三種防腐劑對大腸桿菌和白色葡萄球菌的抑制效果

1、三種防腐劑對大腸桿菌和白色葡萄球菌的抑制效果第二組 組長：李爽 ；成員：顏同文、褚劍鈳、雷聰、謝偉、胡雪麗摘要：目的：研究三種防腐劑（丙酸鈣、山梨酸鉀、脫氫乙酸鈉）對大腸桿菌和白色葡萄球菌的抑菌效果。方法：采用牛津杯培養(yǎng)測定不同防腐劑對大腸桿菌和白色葡萄球菌的抑菌效果。結(jié)果： 0.2%的山梨酸鉀對大腸桿菌的抑制效果好于對白色葡萄球菌的抑制效果，0.2%的丙酸鈣對白色葡萄球菌的抑制效果好于對大腸桿菌的抑菌效果，0.2%的脫氫乙酸鈉對白色葡萄球菌的抑制效果好于對大腸桿菌的抑菌效果。結(jié)論：三種防腐劑對大腸桿菌和白色葡萄球菌的抑制效果有所差異，山梨酸鉀對大腸桿菌的抑制效果更好，丙酸鈣、脫氫乙酸鈉對白色

2、葡萄球菌的抑制效果好。關(guān)鍵詞：防腐劑；山梨酸鉀；丙酸鈣；脫氫乙酸鈉；抑菌作用食源性疾病是發(fā)展中國家和發(fā)達(dá)國家的首要食品安全問題，對人類健康危害嚴(yán)重，尤其是對兒童、孕婦和老人。食品在生產(chǎn)和貯藏過程中，易受細(xì)菌性微生物感染而腐敗變質(zhì)，并導(dǎo)致食物中毒和食源性疾病影響人類健康。采用防腐劑抑制腐敗菌與食源性致病菌是貯藏食品的有效手段之一。常見的食源性致病菌種類繁多，其中包括革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌。目前水產(chǎn)品中的主要防腐劑有山梨酸鉀，山梨酸鉀2。山梨酸鉀作為一種不飽和脂肪酸，可在體內(nèi)參與新陳代謝，最終被分解成二氧化碳和水，而幾乎沒有毒性，目前山梨酸鉀已成為一種在全球范圍使用廣泛的化學(xué)防腐劑。白色結(jié)晶性

3、顆?；蚍勰?，無臭或略帶輕微丙酸氣味，對光和熱穩(wěn)定，易溶于水是一種安全性很好的防腐劑。丙酸鈣對各種霉菌、需氧芽孢桿菌、革蘭氏陽性桿菌有作用較強(qiáng)的抑制作用，對能引起食品發(fā)粘的枯草桿菌效果尤為顯著，對防止黃曲霉素的產(chǎn)生有特效4。脫氫乙酸鈉是繼苯甲酸鈉、尼泊金、山梨酸鉀之后又一代新的食品防腐保鮮劑，對霉菌、酵母菌、細(xì)菌具有很好的抑制作用，廣泛應(yīng)用與飲料、食品、飼料的加工業(yè)，可延長存放期，避免霉變損失。其作用機(jī)理是有效滲透到細(xì)胞體內(nèi)，抑制微生物的呼吸作用，從而達(dá)到防腐防霉保鮮保濕等作用。白色葡萄球菌是革蘭氏陽性菌，大腸桿菌是革蘭氏陰性菌，兩者在環(huán)境中分布廣泛，兩者在我國水產(chǎn)品中都曾有報道被檢出5。選取這

4、2種菌作為實驗對象，對純培養(yǎng)狀態(tài)和模擬食品體系中的革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌對山梨酸鉀、丙酸鈣、脫氫乙酸鈉防腐劑的耐受性差異進(jìn)行了探討，以期為今后制定更有針對性的食品防控措施提供理論依據(jù)。1 材料與方法1材料與儀器1材料山梨酸鉀（食品添加級）：購自青島九泰生物科技有限公司；丙酸鈣：購自青島九泰生物科技有限公司；脫氫乙酸鈉：購自青島九泰生物科技有限公司；菌株：實驗室提供；培養(yǎng)基：實驗室提供。2主要儀器與設(shè)備恒溫培養(yǎng)箱，天平，酒精燈，試管，涂布器，牛津杯，移液槍2實驗方法2防腐劑稀釋液的制備用天平準(zhǔn)確稱量0.100g山梨酸鉀，轉(zhuǎn)移至裝有5mL蒸餾水的試管中，振蕩完全稀釋均勻，制成0.2%的山梨酸鉀

5、稀釋液。0.2%的丙酸鈣、脫氫乙酸鈉稀釋液配制同理。22接種培養(yǎng)在酒精燈火焰周圍，用移液槍取20l大腸桿菌菌液至牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中，用灼燒滅菌后的涂布器稀釋涂布，用鑷子小心將津杯放在培養(yǎng)基上，向其中加入25l的0.2%的山梨酸鉀稀釋液。在酒精燈火焰周圍，用移液槍取20l白色葡萄球菌菌液至牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中，用灼燒滅菌后的涂布器稀釋涂布，用鑷子小心將津杯放在培養(yǎng)基上，向其中加入25l的0.2%的山梨酸鉀稀釋液。0.2%的丙酸鈣、脫氫乙酸鈉稀釋液的接種同理。接種完后放入37恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h。25測量抑菌圈大小及分析培養(yǎng)好后，測量出不同防腐劑的抑菌圈大小并記錄，進(jìn)行分析。2結(jié)果與分析測量得

6、到0.2%山梨酸鉀的大腸桿菌抑菌圈直徑為1.72cm，0.2%山梨酸鉀的白色葡萄球菌抑菌圈直徑為1.14cm；0.2%丙酸鈣的大腸桿菌抑菌圈直徑為1.43cm，0.2%丙酸鈣的白色葡萄球菌抑菌圈直徑為1.65cm；0.2%脫氫乙酸鈉的大腸桿菌抑菌圈直徑為1.21cm，0.2%脫氫乙酸鈉的白色葡萄球菌抑菌圈直徑為1.82cm。圖1：山梨酸鉀白色葡萄球菌（左）、大腸桿菌（右）圖2：丙酸鈣白色葡萄球菌（左）、大腸桿菌（右）圖3：丙酸鈣白色葡萄球菌（左）、大腸桿菌（右）由上述結(jié)果可看出山梨酸鉀對大腸桿菌的的抑制效果明顯好于白色葡萄球菌，而丙酸鈣和脫氫乙酸鈉對白色葡萄球菌的抑制要過要好于大腸桿菌，并且脫

7、氫乙酸鈉作為新一代防腐劑，對白色葡萄球菌的抑制效果好于丙酸鈣。3討論實驗結(jié)果表明，種防腐劑在本實驗中所設(shè)定的質(zhì)量濃度梯度對兩種菌的生長都呈現(xiàn)明顯的抑制作用，并且抑制作用都不完全相同，與實驗預(yù)期結(jié)果一致。其中山梨酸鉀對大腸桿菌的抑制作用明顯好于白色葡萄球菌，基本符合本組根據(jù)文獻(xiàn)查到的山梨酸鉀對革蘭氏陰性菌的抑制作用好于革蘭氏陽性菌這一結(jié)論6。大多數(shù)文獻(xiàn)表明丙酸鈣對革蘭氏陽性菌的抑制作用好于革蘭氏陰性菌，也與本組的實驗結(jié)果相對應(yīng)7。脫氫乙酸鈉的作用效果強(qiáng)是因為它是新一代的防腐劑，脫氫乙酸鈉鹽具有廣譜的抗菌能力，對霉菌和酵母的抗菌能力尤強(qiáng)，脫氫乙酸鈉鹽對引起食品腐敗的酵母菌、霉菌作用極強(qiáng)。實驗結(jié)果中的抑菌圈較小，本次是實驗選擇的濃度是按國家安全標(biāo)準(zhǔn)添加濃度范圍的最小值，故而抑菌圈不大。對于不同防腐劑復(fù)配使用的效果由于實驗條件所限，有待進(jìn)一步研究。4結(jié)論實驗結(jié)果表明，種防腐劑在本實驗中所設(shè)定的質(zhì)量濃度梯度對兩種菌的生長都呈現(xiàn)明顯的抑制作用，并且抑制作用與差異。山梨酸鉀對大腸桿菌的的抑制效果較好，而丙酸鈣和脫氫乙酸鈉對白色葡萄球菌的抑制更好，且脫氫乙酸鈉的抑菌效果最強(qiáng)，在食品加工防腐過程中可將根據(jù)需要殺滅的不同細(xì)菌選擇合適的防腐劑。 參考文獻(xiàn)喬支紅，程永強(qiáng)，魯戰(zhàn)會，等乳酸對三種食源性致病菌的抑菌及殺菌作用食品科技，：凌關(guān)庭，唐述潮，陶民強(qiáng)，等食品添加劑手冊北京：