脈通方對高糖高脂高膽固醇飲食DM大鼠血小板功能及股動脈內(nèi)皮形態(tài)的影響

1、    脈通方對高糖高脂高膽固醇飲食DM大鼠血小板功能及股動脈內(nèi)皮形態(tài)的影響亓魯光 王永山 關(guān)青寶 李一北 2005-12-13 13:07:11 中華現(xiàn)代中西醫(yī)雜志 2004年1月第2卷第1期 【摘要】 目的 研究脈通方對糖尿病下肢動脈硬化閉塞癥（DLASO）早期改變的影響，主要是血栓素A 2 （TXA 2 ）、前列環(huán)素（PGI 2 ）及血漿內(nèi)皮素（EF）的影響。方法 采用高糖高脂高膽固醇飼料喂養(yǎng)SD大鼠，并用Alloxan腹腔注射誘發(fā)糖尿病大鼠模型。隨機(jī)分為脈通方低、高劑量組，西洛他唑組，模型對照組，并設(shè)正常對

2、照組。通過放射免疫、生化檢測、形態(tài)學(xué)等方法，對照觀察各組藥物對DM大鼠血糖、TXA 2 、PGI 2 、ET等指標(biāo)及股動脈組織形態(tài)學(xué)的影響。結(jié)果 脈通方可降低血糖，降低TXA 2 /PGI 2 的比值和血漿內(nèi)皮素水平。結(jié)論 脈通方通過改善糖代謝、抑制血小板聚集、調(diào)節(jié)血管舒縮功能，從始動環(huán)節(jié)上干預(yù)糖尿病動脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展，起到防治DLASO的作用。 關(guān)鍵詞 脈通方 糖尿病下肢動脈硬化閉塞癥 血栓素A 2 前列環(huán)素 內(nèi)皮素 Effects of Maitongfang on platelet function and femoral artery endotheliumconformation

3、 of DM rats induced by high-sugar， high-fat and high-cholesterol diet Qi Luguang，Wang Yongshan，Guan Qingbao，et al.Chengdu University of Traditional Chinese Medicine，Sichuan610075.【Abstract】 Objective To investigate the affection of Maitongfang on the early stage of Diabetic lower limbs atherosc

4、lerosis obliterans（DLASO），mainly the changes of thromboxane A 2 （TXA 2 ），prostacyclin（PGI 2 ）and plasm Endothelin（ET）.Methods The SD rats were fed with high-sugar，high-fat and high-cholosterol feeding stuff，and then induced by Alloxan intraperitoncally to be diabetic rat models.The rats were randoml

5、y divided into five groups，ic.Model control，low dosage of Maitongfang，high dosage of Maitongfang，and Cilostazol group respectively.Normal control group was also established.The effect of different medicines on the following parameters were detected by radioimmunoassay，biochemistrydetect method，Histo

6、morphometry，etc.which were Blood Glucose，TXA 2 ，PGI 2 ，ET and tectology of femoral artery.Results The actions of lowering the level of Blood Glucose and plasm ET and the ratio of TXA 2 /PGI 2 were observed.Conclusion Through the action of improving metabolism of Blood Glucose and inhibiting platelet

7、 aggregation and regulating Vasomotor function，Maitongfang contributes to the prevention and treatment of DLASO by doing intervention job on the very first link of DLASO. Key words Maitongfang DLASO ET NO糖尿病下肢動脈硬化閉塞癥（DLASO）是糖尿病嚴(yán)重的大血管并發(fā)癥，臨床發(fā)展的最終結(jié)果往往是因壞疽而截肢。有資料顯示，DLASO的發(fā)病率比非糖尿病下肢動脈硬化閉塞癥的發(fā)病率高710倍，且發(fā)病年齡

8、早、病情進(jìn)展快、病變更嚴(yán)重，截肢率高 1 。近年來的研究表明，糖尿病血管并發(fā)癥的發(fā)生與內(nèi)皮細(xì)胞的損傷有關(guān) 2 。血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷時，血小板被激活變形，發(fā)生粘附、釋放、聚集反應(yīng)，血栓素A 2 （thromboxane A 2 ，TXA 2）、前列環(huán)素（prostacyclin，PGI 2 ）和內(nèi)皮素（endothelin，ET）等分泌失衡，導(dǎo)致血管痙攣、血栓形成與動脈粥樣硬化發(fā)生 3 。本文觀察了脈通方對高糖高脂高膽固醇飼料喂養(yǎng)的糖尿病大鼠股動脈內(nèi)皮病理形態(tài)以及TXA 2 、PGI 2 與ET水平的影響，為探求脈通方治療糖尿病下肢動脈粥樣硬化的作用機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)，現(xiàn)報道如下。1 材料與方法&#

9、160;1.1 動物 SD大鼠80只，雌雄各半，體重130150g（7090日齡），本校動脈實(shí)驗(yàn)中心提供。合格證號:川實(shí)動管字第008號。1.2 試劑 Alloxan由美國SIGMA公司生產(chǎn)，批號:A7413。內(nèi)皮素放免試劑盒由天津九鼎醫(yī)學(xué)生物工程公司提供。6-酮-前列腺1試劑盒由北京北方生物技術(shù)研究所提供。血栓素B 2 試劑盒由北京北方生物技術(shù)研究所提供。脈通方煎取液:黃芪、當(dāng)歸、銀花藤、澤瀉等。西洛他唑片:由中國大冢制藥公司生產(chǎn)，規(guī)格:50mg/片。1.3 飼料及飼養(yǎng)環(huán)境 高糖高脂高膽固醇飼料配方為10%蔗糖，10%豬油，2.5%膽固醇（購自上海生工生物工程有限公司），由本校動物實(shí)驗(yàn)中心配

10、制。普通飼料由本校附屬醫(yī)院動物實(shí)驗(yàn)室提供。各組大鼠自由攝食、飲水，雌雄分籠喂養(yǎng)，室溫1822，空氣流通，相對濕度55%70%，12h光照維持，晝夜循環(huán)。1.4 方法1.4.1 造模與分組 大鼠馴化喂養(yǎng)1周，繼之喂以高糖高脂高膽固醇飼粒4周，選擇體重在180220g之間，然后禁食12h，Alloxan新鮮配制成2.5%生理鹽水溶液，按120mg/kg體重隔日2次腹腔注射，5天后斷尾取血，用Sure step plus血糖儀測試血糖，選擇血糖值>16.7mmol/L者入選。合格入選的DM大鼠按血糖高低、性別不同，隨機(jī)分為4組，即糖尿病模型對照組、中藥低、高劑量組、西洛他唑?qū)φ战M，另設(shè)正常對照

11、組，每組10只。1.4.2 給藥方法 造模成功后，中藥低劑量組與高劑量組分別按照2.9g/kg體重、14.5g/kg體重予中藥煎取液灌胃，即相當(dāng)于臨床成人劑量與5倍成人劑量;西藥對照組予西洛他唑混懸液，按1.67g/kg體重灌胃，相當(dāng)于臨床成人劑量;模型對照組與正常對照組灌胃同體積的生理鹽水。每周測1次血糖，稱1次體重，根據(jù)體重調(diào)整給藥劑量。1.5 觀察指標(biāo)及檢測方法1.5.1 血糖 大鼠斷尾取血，用美國強(qiáng)生公司生產(chǎn)的Sure step plus血糖儀測試血糖。1.5.2 內(nèi)皮素 造模8周后，大鼠內(nèi)眥靜脈取血2ml，放入已含有7.5%EDTA·Na 2 30l和抑肽酶40l的試管中混

12、勻，43600rpm離心10min，分離血漿，-20保存。測定前，使樣本置于室溫或冷水中復(fù)融，再次43600rpm離心5min，取上清測定。1.5.3 TXA 2 、PGI 2 測定 造模8周后，大鼠內(nèi)眥靜脈取血1.5ml，放入已含有EDTA抗凝劑的試管中，抗凝劑與血量之比為1:9。輕搖，混勻，迅速離心（3500r/min，15min），取上清。由于TXA 2 、PGI 2 在血中極不穩(wěn)定，半衰期很短，一般通過測定二者穩(wěn)定的代謝產(chǎn)物血清TXB 2 、6-Keto-PGF1 來反映。1.5.4 股動脈病理組織學(xué)檢測 各組大鼠處死后，取出距左側(cè)髂股動脈分叉處之遠(yuǎn)端510mm的股動脈，剔除肌肉、筋膜

13、等軟組織，用生理鹽水沖洗，放入10%中性福爾馬林試管中，原位固定48h，逐級酒精脫水，二甲苯透明，浸蠟石蠟包埋，常規(guī)切片4m。分別做HE及Masson染色，做光 鏡檢查。1.6 統(tǒng)計處理 所有數(shù)據(jù)均用統(tǒng)計軟件SPSS11.0進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理，各項(xiàng)指標(biāo)結(jié)果以x±s表示，組間比較采用t檢驗(yàn)。2 結(jié)果2.1 大鼠血糖變化 用藥4周后，與正常組相比的其余各組血糖水平仍然很高（P< 0.01），與模型組差異無顯著性。用藥8周后，中藥治療組血糖均明顯降低，與模型組相比差異有極顯著性（P< 0.01），但與正常組相比仍有差異，低劑量組差異較大（P< 0.01），高劑量組差異較?。≒< 0.05）。西藥組血糖值與模型組相比差異無顯著性（P>0.05），見表1。表1 不同病程中大鼠血糖的比較 （mmol/L，x±s）2.2 對血小板功能的影響 與正常組相比，模型組TXB 2 含量明顯升高（P< 0.05）;較之模型組，中藥高劑量組、西藥對照組TXB 2 水平顯著降低（P< 0.05），接近于正常對照組（P>0.05）;西藥組與中藥高劑量組之間差異無顯著性（P>0.05）。與模型組相比，僅西藥組可明顯提高6-Keto