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1、第四章生物化學(xué)與分子生物學(xué)技術(shù)實(shí)踐一、選擇題(每小題只有1個(gè)選項(xiàng)符合題意,每小題 2分,共40分)1. 下列關(guān)于DNA聚合酶催化合成 DNA子鏈的說(shuō)法中,正確的是()A. 以DNA為模板,使DNA子鏈從5,端延伸到3,端的一種酶B. TaqDNA聚合酶必須在每次高溫變性處理后再添加C. TaqDNA聚合酶能特異性地復(fù)制整個(gè) DNA的全部序列D. TaqDNA聚合酶是從深海生態(tài)系統(tǒng)中發(fā)現(xiàn)的2. 在PCR反應(yīng)中,只有一個(gè) DNA片段作為模板,經(jīng)過(guò)一次循環(huán)后,含引物的單鏈占DNA總數(shù)的()A . 1/2B. 1/4C. 1D. 1/83. 蛋白酶能將蛋白質(zhì)水解而使DNA分離出來(lái),下列藥品同樣可達(dá)到這
2、個(gè)目的()A .蒸餾水B. NaCl溶液C. NaOH溶液D.鹽酸4將攪拌好的混合液離心來(lái)分離血紅蛋白溶液時(shí),第2層是()A. 甲苯B.血紅蛋白水溶液C.脂溶性物質(zhì)的沉淀層D.其他雜質(zhì)的沉淀5. 在蛋白質(zhì)的提取和分離中,關(guān)于對(duì)樣品處理過(guò)程中,分析無(wú)誤的是()A. 洗滌紅細(xì)胞的目的是去除血漿中的葡萄糖、無(wú)機(jī)鹽B. 洗滌時(shí)離心速度過(guò)低,時(shí)間過(guò)短,白細(xì)胞等會(huì)沉淀,達(dá)不到分離的效果C. 洗滌過(guò)程選用 0.1 %的生理鹽水D. 透析的目的是去除樣品中相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)6. 在做“提取 DNA實(shí)驗(yàn)”時(shí),某學(xué)生試圖用人血代替雞血,沒(méi)有成功,原因是()A.操作方法不對(duì)B.人血含DNA太少C. NaCl溶液
3、濃度太高D.加二苯胺太少7. 下列有關(guān)“ DNA精提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)原理的敘述正確的是()A. DNA在 NaCl溶液中的溶解度,隨 NaCl溶液濃度的降低而減小B. 利用DNA不溶于酒精的性質(zhì),可除去細(xì)胞中溶于酒精的物質(zhì)而得到較純的DNAC. DNA是大分子有機(jī)物,不溶于水而溶于某些有機(jī)溶劑D. 在沸水中,DNA遇二苯胺會(huì)出現(xiàn)紫色反應(yīng)8. 引物與DNA母鏈的關(guān)系是A.堿基順序相同 B .長(zhǎng)度相同C.堿基互補(bǔ)配對(duì) D.完全相同9. 有關(guān)PCR勺描述不正確的是A.是一種酶促反應(yīng)B.引物決定了擴(kuò)增的特異性C.擴(kuò)增產(chǎn)量按y=(1+x)2D.擴(kuò)增對(duì)象是氨基酸序列10. (10分)在進(jìn)行DNA粗提取實(shí)驗(yàn)時(shí)
4、,為得到含 DNA的黏稠物,某同學(xué)進(jìn)行了如下操作: 在新鮮雞血中加入適量的檸檬酸鈉,經(jīng)離心后,除去血漿留下血細(xì)胞備用。 取510mL血細(xì)胞放入50mL的塑料燒杯中,并立即注入20mL0.14mol/L的氯化鈉溶液,快速攪拌5min后經(jīng)濾紙過(guò)濾,取其濾液。 濾液中加入40mL2mol/L的氯化鈉溶液,并用玻璃棒沿一個(gè)方向快速攪拌1min。 上述溶液中緩慢加入蒸餾水,同時(shí)用玻璃棒沿一個(gè)方向不停地輕輕攪拌,直到溶液中出現(xiàn)絲狀物為止,再進(jìn)行過(guò)濾而得到DNA的黏稠物。實(shí)驗(yàn)結(jié)果是:所得含 DNA的黏稠物極少,導(dǎo)致下一步實(shí)驗(yàn)無(wú)法進(jìn)行。(1 )請(qǐng)指出并改正上述實(shí)驗(yàn)操作中的三處錯(cuò)誤:1: ii: iii: (2
5、 )步驟中加入蒸餾水使DNA析出的原理是 (3)要進(jìn)一步提取 DNA時(shí),加入冷卻的酒精的其作用是 。11. 已知蛋白質(zhì)混合液中硫酸銨濃度的不同可以使不同種類(lèi)的蛋白質(zhì)析出(或沉淀),隨著硫酸銨濃度增加,混合液中蛋白質(zhì)析出的種類(lèi)和總量增加。下表是某蛋白質(zhì)混合液中的不同蛋白質(zhì)從開(kāi)始析出到完全析出所需要的蛋白質(zhì)混合液中的硫酸銨濃度范圍。蛋白質(zhì)混合液中硫酸銨濃度(%析出的蛋白質(zhì)15-20甲蛋白23-30乙蛋白25-35丙蛋白38-40丁蛋白請(qǐng)據(jù)表回答:(1) 若只完全析出甲蛋白,混合液中最合適的硫酸銨濃度為 。(2) 向該蛋白質(zhì)混合液中加入硫酸銨溶液(或硫酸銨),使混合液中的硫酸銨濃度達(dá)到30%會(huì)析出若
6、干種蛋白質(zhì),他們分別是 。(3) 通過(guò)改變混合液中的硫酸銨濃度( 能、不能)從混合液中得到所有的、不含有其他蛋白質(zhì)的乙蛋白,原因是 。(4)簡(jiǎn)要寫(xiě)出從該蛋白質(zhì)混合液中分離出全部丁蛋白的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路。(5)如果蛋白質(zhì)析出物中還含有一定量的硫酸銨,可用半透膜除去析出物中的硫酸銨。用半透膜除去析出物中硫酸銨的原理是 2參考答案:12. 果膠是植物細(xì)胞壁以及胞間層的主要組成成分之一。果膠酶能夠分解果膠,瓦解植物 細(xì)胞壁及胞間層。在果汁生產(chǎn)中應(yīng)用果膠酶可以提高出汁率和澄清度。請(qǐng)你幫助完成以下有關(guān)果膠酶和果汁生產(chǎn)的實(shí)驗(yàn)課題。實(shí)驗(yàn)用具和材料:磨漿機(jī)、燒杯、試管、量筒、刀片、玻璃棒、漏斗、紗布等。蘋(píng)果、 質(zhì)量
7、分?jǐn)?shù)為2%的果膠酶溶液、蒸餾水等。實(shí)驗(yàn)一:果膠酶在果汁生產(chǎn)中的作用實(shí)驗(yàn)方法及步驟:(1)將蘋(píng)果洗凈去皮,用磨漿機(jī)制成蘋(píng)果泥,加入適量蒸餾水備用。(2)取兩個(gè)100mL潔凈的燒杯,編號(hào)為1、2號(hào),按相應(yīng)程序進(jìn)行操作,請(qǐng)把表中未填 寫(xiě)的內(nèi)容填上。操作 順序項(xiàng)目燒杯12在燒杯中加入蘋(píng)果泥20mL20mL2mLL-*1注入蒸餾水一一在恒溫水浴中保溫,并 用玻璃棒不時(shí)攪拌10mi n10mi n(3) 實(shí)驗(yàn)步驟中用玻璃棒攪拌的目的是使 以減少實(shí)驗(yàn)誤 差。實(shí)驗(yàn)結(jié)果的預(yù)測(cè)及結(jié)論:(4)取出兩個(gè)燒杯,同時(shí)進(jìn)行過(guò)濾,進(jìn)行觀察比較,并記錄結(jié)果。如果是,則說(shuō)明果膠酶對(duì)果膠的水解具有催化作用。實(shí)驗(yàn)二:探究pH對(duì)果膠酶
8、活性的影響在課題實(shí)驗(yàn)步驟中,在完成“燒杯中分別加入蘋(píng)果泥、試管中分別加入果膠酶溶液、編號(hào)、編組”之后,有下列兩種操作:方法一:將試管中的果膠酶溶液和燒杯中的蘋(píng)果泥相混合,再把混合液的pH分別調(diào)至4、5、6、,10。方法二:將試管中的果膠酶溶液和燒杯中的蘋(píng)果泥的pH分別調(diào)至4、5、6、,10,再把pH相等的果膠酶溶液和蘋(píng)果泥相混合。(5) 請(qǐng)問(wèn)哪一種方法更為科學(xué): ,并說(shuō)明理由: O(6)如果用曲線圖的方式記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果,在現(xiàn)有的條件下,如果實(shí)驗(yàn)的操作和記錄是 比較切實(shí)可行的,根據(jù)你對(duì)酶特性的了解,繪出表示實(shí)驗(yàn)結(jié)果的曲線圖。3參考答案1. A 2 . B 3 . B 4. C 5 . D 6 . B 7 . B 8C 9D10.(每空2分,共10分)(1 )將步驟中的“ 0.14mol/L的氯化鈉溶液”改成“蒸餾水”;將步驟中的“濾紙” 改成"紗布”;將步驟中的"直到溶液中出現(xiàn)絲狀物為止”改為“直到溶液中絲 狀物不再增加為止”(2) 加入蒸餾水,使溶液濃度降低至約為0. 14mol/L 時(shí),DNA的溶解度最小,使 DNA 析出(3)溶解雜質(zhì)、析出 DNA1L «每空2分.共10分(1)S.解齷(2)DMA分子中獨(dú)特的戲螺噴菇構(gòu)】復(fù)制過(guò)程中嚴(yán)洛連循膩基互鼻庸匕寸廈則(3) D (4) 1/1612. 2分)注人果膠屬潛裱 2mL(
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