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文檔簡介
1、.第一章 概論1.靈敏度:檢驗(yàn)儀器在穩(wěn)態(tài)下輸出量變化與輸入量變化之比,即檢驗(yàn)儀器對單位濃度或質(zhì)量的被檢物質(zhì)通過檢測器時所產(chǎn)生的響應(yīng)信號值變化大小的反應(yīng)能力,它反映儀器能夠檢測的最小被測量。2.誤差:當(dāng)對某物理量進(jìn)行檢測時,所測得的數(shù)值與標(biāo)稱值(即真值)之間的差異稱為誤差,誤差的大小反映了測量值對真值的偏離程度。3. 噪音:檢測儀器在沒有加入被檢驗(yàn)物品(即輸入為零)時,儀器輸出信號的波動或變化范圍即為噪音。4.最小檢測量:檢測儀器能確切反映的最小物質(zhì)含量。最小檢測量也可以用含量所轉(zhuǎn)換的物理量來表示。如含量轉(zhuǎn)換成電阻的變化,此時最小檢測量就可以說成是能確切反應(yīng)的最小電阻量的變化量了。5.精度:對檢
2、測可靠度或檢測結(jié)果可靠度的一種評價,是指檢測值偏離真值的程度。精度是一個定性的概念,其高低是用誤差來衡量的,誤差大則精度低,誤差小則精度高。6.可靠性:儀器在規(guī)定的時期內(nèi)及在保持其運(yùn)行指標(biāo)不超限的情況下執(zhí)行其功能的能力。它是反映儀器是否耐用的一項綜合指標(biāo)。7.重復(fù)性:在同一檢測方法和檢測條件(儀器、設(shè)備、檢測者、環(huán)境條件)下,在一個不太長的時間間隔內(nèi),連續(xù)多次檢測同一參數(shù),所得到的數(shù)據(jù)的分散程度。重復(fù)性與精密度密切相關(guān),重復(fù)性反映一臺設(shè)備固有誤差的精密度。8.分辨率:儀器設(shè)備能感覺、識別或探測的輸入量(或能產(chǎn)生、能響應(yīng)的輸出量)的最小值。9.測量范圍和示值范圍:在允許誤差極限內(nèi)儀器所能測出的被
3、檢測值的范圍。10.線性范圍:輸入與輸出成正比例的范圍。也就是反應(yīng)曲線呈直線的那一段所對應(yīng)的物質(zhì)含量范圍。11臨床檢驗(yàn)儀器常用的性能指標(biāo)有哪些?答:一個優(yōu)良的檢驗(yàn)儀器應(yīng)具有的性能指標(biāo)有:靈敏度好、精度高;噪音、誤差小;分辨率高,可靠性、重復(fù)性好;響應(yīng)迅速;線性范圍寬和穩(wěn)定性好。第二章 顯微鏡1. 光學(xué)顯微鏡的工作原理:顯微鏡是由兩組會聚透鏡組成的光學(xué)折射成像系統(tǒng),把焦距較短、靠近觀察物、成實(shí)像的透鏡組稱為物鏡,而焦距較長,靠近眼睛、成虛像的透鏡稱為目鏡,被觀察物體于物鏡的前方,被物鏡作第一級放大后成一倒立的實(shí)像,然后此實(shí)像再被目鏡作第二級放大,得到放大的虛像,位于人眼的明視距離處。2. 光學(xué)顯
4、微鏡的基本機(jī)構(gòu):包括光學(xué)系統(tǒng)和機(jī)械系統(tǒng)兩大部分。光學(xué)系統(tǒng)是顯微鏡的主體部分,包括物鏡、目鏡、聚光鏡及反光鏡。機(jī)械系統(tǒng)包括調(diào)焦系統(tǒng)、載物臺和物鏡轉(zhuǎn)換器以及底座、鏡臂、鏡筒。3. 放大率:或稱放大倍數(shù)是指顯微鏡經(jīng)多次成像后最終所成(放大的)像的大小相對于原物體大小的比值。4. 數(shù)值孔徑:又叫鏡口率,是物體與物鏡間媒質(zhì)的折射率n與物鏡孔徑角的一半()正弦值的乘積。5. 分辨率:又稱為分辨本領(lǐng),是指分辨物體微細(xì)結(jié)構(gòu)的能力。6. 熒光顯微鏡的濾光片有兩組:第一組稱為激發(fā)濾片,位于光源與標(biāo)本之間,僅允許能激發(fā)標(biāo)本產(chǎn)生熒光的光通過,第二組是阻斷濾片,位于標(biāo)本與目鏡之間,把剩余的紫外線過濾掉。7. 相襯顯微鏡
5、:利用光的衍射和干涉現(xiàn)象,把相位差變?yōu)檎穹顏碛^察活細(xì)胞和未染色的標(biāo)本。環(huán)形光闌位于光源與聚光鏡之間,作用是使透過聚光鏡的光線形成空心光錐,聚焦到標(biāo)本上。要求標(biāo)本較薄,并盡可能用單色光源。8. 倒置顯微鏡:需要把照明系統(tǒng)放在載物臺和標(biāo)本之上。9. 偏光顯微鏡:利用偏光顯微鏡可以清楚的看到纖維絲、紡錘體、膠原、染色體、卵巢、骨骼、毛發(fā)、活細(xì)胞的結(jié)晶或液晶態(tài)的內(nèi)含物、神經(jīng)纖維、肌肉纖維等的細(xì)微結(jié)構(gòu),從而可以分析細(xì)胞、組織的變化過程。10. 激光掃描共聚焦顯微鏡:可以對樣品進(jìn)行斷層掃描和成像,也可以無損傷的觀察和分析細(xì)胞的三維空間結(jié)構(gòu),還可以進(jìn)行多重免疫熒光標(biāo)記及和離子熒光標(biāo)記觀察,主要適于觀察細(xì)胞
6、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜系統(tǒng)和細(xì)胞骨架系統(tǒng)等細(xì)胞內(nèi)的復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)。11. 透射電子顯微鏡:由于電子易散射或被物體吸收,故穿透力低,必須制備更薄的超薄切片(50-100um)。12. 掃描電子顯微鏡:主要用來觀察組織、細(xì)胞表面或斷裂面的超微結(jié)構(gòu)及較大的顆粒性樣品的表面形態(tài)結(jié)構(gòu)。13. 超高壓電子顯微鏡:提高了電子顯微鏡的分辨率,可以觀察活細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的動態(tài)變化。第三章 離心機(jī)1離心機(jī)的工作原理:是利用旋轉(zhuǎn)運(yùn)動的離心力以及物質(zhì)的沉降系數(shù)或浮力密度的差異進(jìn)行分離、濃縮和提純生物樣品的一種方法。離心力:當(dāng)物體所受外力小于運(yùn)動所需要的向心力時,物體將向遠(yuǎn)離圓心的方向運(yùn)動。14. 相對離心力:是指在離心力場中,作用于顆粒的離
7、心力相當(dāng)于地球重力的倍數(shù)。15. 沉降系數(shù):顆粒在單位離心力場作用下的沉降系數(shù),其單位為秒。16. 經(jīng)典式沉降平衡離心法主要用于對生物大分子分子量的測定、純度估計、構(gòu)象變化等。17. 差速離心法:是利用不同的粒子在離心力場中沉降的差別,在同一離心條件下,通過不斷增加相對離心力,使一個非均勻混合液內(nèi)的大小、形狀不同的粒子分步沉淀的離心方法。操作簡單,分離時間短、重復(fù)性高、樣本處理量大。但是分辨率有限、分離效果差,顆粒被擠壓。18. 密度梯度離心法:又稱區(qū)帶離心法,是樣品在一定惰性梯度介質(zhì)中進(jìn)行離心沉淀或沉降平衡,在一定離心力下把顆粒分配到梯度液中某些特定的位置上,形成不同區(qū)帶的分離方法。19.
8、分析型超速離心機(jī)基本機(jī)構(gòu):橢圓形的轉(zhuǎn)子、一套真空系統(tǒng)和一套光學(xué)系統(tǒng)所組成。20. 離心機(jī)的分類:低速(10000轉(zhuǎn)以內(nèi),15000g以內(nèi))、高速(20000-25000轉(zhuǎn),最大89000g分離形式是固液沉降分離)、超速離心機(jī)(50000-80000轉(zhuǎn),5100000g,用于生物大分子、細(xì)胞器和病毒等的分離純化。)21. 離心機(jī)的結(jié)構(gòu):低速離心機(jī),電動機(jī)、離心轉(zhuǎn)盤、調(diào)速器、離心套管與底座等主要部件構(gòu)成。高速離心機(jī),轉(zhuǎn)動裝置、速度控制系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)、真空系統(tǒng)、離心室、離心轉(zhuǎn)頭及安全保護(hù)裝置等。22. 轉(zhuǎn)頭:是離心機(jī)分離樣本的核心部件。低速離心機(jī)一般采用強(qiáng)度好、重量輕的超硬鋁合金;超速離心機(jī)采用
9、鈦合金。23. 轉(zhuǎn)頭分類:固定角轉(zhuǎn)頭、甩平式轉(zhuǎn)頭、連續(xù)流動轉(zhuǎn)頭、區(qū)帶轉(zhuǎn)頭、垂直轉(zhuǎn)頭。24. 離心轉(zhuǎn)頭的常用標(biāo)記及參數(shù):FA:固定角轉(zhuǎn)頭Rmax表示從轉(zhuǎn)軸中心至試管底的距離。V :垂直轉(zhuǎn)頭Rmin表示從轉(zhuǎn)軸中心至試管最內(nèi)緣或試管頂?shù)?距離SW:甩平式轉(zhuǎn)頭RPMmax表示轉(zhuǎn)頭的最高安全轉(zhuǎn)速。第四章 光譜分析技術(shù)25. 光譜分析:對物質(zhì)發(fā)射的輻射能能譜進(jìn)行的分析或?qū)椛淠芘c物質(zhì)相互作用引起的能譜改變進(jìn)行的分析都稱為光譜分析。 常用的光譜分析方法有:吸收光譜分析法、發(fā)射光譜分析法、散射光譜分析法等。26. 光譜分析儀器有:紫外-可見分光光度計、原子吸收分光光度計、紅外光譜儀。原子發(fā)射光譜儀、熒光分析儀
10、、原子熒光分析儀。27. 光譜分析的原理:光照射到物質(zhì)時,可發(fā)生折射、反射和透射,一部分光會被物質(zhì)吸收,每一種物質(zhì)都有其特定的吸收光譜,因此可根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜來分析物質(zhì)的結(jié)構(gòu)和含量,這就是吸收光譜分析法的基礎(chǔ)。28. 光的吸收定律:郎伯比爾定律。29. 線狀光譜是由原子或離子被激發(fā)而發(fā)射,帶狀光譜由分子被激發(fā)而發(fā)射,連續(xù)光譜由炙熱的固體或液體所產(chǎn)生。30. 200-800nm的分光光度計稱為紫外-可見分光光度計,200-400為紫外分光去,400-800為可見光區(qū)。31. 紫外-可見分光光度計的基本結(jié)構(gòu):光源、單色器、樣品池、檢測器和放大顯示系統(tǒng)五部分組成。32. 常用的光源有熱輻射燈、氣體
11、放電燈、金屬弧燈。33. 鹵鎢燈穩(wěn)定性好,常用作可見分光光度計的光源。34. 影響分光光度法準(zhǔn)確性的因素:單色光不純的影響、雜散光的影響、吸收池的影響、電壓檢測器負(fù)高壓波動的影響、其他因素的影響。35. 熒光光譜儀主要特點(diǎn):靈敏度高,選擇性強(qiáng)用量少、特異性好操作簡單。不足之處:對溫度、pH值等因素變化比較敏感,應(yīng)用范圍較窄,只能用來測量發(fā)熒光的物質(zhì)。36. 熒光光譜儀工作原理:對于某一熒光物質(zhì)的稀溶液,在激發(fā)光的頻率、強(qiáng)度以及液層厚度不變時,此熒光物質(zhì)所發(fā)出的熒光強(qiáng)度與溶液的濃度成正比關(guān)系,由此可通過測定熒光強(qiáng)度來求出該物質(zhì)的含量。37. 原子吸收光譜儀的基本原理:從光源中發(fā)出一束特定波長的入
12、射光,在原子化器中待測元素的基態(tài)原子蒸汽對其產(chǎn)生吸收,未被吸收的部分透射過去,通過測定特定波長下被吸收光量的大小,來求出待測元素的含量。38. 原子吸收光譜儀能測量近70種金屬和半金屬元素,從超微量到高濃度都能準(zhǔn)確和精確的測定。光源系統(tǒng)常用的是空心陰極燈。原子化器的作用是提供能量將液態(tài)試樣中的待測元素干燥蒸發(fā)使之轉(zhuǎn)變成原子態(tài)的蒸汽,常用的有火焰原子化器和無火焰原子化器。39. 原子發(fā)射光譜儀的工作原理:提供足夠能量的光源,使試樣蒸發(fā)并將各組分轉(zhuǎn)變成氣態(tài)原子或離子,引起氣體中各基本粒子的電激發(fā),被激發(fā)的原子或離子回到基態(tài)時發(fā)射出每個元素的特征光譜,不同濃度的各原子或離子發(fā)射的強(qiáng)度不同,可實(shí)現(xiàn)元素
13、的定量檢測。40. 利用試樣中原子或離子所發(fā)射的特征譜線的波長或強(qiáng)度來檢測元素的存在和含量的儀器稱為原子發(fā)射光譜儀。41. 原子發(fā)射光譜儀包括:火焰光度計、火焰分光光度計、攝譜儀、光電直讀光譜儀和激光顯微發(fā)射光譜儀等。42. 原子發(fā)射光譜儀靈敏度高、選擇性好、分析速度快、用量少、能同時進(jìn)行多元素的定性和定量分析,是元素分析最常用的方法之一。第五章 色譜分析技術(shù)色譜儀:用光柵或棱鏡作色散元件,用照相法記錄光譜的原子發(fā)射光譜儀器。43. 色譜儀的結(jié)構(gòu):光源、分光系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)等三部分構(gòu)成。44. 光電直讀光譜儀:用光電倍增管來接受和記錄譜線的方法稱為光電直讀法。45. 色譜法:是一種物理分離技術(shù),
14、實(shí)質(zhì)上是利用混合物中各個組分在互不相溶的兩相之間的分配的差異而使混合物得到分離的一種方法。46. 色譜儀輸出的信息:色譜圖、基線、色譜峰、進(jìn)樣峰和空氣峰、保留時間、死時間和死體積。47. 色譜圖:被色譜柱分離的物質(zhì)流過檢測器的含量與時間的關(guān)系。48. 基線:純流動相流過檢測器時所產(chǎn)生的響應(yīng)。49. 保留時間:從進(jìn)樣開始到出現(xiàn)色譜峰最大值所需要的時間。50. 死時間:指惰性物質(zhì)組分,從注入到出現(xiàn)峰的最高點(diǎn)所需要的時間。51. 色譜儀的分類:氣相色譜儀和高效液相色譜儀。52. 氣相色譜儀的基本結(jié)構(gòu):氣路系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)(色譜柱)、檢測系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)、數(shù)據(jù)處理、記錄系統(tǒng)及電源、電子線路等
15、構(gòu)成。53. 氣路系統(tǒng)是為向色譜柱提供質(zhì)地潔凈、流動平穩(wěn)的流動相,通常由載氣源、減壓閥、凈化器、穩(wěn)壓閥、柱子及全部鏈接管道構(gòu)成。54. 凈化器:載氣中一般含有水、碳?xì)浠衔?、二氧化碳和其他惰性氣體,載氣是否凈化對檢測性的穩(wěn)定性和響應(yīng)的影響相當(dāng)嚴(yán)重。55. 當(dāng)要求分析的樣品量較大且分離不困難時,可采用內(nèi)徑較大、長度較短的填充柱。56. 在氣相色譜儀的使用過程中,必須使用氣態(tài)樣品,因此,溫度的控制的穩(wěn)定與否與氣象色譜儀的正常工作及其測量結(jié)果的可靠性有著密切的聯(lián)系。57. 線性升溫應(yīng)用最為廣泛,尤其是對沸點(diǎn)分布比較均勻的樣品分析時。58. 氣象色譜儀常用的檢測器的分類:積分型的檢測器和微分型的檢測器
16、。微分型檢測器又分為濃度檢測器和質(zhì)量流速檢測器。59. 氣象色譜儀常用的監(jiān)測器:熱導(dǎo)檢測器,氫火焰離子化檢測器、電子捕獲檢測器。60. 基本檢測原理是載氣和樣品各組分具有不同的熱導(dǎo)系數(shù)。61. 高效液相色譜儀:又稱高速液相色譜儀、高壓液相色譜儀等。62. 對高壓輸液泵的要求主要是:能產(chǎn)生較高的壓力推動流動相,且壓力要平穩(wěn),脈動小 。能提供無脈動恒定流量。輸送流動相的流量能在較大范圍內(nèi)連續(xù)調(diào)節(jié)。更換流動相方便。便于實(shí)現(xiàn)程序控制。 63. 自動化儀器完善的檢測保護(hù)裝置的原因自動化儀器由于采用了自動控制裝置,其內(nèi)部工作過程都可以自動完成。但在工作過程中,如果出現(xiàn)了故障而沒有完善的檢測保護(hù)裝置來進(jìn)行實(shí)
17、時的監(jiān)測、保護(hù),那就會使儀器在異常的情況下繼續(xù)工作,這樣不但得不到正確的分析結(jié)果,而且還可能進(jìn)一步損壞儀器,因此自動化儀器必須要有完善的檢測保護(hù)裝置來保證其正常運(yùn)行。64. 對于一些復(fù)雜樣品,采用常液洗脫的方法,為什么分離效果會很差,可以用什么方法來改善分離對于一些復(fù)雜樣品,如果還是采用常液洗脫的方法,樣品各組分的分配比K的值對任意一種流動相都分布很寬時,分配比小的先出色譜柱,但往往分離不好,甚至不能完全分離。而最后出來的若干組分因分離時間太長,峰形擴(kuò)散,致使檢測器的靈敏度顯著降低,甚至無法檢出,因此不能得到好的分離結(jié)果。為解決這個問題,可采用梯度洗脫;程序升溫;程序變流速;組合柱等方法來改善
18、樣品的分離。最常用的是梯度洗脫的方法。65. 對高效液相色譜儀進(jìn)樣系統(tǒng)的要求主要是什么,如何實(shí)現(xiàn)?高效液相色譜儀的進(jìn)樣系統(tǒng),要求能將樣品有效地注入到系統(tǒng)里去,而不破壞在色譜柱和檢測器里所建立的流量平衡。由于考慮到高效液相色譜儀溶劑流動的特點(diǎn)是壓力高、流速慢,樣品在移動過程中的擴(kuò)散作用更為明顯。因此盡量降低進(jìn)樣器的死體積將有助于柱效率的提高。66. 在液固吸附色譜中,正確選擇流動相應(yīng)依據(jù)哪些基本原則?穩(wěn)定性。主要是指柱效率或柱子的保留性質(zhì)要長期不變。適應(yīng)所采用的檢測器。能溶解待分離樣品。清洗方便。粘度要小一些。67. 對于高效液相色譜儀的檢測器,除了須具備與氣相色譜儀相同的基本要求外,還要特別注
19、意哪兩點(diǎn)?為什么?對流動相的適應(yīng):在氣相色譜儀中,流動相比較簡單,只是少數(shù)性質(zhì)差異不大的氣體。但在高效液相色譜儀中,流動相從有機(jī)化合物到水及其他電解質(zhì)溶液都有,特別是加上梯度洗脫之后,流動相本身就成為多元物質(zhì),因此在設(shè)計及選用檢測器時必須充分注意。峰擴(kuò)展的問題:在高效液相色譜儀中由于流動相的流速相對較慢,峰擴(kuò)展的問題顯得比氣相色譜儀中更為突出。因此,對于死體積及測量系統(tǒng)的時間常數(shù)的要求就更為嚴(yán)格。要求檢測器的空間及測量系統(tǒng)的時間常數(shù)盡可能小。早期樣品池體積在50l左右,現(xiàn)在一般都在10l以下。68. 紫外及可見分光檢測器與一般的紫外-可見分光光度計的主要差異有哪些?紫外及可見分光檢測器與一般的
20、紫外-可見分光光度計的主要差異有:樣品檢測池體積只有5l8l,不致于影響峰形,并做成流動式。檢測靈敏度達(dá)0.05O.D.0.01O.D.的滿度值(一般光度計僅為1.0O.D.0.5O.D.)。為提高靈敏度,樣品池盡量做得細(xì)長。對分光后光的單色性、波長精度要求不高,光譜寬度可在10nm,波長精度可以低至±2nm。69. 計算機(jī)在色譜儀中的應(yīng)用可以帶來什么優(yōu)點(diǎn)?通過計算機(jī)的介入,色譜儀能較長期地連續(xù)運(yùn)行。儀器的可靠性,精度等主要技術(shù)指標(biāo)大大提高。色譜儀還能夠自動進(jìn)行標(biāo)定、自動校正諸如環(huán)境溫度、壓力等變化引起的誤差、自動檢查本身的工作狀態(tài),發(fā)現(xiàn)故障,指示故障源和發(fā)出報警信號,停機(jī)。操作、使
21、用更加方便。第六章 電泳技術(shù)70. 電泳:是指帶電荷的溶質(zhì)或者粒子在電場中向著與其本身所帶電荷相反的電極移動的現(xiàn)象。71. 電泳區(qū)帶由近到遠(yuǎn)依次為:清蛋白,1 2 球蛋白72. 電泳的基本原理:物質(zhì)分子在正常狀況下一般不帶電,即所帶正負(fù)電荷量相等。故不顯示帶電性。但在一定的物理作用或者化學(xué)反應(yīng)條件下,某些物質(zhì)會帶電,不同物質(zhì)由于其帶電性質(zhì),顆粒大小形狀不同,在一定電場中移動速度也不同,因此可以它們分離。73. 電場強(qiáng)度:為電場方向上單位長度的電勢降落。(帶電粒子移速與所加電壓有關(guān))74. 等電點(diǎn):當(dāng)溶液酸堿度在一特定PH值時,它將帶正負(fù)相等的電荷,使蛋白質(zhì)分子不會在電場中移動,此PH值成為蛋白
22、質(zhì)的等電點(diǎn)。75. 粒子遷移率:為帶電粒子在單位電場強(qiáng)度下的移動速度(顆粒凈電荷越大,直徑越小,形狀越接近圓形,泳速越快,溶液離子強(qiáng)度越低,泳速越快)76. 常用電泳儀的基本結(jié)構(gòu)?主要設(shè)備:電源(穩(wěn)定的直流電源),電泳槽77. 輔助設(shè)備:恒溫循環(huán)冷卻裝置,伏時積分儀,凝膠烘干器,分析檢測裝置78. 毛細(xì)管電泳技術(shù)CE:是一類以毛細(xì)管為分離通道,以高壓直流電場為驅(qū)動力,根據(jù)樣品和各組分之間遷移速度和分配行為上的差異而實(shí)現(xiàn)分離的一項液相分離技術(shù)。79. 毛細(xì)管電泳的基本原理:溶液中的的帶電粒子在高壓電場為驅(qū)動力,沿著毛細(xì)管通道,以不同速度向與其所帶電荷相反電極方向遷移,并根據(jù)樣品各組分之間的淌度和
23、分配行為上的差異而實(shí)現(xiàn)分離。80. 毛細(xì)管電泳儀的基本機(jī)構(gòu):高壓源,毛細(xì)管柱,檢測器和兩個供毛細(xì)管兩端插入而又可和電源相連的緩沖液槽。第七章 電化學(xué)分析技術(shù)81. 電化學(xué)分析法:是建立在溶液電化學(xué)性質(zhì)基礎(chǔ)上并利用這些性質(zhì),通過電極的變換,將被測物質(zhì)的濃度轉(zhuǎn)變成電學(xué)參數(shù)而進(jìn)行檢測的方法。82. PH測定原理:以參比電極為正極,以指示電極為負(fù)極,組成一個電化學(xué)電池,通過測定電動勢E而測定相應(yīng)溶液的ph83. 離子選擇電極的測定原理ISE:不同的敏感膜對特定的離子特異響應(yīng),與溶液中此種離子發(fā)生交換反應(yīng),改變兩相中的電荷分布,形成雙電層,測其雙電層的電動勢差異得其離子濃度。84. 氧分壓電極測定原理:
24、此電極為氧化還原電極,對氧的測定時基于電解氧原理實(shí)現(xiàn)的。氧在鉑陰極被還原,樣品中氧向陰極發(fā)生濃度擴(kuò)散,穩(wěn)定時形成極限擴(kuò)散電流,測此電流可知氧分壓。(伏安型)85. 二氧化碳分壓電極測定原理:是氣敏電極,有PH玻璃電極和Ag-Agcl電極組成的復(fù)合電極。復(fù)合電極和PCO2緩沖液裝入有機(jī)玻璃筒,有可以通過CO2的氣體滲透膜,co2可以滲入,建立電離平衡引起PH改變,測其PH可知PCO2。86. 電解質(zhì)分析儀的基本結(jié)構(gòu)濕式電解質(zhì)分析儀:離子選擇性電極,參比電極,分析箱,測量電路,控制電路,驅(qū)動電機(jī)和顯示器組成。一。版面系統(tǒng)(Y/N) 二,電極系統(tǒng):指示電極Ph,Na,K,Li, Cl,Ca,Mg等,
25、參比電極為Ag-Agcl電極。三,液路系統(tǒng):由標(biāo)本盤,溶液瓶,吸樣針,三通閥,電極系統(tǒng),蠕動泵構(gòu)成。有定標(biāo)液/沖洗液,標(biāo)本,廢液,回水,電磁閥通路。四,電路系統(tǒng):電源電路,微處理,輸入輸出,信號放大及數(shù)據(jù)采集,蠕動泵和三通閥控制模塊組成。五,軟件系統(tǒng)。干式電解質(zhì)分析儀:(反射光度法,離子選擇性電極法)基于離子選擇性電極法:兩個完全相同的電極(參比層,Agcl層,Ag層),紙鹽橋等組成。87. 血?dú)夥治鰞x原理:利用電極對人全血中酸堿度,PCO2,PO2進(jìn)行測定,根據(jù)以上參數(shù)和輸入的血紅蛋白值,可以計算血液中其他參數(shù)。88. 血?dú)夥治鰞x是一種相對測量儀器,使用時應(yīng)定標(biāo)(PH由7.383和6.840
26、兩種標(biāo)準(zhǔn)緩沖液定標(biāo),PCO2.PO2由5co2,20o2和10co2定標(biāo))89. 血?dú)夥治鰞x基本結(jié)構(gòu):1.電極系統(tǒng)2.管路系統(tǒng)(氣液路)3.電路系統(tǒng)。第十一章 流式細(xì)胞技術(shù)90. 流式細(xì)胞技術(shù):在單細(xì)胞水平上,對于處在快速直線流動狀態(tài)的打量生物顆粒進(jìn)行多參數(shù),快速的定量分析分選技術(shù)。91. 簡述流式細(xì)胞儀的分析原理?經(jīng)特異熒光染料染色后的樣品沿流動室的軸心向下流動,流動室軸心至外壁的鞘液也向下流動,形成包繞細(xì)胞懸液的鞘液流,鞘液和樣品流在噴嘴附近組成一個圓柱流束,與水平方向的激光束垂直相交。染色的細(xì)胞受激光照射后發(fā)出熒光,這些信號分別被光電倍增管接收,經(jīng)過計算機(jī)儲存、計算、分析這些數(shù)字化信息,
27、就可得到細(xì)胞的大小、活性、核酸含量、酶和抗原的性質(zhì)等物理和生化指標(biāo)。92. 簡述流式細(xì)胞儀細(xì)胞分選原理?當(dāng)某類細(xì)胞的特性與要分選的細(xì)胞相同時,流式細(xì)胞儀就會在這類細(xì)胞形成液滴時給含有這類細(xì)胞的液滴充以特定的電荷,帶有電荷的液滴向下落入偏轉(zhuǎn)板間的靜電場時,依所帶電荷的不同分別向左偏轉(zhuǎn)或向右偏轉(zhuǎn),落入指定的收集器內(nèi),不帶電的液滴不發(fā)生偏轉(zhuǎn),垂直落入廢液槽中被排出,從而達(dá)到細(xì)胞分類收集的目的。93. 流式細(xì)胞儀的基本結(jié)構(gòu):流動室及液流驅(qū)動系統(tǒng),激光光源及光束成形系統(tǒng),光學(xué)系統(tǒng),信號檢測與存貯、顯示、分析系統(tǒng),細(xì)胞分選系統(tǒng)等五個部分。94. 流式細(xì)胞儀依據(jù)什么進(jìn)行分類? 各類型有什么特點(diǎn)?答:流式細(xì)胞
28、儀根據(jù)功能不同可分為臨床型和科研型。臨床型只有分析功能,沒有分選功能,儀器的光路調(diào)節(jié)系統(tǒng)固定,自動化程度高,操作簡便,易學(xué)易掌握??蒲行图扔蟹治龉δ苡钟蟹诌x功能,可快速將所感興趣的細(xì)胞分選出來,并可將單個或指定個數(shù)的細(xì)胞分選到特定的容器里,同時可選配多種波長和類型的激光器,適用于更廣泛更靈活的科學(xué)研究。95. 流式細(xì)胞儀根據(jù)其結(jié)構(gòu)不同又可分為一般流式細(xì)胞儀和狹縫掃描流式細(xì)胞儀。前者的激光光斑為橢圓形,光斑直徑大于被檢細(xì)胞體積,只能提供細(xì)胞內(nèi)某種生物化學(xué)成分的參數(shù),不能對細(xì)胞形態(tài)和亞細(xì)胞形態(tài)進(jìn)行分辨。狹縫掃描流式細(xì)胞儀是一種高分辨率的檢測儀器,被檢細(xì)胞直徑大于激光光斑直徑,細(xì)胞通過光束時各部分被
29、依次掃描,根據(jù)熒光信號的先后,就可得到一維的細(xì)胞輪廓組方圖,可計算出細(xì)胞直徑大小、核直徑大小、核漿比例等一系列的形態(tài)學(xué)信息。第十二章 血液分析技術(shù) 96. 血細(xì)胞分析儀:指對一定體積全血內(nèi)血細(xì)胞異質(zhì)性進(jìn)行自動分析的臨床常規(guī)檢驗(yàn)儀器。97. 血液凝固分析儀:采用一定的分析技術(shù),對血栓與止血有關(guān)成分進(jìn)行自動檢測的臨床常規(guī)檢驗(yàn)儀器。98. 血凝儀凝固法原理:是通過檢測血漿在凝血激活劑作用下一系列物理量(光、電、超聲、機(jī)械運(yùn)動等)的變化,再由計算機(jī)分析所得數(shù)據(jù)并將之換算成最終結(jié)果的方法,故也稱生物物理法99. 血?dú)夥治鰞x的檢測原理?電阻抗法:血細(xì)胞與等滲的電解質(zhì)溶液相比為相對的不良導(dǎo)體,其電阻值大于稀
30、釋溶液的電阻值;當(dāng)血細(xì)胞通過檢測器的孔徑感受區(qū)時,檢測器內(nèi)外電極之間的恒流源電路的電阻值瞬間增大,產(chǎn)生電壓脈沖信號;脈沖信號數(shù)等于通過的細(xì)胞數(shù),脈沖信號幅度大小與細(xì)胞大小成正比。聯(lián)合檢測型檢測原理:實(shí)質(zhì)是選用比較特異的方法將血中含量較少的嗜酸,嗜堿性粒細(xì)胞檢出,發(fā)現(xiàn)異常細(xì)胞。多使用(流式,激光,射頻,電導(dǎo),電阻抗,細(xì)胞化學(xué)染色)同時分析一個細(xì)胞,綜合實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),從而得出白細(xì)胞五分群的結(jié)果。100. 血細(xì)胞分析儀的基本機(jī)構(gòu):機(jī)械系統(tǒng),電子系統(tǒng),血細(xì)胞檢測系統(tǒng),血紅蛋白測定系統(tǒng),計算機(jī)和鍵盤控制系統(tǒng)。101. 血凝儀常用檢測原理?有凝固法、底物顯色法、免疫學(xué)方法、干化學(xué)技術(shù)法檢測原理等。凝固法原理是
31、最基本、最常用的方法。102. 凝固法:一,電流法,利用纖維蛋白原無導(dǎo)電性而纖維蛋白油導(dǎo)電性特點(diǎn),待測樣本作為電路一部分,測電流變化來判斷纖維蛋白的形成。二,超聲分析法,利用超聲波測定血漿在體外的凝固過程。三,光學(xué)法,是利用一束光線通過樣品杯,樣品杯中的血漿在凝固過程中導(dǎo)致血漿濁度發(fā)生變化;透射光或散射光的強(qiáng)度也發(fā)生改變;儀器根據(jù)光強(qiáng)度的變化來判斷血漿凝固終點(diǎn)的檢測方法。四,雙磁珠法,在測試杯的兩側(cè)各有一組驅(qū)動線圈,它們產(chǎn)生恒定的交替電磁場,使測試杯內(nèi)特制的去磁小鋼珠保持等幅振蕩運(yùn)動;凝血激活劑加入后,隨著纖維蛋白的增多,小鋼珠的運(yùn)動振幅逐漸減弱;另一組測量線圈感應(yīng)到小鋼珠運(yùn)動的變化;儀器將運(yùn)
32、動幅度衰減到50時確定為凝固終點(diǎn)。103. 底物顯色法:測定產(chǎn)色底物的吸光度變化來推測所測物質(zhì)的含量和活性。104. 免疫學(xué)方法:以被純化的被測物質(zhì)為抗原,制備相應(yīng)的抗體,并利用抗原抗體反應(yīng)對被測物質(zhì)進(jìn)行定量或定性分析。105. 干化學(xué)技術(shù):將惰性順磁鐵氧化顆粒結(jié)合在可產(chǎn)生凝固反應(yīng)或纖溶反應(yīng)的干試劑中,在垂直磁場中顆粒作來回移動,加入血樣本后,血液是干試劑溶解,發(fā)生相應(yīng)的凝固反應(yīng)或纖溶反應(yīng),導(dǎo)致干試劑中PIOP擺動幅度變化,簡介反映出纖維蛋白的形成或者溶解的動態(tài)過程。106. 血液流變分析儀:是對全血,血漿或者血細(xì)胞流變特性進(jìn)行分析的儀器。107. 毛細(xì)管粘度計工作原理和結(jié)構(gòu):毛細(xì)管黏度計是依
33、據(jù)牛頓流體遵循泊肅葉定律而設(shè)定的。即一定體積的液體,在恒定的壓力驅(qū)動力下,流過一定管徑的毛細(xì)管所需的時間與黏度成正比?;窘Y(jié)構(gòu):包括毛細(xì)管、儲液池、控溫裝置、計時裝置等。108. 旋轉(zhuǎn)式黏度計的基本結(jié)構(gòu):樣本傳感器,轉(zhuǎn)速控制系統(tǒng)與調(diào)節(jié)系統(tǒng),力矩測量系統(tǒng),恒溫系統(tǒng)。第十三章 尿液分析技術(shù)109. 尿液分析儀的結(jié)構(gòu)? 尿液分析儀一般由機(jī)械系統(tǒng)、光學(xué)系統(tǒng)(光源、單色處理、光電轉(zhuǎn)換)、電路系統(tǒng)三部分組成。110. 尿液分析儀的工作原理? 尿液與相應(yīng)的試劑帶接觸,尿液中的各種待測成分與尿液試劑帶相應(yīng)區(qū)塊發(fā)生顏色變化,通過對尿液試劑帶反射光的測定,可以知道尿液中相應(yīng)成分的含量。111. 尿液試劑帶反應(yīng)原理
34、?1.PH測定采用PH指示劑原理,常用甲基紅和溴麝香草酚藍(lán)。2.尿蛋白測定PH指示劑蛋白質(zhì)誤差的原理。3.尿葡萄糖測定采用葡萄糖氧化酶原理或者銅還原法原理。4.尿酮體測定采用亞硝基鐵氰化鈉反應(yīng)。5.尿隱血測定采用血紅素用過氧化物酶作用,可以催化過氧化氫產(chǎn)生新生態(tài)氫,使色原顯色。6.尿膽紅素測定采用重氮反應(yīng)原理。7尿膽原測定采用Ehrlish醛反應(yīng)原理或者重氮反應(yīng)原理。8.尿亞硝酸鹽測定利用某些細(xì)菌可以將尿中硝酸鹽還原成亞硝酸鹽,與苯喹啉顯色。9.尿白細(xì)胞測定利用中性粒細(xì)胞的酯酶能水解吲哚乙酸和有機(jī)酸,吲哚酚可進(jìn)一步氧化為靛藍(lán)。10.尿比密測定基于某種預(yù)處理的多聚電解質(zhì)在一定離子濃度的溶液中pK
35、a變化來測量比密度。11.尿維生素C測定采用磷鉬酸緩沖液或甲基綠與尿中維生素C進(jìn)行反應(yīng)。112. 尿液分析儀的檢測原理是什么?答:把試劑帶浸入尿液中后,除了空白塊外,其余的試劑塊都因和尿液發(fā)生了化學(xué)反應(yīng)而產(chǎn)生了顏色的變化。試劑塊的顏色深淺與光的吸收和反射程度有關(guān),顏色越深,相應(yīng)某種成分濃度越高,吸收光量值越大,反射光量值越小,反射率也越小。反之,反射率越大。即顏色的深淺與光的反射率成比例關(guān)系,而顏色的深淺又與尿液中各種成分的濃度成比例關(guān)系。所以只要測得光的反射率即可以求得尿液中各種成分的濃度。113. 簡述流式細(xì)胞術(shù)尿沉渣分析儀的工作原理。答:測定是應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)和電阻抗的原理進(jìn)行的。當(dāng)一個尿
36、液標(biāo)本被稀釋并經(jīng)染色液染色后,靠液壓作用通過鞘液流動池。反應(yīng)樣品從樣品噴嘴出口進(jìn)入鞘液流動室時,被一種無粒子顆粒的鞘液包圍,使每個細(xì)胞以單個縱列的形式通過流動池的中心(豎直)軸線,在這里每個尿液細(xì)胞被氬激光光束照射。每個細(xì)胞有不同程度的熒光強(qiáng)度、前向散射光強(qiáng)度和電阻抗的大小。儀器將這種熒光散射光等光信號轉(zhuǎn)變成電信號,并對各種信號進(jìn)行分析,最后得到每個尿液標(biāo)本產(chǎn)生出的直方圖(histogram)和散射圖(scattergram)。通過分析這些圖形,即可區(qū)分每個細(xì)胞并得出有關(guān)細(xì)胞的形態(tài)。114. 簡述流式細(xì)胞術(shù)尿沉渣分析儀的結(jié)構(gòu)。答:它包括光學(xué)檢測系統(tǒng)(氬激光,激光反射系統(tǒng),流動池,前向光檢測器,
37、前向光采集器)、液壓系統(tǒng)、電阻抗檢測系統(tǒng)和電子系。115. 尿沉渣分析儀工作原理?尿液分析儀對尿液進(jìn)行干化學(xué)分析,尿干化學(xué)分析的結(jié)果傳送到計算機(jī)中,再對離心后的尿沉渣用顯微鏡進(jìn)行檢查,顯微鏡的圖像傳送到計算機(jī)中,在屏幕上顯示出來,只要識別出尿沉渣成分,輸入相對數(shù)目,標(biāo)準(zhǔn)單位下的結(jié)果就會自動換算出來.第十四章 自動血沉分析儀116. 紅細(xì)胞沉降率:是指紅細(xì)胞在一定條件下沉降的速度,簡稱血沉。117. 紅細(xì)胞沉降曲線:即H-T曲線,是表示血沉管內(nèi)血漿高度H(mm)與時間T(min)關(guān)系的曲線。118. 簡述血沉自動分析儀的原理。答:所有血沉自動分析儀的原理和方法都是建立在魏氏法的基礎(chǔ)上,利用光學(xué)阻
38、擋原理進(jìn)行測量。也有采用紅外線障礙法或激光光源掃描微量全血進(jìn)行檢測。紅細(xì)胞沉降過程是一個包含力學(xué)、流變學(xué)及細(xì)胞間相互作用等復(fù)雜的過程。影響紅細(xì)胞沉降的因素很多,對于紅細(xì)胞沉降這一非線性過程而言,自動血沉分析儀可完整記錄紅細(xì)胞沉降的全過程。119. 簡述血沉自動分析儀的讀數(shù)原理。答:一類是血沉管垂直固定在自動血沉儀的孔板上,光電二極管對血沉管進(jìn)行掃描。一旦紅外線穿過血沉管到達(dá)接收器,接收器的信號就引導(dǎo)計算機(jī)開始計算到達(dá)移動終端時所需的距離。首先記錄血沉管中的血液在零計時時的高度,此后每隔一定時間掃描一次,記錄每次掃描時紅細(xì)胞和血漿接觸的位置,血沉以計算機(jī)自動計算轉(zhuǎn)換成魏氏法測定值報告結(jié)果。另一類
39、是固定光電二極管,血沉管隨轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)動。垂直置管方式與魏氏法相同。18度傾斜置管方式是將放入血沉管中的血樣被儀器充分混勻后,試管相對于Y軸傾斜18度,促使紅細(xì)胞沉降加速,靜置一段時間,光電傳感器自動讀出紅細(xì)胞沉降值,先紀(jì)錄結(jié)果后轉(zhuǎn)換成魏氏法測定值。第十五章 自動生化分析技術(shù)120. 自動生化分析儀:是將生物化學(xué)分析過程中的取樣、加試劑、去干擾、混合、保溫反應(yīng)、自動檢測、結(jié)果計算、數(shù)據(jù)處理和打印報告,以及實(shí)驗(yàn)后的清洗等步驟自動化的儀器。121. 連續(xù)流動式自動生化分析儀:測定項目相同的各待測樣品與試劑混合后的化學(xué)反應(yīng),均在同一管道中經(jīng)流動過程完成,又稱管道式分析儀。122. 離心式自動生化分析儀:將
40、樣品和試劑放在特制圓形轉(zhuǎn)頭內(nèi),裝在離心機(jī)的轉(zhuǎn)子位置,當(dāng)離心機(jī)開動后,圓形反應(yīng)器內(nèi)的樣品和試劑受離心力的作用而相互混合發(fā)生反應(yīng),經(jīng)過一定時間的溫育后比色計算結(jié)果。123. 分立式自動化分析儀:是指按手工操作的方式編排程序,并以有節(jié)奏的機(jī)械操作代替手工,各環(huán)節(jié)用轉(zhuǎn)送帶連接起來,按順序依次操作。124. 干化學(xué)式自動生化分析儀:將待測液體樣品直接加到已固化于特殊結(jié)構(gòu)的試劑載體上,以樣品中的水將固化于載體上的試劑溶解,再與樣品中的待測成分發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。測定方法為反射光度法和差示電位法。125. 什么是自動生化分析儀?有什么特點(diǎn)?答:自動生化分析儀是將生物化學(xué)分析過程中的取樣、加試劑、去干擾、混合、保溫反應(yīng)、自動檢測、結(jié)果計算、數(shù)據(jù)處理和打印報告,以及實(shí)驗(yàn)后的清洗等步驟自動化的儀器。它完全模仿并代替了手工操作。不僅提高了工作效率,而且減少了主觀誤差,穩(wěn)定了檢驗(yàn)質(zhì)量。這類儀器一般都具有靈敏、準(zhǔn)確、快速、節(jié)約和標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點(diǎn)。126. 簡述分立式自動生化分析儀的基本結(jié)構(gòu)。答:分立式自動生化分析儀主要由樣品處理系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)及計算機(jī)系統(tǒng)構(gòu)成。樣品處理系統(tǒng)包括樣品架、試劑倉、樣品和試劑取樣單元、攪拌器等;檢測系統(tǒng)包括光源、分光裝置、比色杯、恒溫裝置、清洗裝置等。計算機(jī)是儀器的大腦,整個分析過程均
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