茶葉籽油中茶多酚的分光光度法測定方法

1、茶葉籽油中茶多酚的分光光度法測定方法 一、鑒別試驗(yàn) 1. 試劑：1克香莢蘭素溶于100ml鹽酸中，用時(shí)現(xiàn)配。 2. 鑒別方法：取10ml樣品溶液（4%）放蒸發(fā)皿中蒸干，然后滴加香莢蘭鹽酸溶液生成櫻桃紅色。這是兒茶素類化合物的特異顯色劑，不受花色素和黃酮甙的干擾，具專屬性，缺兒茶素的樣品呈陰性。 二、含量測定1. 原理：多酚類物質(zhì)能與亞鐵離子生成藍(lán)紫色絡(luò)合物。用分光光度法測定其含量。2. 試劑 2.1 酒石酸鐵溶液：稱硫酸亞鐵（FeSO4.7H2O）1g酒石酸鉀鈉（O）5g加水溶解并定容至1L，此液可穩(wěn)定10天。 2.2 pH7.5的索倫遜緩沖液（先配制以下兩種溶液）a、1/15 M的磷酸氫二鈉

2、溶液：稱取Na2HPO4.12H O，加水溶解并稀釋至1L。b、1/15M的磷酸二氫鉀溶液：稱取經(jīng)110烘干2h的KH2PO，加水溶解至1L。取溶液a 85ml和溶液b 15ml混勻，即得pH7.5的緩沖液。2.3 茶多酚標(biāo)準(zhǔn)溶液秤取茶多酚標(biāo)準(zhǔn)，加溶解并稀釋至100.0mL。 3. 測定方法 3.1 茶多酚標(biāo)準(zhǔn)曲線制備：分別吸取茶多酚標(biāo)準(zhǔn)溶液（2mg/ml）：0，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0ml分別盛放25.0ml的比色管中，加水1.0ml，再加4.0ml水，然后加5.0ml酒石酸鐵溶液，加PH7.5緩沖液至刻度，搖勻，放540nm比色。 4. 樣品測定：稱取一定量樣品（約1g），用

3、水溶解至25.0mL，經(jīng)過濾，棄去初濾液，吸取0.5ml濾液放25ml的比色管中，加0.5ml水，再加4.0ml水，然后加5.0ml酒石酸鐵溶液，然后用PH7.5緩沖液稀釋至刻度。與標(biāo)準(zhǔn)管同時(shí)比色測定。4. 計(jì)算：X=­C×V1 /V2/m×100/1000 式中 X：樣品中茶多酚含量g/100g； V1：樣品溶液總體積mL； V2：測定用樣品溶液體積mL； m：樣品質(zhì)量g。茶葉籽油中茶多酚的茶多酚含量的測定一、原理產(chǎn)品中多酚類物質(zhì)能與亞鐵離子形成紫藍(lán)色絡(luò)合物。用分光光度法測定其含量。二、儀器和用具實(shí)驗(yàn)室常規(guī)儀器及下列各項(xiàng)。1、分析天平：感量2、容量瓶：10

4、0ml3、分光光度儀三、試劑和溶液所用試劑應(yīng)為分析純（AR），水為蒸餾水。1、酒石酸亞鐵溶液：稱取1g（準(zhǔn)確至）硫酸亞鐵和5g（準(zhǔn)確至）酒石酸鉀鈉，用水溶解并定容至1000ml（溶液應(yīng)避光，低溫保存，有效期一個(gè)月）。2、PH7.5磷酸鹽緩沖液：（1）1/15M磷酸氫鈉：稱取磷酸氫二鈉，加水溶解后定容至1000ml。（2）1/15M磷酸二氫鉀：稱取磷酸二氫鉀，加水溶解后定容至1000ml。取上述1/15M的磷酸氫二鈉溶液85ml和1/15M的磷酸二氫鉀溶液15ml混合均勻。四、測定步驟1、試液的制備用小燒杯稱?。?zhǔn)確至）試樣，溶解移入100ml容量瓶中，并用蒸餾水稀釋至刻度。2、測定準(zhǔn)確吸取上述試液1ml，注入25ml容量瓶中，加水4ml和酒石酸亞鐵溶液5ml，充分混勻。再加PH7.5的緩沖液至刻度，用10mm比色皿，在波長540nm處，以試劑空白溶液作參比，測定吸光度（A）。五、結(jié)果計(jì)算茶多酚（）(A××2/100) ×L1/(L2×M×m)×100式中 L1：試液的總量（mL） L2：測定時(shí)的用液量（mL） M：試樣的質(zhì)量（g） m：試樣干物質(zhì)含量百分率（%） A：試樣的吸光度：用10mm比色杯，當(dāng)吸光度等于時(shí)，每毫升茶湯中含茶多酚相當(dāng)于