前列腺增生的組織形態(tài)及其PCNA表達(dá)的定量研究

1、    前列腺增生的組織形態(tài)及其PCNA表達(dá)的定量研究        【摘要】目的探討前列腺增生(BPH)手術(shù)標(biāo)本的組織形態(tài)及其細(xì)胞增殖狀態(tài)的區(qū)域分布特征。方法應(yīng)用HE染色和免疫組化染色結(jié)合計(jì)算機(jī)輔助像分析方法，對(duì)24例BPH手術(shù)標(biāo)本的三個(gè)區(qū)域中組織構(gòu)成和增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)表達(dá)進(jìn)行定量分析。結(jié)果間質(zhì)面積百分比和間質(zhì)/上皮比值在尿道周圍區(qū)、中間區(qū)和包膜下區(qū)中均依次遞減(P0.01)，而上皮和腺腔面積百分比則依次遞增(P0.01)；三區(qū)間腺腔/上皮比值差異無顯著性。尿道周

2、圍區(qū)PCNA指數(shù)高于其它兩區(qū)(P0.05)。結(jié)論BPH的組織構(gòu)成和細(xì)胞增殖狀態(tài)存在著區(qū)域分布差異?！娟P(guān)鍵詞】前列腺增生,免疫組織化學(xué),增殖細(xì)胞核抗原 Regional morphosis and quantitative distribution of the index of PCNA in benign prostatic hyperplasiaXIE Qingxiang,PEI Faguang MENG Jiarong,et al.Department of Urology,the 175 Hospital of PLA,Zhangzhou 363000【Abstract】Objecti

3、veTo explore the regional distribution characteristic of morphosis and cellular proliferation in benign prostatic hyperplasia(BPH).MethodsThe HE staining and immunohistochemistry combining with computer-assisted quantitative image analysis system were adopted to examine the mean percent area densiti

4、es of stroma,epithelium and glandular lumen and the index of PCNA among periurethral zone,intermediate zone and supcapsular zone of prostate specimens from 24 patients with BPH.Results Both the area density of stroma and the ratios of stroma to epithelium were the highest in the periurethral zone an

5、d the lowest in the supcapsular zone. While the area density of epithelium and glandular lumen in the periurethral zone was significantly lower than those of peripheral zones.The ratios of glandular lumen to epithelium among three zones were not statistically different. There were significant differ

6、ences of the index of PCNA among three zones.ConclusionsRegional distribution differences of morphosis and PCNA index in BPH tissues were observed.【Key words】Prostatic hypertrophy,Immunohistochemistry,Proliferating cell nuclear antigen應(yīng)用HE染色和免疫組化結(jié)合計(jì)算機(jī)像分析的方法對(duì)24例前列腺增生(BPH)組織的72份標(biāo)本進(jìn)行了組織形態(tài)學(xué)和增殖細(xì)胞核抗原(PCNA

7、)表達(dá)的定量研究。材料與方法一、組織標(biāo)本恥骨上經(jīng)膀胱前列腺摘除標(biāo)本24例，均為兩側(cè)葉增大，6例伴中葉顯著增大。年齡5180歲，平均66歲。所有標(biāo)本均在離體后10分鐘內(nèi)于10%中性緩沖甲醛液固定46小時(shí)。與尿道縱軸平行縱向切取一側(cè)葉的尿道周圍區(qū)(尿道粘膜下)、中間區(qū)和包膜下區(qū)3份標(biāo)本。石蠟包埋、切片厚4m，常規(guī)HE染色。均經(jīng)病理組織學(xué)證實(shí)為BPH。二、免疫組化SP方法PCNA為鼠抗單克隆抗體，稀釋度150。DAB顯色，蘇木素復(fù)染。PBS替代一抗作為陰性對(duì)照。三、組織構(gòu)成成分所占面積百分比的檢測應(yīng)用醫(yī)學(xué)真彩色像處理系統(tǒng)對(duì)HE染色切片進(jìn)行像分析。每張切片隨機(jī)測量510個(gè)視野(×100)，分

8、別計(jì)算間質(zhì)、上皮和腺腔所占的面積百分比。四、PCNA指數(shù)的計(jì)算高倍鏡下(×400)通過像處理系統(tǒng)顯示屏放大，隨機(jī)檢測1020個(gè)視野，計(jì)算陽性細(xì)胞所占百分比、即PCNA指數(shù)，其中至少分別計(jì)數(shù)500個(gè)上皮細(xì)胞和500個(gè)間質(zhì)細(xì)胞。五、統(tǒng)計(jì)方法應(yīng)用萬道統(tǒng)計(jì)軟件(SDAS)統(tǒng)計(jì)分析，三樣本之間比較采用完全隨機(jī)配伍組方差分析，相關(guān)分析采用直線相關(guān)回歸分析。結(jié)果光鏡下見大多數(shù)尿道周圍區(qū)標(biāo)本中的腺體分布較稀疏、腺腔小、上皮細(xì)胞層次相對(duì)較多；包膜下區(qū)腺體增多、腺腔膨大、分布上相對(duì)密集呈腺瘤樣增生結(jié)節(jié)，中間區(qū)處于兩者之間。各組織中構(gòu)成成分面積百分比、間質(zhì)/上皮和腺腔/上皮比值見表1。盡管上述各指標(biāo)個(gè)體差

9、異較大，但大多數(shù)標(biāo)本的區(qū)域組織間各成分百分比和間質(zhì)/上皮比值呈一定規(guī)律性分布，即由尿道周圍區(qū)向包膜下區(qū)呈遞增或遞減趨勢。腺腔/上皮比值在三者之間則無顯著性差異。每份標(biāo)本的間質(zhì)和上皮均陽性表達(dá)PCNA，個(gè)體間也存在著差異。上皮中表達(dá)率及染色程度均高于間質(zhì)，部分病例中基底細(xì)胞染色較腺上皮細(xì)胞多且深。三個(gè)區(qū)域之間的上皮和間質(zhì)的PCNA指數(shù)均有顯著性差異(表1)。相關(guān)回歸分析發(fā)現(xiàn)PCNA指數(shù)與間質(zhì)和上皮面積百分比、間質(zhì)/上皮比值和腺腔/上皮比值之間均無顯著相關(guān)性(P0.05)。表1前列腺區(qū)帶組織中構(gòu)成成分百分比、間質(zhì)/上皮和腺腔/上皮比值(<"xx3 (840 bytes)"

10、 src="/med/cano/201003/20100312192113977" 12 15>±s)組織構(gòu)成成分百分比(%)間質(zhì)/上皮腺腔/上皮PCNA指數(shù)間質(zhì)上皮腺腔間質(zhì)上皮尿道周圍區(qū)59.7±10.415.2±5.025.1±9.14.6±2.71.9±0.5816.3±11.624.4±15.9中間區(qū)55.8± 8.017.9±4.526.3±9.03.3±1.01.6±0.5211.4± 7.417.4±12.

11、3包膜下區(qū)50.4± 9.318.4±4.631.2±8.13.0±1.51.8±0.4813.7± 9.920.2±13.7P值0.00000.00330.00260.00130.08650.00150.0003討論BPH是由間質(zhì)和上皮依不同比例混合增生的疾病。本組對(duì)BPH組織中不同區(qū)域的構(gòu)成成分進(jìn)行定量分析，發(fā)現(xiàn)三區(qū)域之間的間質(zhì)比例差異有顯著性，尿道周圍區(qū)最高、包膜下區(qū)最低，提示BPH組織中各區(qū)域間質(zhì)增生的程度并不一致，與Sciarra等1的結(jié)果類似。本組發(fā)現(xiàn)尿道周圍區(qū)的間質(zhì)/上皮比值顯著高于其它兩區(qū)，提示尿道周圍區(qū)的間

12、質(zhì)增生程度高于其它兩區(qū)，該區(qū)間質(zhì)增生程度也高于腺上皮增生，表明BPH是以間質(zhì)增生為主的增殖性疾病，間質(zhì)增生是BPH發(fā)生的第一步。雖然BPH組織內(nèi)各區(qū)域間諸成分增生的程度并不一致，但本組三區(qū)域的間質(zhì)/上皮比值均較正常前列腺的1.8為高2，提示相對(duì)于上皮細(xì)胞增生程度而言，間質(zhì)增生程度更為顯著，進(jìn)一步表明BPH是以間質(zhì)增生為主的疾病。BPH的臨床癥狀與組織構(gòu)成比例和間質(zhì)/上皮比值之間密切相關(guān)，有癥狀的BPH間質(zhì)比例為62%、間質(zhì)/上皮比值為4.6，均顯著高于無癥狀的54%和2.73。本組結(jié)果提示尿道周圍區(qū)對(duì)BPH臨床癥狀的影響較其它區(qū)域更大。Kaplan等4研究也表明移行區(qū)指數(shù)即移行區(qū)與前列腺總的體

13、積比值與BPH癥狀得分密切相關(guān)。本組結(jié)果顯示BPH三區(qū)域中上皮和腺腔比例由內(nèi)向外逐漸遞增，提示BPH組織中各區(qū)域的上皮增生和腺腔擴(kuò)大的程度也不一致，表明包膜下區(qū)域腺上皮細(xì)胞增生較尿道周圍區(qū)更為顯著，推測當(dāng)尿道周圍區(qū)的BPH間質(zhì)結(jié)節(jié)形成后并向外發(fā)展時(shí)，通過間質(zhì)-上皮相互作用等機(jī)制，不斷誘導(dǎo)及促進(jìn)上皮、間質(zhì)增生。在此過程中腺上皮增生程度相對(duì)增高而間質(zhì)增生程度相對(duì)降低，其原因是否與調(diào)控因子分布差異有關(guān)，有待于深入研究。夏同禮等5研究也認(rèn)為BPH發(fā)生發(fā)展過程中間質(zhì)和上皮呈非同步性分化與增生。本組三區(qū)域間的腺腔/上皮的比值并沒有明顯差別，提示BPH各區(qū)域中上皮增生和腺腔擴(kuò)大的程度基本上呈同步變化。但三個(gè)

14、區(qū)域的腺腔比例均顯著高于鄧方明等2報(bào)道的正常前列腺的19%，而且各自腺腔/上皮比值也高于正常的0.7。但西方人的BPH組織中腺腔比例并沒有比正常的增多，提示腺腔顯著擴(kuò)張是中國人BPH的一個(gè)重要特征。應(yīng)用免疫組化方法檢測PCNA表達(dá)能較好地反映細(xì)胞增殖狀態(tài)。本組發(fā)現(xiàn)無論是間質(zhì)還是上皮組織，三區(qū)域組織之間PCNA指數(shù)均存有差異，提示各區(qū)域中細(xì)胞增殖狀態(tài)分布并不一致，而且在BPH發(fā)生發(fā)展的不同階段細(xì)胞增殖所起的作用也不相同，這可能與組織中多肽生長因子及雄激素等調(diào)節(jié)因素分布差異有關(guān)1。鑒于尿道周圍區(qū)是BPH主要起源部位，本組發(fā)現(xiàn)該區(qū)PCNA指數(shù)顯著高于其它區(qū)域，提示該區(qū)細(xì)胞增殖活躍，表明細(xì)胞增殖的增加

15、在BPH的發(fā)生、發(fā)展過程中起到重要作用，此點(diǎn)與Claus等6的研究結(jié)果一致。但本組PCNA指數(shù)與間質(zhì)及上皮比例及其它指標(biāo)之間均無相關(guān)性，可能與BPH的發(fā)生、發(fā)展涉及到細(xì)胞增殖和凋亡兩因素有關(guān)，單一細(xì)胞增殖不能確切反映BPH增生的程度。 作者單位：謝慶祥、汪鴻、繆友仁(363000 漳州，解放軍第一七五中心醫(yī)院泌尿外科)裴發(fā)光、孟家榕(病理科)參考文獻(xiàn)1Sciarra F,Montis,Adamo MV,et al.Regional distribution of epidermal growth factor,testosterone and dihydrotesterone in benig

16、n prostatic hyperplasia tissue.Urol Res,1995,23387-390.2鄧方明，夏同禮，顧方六，等. 正常前列腺和前列腺增生的組織形態(tài)學(xué)定量研究. 中華泌尿外科雜志，1995,16708-710.3Shapiro E,Becich MJ,Hartanto V,et al.The relative proportion of stromal and epithelial hyperplasia is related to the development of symptomatic benign prostate hyperplasia. J Urol,1992,1471293-1297.4Kaplan SA,Te AE,Pressler LB,et al. Transition zone index as a method of assessing benign prostatic hyperplasia:correlation with symptoms,urine flow a