萊菔子水溶性生物堿逆轉(zhuǎn)SHR心血管重構(gòu)的實(shí)驗(yàn)研究(一)

1、萊菔子水溶性生物堿逆轉(zhuǎn)SHR心血管重構(gòu)的實(shí)驗(yàn)研究(一)    作者：李炳根，李鐵云，張國俠，郭鴻雁，李天國，柳靜，蓋國忠【摘要】 目的:探討萊菔子水溶性生物堿對自發(fā)性高血壓大鼠（SHR）的血壓及心血管重構(gòu)的影響。方法:將40只SHR隨機(jī)分為5組:空白組、萊菔子水溶性生物堿高、中、低劑量組、卡托普利組，每組8只。采用尾動脈測壓法測量血壓，于給藥8周后，摘取心臟，檢測大鼠左室重量及心肌細(xì)胞直徑、管壁厚/腔徑比、管壁面積/腔徑比等心血管重構(gòu)指標(biāo)。結(jié)果:萊菔子水溶性生物堿能明顯降低SHR的血壓，并使SHR的心室重構(gòu)得到了改善。結(jié)論:萊菔子水溶性生物堿具有明顯的降

2、壓作用，并對心血管重構(gòu)具有逆轉(zhuǎn)作用。 【關(guān)鍵詞】 萊菔子水溶性生物堿;自發(fā)性高血壓大鼠;心血管重構(gòu)Abstract:Objective:To explore the effects of the soluble Semen Raphani alkaloids on spontaneous hypertensive rats（SHR）and on cardiovascular remodeling.Method:Forty SHRs were randomly divided into five groups:untreated control group，the high，middle，low

3、 dosage group of the Semen Raphani soluble alkaloids，and Captoril group，with eight rats in each group.Tail-cuff blood pressure（BP）were measured every two weeks.After8weeks，the hearts were removed，the left ven-tricular mass（LVM）were determined.And the diameter of cardiac myocyte，the lumen（R），wall thi

4、ckness（WT）and wall area（WA）of small artery;WT.R ratio，WA.R ratio were merured.Result:The soluble alkaloids of Semen Raphani signifi-cantly declined the blood pressure of rats.improved the process of cardiovascular remodeling（CR）.Conclusion:The soluble Semen Raphani alkaloids has prominent hypotensiv

5、e function and can improve the process of cardiovascular remodeling.Key words:soluble Semen Raphani alkaloids;spontaneous hypertensive rats;cardiovascular remodeling高血壓病是臨床常見的心血管疾病。目前人們普遍認(rèn)識到對高血壓病的治療并非只是單純強(qiáng)調(diào)降壓，而是最大限度地降低心血管病的死亡和病殘的總危險。萊菔子是十字花科植物蘿卜（Raphanus sativus L.）的干燥成熟種子，性味辛甘平，歸肺脾胃經(jīng)，具有降氣化痰，消食除脹之功效

6、。近年研究表明萊菔子有較強(qiáng)的降壓作用12 ，本實(shí)驗(yàn)通過觀察萊菔子有效成分水溶性生物堿對自發(fā)性高血壓大鼠（spontaneous hypertensive rats，SHR）的血壓及心血管結(jié)構(gòu)的影響，探討萊菔子對靶器官的保護(hù)作用。1 實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)藥品:萊菔子水溶性生物堿，由吉林省中醫(yī)中藥研究院新藥中心制備。實(shí)驗(yàn)動物:雄性自發(fā)性高血壓大鼠（SHR）40只，13周齡，體重（265±20）g，清潔級，購自北京維通利華公司，合格證號SCXK（京）2002-2003。儀器:RBP-1B型高血壓大鼠測壓儀（北京中日友好醫(yī)院生產(chǎn)，生物顯微鏡（南京德賽生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)）。2 實(shí)驗(yàn)方法2.1 萊菔子

7、水溶性生物堿的制備 參照文獻(xiàn)3 ，生萊菔子經(jīng)水提、70%醇沉，得稠膏狀提取物，用稀氨水溶解，氯仿萃取，堿水層用鹽酸調(diào)至PH2-3，濾去不溶物，加雷氏銨鹽溶液至沉淀完全，沉淀加少量水洗滌，抽干，用丙酮溶解，過濾，濾液通過中性氧化鋁柱，流出丙酮液加飽和硫酸銀溶液，濾液減壓回收丙酮，析出紅棕色結(jié)晶，經(jīng)理化和光譜分析主要為芥子堿硫氰酸鹽。2.2 分組及給藥 將SHR隨機(jī)分為5組，每組8只。空白組，灌服飲用水/d;高、中、低劑量組，分別按45、30、15mg.（kg·d）灌服萊菔子水溶性生物堿（相當(dāng)于生藥30、20、10g.kg）;卡托普利組，按20mg.（kg·d）灌服卡托普利。給

8、藥時間為8周。2.3 血壓測定 使用RBP-1B型測壓儀測量大鼠尾動脈收縮壓。2.4 心肌樣本采集及檢測 給藥8周后，將動物禁食12h，稱重，烏拉坦麻醉，腹主動脈取血處死后取出心臟，剪取室間隔、左室游離壁作為左室重量（LVM）。計(jì)算左室重量指數(shù)（LVMI，mg·g -1 ）。同時將心肌用10%中性甲醛液固定，石蠟包埋，3m切片，HE染色，光鏡下觀察大鼠心肌細(xì)胞及血管結(jié)構(gòu)的變化，參照文獻(xiàn)4 計(jì)算心肌細(xì)胞直徑、小動脈腔徑、管壁厚度及管壁面積。2.5 統(tǒng)計(jì)方法 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，運(yùn)用SPSS13.0軟件進(jìn)行計(jì)算，組間比較采用方差分析。3 結(jié)果3.1

9、 對SHR血壓的影響 治療8周后，萊菔子水溶性生物堿各劑量組及卡托普利組均明顯降低了SHR的血壓，與空白組比較均有顯著性差異（P0.01）。結(jié)果見表1。表1 各組治療前后4、8周血壓變化比較（略）注:與空白對照組比較，*P0.05，*P0.013.2 對SHR左室肥厚的影響 治療8周后，各治療組與空白組比較，左室重（LVM）明顯減低，左室重量指數(shù)（LVMI）也明顯降低，萊菔子各組與卡托普利組 比較無顯著差異。3.3 對SHR心肌細(xì)胞直徑、小動脈腔徑及管壁厚度的影響 治療8周后，空白組大鼠心肌細(xì)胞肥大，各治療組大鼠心肌細(xì)胞直徑明顯減小，萊菔子高、中劑量組明顯優(yōu)于卡托普利組?？瞻捉M大鼠心臟小動脈管

10、壁增厚，管腔變窄，壁厚/腔徑比值、管壁面積/腔徑比值均明顯增大，各治療組大鼠心臟小動脈管腔變大，管壁變薄，壁厚/腔徑比值均明顯減?。≒0.01），萊菔子高劑量組明顯優(yōu)于卡托普利組（P0.01），并且萊菔子高、中劑量組管壁面積/腔徑比值也明顯減?。≒0.01）。見表2。表2 各組壁厚/腔徑、管壁面積/腔徑變化比較（略）注:與空白對照組比較，*P0.01，與卡托普利組比較，P0.014 討論SHR是最接近人類原發(fā)性高血壓的動物模型，研究表明，SHR飼養(yǎng)生長至14周齡時已經(jīng)出現(xiàn)心腎血管等靶器官的損害，且隨著鼠齡增加而加重5 。本實(shí)驗(yàn)在此基礎(chǔ)上應(yīng)用萊菔子水溶性生物堿進(jìn)行干預(yù)，并與卡托普利進(jìn)行對照。結(jié)果

11、表明，以芥子堿為主要成分的萊菔子水溶性生物堿具有明顯的降壓作用，其中高、中劑量組與卡托普利組比較無顯著性差異，同時萊菔子治療組還能降低左室重量指數(shù)（LVMI），抑制大鼠心肌細(xì)胞肥大，并使心臟小動脈管腔變大，管壁變薄，壁厚/腔徑及管壁面積/腔徑比值均明顯減小，其中部分作用優(yōu)于卡托普利，說明萊菔子能夠逆轉(zhuǎn)左室肥厚及心血管重構(gòu)，具有良好的保護(hù)靶器官作用。【參考文獻(xiàn)】1王維蘭.萊菔子降壓有效成分初步研究J.中草藥，1986，9（2）:10.2萊 萌.治療高血壓病新藥-萊菔子降壓片的研究J.醫(yī)學(xué)研究通訊，1986，15（6）:185-186.3王維蘭，朱 進(jìn)，李鐘大，等.萊菔子降壓活性成分的研究J.中草藥，1987，18（8）