seps1基因在內(nèi)毒素所致膿毒癥小鼠的變化規(guī)律及作用

1、普通外科學(xué)專業(yè)畢業(yè)論文 精品論文 SEPS1基因在內(nèi)毒素所致膿毒癥小鼠的變化規(guī)律及作用關(guān)鍵詞：SEPS1基因 膿毒癥 內(nèi)毒素 RNA干擾摘要：目的：研究SEPS1基因在內(nèi)毒素所致膿毒癥小鼠的變化規(guī)律及其作用。 方法：研究分為兩部分。第一部分采用內(nèi)毒素攻擊小鼠膿毒癥模型研究SEPS1基因在內(nèi)毒素所致膿毒癥小鼠的變化規(guī)律。BALB/c小鼠，1720g。腹腔內(nèi)注射內(nèi)毒素10mg/Kg，84只小鼠隨機(jī)選取對(duì)照組動(dòng)物10只，其余制作膿毒癥模型。正常對(duì)照組麻醉后活殺動(dòng)物。腹腔注射內(nèi)毒素10mg/Kg復(fù)制膿毒癥模型后，分別于6h、12h、24h、48h、72h、96h留取肝臟、肺臟標(biāo)本和血標(biāo)本，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)隨

2、機(jī)選取10只小鼠，檢測(cè)指標(biāo)包括血生化：血清丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(GPT)、天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(GOT)、肌酐(Cr)、血尿素氮(BUN)及肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌酸激酶(CK)和乳酸脫氫酶(LDH)含量；肝組織細(xì)胞因子TNF-、IL-6含量；肝組織SEPS1蛋白表達(dá)Western Blot檢測(cè)。第二部分研究siRNA沉默SEPS1基因后對(duì)內(nèi)毒素所致膿毒癥小鼠的臟器功能和細(xì)胞因子以及SEPS1蛋白表達(dá)的影響。30只小鼠隨機(jī)分為三組：H組(膿毒癥組，n=10)，K組(scrambled組，n=10)，L組(siRNA組，n=10)。實(shí)驗(yàn)前12h K組經(jīng)小鼠尾靜脈注射scrambled RNA，L組經(jīng)

3、小鼠尾靜脈注射SEPS1 siRNA。實(shí)驗(yàn)當(dāng)天腹腔內(nèi)注射內(nèi)毒素10mg/Kg，連續(xù)觀察24h。分別于12h、24h留取血標(biāo)本和組織標(biāo)本，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)5只動(dòng)物。用于檢測(cè)血生化，細(xì)胞因子TNF-、IL-6；核因子NF-kB，SEPS1蛋白表達(dá)Western Blot檢測(cè)。每組中選取一個(gè)肺組織和肝組織進(jìn)行HE染色病理檢查和組織化學(xué)檢測(cè)。 結(jié)果：第一部分研究顯示膿毒癥小鼠心臟、肝臟和腎臟均有不同程度的損傷，表現(xiàn)為GPT、GOT、Cr、BUN及心肌酶CK-MB、CK和LDH含量升高。6h24h達(dá)到損傷高峰，與Oh比較有顯著差異(P0.05)。隨后逐漸下降，并于24h72h恢復(fù)至損傷前水平。細(xì)胞因子白介素-

4、6(IL-6)和腫瘤壞死因子(TNF-)水平明顯升高。048h內(nèi)損傷持續(xù)快速加重，IL-6和TNF-均在6h達(dá)到高峰，與正常對(duì)照組0h比較差異顯著(P0.05)。Western Blot檢測(cè)膿毒癥小鼠肝組織SEPS1蛋白表達(dá)顯示，正常肝組織中有少量SEPS1蛋白表達(dá)，內(nèi)毒素攻擊導(dǎo)致膿毒癥小鼠肝臟SEPS1蛋白表達(dá)顯著升高，并于傷后第24h達(dá)峰值。隨后逐漸減弱，72h近乎恢復(fù)到正常水平。石蠟切片免疫組化研究結(jié)果顯示正常肝組織中有少量SEPS1蛋白表達(dá)。內(nèi)毒素攻擊致膿毒癥小鼠肝臟SEPS1蛋白表達(dá)逐漸增高，并于傷后第24h達(dá)峰值。病理結(jié)果顯示膿毒癥小鼠的肝組織和肺組織明顯病變，6h12h細(xì)胞病變最

5、嚴(yán)重。第二部分研究顯示，膿毒癥24h時(shí)GOT含量三組存在差異，L組(siRNA組)高于H組(膿毒癥組)。24h時(shí)L組BUN明顯高于其它兩組(P0.05)。心肌酶顯示L組(siRNA組)高于H組(膿毒癥組)。IL-6和TNF-檢測(cè)結(jié)果顯示L組(siRNA組)高于H組(膿毒癥組)，尤其24h更顯著。NF-kB檢測(cè)結(jié)果顯示12h時(shí)L組(siRNA組)活性高于K組(scrambled組)(P0.05)。Western Blot檢測(cè)顯示H組(膿毒癥組)動(dòng)物12h時(shí)肝組織中有大量SEPS1蛋白表達(dá)，24h時(shí)有所減弱。K組(scrambled組)12h時(shí)和24h時(shí)表達(dá)無明顯差異。L組(siRNA組)12h時(shí)

6、和24h時(shí)表達(dá)均較H組(膿毒癥組)減弱。石蠟切片免疫組化研究結(jié)果顯示，siRNA干擾膿毒癥小鼠后，三組相比較，K組SEPS1蛋白表達(dá)最強(qiáng)，L組和H組表達(dá)情況相似。組內(nèi)比較，各組24h時(shí)SEPS1蛋白表達(dá)均強(qiáng)于12h。石蠟切片HE染色結(jié)果顯示內(nèi)毒素攻擊致膿毒癥小鼠的肝、肺組織明顯病變。 結(jié)論：膿毒癥小鼠心臟、肝臟和腎臟均有不同程度的損傷，白介素-6(IL-6)和腫瘤壞死因子(TNF-)水平明顯升高。肝臟SEPS1蛋白表達(dá)顯著升高，并于傷后第24h達(dá)峰值，與組化檢測(cè)表現(xiàn)一致。siRNA干擾致SEPS1基因沉默可引起膿毒癥小鼠臟器損害加重，炎性反應(yīng)增強(qiáng)，Selenoprotein S1蛋白表達(dá)水平下

7、調(diào)。推測(cè)SEPS1基因?qū)?nèi)毒素攻擊膿毒癥小鼠具有保護(hù)作用。正文內(nèi)容 目的：研究SEPS1基因在內(nèi)毒素所致膿毒癥小鼠的變化規(guī)律及其作用。 方法：研究分為兩部分。第一部分采用內(nèi)毒素攻擊小鼠膿毒癥模型研究SEPS1基因在內(nèi)毒素所致膿毒癥小鼠的變化規(guī)律。BALB/c小鼠，1720g。腹腔內(nèi)注射內(nèi)毒素10mg/Kg，84只小鼠隨機(jī)選取對(duì)照組動(dòng)物10只，其余制作膿毒癥模型。正常對(duì)照組麻醉后活殺動(dòng)物。腹腔注射內(nèi)毒素10mg/Kg復(fù)制膿毒癥模型后，分別于6h、12h、24h、48h、72h、96h留取肝臟、肺臟標(biāo)本和血標(biāo)本，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)隨機(jī)選取10只小鼠，檢測(cè)指標(biāo)包括血生化：血清丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(GPT)、天門冬氨

8、酸轉(zhuǎn)氨酶(GOT)、肌酐(Cr)、血尿素氮(BUN)及肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌酸激酶(CK)和乳酸脫氫酶(LDH)含量；肝組織細(xì)胞因子TNF-、IL-6含量；肝組織SEPS1蛋白表達(dá)Western Blot檢測(cè)。第二部分研究siRNA沉默SEPS1基因后對(duì)內(nèi)毒素所致膿毒癥小鼠的臟器功能和細(xì)胞因子以及SEPS1蛋白表達(dá)的影響。30只小鼠隨機(jī)分為三組：H組(膿毒癥組，n=10)，K組(scrambled組，n=10)，L組(siRNA組，n=10)。實(shí)驗(yàn)前12h K組經(jīng)小鼠尾靜脈注射scrambled RNA，L組經(jīng)小鼠尾靜脈注射SEPS1 siRNA。實(shí)驗(yàn)當(dāng)天腹腔內(nèi)注射內(nèi)毒素10mg/K

9、g，連續(xù)觀察24h。分別于12h、24h留取血標(biāo)本和組織標(biāo)本，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)5只動(dòng)物。用于檢測(cè)血生化，細(xì)胞因子TNF-、IL-6；核因子NF-kB，SEPS1蛋白表達(dá)Western Blot檢測(cè)。每組中選取一個(gè)肺組織和肝組織進(jìn)行HE染色病理檢查和組織化學(xué)檢測(cè)。 結(jié)果：第一部分研究顯示膿毒癥小鼠心臟、肝臟和腎臟均有不同程度的損傷，表現(xiàn)為GPT、GOT、Cr、BUN及心肌酶CK-MB、CK和LDH含量升高。6h24h達(dá)到損傷高峰，與Oh比較有顯著差異(P0.05)。隨后逐漸下降，并于24h72h恢復(fù)至損傷前水平。細(xì)胞因子白介素-6(IL-6)和腫瘤壞死因子(TNF-)水平明顯升高。048h內(nèi)損傷持續(xù)快

10、速加重，IL-6和TNF-均在6h達(dá)到高峰，與正常對(duì)照組0h比較差異顯著(P0.05)。Western Blot檢測(cè)膿毒癥小鼠肝組織SEPS1蛋白表達(dá)顯示，正常肝組織中有少量SEPS1蛋白表達(dá)，內(nèi)毒素攻擊導(dǎo)致膿毒癥小鼠肝臟SEPS1蛋白表達(dá)顯著升高，并于傷后第24h達(dá)峰值。隨后逐漸減弱，72h近乎恢復(fù)到正常水平。石蠟切片免疫組化研究結(jié)果顯示正常肝組織中有少量SEPS1蛋白表達(dá)。內(nèi)毒素攻擊致膿毒癥小鼠肝臟SEPS1蛋白表達(dá)逐漸增高，并于傷后第24h達(dá)峰值。病理結(jié)果顯示膿毒癥小鼠的肝組織和肺組織明顯病變，6h12h細(xì)胞病變最嚴(yán)重。第二部分研究顯示，膿毒癥24h時(shí)GOT含量三組存在差異，L組(siR

11、NA組)高于H組(膿毒癥組)。24h時(shí)L組BUN明顯高于其它兩組(P0.05)。心肌酶顯示L組(siRNA組)高于H組(膿毒癥組)。IL-6和TNF-檢測(cè)結(jié)果顯示L組(siRNA組)高于H組(膿毒癥組)，尤其24h更顯著。NF-kB檢測(cè)結(jié)果顯示12h時(shí)L組(siRNA組)活性高于K組(scrambled組)(P0.05)。Western Blot檢測(cè)顯示H組(膿毒癥組)動(dòng)物12h時(shí)肝組織中有大量SEPS1蛋白表達(dá)，24h時(shí)有所減弱。K組(scrambled組)12h時(shí)和24h時(shí)表達(dá)無明顯差異。L組(siRNA組)12h時(shí)和24h時(shí)表達(dá)均較H組(膿毒癥組)減弱。石蠟切片免疫組化研究結(jié)果顯示，si

12、RNA干擾膿毒癥小鼠后，三組相比較，K組SEPS1蛋白表達(dá)最強(qiáng)，L組和H組表達(dá)情況相似。組內(nèi)比較，各組24h時(shí)SEPS1蛋白表達(dá)均強(qiáng)于12h。石蠟切片HE染色結(jié)果顯示內(nèi)毒素攻擊致膿毒癥小鼠的肝、肺組織明顯病變。 結(jié)論：膿毒癥小鼠心臟、肝臟和腎臟均有不同程度的損傷，白介素-6(IL-6)和腫瘤壞死因子(TNF-)水平明顯升高。肝臟SEPS1蛋白表達(dá)顯著升高，并于傷后第24h達(dá)峰值，與組化檢測(cè)表現(xiàn)一致。siRNA干擾致SEPS1基因沉默可引起膿毒癥小鼠臟器損害加重，炎性反應(yīng)增強(qiáng)，Selenoprotein S1蛋白表達(dá)水平下調(diào)。推測(cè)SEPS1基因?qū)?nèi)毒素攻擊膿毒癥小鼠具有保護(hù)作用。目的：研究SEP

13、S1基因在內(nèi)毒素所致膿毒癥小鼠的變化規(guī)律及其作用。 方法：研究分為兩部分。第一部分采用內(nèi)毒素攻擊小鼠膿毒癥模型研究SEPS1基因在內(nèi)毒素所致膿毒癥小鼠的變化規(guī)律。BALB/c小鼠，1720g。腹腔內(nèi)注射內(nèi)毒素10mg/Kg，84只小鼠隨機(jī)選取對(duì)照組動(dòng)物10只，其余制作膿毒癥模型。正常對(duì)照組麻醉后活殺動(dòng)物。腹腔注射內(nèi)毒素10mg/Kg復(fù)制膿毒癥模型后，分別于6h、12h、24h、48h、72h、96h留取肝臟、肺臟標(biāo)本和血標(biāo)本，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)隨機(jī)選取10只小鼠，檢測(cè)指標(biāo)包括血生化：血清丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(GPT)、天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(GOT)、肌酐(Cr)、血尿素氮(BUN)及肌酸激酶同工酶(CK-MB)、

14、肌酸激酶(CK)和乳酸脫氫酶(LDH)含量；肝組織細(xì)胞因子TNF-、IL-6含量；肝組織SEPS1蛋白表達(dá)Western Blot檢測(cè)。第二部分研究siRNA沉默SEPS1基因后對(duì)內(nèi)毒素所致膿毒癥小鼠的臟器功能和細(xì)胞因子以及SEPS1蛋白表達(dá)的影響。30只小鼠隨機(jī)分為三組：H組(膿毒癥組，n=10)，K組(scrambled組，n=10)，L組(siRNA組，n=10)。實(shí)驗(yàn)前12h K組經(jīng)小鼠尾靜脈注射scrambled RNA，L組經(jīng)小鼠尾靜脈注射SEPS1 siRNA。實(shí)驗(yàn)當(dāng)天腹腔內(nèi)注射內(nèi)毒素10mg/Kg，連續(xù)觀察24h。分別于12h、24h留取血標(biāo)本和組織標(biāo)本，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)5只動(dòng)物。用

15、于檢測(cè)血生化，細(xì)胞因子TNF-、IL-6；核因子NF-kB，SEPS1蛋白表達(dá)Western Blot檢測(cè)。每組中選取一個(gè)肺組織和肝組織進(jìn)行HE染色病理檢查和組織化學(xué)檢測(cè)。 結(jié)果：第一部分研究顯示膿毒癥小鼠心臟、肝臟和腎臟均有不同程度的損傷，表現(xiàn)為GPT、GOT、Cr、BUN及心肌酶CK-MB、CK和LDH含量升高。6h24h達(dá)到損傷高峰，與Oh比較有顯著差異(P0.05)。隨后逐漸下降，并于24h72h恢復(fù)至損傷前水平。細(xì)胞因子白介素-6(IL-6)和腫瘤壞死因子(TNF-)水平明顯升高。048h內(nèi)損傷持續(xù)快速加重，IL-6和TNF-均在6h達(dá)到高峰，與正常對(duì)照組0h比較差異顯著(P0.05

16、)。Western Blot檢測(cè)膿毒癥小鼠肝組織SEPS1蛋白表達(dá)顯示，正常肝組織中有少量SEPS1蛋白表達(dá)，內(nèi)毒素攻擊導(dǎo)致膿毒癥小鼠肝臟SEPS1蛋白表達(dá)顯著升高，并于傷后第24h達(dá)峰值。隨后逐漸減弱，72h近乎恢復(fù)到正常水平。石蠟切片免疫組化研究結(jié)果顯示正常肝組織中有少量SEPS1蛋白表達(dá)。內(nèi)毒素攻擊致膿毒癥小鼠肝臟SEPS1蛋白表達(dá)逐漸增高，并于傷后第24h達(dá)峰值。病理結(jié)果顯示膿毒癥小鼠的肝組織和肺組織明顯病變，6h12h細(xì)胞病變最嚴(yán)重。第二部分研究顯示，膿毒癥24h時(shí)GOT含量三組存在差異，L組(siRNA組)高于H組(膿毒癥組)。24h時(shí)L組BUN明顯高于其它兩組(P0.05)。心肌

17、酶顯示L組(siRNA組)高于H組(膿毒癥組)。IL-6和TNF-檢測(cè)結(jié)果顯示L組(siRNA組)高于H組(膿毒癥組)，尤其24h更顯著。NF-kB檢測(cè)結(jié)果顯示12h時(shí)L組(siRNA組)活性高于K組(scrambled組)(P0.05)。Western Blot檢測(cè)顯示H組(膿毒癥組)動(dòng)物12h時(shí)肝組織中有大量SEPS1蛋白表達(dá)，24h時(shí)有所減弱。K組(scrambled組)12h時(shí)和24h時(shí)表達(dá)無明顯差異。L組(siRNA組)12h時(shí)和24h時(shí)表達(dá)均較H組(膿毒癥組)減弱。石蠟切片免疫組化研究結(jié)果顯示，siRNA干擾膿毒癥小鼠后，三組相比較，K組SEPS1蛋白表達(dá)最強(qiáng)，L組和H組表達(dá)情況相

18、似。組內(nèi)比較，各組24h時(shí)SEPS1蛋白表達(dá)均強(qiáng)于12h。石蠟切片HE染色結(jié)果顯示內(nèi)毒素攻擊致膿毒癥小鼠的肝、肺組織明顯病變。 結(jié)論：膿毒癥小鼠心臟、肝臟和腎臟均有不同程度的損傷，白介素-6(IL-6)和腫瘤壞死因子(TNF-)水平明顯升高。肝臟SEPS1蛋白表達(dá)顯著升高，并于傷后第24h達(dá)峰值，與組化檢測(cè)表現(xiàn)一致。siRNA干擾致SEPS1基因沉默可引起膿毒癥小鼠臟器損害加重，炎性反應(yīng)增強(qiáng)，Selenoprotein S1蛋白表達(dá)水平下調(diào)。推測(cè)SEPS1基因?qū)?nèi)毒素攻擊膿毒癥小鼠具有保護(hù)作用。目的：研究SEPS1基因在內(nèi)毒素所致膿毒癥小鼠的變化規(guī)律及其作用。 方法：研究分為兩部分。第一部分采

19、用內(nèi)毒素攻擊小鼠膿毒癥模型研究SEPS1基因在內(nèi)毒素所致膿毒癥小鼠的變化規(guī)律。BALB/c小鼠，1720g。腹腔內(nèi)注射內(nèi)毒素10mg/Kg，84只小鼠隨機(jī)選取對(duì)照組動(dòng)物10只，其余制作膿毒癥模型。正常對(duì)照組麻醉后活殺動(dòng)物。腹腔注射內(nèi)毒素10mg/Kg復(fù)制膿毒癥模型后，分別于6h、12h、24h、48h、72h、96h留取肝臟、肺臟標(biāo)本和血標(biāo)本，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)隨機(jī)選取10只小鼠，檢測(cè)指標(biāo)包括血生化：血清丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(GPT)、天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(GOT)、肌酐(Cr)、血尿素氮(BUN)及肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌酸激酶(CK)和乳酸脫氫酶(LDH)含量；肝組織細(xì)胞因子TNF-、IL-6含量；肝

20、組織SEPS1蛋白表達(dá)Western Blot檢測(cè)。第二部分研究siRNA沉默SEPS1基因后對(duì)內(nèi)毒素所致膿毒癥小鼠的臟器功能和細(xì)胞因子以及SEPS1蛋白表達(dá)的影響。30只小鼠隨機(jī)分為三組：H組(膿毒癥組，n=10)，K組(scrambled組，n=10)，L組(siRNA組，n=10)。實(shí)驗(yàn)前12h K組經(jīng)小鼠尾靜脈注射scrambled RNA，L組經(jīng)小鼠尾靜脈注射SEPS1 siRNA。實(shí)驗(yàn)當(dāng)天腹腔內(nèi)注射內(nèi)毒素10mg/Kg，連續(xù)觀察24h。分別于12h、24h留取血標(biāo)本和組織標(biāo)本，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)5只動(dòng)物。用于檢測(cè)血生化，細(xì)胞因子TNF-、IL-6；核因子NF-kB，SEPS1蛋白表達(dá)Wes

21、tern Blot檢測(cè)。每組中選取一個(gè)肺組織和肝組織進(jìn)行HE染色病理檢查和組織化學(xué)檢測(cè)。 結(jié)果：第一部分研究顯示膿毒癥小鼠心臟、肝臟和腎臟均有不同程度的損傷，表現(xiàn)為GPT、GOT、Cr、BUN及心肌酶CK-MB、CK和LDH含量升高。6h24h達(dá)到損傷高峰，與Oh比較有顯著差異(P0.05)。隨后逐漸下降，并于24h72h恢復(fù)至損傷前水平。細(xì)胞因子白介素-6(IL-6)和腫瘤壞死因子(TNF-)水平明顯升高。048h內(nèi)損傷持續(xù)快速加重，IL-6和TNF-均在6h達(dá)到高峰，與正常對(duì)照組0h比較差異顯著(P0.05)。Western Blot檢測(cè)膿毒癥小鼠肝組織SEPS1蛋白表達(dá)顯示，正常肝組織中

22、有少量SEPS1蛋白表達(dá)，內(nèi)毒素攻擊導(dǎo)致膿毒癥小鼠肝臟SEPS1蛋白表達(dá)顯著升高，并于傷后第24h達(dá)峰值。隨后逐漸減弱，72h近乎恢復(fù)到正常水平。石蠟切片免疫組化研究結(jié)果顯示正常肝組織中有少量SEPS1蛋白表達(dá)。內(nèi)毒素攻擊致膿毒癥小鼠肝臟SEPS1蛋白表達(dá)逐漸增高，并于傷后第24h達(dá)峰值。病理結(jié)果顯示膿毒癥小鼠的肝組織和肺組織明顯病變，6h12h細(xì)胞病變最嚴(yán)重。第二部分研究顯示，膿毒癥24h時(shí)GOT含量三組存在差異，L組(siRNA組)高于H組(膿毒癥組)。24h時(shí)L組BUN明顯高于其它兩組(P0.05)。心肌酶顯示L組(siRNA組)高于H組(膿毒癥組)。IL-6和TNF-檢測(cè)結(jié)果顯示L組(

23、siRNA組)高于H組(膿毒癥組)，尤其24h更顯著。NF-kB檢測(cè)結(jié)果顯示12h時(shí)L組(siRNA組)活性高于K組(scrambled組)(P0.05)。Western Blot檢測(cè)顯示H組(膿毒癥組)動(dòng)物12h時(shí)肝組織中有大量SEPS1蛋白表達(dá)，24h時(shí)有所減弱。K組(scrambled組)12h時(shí)和24h時(shí)表達(dá)無明顯差異。L組(siRNA組)12h時(shí)和24h時(shí)表達(dá)均較H組(膿毒癥組)減弱。石蠟切片免疫組化研究結(jié)果顯示，siRNA干擾膿毒癥小鼠后，三組相比較，K組SEPS1蛋白表達(dá)最強(qiáng)，L組和H組表達(dá)情況相似。組內(nèi)比較，各組24h時(shí)SEPS1蛋白表達(dá)均強(qiáng)于12h。石蠟切片HE染色結(jié)果顯示內(nèi)

24、毒素攻擊致膿毒癥小鼠的肝、肺組織明顯病變。 結(jié)論：膿毒癥小鼠心臟、肝臟和腎臟均有不同程度的損傷，白介素-6(IL-6)和腫瘤壞死因子(TNF-)水平明顯升高。肝臟SEPS1蛋白表達(dá)顯著升高，并于傷后第24h達(dá)峰值，與組化檢測(cè)表現(xiàn)一致。siRNA干擾致SEPS1基因沉默可引起膿毒癥小鼠臟器損害加重，炎性反應(yīng)增強(qiáng)，Selenoprotein S1蛋白表達(dá)水平下調(diào)。推測(cè)SEPS1基因?qū)?nèi)毒素攻擊膿毒癥小鼠具有保護(hù)作用。目的：研究SEPS1基因在內(nèi)毒素所致膿毒癥小鼠的變化規(guī)律及其作用。 方法：研究分為兩部分。第一部分采用內(nèi)毒素攻擊小鼠膿毒癥模型研究SEPS1基因在內(nèi)毒素所致膿毒癥小鼠的變化規(guī)律。BAL

25、B/c小鼠，1720g。腹腔內(nèi)注射內(nèi)毒素10mg/Kg，84只小鼠隨機(jī)選取對(duì)照組動(dòng)物10只，其余制作膿毒癥模型。正常對(duì)照組麻醉后活殺動(dòng)物。腹腔注射內(nèi)毒素10mg/Kg復(fù)制膿毒癥模型后，分別于6h、12h、24h、48h、72h、96h留取肝臟、肺臟標(biāo)本和血標(biāo)本，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)隨機(jī)選取10只小鼠，檢測(cè)指標(biāo)包括血生化：血清丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(GPT)、天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(GOT)、肌酐(Cr)、血尿素氮(BUN)及肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌酸激酶(CK)和乳酸脫氫酶(LDH)含量；肝組織細(xì)胞因子TNF-、IL-6含量；肝組織SEPS1蛋白表達(dá)Western Blot檢測(cè)。第二部分研究siRNA沉默SEP

26、S1基因后對(duì)內(nèi)毒素所致膿毒癥小鼠的臟器功能和細(xì)胞因子以及SEPS1蛋白表達(dá)的影響。30只小鼠隨機(jī)分為三組：H組(膿毒癥組，n=10)，K組(scrambled組，n=10)，L組(siRNA組，n=10)。實(shí)驗(yàn)前12h K組經(jīng)小鼠尾靜脈注射scrambled RNA，L組經(jīng)小鼠尾靜脈注射SEPS1 siRNA。實(shí)驗(yàn)當(dāng)天腹腔內(nèi)注射內(nèi)毒素10mg/Kg，連續(xù)觀察24h。分別于12h、24h留取血標(biāo)本和組織標(biāo)本，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)5只動(dòng)物。用于檢測(cè)血生化，細(xì)胞因子TNF-、IL-6；核因子NF-kB，SEPS1蛋白表達(dá)Western Blot檢測(cè)。每組中選取一個(gè)肺組織和肝組織進(jìn)行HE染色病理檢查和組織化學(xué)檢

27、測(cè)。 結(jié)果：第一部分研究顯示膿毒癥小鼠心臟、肝臟和腎臟均有不同程度的損傷，表現(xiàn)為GPT、GOT、Cr、BUN及心肌酶CK-MB、CK和LDH含量升高。6h24h達(dá)到損傷高峰，與Oh比較有顯著差異(P0.05)。隨后逐漸下降，并于24h72h恢復(fù)至損傷前水平。細(xì)胞因子白介素-6(IL-6)和腫瘤壞死因子(TNF-)水平明顯升高。048h內(nèi)損傷持續(xù)快速加重，IL-6和TNF-均在6h達(dá)到高峰，與正常對(duì)照組0h比較差異顯著(P0.05)。Western Blot檢測(cè)膿毒癥小鼠肝組織SEPS1蛋白表達(dá)顯示，正常肝組織中有少量SEPS1蛋白表達(dá)，內(nèi)毒素攻擊導(dǎo)致膿毒癥小鼠肝臟SEPS1蛋白表達(dá)顯著升高，并

28、于傷后第24h達(dá)峰值。隨后逐漸減弱，72h近乎恢復(fù)到正常水平。石蠟切片免疫組化研究結(jié)果顯示正常肝組織中有少量SEPS1蛋白表達(dá)。內(nèi)毒素攻擊致膿毒癥小鼠肝臟SEPS1蛋白表達(dá)逐漸增高，并于傷后第24h達(dá)峰值。病理結(jié)果顯示膿毒癥小鼠的肝組織和肺組織明顯病變，6h12h細(xì)胞病變最嚴(yán)重。第二部分研究顯示，膿毒癥24h時(shí)GOT含量三組存在差異，L組(siRNA組)高于H組(膿毒癥組)。24h時(shí)L組BUN明顯高于其它兩組(P0.05)。心肌酶顯示L組(siRNA組)高于H組(膿毒癥組)。IL-6和TNF-檢測(cè)結(jié)果顯示L組(siRNA組)高于H組(膿毒癥組)，尤其24h更顯著。NF-kB檢測(cè)結(jié)果顯示12h時(shí)

29、L組(siRNA組)活性高于K組(scrambled組)(P0.05)。Western Blot檢測(cè)顯示H組(膿毒癥組)動(dòng)物12h時(shí)肝組織中有大量SEPS1蛋白表達(dá)，24h時(shí)有所減弱。K組(scrambled組)12h時(shí)和24h時(shí)表達(dá)無明顯差異。L組(siRNA組)12h時(shí)和24h時(shí)表達(dá)均較H組(膿毒癥組)減弱。石蠟切片免疫組化研究結(jié)果顯示，siRNA干擾膿毒癥小鼠后，三組相比較，K組SEPS1蛋白表達(dá)最強(qiáng)，L組和H組表達(dá)情況相似。組內(nèi)比較，各組24h時(shí)SEPS1蛋白表達(dá)均強(qiáng)于12h。石蠟切片HE染色結(jié)果顯示內(nèi)毒素攻擊致膿毒癥小鼠的肝、肺組織明顯病變。 結(jié)論：膿毒癥小鼠心臟、肝臟和腎臟均有不同

30、程度的損傷，白介素-6(IL-6)和腫瘤壞死因子(TNF-)水平明顯升高。肝臟SEPS1蛋白表達(dá)顯著升高，并于傷后第24h達(dá)峰值，與組化檢測(cè)表現(xiàn)一致。siRNA干擾致SEPS1基因沉默可引起膿毒癥小鼠臟器損害加重，炎性反應(yīng)增強(qiáng)，Selenoprotein S1蛋白表達(dá)水平下調(diào)。推測(cè)SEPS1基因?qū)?nèi)毒素攻擊膿毒癥小鼠具有保護(hù)作用。目的：研究SEPS1基因在內(nèi)毒素所致膿毒癥小鼠的變化規(guī)律及其作用。 方法：研究分為兩部分。第一部分采用內(nèi)毒素攻擊小鼠膿毒癥模型研究SEPS1基因在內(nèi)毒素所致膿毒癥小鼠的變化規(guī)律。BALB/c小鼠，1720g。腹腔內(nèi)注射內(nèi)毒素10mg/Kg，84只小鼠隨機(jī)選取對(duì)照組動(dòng)物

31、10只，其余制作膿毒癥模型。正常對(duì)照組麻醉后活殺動(dòng)物。腹腔注射內(nèi)毒素10mg/Kg復(fù)制膿毒癥模型后，分別于6h、12h、24h、48h、72h、96h留取肝臟、肺臟標(biāo)本和血標(biāo)本，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)隨機(jī)選取10只小鼠，檢測(cè)指標(biāo)包括血生化：血清丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(GPT)、天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(GOT)、肌酐(Cr)、血尿素氮(BUN)及肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌酸激酶(CK)和乳酸脫氫酶(LDH)含量；肝組織細(xì)胞因子TNF-、IL-6含量；肝組織SEPS1蛋白表達(dá)Western Blot檢測(cè)。第二部分研究siRNA沉默SEPS1基因后對(duì)內(nèi)毒素所致膿毒癥小鼠的臟器功能和細(xì)胞因子以及SEPS1蛋白表達(dá)的影響。3

32、0只小鼠隨機(jī)分為三組：H組(膿毒癥組，n=10)，K組(scrambled組，n=10)，L組(siRNA組，n=10)。實(shí)驗(yàn)前12h K組經(jīng)小鼠尾靜脈注射scrambled RNA，L組經(jīng)小鼠尾靜脈注射SEPS1 siRNA。實(shí)驗(yàn)當(dāng)天腹腔內(nèi)注射內(nèi)毒素10mg/Kg，連續(xù)觀察24h。分別于12h、24h留取血標(biāo)本和組織標(biāo)本，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)5只動(dòng)物。用于檢測(cè)血生化，細(xì)胞因子TNF-、IL-6；核因子NF-kB，SEPS1蛋白表達(dá)Western Blot檢測(cè)。每組中選取一個(gè)肺組織和肝組織進(jìn)行HE染色病理檢查和組織化學(xué)檢測(cè)。 結(jié)果：第一部分研究顯示膿毒癥小鼠心臟、肝臟和腎臟均有不同程度的損傷，表現(xiàn)為GP

33、T、GOT、Cr、BUN及心肌酶CK-MB、CK和LDH含量升高。6h24h達(dá)到損傷高峰，與Oh比較有顯著差異(P0.05)。隨后逐漸下降，并于24h72h恢復(fù)至損傷前水平。細(xì)胞因子白介素-6(IL-6)和腫瘤壞死因子(TNF-)水平明顯升高。048h內(nèi)損傷持續(xù)快速加重，IL-6和TNF-均在6h達(dá)到高峰，與正常對(duì)照組0h比較差異顯著(P0.05)。Western Blot檢測(cè)膿毒癥小鼠肝組織SEPS1蛋白表達(dá)顯示，正常肝組織中有少量SEPS1蛋白表達(dá)，內(nèi)毒素攻擊導(dǎo)致膿毒癥小鼠肝臟SEPS1蛋白表達(dá)顯著升高，并于傷后第24h達(dá)峰值。隨后逐漸減弱，72h近乎恢復(fù)到正常水平。石蠟切片免疫組化研究結(jié)

34、果顯示正常肝組織中有少量SEPS1蛋白表達(dá)。內(nèi)毒素攻擊致膿毒癥小鼠肝臟SEPS1蛋白表達(dá)逐漸增高，并于傷后第24h達(dá)峰值。病理結(jié)果顯示膿毒癥小鼠的肝組織和肺組織明顯病變，6h12h細(xì)胞病變最嚴(yán)重。第二部分研究顯示，膿毒癥24h時(shí)GOT含量三組存在差異，L組(siRNA組)高于H組(膿毒癥組)。24h時(shí)L組BUN明顯高于其它兩組(P0.05)。心肌酶顯示L組(siRNA組)高于H組(膿毒癥組)。IL-6和TNF-檢測(cè)結(jié)果顯示L組(siRNA組)高于H組(膿毒癥組)，尤其24h更顯著。NF-kB檢測(cè)結(jié)果顯示12h時(shí)L組(siRNA組)活性高于K組(scrambled組)(P0.05)。Wester

35、n Blot檢測(cè)顯示H組(膿毒癥組)動(dòng)物12h時(shí)肝組織中有大量SEPS1蛋白表達(dá)，24h時(shí)有所減弱。K組(scrambled組)12h時(shí)和24h時(shí)表達(dá)無明顯差異。L組(siRNA組)12h時(shí)和24h時(shí)表達(dá)均較H組(膿毒癥組)減弱。石蠟切片免疫組化研究結(jié)果顯示，siRNA干擾膿毒癥小鼠后，三組相比較，K組SEPS1蛋白表達(dá)最強(qiáng)，L組和H組表達(dá)情況相似。組內(nèi)比較，各組24h時(shí)SEPS1蛋白表達(dá)均強(qiáng)于12h。石蠟切片HE染色結(jié)果顯示內(nèi)毒素攻擊致膿毒癥小鼠的肝、肺組織明顯病變。 結(jié)論：膿毒癥小鼠心臟、肝臟和腎臟均有不同程度的損傷，白介素-6(IL-6)和腫瘤壞死因子(TNF-)水平明顯升高。肝臟SEP

36、S1蛋白表達(dá)顯著升高，并于傷后第24h達(dá)峰值，與組化檢測(cè)表現(xiàn)一致。siRNA干擾致SEPS1基因沉默可引起膿毒癥小鼠臟器損害加重，炎性反應(yīng)增強(qiáng)，Selenoprotein S1蛋白表達(dá)水平下調(diào)。推測(cè)SEPS1基因?qū)?nèi)毒素攻擊膿毒癥小鼠具有保護(hù)作用。目的：研究SEPS1基因在內(nèi)毒素所致膿毒癥小鼠的變化規(guī)律及其作用。 方法：研究分為兩部分。第一部分采用內(nèi)毒素攻擊小鼠膿毒癥模型研究SEPS1基因在內(nèi)毒素所致膿毒癥小鼠的變化規(guī)律。BALB/c小鼠，1720g。腹腔內(nèi)注射內(nèi)毒素10mg/Kg，84只小鼠隨機(jī)選取對(duì)照組動(dòng)物10只，其余制作膿毒癥模型。正常對(duì)照組麻醉后活殺動(dòng)物。腹腔注射內(nèi)毒素10mg/Kg復(fù)

37、制膿毒癥模型后，分別于6h、12h、24h、48h、72h、96h留取肝臟、肺臟標(biāo)本和血標(biāo)本，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)隨機(jī)選取10只小鼠，檢測(cè)指標(biāo)包括血生化：血清丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(GPT)、天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(GOT)、肌酐(Cr)、血尿素氮(BUN)及肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌酸激酶(CK)和乳酸脫氫酶(LDH)含量；肝組織細(xì)胞因子TNF-、IL-6含量；肝組織SEPS1蛋白表達(dá)Western Blot檢測(cè)。第二部分研究siRNA沉默SEPS1基因后對(duì)內(nèi)毒素所致膿毒癥小鼠的臟器功能和細(xì)胞因子以及SEPS1蛋白表達(dá)的影響。30只小鼠隨機(jī)分為三組：H組(膿毒癥組，n=10)，K組(scrambled組，n=1

38、0)，L組(siRNA組，n=10)。實(shí)驗(yàn)前12h K組經(jīng)小鼠尾靜脈注射scrambled RNA，L組經(jīng)小鼠尾靜脈注射SEPS1 siRNA。實(shí)驗(yàn)當(dāng)天腹腔內(nèi)注射內(nèi)毒素10mg/Kg，連續(xù)觀察24h。分別于12h、24h留取血標(biāo)本和組織標(biāo)本，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)5只動(dòng)物。用于檢測(cè)血生化，細(xì)胞因子TNF-、IL-6；核因子NF-kB，SEPS1蛋白表達(dá)Western Blot檢測(cè)。每組中選取一個(gè)肺組織和肝組織進(jìn)行HE染色病理檢查和組織化學(xué)檢測(cè)。 結(jié)果：第一部分研究顯示膿毒癥小鼠心臟、肝臟和腎臟均有不同程度的損傷，表現(xiàn)為GPT、GOT、Cr、BUN及心肌酶CK-MB、CK和LDH含量升高。6h24h達(dá)到損傷

39、高峰，與Oh比較有顯著差異(P0.05)。隨后逐漸下降，并于24h72h恢復(fù)至損傷前水平。細(xì)胞因子白介素-6(IL-6)和腫瘤壞死因子(TNF-)水平明顯升高。048h內(nèi)損傷持續(xù)快速加重，IL-6和TNF-均在6h達(dá)到高峰，與正常對(duì)照組0h比較差異顯著(P0.05)。Western Blot檢測(cè)膿毒癥小鼠肝組織SEPS1蛋白表達(dá)顯示，正常肝組織中有少量SEPS1蛋白表達(dá)，內(nèi)毒素攻擊導(dǎo)致膿毒癥小鼠肝臟SEPS1蛋白表達(dá)顯著升高，并于傷后第24h達(dá)峰值。隨后逐漸減弱，72h近乎恢復(fù)到正常水平。石蠟切片免疫組化研究結(jié)果顯示正常肝組織中有少量SEPS1蛋白表達(dá)。內(nèi)毒素攻擊致膿毒癥小鼠肝臟SEPS1蛋白

40、表達(dá)逐漸增高，并于傷后第24h達(dá)峰值。病理結(jié)果顯示膿毒癥小鼠的肝組織和肺組織明顯病變，6h12h細(xì)胞病變最嚴(yán)重。第二部分研究顯示，膿毒癥24h時(shí)GOT含量三組存在差異，L組(siRNA組)高于H組(膿毒癥組)。24h時(shí)L組BUN明顯高于其它兩組(P0.05)。心肌酶顯示L組(siRNA組)高于H組(膿毒癥組)。IL-6和TNF-檢測(cè)結(jié)果顯示L組(siRNA組)高于H組(膿毒癥組)，尤其24h更顯著。NF-kB檢測(cè)結(jié)果顯示12h時(shí)L組(siRNA組)活性高于K組(scrambled組)(P0.05)。Western Blot檢測(cè)顯示H組(膿毒癥組)動(dòng)物12h時(shí)肝組織中有大量SEPS1蛋白表達(dá)，2

41、4h時(shí)有所減弱。K組(scrambled組)12h時(shí)和24h時(shí)表達(dá)無明顯差異。L組(siRNA組)12h時(shí)和24h時(shí)表達(dá)均較H組(膿毒癥組)減弱。石蠟切片免疫組化研究結(jié)果顯示，siRNA干擾膿毒癥小鼠后，三組相比較，K組SEPS1蛋白表達(dá)最強(qiáng)，L組和H組表達(dá)情況相似。組內(nèi)比較，各組24h時(shí)SEPS1蛋白表達(dá)均強(qiáng)于12h。石蠟切片HE染色結(jié)果顯示內(nèi)毒素攻擊致膿毒癥小鼠的肝、肺組織明顯病變。 結(jié)論：膿毒癥小鼠心臟、肝臟和腎臟均有不同程度的損傷，白介素-6(IL-6)和腫瘤壞死因子(TNF-)水平明顯升高。肝臟SEPS1蛋白表達(dá)顯著升高，并于傷后第24h達(dá)峰值，與組化檢測(cè)表現(xiàn)一致。siRNA干擾致S

42、EPS1基因沉默可引起膿毒癥小鼠臟器損害加重，炎性反應(yīng)增強(qiáng)，Selenoprotein S1蛋白表達(dá)水平下調(diào)。推測(cè)SEPS1基因?qū)?nèi)毒素攻擊膿毒癥小鼠具有保護(hù)作用。目的：研究SEPS1基因在內(nèi)毒素所致膿毒癥小鼠的變化規(guī)律及其作用。 方法：研究分為兩部分。第一部分采用內(nèi)毒素攻擊小鼠膿毒癥模型研究SEPS1基因在內(nèi)毒素所致膿毒癥小鼠的變化規(guī)律。BALB/c小鼠，1720g。腹腔內(nèi)注射內(nèi)毒素10mg/Kg，84只小鼠隨機(jī)選取對(duì)照組動(dòng)物10只，其余制作膿毒癥模型。正常對(duì)照組麻醉后活殺動(dòng)物。腹腔注射內(nèi)毒素10mg/Kg復(fù)制膿毒癥模型后，分別于6h、12h、24h、48h、72h、96h留取肝臟、肺臟標(biāo)本

43、和血標(biāo)本，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)隨機(jī)選取10只小鼠，檢測(cè)指標(biāo)包括血生化：血清丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(GPT)、天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(GOT)、肌酐(Cr)、血尿素氮(BUN)及肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌酸激酶(CK)和乳酸脫氫酶(LDH)含量；肝組織細(xì)胞因子TNF-、IL-6含量；肝組織SEPS1蛋白表達(dá)Western Blot檢測(cè)。第二部分研究siRNA沉默SEPS1基因后對(duì)內(nèi)毒素所致膿毒癥小鼠的臟器功能和細(xì)胞因子以及SEPS1蛋白表達(dá)的影響。30只小鼠隨機(jī)分為三組：H組(膿毒癥組，n=10)，K組(scrambled組，n=10)，L組(siRNA組，n=10)。實(shí)驗(yàn)前12h K組經(jīng)小鼠尾靜脈注射scramb

44、led RNA，L組經(jīng)小鼠尾靜脈注射SEPS1 siRNA。實(shí)驗(yàn)當(dāng)天腹腔內(nèi)注射內(nèi)毒素10mg/Kg，連續(xù)觀察24h。分別于12h、24h留取血標(biāo)本和組織標(biāo)本，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)5只動(dòng)物。用于檢測(cè)血生化，細(xì)胞因子TNF-、IL-6；核因子NF-kB，SEPS1蛋白表達(dá)Western Blot檢測(cè)。每組中選取一個(gè)肺組織和肝組織進(jìn)行HE染色病理檢查和組織化學(xué)檢測(cè)。 結(jié)果：第一部分研究顯示膿毒癥小鼠心臟、肝臟和腎臟均有不同程度的損傷，表現(xiàn)為GPT、GOT、Cr、BUN及心肌酶CK-MB、CK和LDH含量升高。6h24h達(dá)到損傷高峰，與Oh比較有顯著差異(P0.05)。隨后逐漸下降，并于24h72h恢復(fù)至損傷前

45、水平。細(xì)胞因子白介素-6(IL-6)和腫瘤壞死因子(TNF-)水平明顯升高。048h內(nèi)損傷持續(xù)快速加重，IL-6和TNF-均在6h達(dá)到高峰，與正常對(duì)照組0h比較差異顯著(P0.05)。Western Blot檢測(cè)膿毒癥小鼠肝組織SEPS1蛋白表達(dá)顯示，正常肝組織中有少量SEPS1蛋白表達(dá)，內(nèi)毒素攻擊導(dǎo)致膿毒癥小鼠肝臟SEPS1蛋白表達(dá)顯著升高，并于傷后第24h達(dá)峰值。隨后逐漸減弱，72h近乎恢復(fù)到正常水平。石蠟切片免疫組化研究結(jié)果顯示正常肝組織中有少量SEPS1蛋白表達(dá)。內(nèi)毒素攻擊致膿毒癥小鼠肝臟SEPS1蛋白表達(dá)逐漸增高，并于傷后第24h達(dá)峰值。病理結(jié)果顯示膿毒癥小鼠的肝組織和肺組織明顯病變

46、，6h12h細(xì)胞病變最嚴(yán)重。第二部分研究顯示，膿毒癥24h時(shí)GOT含量三組存在差異，L組(siRNA組)高于H組(膿毒癥組)。24h時(shí)L組BUN明顯高于其它兩組(P0.05)。心肌酶顯示L組(siRNA組)高于H組(膿毒癥組)。IL-6和TNF-檢測(cè)結(jié)果顯示L組(siRNA組)高于H組(膿毒癥組)，尤其24h更顯著。NF-kB檢測(cè)結(jié)果顯示12h時(shí)L組(siRNA組)活性高于K組(scrambled組)(P0.05)。Western Blot檢測(cè)顯示H組(膿毒癥組)動(dòng)物12h時(shí)肝組織中有大量SEPS1蛋白表達(dá)，24h時(shí)有所減弱。K組(scrambled組)12h時(shí)和24h時(shí)表達(dá)無明顯差異。L組(

47、siRNA組)12h時(shí)和24h時(shí)表達(dá)均較H組(膿毒癥組)減弱。石蠟切片免疫組化研究結(jié)果顯示，siRNA干擾膿毒癥小鼠后，三組相比較，K組SEPS1蛋白表達(dá)最強(qiáng)，L組和H組表達(dá)情況相似。組內(nèi)比較，各組24h時(shí)SEPS1蛋白表達(dá)均強(qiáng)于12h。石蠟切片HE染色結(jié)果顯示內(nèi)毒素攻擊致膿毒癥小鼠的肝、肺組織明顯病變。 結(jié)論：膿毒癥小鼠心臟、肝臟和腎臟均有不同程度的損傷，白介素-6(IL-6)和腫瘤壞死因子(TNF-)水平明顯升高。肝臟SEPS1蛋白表達(dá)顯著升高，并于傷后第24h達(dá)峰值，與組化檢測(cè)表現(xiàn)一致。siRNA干擾致SEPS1基因沉默可引起膿毒癥小鼠臟器損害加重，炎性反應(yīng)增強(qiáng)，Selenoprotei

48、n S1蛋白表達(dá)水平下調(diào)。推測(cè)SEPS1基因?qū)?nèi)毒素攻擊膿毒癥小鼠具有保護(hù)作用。目的：研究SEPS1基因在內(nèi)毒素所致膿毒癥小鼠的變化規(guī)律及其作用。 方法：研究分為兩部分。第一部分采用內(nèi)毒素攻擊小鼠膿毒癥模型研究SEPS1基因在內(nèi)毒素所致膿毒癥小鼠的變化規(guī)律。BALB/c小鼠，1720g。腹腔內(nèi)注射內(nèi)毒素10mg/Kg，84只小鼠隨機(jī)選取對(duì)照組動(dòng)物10只，其余制作膿毒癥模型。正常對(duì)照組麻醉后活殺動(dòng)物。腹腔注射內(nèi)毒素10mg/Kg復(fù)制膿毒癥模型后，分別于6h、12h、24h、48h、72h、96h留取肝臟、肺臟標(biāo)本和血標(biāo)本，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)隨機(jī)選取10只小鼠，檢測(cè)指標(biāo)包括血生化：血清丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(GPT

49、)、天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(GOT)、肌酐(Cr)、血尿素氮(BUN)及肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌酸激酶(CK)和乳酸脫氫酶(LDH)含量；肝組織細(xì)胞因子TNF-、IL-6含量；肝組織SEPS1蛋白表達(dá)Western Blot檢測(cè)。第二部分研究siRNA沉默SEPS1基因后對(duì)內(nèi)毒素所致膿毒癥小鼠的臟器功能和細(xì)胞因子以及SEPS1蛋白表達(dá)的影響。30只小鼠隨機(jī)分為三組：H組(膿毒癥組，n=10)，K組(scrambled組，n=10)，L組(siRNA組，n=10)。實(shí)驗(yàn)前12h K組經(jīng)小鼠尾靜脈注射scrambled RNA，L組經(jīng)小鼠尾靜脈注射SEPS1 siRNA。實(shí)驗(yàn)當(dāng)天腹腔內(nèi)注射內(nèi)毒素

50、10mg/Kg，連續(xù)觀察24h。分別于12h、24h留取血標(biāo)本和組織標(biāo)本，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)5只動(dòng)物。用于檢測(cè)血生化，細(xì)胞因子TNF-、IL-6；核因子NF-kB，SEPS1蛋白表達(dá)Western Blot檢測(cè)。每組中選取一個(gè)肺組織和肝組織進(jìn)行HE染色病理檢查和組織化學(xué)檢測(cè)。 結(jié)果：第一部分研究顯示膿毒癥小鼠心臟、肝臟和腎臟均有不同程度的損傷，表現(xiàn)為GPT、GOT、Cr、BUN及心肌酶CK-MB、CK和LDH含量升高。6h24h達(dá)到損傷高峰，與Oh比較有顯著差異(P0.05)。隨后逐漸下降，并于24h72h恢復(fù)至損傷前水平。細(xì)胞因子白介素-6(IL-6)和腫瘤壞死因子(TNF-)水平明顯升高。048h

51、內(nèi)損傷持續(xù)快速加重，IL-6和TNF-均在6h達(dá)到高峰，與正常對(duì)照組0h比較差異顯著(P0.05)。Western Blot檢測(cè)膿毒癥小鼠肝組織SEPS1蛋白表達(dá)顯示，正常肝組織中有少量SEPS1蛋白表達(dá)，內(nèi)毒素攻擊導(dǎo)致膿毒癥小鼠肝臟SEPS1蛋白表達(dá)顯著升高，并于傷后第24h達(dá)峰值。隨后逐漸減弱，72h近乎恢復(fù)到正常水平。石蠟切片免疫組化研究結(jié)果顯示正常肝組織中有少量SEPS1蛋白表達(dá)。內(nèi)毒素攻擊致膿毒癥小鼠肝臟SEPS1蛋白表達(dá)逐漸增高，并于傷后第24h達(dá)峰值。病理結(jié)果顯示膿毒癥小鼠的肝組織和肺組織明顯病變，6h12h細(xì)胞病變最嚴(yán)重。第二部分研究顯示，膿毒癥24h時(shí)GOT含量三組存在差異，

52、L組(siRNA組)高于H組(膿毒癥組)。24h時(shí)L組BUN明顯高于其它兩組(P0.05)。心肌酶顯示L組(siRNA組)高于H組(膿毒癥組)。IL-6和TNF-檢測(cè)結(jié)果顯示L組(siRNA組)高于H組(膿毒癥組)，尤其24h更顯著。NF-kB檢測(cè)結(jié)果顯示12h時(shí)L組(siRNA組)活性高于K組(scrambled組)(P0.05)。Western Blot檢測(cè)顯示H組(膿毒癥組)動(dòng)物12h時(shí)肝組織中有大量SEPS1蛋白表達(dá)，24h時(shí)有所減弱。K組(scrambled組)12h時(shí)和24h時(shí)表達(dá)無明顯差異。L組(siRNA組)12h時(shí)和24h時(shí)表達(dá)均較H組(膿毒癥組)減弱。石蠟切片免疫組化研究結(jié)

53、果顯示，siRNA干擾膿毒癥小鼠后，三組相比較，K組SEPS1蛋白表達(dá)最強(qiáng)，L組和H組表達(dá)情況相似。組內(nèi)比較，各組24h時(shí)SEPS1蛋白表達(dá)均強(qiáng)于12h。石蠟切片HE染色結(jié)果顯示內(nèi)毒素攻擊致膿毒癥小鼠的肝、肺組織明顯病變。 結(jié)論：膿毒癥小鼠心臟、肝臟和腎臟均有不同程度的損傷，白介素-6(IL-6)和腫瘤壞死因子(TNF-)水平明顯升高。肝臟SEPS1蛋白表達(dá)顯著升高，并于傷后第24h達(dá)峰值，與組化檢測(cè)表現(xiàn)一致。siRNA干擾致SEPS1基因沉默可引起膿毒癥小鼠臟器損害加重，炎性反應(yīng)增強(qiáng)，Selenoprotein S1蛋白表達(dá)水平下調(diào)。推測(cè)SEPS1基因?qū)?nèi)毒素攻擊膿毒癥小鼠具有保護(hù)作用。目的

54、：研究SEPS1基因在內(nèi)毒素所致膿毒癥小鼠的變化規(guī)律及其作用。 方法：研究分為兩部分。第一部分采用內(nèi)毒素攻擊小鼠膿毒癥模型研究SEPS1基因在內(nèi)毒素所致膿毒癥小鼠的變化規(guī)律。BALB/c小鼠，1720g。腹腔內(nèi)注射內(nèi)毒素10mg/Kg，84只小鼠隨機(jī)選取對(duì)照組動(dòng)物10只，其余制作膿毒癥模型。正常對(duì)照組麻醉后活殺動(dòng)物。腹腔注射內(nèi)毒素10mg/Kg復(fù)制膿毒癥模型后，分別于6h、12h、24h、48h、72h、96h留取肝臟、肺臟標(biāo)本和血標(biāo)本，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)隨機(jī)選取10只小鼠，檢測(cè)指標(biāo)包括血生化：血清丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(GPT)、天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(GOT)、肌酐(Cr)、血尿素氮(BUN)及肌酸激酶同工酶(C

55、K-MB)、肌酸激酶(CK)和乳酸脫氫酶(LDH)含量；肝組織細(xì)胞因子TNF-、IL-6含量；肝組織SEPS1蛋白表達(dá)Western Blot檢測(cè)。第二部分研究siRNA沉默SEPS1基因后對(duì)內(nèi)毒素所致膿毒癥小鼠的臟器功能和細(xì)胞因子以及SEPS1蛋白表達(dá)的影響。30只小鼠隨機(jī)分為三組：H組(膿毒癥組，n=10)，K組(scrambled組，n=10)，L組(siRNA組，n=10)。實(shí)驗(yàn)前12h K組經(jīng)小鼠尾靜脈注射scrambled RNA，L組經(jīng)小鼠尾靜脈注射SEPS1 siRNA。實(shí)驗(yàn)當(dāng)天腹腔內(nèi)注射內(nèi)毒素10mg/Kg，連續(xù)觀察24h。分別于12h、24h留取血標(biāo)本和組織標(biāo)本，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)

56、5只動(dòng)物。用于檢測(cè)血生化，細(xì)胞因子TNF-、IL-6；核因子NF-kB，SEPS1蛋白表達(dá)Western Blot檢測(cè)。每組中選取一個(gè)肺組織和肝組織進(jìn)行HE染色病理檢查和組織化學(xué)檢測(cè)。 結(jié)果：第一部分研究顯示膿毒癥小鼠心臟、肝臟和腎臟均有不同程度的損傷，表現(xiàn)為GPT、GOT、Cr、BUN及心肌酶CK-MB、CK和LDH含量升高。6h24h達(dá)到損傷高峰，與Oh比較有顯著差異(P0.05)。隨后逐漸下降，并于24h72h恢復(fù)至損傷前水平。細(xì)胞因子白介素-6(IL-6)和腫瘤壞死因子(TNF-)水平明顯升高。048h內(nèi)損傷持續(xù)快速加重，IL-6和TNF-均在6h達(dá)到高峰，與正常對(duì)照組0h比較差異顯著

57、(P0.05)。Western Blot檢測(cè)膿毒癥小鼠肝組織SEPS1蛋白表達(dá)顯示，正常肝組織中有少量SEPS1蛋白表達(dá)，內(nèi)毒素攻擊導(dǎo)致膿毒癥小鼠肝臟SEPS1蛋白表達(dá)顯著升高，并于傷后第24h達(dá)峰值。隨后逐漸減弱，72h近乎恢復(fù)到正常水平。石蠟切片免疫組化研究結(jié)果顯示正常肝組織中有少量SEPS1蛋白表達(dá)。內(nèi)毒素攻擊致膿毒癥小鼠肝臟SEPS1蛋白表達(dá)逐漸增高，并于傷后第24h達(dá)峰值。病理結(jié)果顯示膿毒癥小鼠的肝組織和肺組織明顯病變，6h12h細(xì)胞病變最嚴(yán)重。第二部分研究顯示，膿毒癥24h時(shí)GOT含量三組存在差異，L組(siRNA組)高于H組(膿毒癥組)。24h時(shí)L組BUN明顯高于其它兩組(P0.

58、05)。心肌酶顯示L組(siRNA組)高于H組(膿毒癥組)。IL-6和TNF-檢測(cè)結(jié)果顯示L組(siRNA組)高于H組(膿毒癥組)，尤其24h更顯著。NF-kB檢測(cè)結(jié)果顯示12h時(shí)L組(siRNA組)活性高于K組(scrambled組)(P0.05)。Western Blot檢測(cè)顯示H組(膿毒癥組)動(dòng)物12h時(shí)肝組織中有大量SEPS1蛋白表達(dá)，24h時(shí)有所減弱。K組(scrambled組)12h時(shí)和24h時(shí)表達(dá)無明顯差異。L組(siRNA組)12h時(shí)和24h時(shí)表達(dá)均較H組(膿毒癥組)減弱。石蠟切片免疫組化研究結(jié)果顯示，siRNA干擾膿毒癥小鼠后，三組相比較，K組SEPS1蛋白表達(dá)最強(qiáng)，L組和H組表達(dá)情況相似。組內(nèi)比較，各組24h時(shí)SEPS1蛋白表達(dá)均強(qiáng)于12h。石蠟切片HE染色結(jié)果顯示內(nèi)毒素攻擊致膿毒癥小鼠的肝、肺組織明顯病變。 結(jié)論：膿毒癥小鼠心臟、肝臟和腎臟均有不同程度的損傷，白介素-6(IL-6)和腫瘤壞死因子(TNF-)水平明顯升高。肝臟SEPS1蛋白表達(dá)顯著升高，并于傷后第24h達(dá)峰值，與組化檢測(cè)表現(xiàn)一致。siRNA干擾致SEPS1基因沉默可引起膿毒癥小鼠臟器損害加重，炎性反應(yīng)增強(qiáng)，Selenoprotein S1蛋白表達(dá)水平下調(diào)。推測(cè)SEPS1基因?qū)?nèi)毒素