鹽、

5、酮體、膽紅素、尿膽原的測定波長為為550550nmnm；PHPH、葡萄糖、蛋白質、維生素葡萄糖、蛋白質、維生素C C、潛血的測定潛血的測定波長為波長為620620nmnm。各試劑塊所選用的參考波長為各試劑塊所選用的參考波長為720720nmnm。 其結構示意圖見圖其結構示意圖見圖8-18-1 尿液自動生化分析儀結構示意圖尿液自動生化分析儀結構示意圖儀器按下列公式自動計算出反射率，然后與標準曲線比較，儀器按下列公式自動計算出反射率，然后與標準曲線比較，自動自動打打印印出出各種成分的相應結果，尿液中某種成分含量高，各種成分的相應結果，尿液中某種成分含量高，其相應試劑墊的反射光較暗，否則較強。其相應

6、試劑墊的反射光較暗，否則較強。反射率分式：反射率分式：R R（% %）=Tm.Cs/TsCm=Tm.Cs/TsCm100%100% R R（% %）為反射率；為反射率； Tm Tm為試劑墊對測定波長的反射強度；為試劑墊對測定波長的反射強度； Ts Ts為試劑墊對參考波長的反射強度；為試劑墊對參考波長的反射強度； Cm Cm為為校校準墊對測定準墊對測定波波長的反射強度；長的反射強度； Cs Cs為校準對參考波長的反射強度。為校準對參考波長的反射強度。測定波長：是被測試劑塊的敏感特征波長；測定波長：是被測試劑塊的敏感特征波長；參考波長：是被測試劑塊的不敏感的波長，用以消除背景光參考波長：是被測試劑

7、塊的不敏感的波長，用以消除背景光 和其它雜散光的影響。和其它雜散光的影響。三、測試項目原理三、測試項目原理 項目 英文縮寫 反應原理 1、PH PH指示劑2、比重 d（SG） 多聚電解質離子解離法 3、蛋白質 PRO PH指示劑的蛋白質誤差法4、葡萄糖 GLU 葡萄糖氧化酶法5、膽紅素 BIL 偶氮反應法6、尿膽原 URO 醛反應、重氮反應法7、酮體 KET 亞硝基鐵氫化鈉法8、亞硝酸鹽 NIT 亞硝酸鹽還原法9、隱血或紅細胞 BLD 血紅蛋白類過氧化酶法10、白細胞 LEU或WBC 酯酶法11、VitC ASG 吲哚酚法pH測定：采用測定：采用pH指示劑原理，常用甲基紅和溴麝香草指示劑原理，

8、常用甲基紅和溴麝香草 酚藍組成的復合型指示劑，呈色范圍從酚藍組成的復合型指示劑，呈色范圍從pH 59顏色從由橘黃色，綠色變?yōu)樗{色，由顏色從由橘黃色，綠色變?yōu)樗{色，由 此反映尿液此反映尿液Ph。試劑帶的反應原理試劑帶的反應原理尿蛋白質測定：尿蛋白質測定： 利用利用pH指示劑都具有一定的指示劑都具有一定的pH變色范圍，當溶液中存在變色范圍，當溶液中存在蛋白質時，蛋白質離子可與帶電相反電荷的指示劑離子結蛋白質時，蛋白質離子可與帶電相反電荷的指示劑離子結合，引起指示劑的進一步電離，從而產(chǎn)生顏色的變化，其合，引起指示劑的進一步電離，從而產(chǎn)生顏色的變化，其顏色的深淺與蛋白質含量有關。顏色的深淺與蛋白質含量

9、有關。尿葡萄糖的測定：尿葡萄糖的測定： 是基于葡萄糖氧化酶法原理，能特異地檢出尿中的是基于葡萄糖氧化酶法原理，能特異地檢出尿中的 葡萄糖；葡萄糖；葡萄糖氧化酶催化葡萄糖與氧作用，生成葡萄糖酸內葡萄糖氧化酶催化葡萄糖與氧作用，生成葡萄糖酸內酯及過氧化氫（酯及過氧化氫（H2O2），），后者與色素酶在過氧化氫酶后者與色素酶在過氧化氫酶的作用下，使色素原呈現(xiàn)由藍色經(jīng)綠色至棕色的色澤的作用下，使色素原呈現(xiàn)由藍色經(jīng)綠色至棕色的色澤變化，呈色的深淺與葡萄糖含量成正比。變化，呈色的深淺與葡萄糖含量成正比。常見的色素原有鄰聯(lián)甲苯胺、碘化鉀。常見的色素原有鄰聯(lián)甲苯胺、碘化鉀。尿酮體測定：尿酮體測定：即亞硝基鐵氰化

10、鈉反應測量酮體。即亞硝基鐵氰化鈉反應測量酮體。在堿性條件下，尿中酮體和亞硝基鐵氰化鈉反應而顯紫紅在堿性條件下，尿中酮體和亞硝基鐵氰化鈉反應而顯紫紅色，其顏色深淺和與酮體含量有關。色，其顏色深淺和與酮體含量有關。 尿隱血測定：尿隱血測定：利用游離血紅蛋白、溶解的紅細胞，或肌紅蛋白中的血紅素利用游離血紅蛋白、溶解的紅細胞，或肌紅蛋白中的血紅素具有類過氧化物酶的作用，能催化過氧化氫釋放新生態(tài)氧，具有類過氧化物酶的作用，能催化過氧化氫釋放新生態(tài)氧，使色原氧化而顯色，其顏色深淺有血紅素含量有關。使色原氧化而顯色，其顏色深淺有血紅素含量有關。尿膽紅素測定：尿膽紅素測定：采用重氮反應法原理。在強酸性條件下，

11、尿中結合膽紅素能與采用重氮反應法原理。在強酸性條件下，尿中結合膽紅素能與2，4二氯苯氨重氮鹽起偶聯(lián)反應形成紫紅色，顏色深淺與尿二氯苯氨重氮鹽起偶聯(lián)反應形成紫紅色，顏色深淺與尿中膽紅素含量有關。中膽紅素含量有關。 尿膽原測定：采用尿膽原測定：采用Ehrlich醛反應原理或重氮反應原理。醛反應原理或重氮反應原理。 Ehrlich醛法試帶利用尿膽原在酸性條件下與對二甲氨基苯醛法試帶利用尿膽原在酸性條件下與對二甲氨基苯甲醛反應生成櫻紅色的復合物，顏色深淺與尿膽原含量有關。甲醛反應生成櫻紅色的復合物，顏色深淺與尿膽原含量有關。 重氮試帶法是利用尿膽原在強酸性的條件下與重氮試帶法是利用尿膽原在強酸性的條件

12、下與4-甲氧基苯甲氧基苯重氮鹽四氟化硼酸鹽反應生成重氮色素，顏色深淺與尿膽原含重氮鹽四氟化硼酸鹽反應生成重氮色素，顏色深淺與尿膽原含量有關量有關尿亞硝酸鹽測定：亞硝酸鹽還原法。尿亞硝酸鹽測定：亞硝酸鹽還原法。在酸性條件下，亞硝酸鹽與芳香胺結合形成重氮化合物，再在酸性條件下，亞硝酸鹽與芳香胺結合形成重氮化合物，再與苯喹啉結合產(chǎn)生重氮色素；顏色變化與細菌數(shù)量不成比例，與苯喹啉結合產(chǎn)生重氮色素；顏色變化與細菌數(shù)量不成比例，但陽性結果表明尿中細菌數(shù)量在但陽性結果表明尿中細菌數(shù)量在105/ml以上。以上。 尿白細胞測定：白細胞酯酶法。尿白細胞測定：白細胞酯酶法。利用中性粒細胞的酯酶能水解吲哚酚酯生成吲哚

13、酚和有機酸，利用中性粒細胞的酯酶能水解吲哚酚酯生成吲哚酚和有機酸，吲哚酚可引進一步氧化成靛藍；或吲哚酚和重氮鹽反應生成吲哚酚可引進一步氧化成靛藍；或吲哚酚和重氮鹽反應生成紫色物質，顏色深淺與粒細胞量的多少有關。紫色物質，顏色深淺與粒細胞量的多少有關。尿比密測定：多聚電解質離子解離法。尿比密測定：多聚電解質離子解離法?；谀撤N預處理的多聚電解質在一定離子濃度中基于某種預處理的多聚電解質在一定離子濃度中pKa的變化的變化來測量比密。尿液中電解質離子可和聚甲氧乙烯順丁烯二來測量比密。尿液中電解質離子可和聚甲氧乙烯順丁烯二酸共聚體中的氫離子發(fā)生置換，換出的氫離子使溴麝香草酸共聚體中的氫離子發(fā)生置換，換

14、出的氫離子使溴麝香草酚藍指示劑的顏色發(fā)生變化，顏色由藍綠色，綠色變成黃酚藍指示劑的顏色發(fā)生變化，顏色由藍綠色，綠色變成黃綠色。綠色。尿維生素尿維生素C測定：還原法測定：還原法采用磷鉬酸緩沖液或甲基綠與尿中維采用磷鉬酸緩沖液或甲基綠與尿中維C進行反應，形成鉬藍，進行反應，形成鉬藍，顏色由藍色變成紫色，顏色深淺與尿中維生素顏色由藍色變成紫色，顏色深淺與尿中維生素C含量有關。含量有關。四、質量控制四、質量控制（一一）、）、尿液干化學分析干擾因素及排除方法尿液干化學分析干擾因素及排除方法（二）、（二）、 尿液干化學分析儀質量控制尿液干化學分析儀質量控制（三）、分析后質量控制（三）、分析后質量控制（一一

15、）、 尿液干化學分析干擾因素尿液干化學分析干擾因素1.2 尿液分析中存在的干擾因素尿液分析中存在的干擾因素1.2.1酸堿度的干擾酸堿度的干擾 PH、尿蛋白、尿比重尿蛋白、尿比重當尿液當尿液PH9.0時，蛋白質出現(xiàn)假陰性或假陽性結果；時，蛋白質出現(xiàn)假陰性或假陽性結果；尿比重測定，堿性尿可使其結果偏低，強酸性尿可使其結果尿比重測定，堿性尿可使其結果偏低，強酸性尿可使其結果偏高，實驗證明對于堿性尿，實測結果應在原測定結果基礎偏高，實驗證明對于堿性尿，實測結果應在原測定結果基礎上增加上增加0.005作為補償；作為補償；1.2.2菌尿的干擾菌尿的干擾 原因原因 1、改變、改變PH值值 2、產(chǎn)生或釋放一些

16、酶類及其它代謝產(chǎn)物，、產(chǎn)生或釋放一些酶類及其它代謝產(chǎn)物， 如過氧化物酶。如過氧化物酶。菌尿的干擾的項目菌尿的干擾的項目 紅細胞、尿糖紅細胞、尿糖排除干擾的方法：排除干擾的方法：所以在實驗過程中發(fā)現(xiàn)菌尿時，最好使用顯微鏡檢查法或者其所以在實驗過程中發(fā)現(xiàn)菌尿時，最好使用顯微鏡檢查法或者其他方法來加以鑒別。他方法來加以鑒別。1.2.3藥物的干擾藥物的干擾維生素維生素C；青霉素對青霉素對尿蛋白尿蛋白定性實驗有干擾；定性實驗有干擾；慶大霉素或霉素慶大霉素或霉素可造成可造成白細胞白細胞測定假陰性；測定假陰性；磺胺藥對磺胺藥對尿膽原尿膽原測定有干擾；測定有干擾；氯丙嗪，酚噻嗪等藥物可使氯丙嗪，酚噻嗪等藥物可

17、使尿膽原和膽紅素尿膽原和膽紅素等呈等呈假陽性反應等。假陽性反應等。1.2.4患者自身因素：患者自身因素： 如疾病類型、飲食、個人習慣等。如疾病類型、飲食、個人習慣等。 腎移植、腎炎、腎病綜合癥、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等腎移植、腎炎、腎病綜合癥、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等 尿白細胞測定假陰性；尿白細胞測定假陰性； 對以淋巴細胞為主的患者，會產(chǎn)生假陰性。對以淋巴細胞為主的患者，會產(chǎn)生假陰性。因此對因此對腎病患者或泌尿系統(tǒng)疾病患者腎病患者或泌尿系統(tǒng)疾病患者一律需要一律需要做尿鏡檢分析，從而減少漏診或誤診；做尿鏡檢分析，從而減少漏診或誤診；飲食（對飲食（對NIT的影響）的影響）當患者飲食中缺乏蔬菜或水果類食物時，即使有

18、細菌感當患者飲食中缺乏蔬菜或水果類食物時，即使有細菌感染，也無硝酸鹽還原，而使亞硝酸鹽染，也無硝酸鹽還原，而使亞硝酸鹽假陰性假陰性。送檢標本時間過長或進食含亞硝酸鹽豐富送檢標本時間過長或進食含亞硝酸鹽豐富的食物可使亞硝酸鹽出現(xiàn)的食物可使亞硝酸鹽出現(xiàn)假陽性假陽性。1.2.5其它因素其它因素尿液干化學分析儀本身的因素尿液干化學分析儀本身的因素試紙條方面試紙條方面尿液干化學分析項目尿液干化學分析項目 如尿蛋白質、白細胞在一定程度上可干擾比重測定；如尿蛋白質、白細胞在一定程度上可干擾比重測定； 溫度與酸堿度干擾酶的活性，從而對尿糖測定產(chǎn)生干擾。溫度與酸堿度干擾酶的活性，從而對尿糖測定產(chǎn)生干擾。 溫度對

19、尿比重的測定；溫度對尿比重的測定； 因此檢驗時應加以注意。因此檢驗時應加以注意。 尿液干化學分析干擾因素排除方法尿液干化學分析干擾因素排除方法應著手分析檢驗的過程，它可能出現(xiàn)在檢驗的應著手分析檢驗的過程，它可能出現(xiàn)在檢驗的前、中、后期前、中、后期。1、尿液分析儀是否正常運轉、尿液分析儀是否正常運轉 試紙質量是否合格；試紙質量是否合格；2、尿液標本容器首先是否干燥、清潔；、尿液標本容器首先是否干燥、清潔；3、留取標本的時間是否合適；、留取標本的時間是否合適；4、尿送檢是否及時；、尿送檢是否及時；5、注意觀察尿量及顏色、混濁度等情況；、注意觀察尿量及顏色、混濁度等情況；6、女性應避免月經(jīng)及陰道分泌

20、物的污染；、女性應避免月經(jīng)及陰道分泌物的污染；7、留尿前還應囑咐病人不要過量飲水、喝濃茶或進藥等；、留尿前還應囑咐病人不要過量飲水、喝濃茶或進藥等；8、檢驗人員應本著認真負責的態(tài)度，不要弄錯標本或有傳、檢驗人員應本著認真負責的態(tài)度，不要弄錯標本或有傳 輸結果錯誤等；輸結果錯誤等；9、對于結果有懷疑的病例，應結合臨床綜合分析，甚至進、對于結果有懷疑的病例，應結合臨床綜合分析，甚至進 行動態(tài)觀察。行動態(tài)觀察?？傊疄榇_保檢測結果的準確，要盡可能地排除一切可能存在總之為確保檢測結果的準確，要盡可能地排除一切可能存在的干擾因素，從而減少不必要的漏診和誤診。的干擾因素，從而減少不必要的漏診和誤診。（二）、

21、（二）、 尿液干化學分析儀質量控制尿液干化學分析儀質量控制3.1 校正校正可用質控物對試紙的質量進行監(jiān)控?？捎觅|控物對試紙的質量進行監(jiān)控。3.2 貯存溫度貯存溫度3.3 使用壽命使用壽命3.4室溫和濕度室溫和濕度3.5 儀器、試紙監(jiān)測儀器、試紙監(jiān)測尿液分析儀及干化學試紙帶一定要符合要求；尿液分析儀及干化學試紙帶一定要符合要求；儀器的正常運轉和試劑帶質量合格是實驗結果的基本保證，儀器的正常運轉和試劑帶質量合格是實驗結果的基本保證，所以分析儀與試紙在質量、穩(wěn)定性等方面要嚴格把關。所以分析儀與試紙在質量、穩(wěn)定性等方面要嚴格把關。3.6 質控物質控物建議使用尿液分析儀各生產(chǎn)廠家提供的質控試紙條進行室建

22、議使用尿液分析儀各生產(chǎn)廠家提供的質控試紙條進行室 內質控。內質控。尿液干化學分析干擾因素眾多，且不可避免地有一定的假尿液干化學分析干擾因素眾多，且不可避免地有一定的假陰性率或假陽性率，因此要結合臨床表現(xiàn)判斷結果，決不陰性率或假陽性率，因此要結合臨床表現(xiàn)判斷結果，決不可只看干化學分析，忽視鏡檢?？芍豢锤苫瘜W分析，忽視鏡檢。1 注意試帶的專一性與傳統(tǒng)檢測的不同之處注意試帶的專一性與傳統(tǒng)檢測的不同之處 蛋白模塊。蛋白模塊。 葡萄糖模塊。葡萄糖模塊。 酮體模塊酮體模塊 隱血模塊隱血模塊 白細胞模塊白細胞模塊 膽紅素及尿膽原模塊膽紅素及尿膽原模塊 比重模塊比重模塊（三）、分析后質量控制（三）、分析后質量

23、控制2、 尿試帶的確證試驗尿試帶的確證試驗干化學法屬于過篩試驗。干化學法屬于過篩試驗。原則上對懷疑結果應進行確證試驗復核，這是質量保證重原則上對懷疑結果應進行確證試驗復核，這是質量保證重要環(huán)節(jié)。按要環(huán)節(jié)。按CCCLS文件規(guī)定，文件規(guī)定，尿蛋白的確證試驗為磺基水楊酸法；尿蛋白的確證試驗為磺基水楊酸法；尿葡萄糖的確證試驗為葡萄糖氧化酶定量法；尿葡萄糖的確證試驗為葡萄糖氧化酶定量法；尿膽紅素的確證試驗為尿膽紅素的確證試驗為Harrison法；法；尿白細胞、紅細胞的確證試驗為尿沉渣顯微鏡檢查。尿白細胞、紅細胞的確證試驗為尿沉渣顯微鏡檢查。3、 儀器檢測結果與尿沉渣顯微鏡檢查不符時的分析儀器檢測結果與尿沉渣顯微鏡檢查不符時的分析 儀器法檢測白細胞、紅細胞的結果出現(xiàn)陰性時，儀器法檢測白細胞、紅細胞的結果出現(xiàn)陰性時， 應以鏡檢為準；應以鏡檢為準； 當儀器分析（），而鏡檢（）的結果分析當儀器分析（），而鏡檢（）的結果分析 白細胞可能破壞；白細胞可能破壞； 紅細胞常破壞，或尿中含觸酶時；紅細胞常破壞，或尿中含觸酶時；總之，干化學尿分析儀不能取代顯微鏡檢查?？傊?，干化學尿分析儀不能取代顯微鏡檢查。尿沉渣顯微鏡檢查的指征尿沉渣顯微鏡檢查的指征1、美國臨床