拳參正丁醇提取物對豚鼠心肌生理特性的影響

1、拳參正丁醇提取物對豚鼠心肌生理特性的影響                          作者：黃志華, 鐘富有 李良東 朱丹 葉和楊 曾靖【摘要】  目的研究拳參正丁醇提取物對豚鼠離體右心房自律性及收縮特性的影響，并探討其作用機制。方法采用豚鼠離體右心房測定拳參正丁醇提取物對其自律性、收縮幅度、收縮速度、舒張速度的影響。結(jié)果拳參正丁醇

2、提取物可降低豚鼠離體右心房的自律性，降低豚鼠離體右心房的收縮幅度、收縮速度、舒張速度，且具有明顯的劑量依賴性。結(jié)論拳參正丁醇提取物可抑制豚鼠離體右心房的自律性，降低豚鼠離體右心房的收縮幅度、收縮速度、舒張速度，且具有明顯的劑量依賴性。其機制可能與抑制鈣離子的內(nèi)流及改變肌漿網(wǎng)上的鈣泵活性有關(guān)。 【關(guān)鍵詞】  拳參正丁醇提取物 右心房 自律性 收縮特性Abstract:ObjectiveTo investigate the effect of Polygonum Bistorla L.n-Butyl alcohol extract on autorhythmicity and contr

3、action of isolated right atrium of guinea pig and its mechanism. MethodsAfter treated with Polygonum bistorla L. n-Butyl Alcohol Extract, the isolated right atria were investigated that including autorhythmicity, contraction scale, contraction velocity and relaxation speed.ResultsThe autorhythmicity

4、 of the isolated right atria were inhibited after treated with the extract. Moreover, their contraction scale, contraction velocity and relaxation speed were significantly reduced in a dose-dependent manner. ConclusionPolygonum bistorla L. n-Butyl Alcohol Extract can inhibit autorhythmicity of the i

5、solated right atrium, and significantly reduce their contraction scale, contraction velocity and relaxation speed in a dose-dependent manner. Its mechanism may be related to inhibition of calcium influx and mediation activity of calcium pump in sarcoplasmic reticulum.Key words:Polygonum Bistorla L.

6、n-Butyl Alcohol Extract;  Right atrium;  Autorhythmicity;  Contraction    拳參Polygonum bistora L.別名草河車，系蓼科植物的干燥根莖。具有清熱、鎮(zhèn)驚、利濕、消腫、鎮(zhèn)痛等功效。主要成分1為沒食子酸、丁二酸、槲皮素、槲皮素-5-O-D-葡萄糖苷、原兒茶酸等。其中槲皮素的藥理作用研究較多，具有抗癌2,3、止瀉4,5、抑制血小板聚集6、心肌保護、抗氧自由基711等作用。本課題組曾報道其水提取液具有抗心律失常12及鎮(zhèn)痛作用13，其正丁醇提取物(Polyg

7、onum Bistorla L. n-Butyl Alcohol Extract)具有中樞抑制14、鎮(zhèn)痛15、心肌缺血16及心肌缺血再灌注損傷的保護17等作用?，F(xiàn)報道其正丁醇提取物對豚鼠離體右心房自律性及收縮特性的影響。1  器材1.1  藥物拳參正丁醇提取物Polygonum bistorla L. n-Butyl Alcohol Extract）由沈陽藥科大學中醫(yī)藥學院植化教研室提供，實驗前用雙蒸水稀釋至所需濃度。1.2  動物豚鼠購自贛南制藥廠實驗動物中心，體重300400 g，雌雄各半。1.3  儀器HHS1-2電熱恒溫水浴鍋（上海躍進醫(yī)療器械廠

8、）；JZ100型10 g張力換能器（北京新航興業(yè)科貿(mào)有限公司）；Medlab-U/4CS生物信號采集處理系統(tǒng)（南京美易科技有限公司）。2  方法與結(jié)果2.1  方法健康豚鼠，雌雄各半，體重300400 g，擊頭剖心，在持續(xù)充純氧的條件下，分離右心房。將右心房懸掛在含20 ml Krebs液的麥氏浴槽中，Krebs液的成分（mmol·L-1）如下：NaCl 120.00，CaCl2 2.20，KCl 5.40，MgCl2 1.0，NaHCO3 25.00，Glucose 5.6，pH 7.27.4，持續(xù)通入純氧，恒溫(37±0.5)。右心房穩(wěn)定45 min

9、后，測定其正常自動節(jié)律、收縮幅度、收縮速度和舒張速度作為給藥前對照，然后累積加入拳參正丁醇提取物（0.001×3，0.01，0.01×3，0.1，0.1×3，1，1×3，10，10×3 mg·L-1）0.2 ml，每次給藥間隔5 min，測定其自動節(jié)律、收縮幅度、收縮速度、舒張速度的變化18。統(tǒng)計學分析：實驗數(shù)據(jù)采用Graphpad  prism4.0軟件進行單因素方差分析，結(jié)果以柱狀圖表示，P0.05認為有統(tǒng)計學意義。2.2  結(jié)果2.2.1  拳參正丁醇提取物對右心房自動節(jié)律的影響拳參正丁醇提取物對自

10、動節(jié)律的影響結(jié)果以右心房自動節(jié)律比表示，右心房自動節(jié)律比=給藥后自動節(jié)律/實驗前自動節(jié)律。結(jié)果見圖1。結(jié)果表明，終濃度為10，10×3 g·L-1的拳參正丁醇提取物能抑制右心房自動節(jié)律。2.2.2  拳參正丁醇提取物對右心房收縮幅度的影響拳參正丁醇提取物對右心房收縮幅度的影響以收縮比表示（收縮比=給藥后收縮幅度/給藥前收縮幅度），結(jié)果見圖2。結(jié)果表明，拳參正丁醇提取物（0.1，0.1×3，1，1×3，10，10×3，100，100×3 g·L-1）具有抑制右心房收縮幅度的作用，且呈明顯的劑量依賴性負性作用。2.2.

11、3  拳參正丁醇提取物對右心房收縮速度的影響拳參正丁醇提取物對右心房收縮速度的影響以收縮速度比表示（收縮速度比=給藥后收縮速度/給藥前收縮速度）。結(jié)果見圖3。結(jié)果表明，拳參正丁醇提取物（0.01，0.01×3，0.1，0.1×3，1，1×3，10，10×3 mg·L-1）具有抑制右心房收縮速度的作用，且呈明顯的劑量依賴性負性作用。2.2.4  拳參正丁醇提取物對右心房舒張速度的影響拳參正丁醇提取物對右心房舒張速度的影響以舒張速度比表示（舒張速度比=給藥后舒張速度/給藥前舒張速度）。結(jié)果見圖4。結(jié)果表明，拳參正丁醇提取物（0.

12、01，0.01×3，0.1，0.1×3，1，1×3，10，10×3mg·L-1）具有抑制右心房舒張速度的作用，且呈明顯的劑量依賴性負性作用。1         3  討論本實驗結(jié)果表明，10 g·L-1及10×3 g·L-1劑量的拳參正丁醇提取物對豚鼠離體右心房肌具有負性頻率作用，但無劑量依賴性，而是有劑量選擇性。拳參正丁醇提取物溶解部分主要由4種成分組成19，包括丁香苷(syringin)、兒茶素(catechin)、蘆丁(

13、rutin)、mururin A，不同的成分可能對心率的影響不同，在濃度為1 mg·L-1及1×3 mg·L-1時，復(fù)合物的作用對心率有抑制作用，但其作用較弱。0.1×3，1，1×3，10，10×3，100及100×3 g·L-1劑量的拳參正丁醇提取物可使右心房肌的收縮幅度、收縮速度、舒張速度均降低，且具有劑量依賴性。有報道表明，兒茶素能拮抗氯仿、CaCl2和哇巴因所致的室性心律失常，其抗心律失常作用可能與抑制鈣離子的內(nèi)流和胞漿內(nèi)鈣離子的超負荷或直接阻斷鈣通道而起作用20。拳參正丁醇提取物對心房肌收縮幅度和收縮速度

14、的抑制作用也可能與抑制鈣離子的內(nèi)流，降低細胞內(nèi)鈣離子的濃度，從而使心房肌的收縮力度和速度均降低；其對心房肌舒張速度的抑制作用可能與改變肌漿網(wǎng)上的鈣泵活性有關(guān)，這有待于進一步深入的研究?！疚墨I】  1劉曉秋，陳發(fā)奎，吳立軍，等拳參的化學成分J.沈陽藥科大學學報，2004，21(3)：187.2余生元，董曉強，黃世良，等槲皮素對胃癌細胞多藥耐藥的逆轉(zhuǎn)作用J.江蘇醫(yī)藥，2004，30(7)：510.3朱蕾，何麗婭槲皮素抗癌作用的分子機制J.武漢科技大學學報·版，2004，27(2)：194.4吳荷芬，張 琳，何 露，等拳參輔助嬰幼兒腹瀉的臨床分析J.右江醫(yī)學，2003，31(4)

15、：389.5戚懋材，熊惠江拳參治療嬰幼兒秋冬季腹瀉28例J.中華實用醫(yī)學，2002，4(6)：48.6臧寶霞，金 鳴，吳 偉，等槲皮素抑制血小板活化因子受體結(jié)合作用的研究J.心肺血管病雜志，2004，23(2)：105.7唐玉，成亮，高建，等槲皮素對急性心肌梗死大鼠模型白細胞黏附分子表達的影響J.老年學雜志，2005，25(1)：80.8季鳳清，李寶紅，孫海梅，等槲皮素對急性心肌缺血大鼠心肌caspase-3基因蛋白表達的影響J.首都醫(yī)科大學學報，2004，25(4)：435.9馬維勇，陸仁英，許 帆，等復(fù)方板藍根顆粒治療病毒性心肌炎的療效觀察J.實用心腦肺血管病雜志，2003，l1(3)：l

16、35.10王曉慶，梁中琴，顧振綸，等槲皮素抑制血管生成作用的實驗研究J.中國藥通報，2004，20(10)：1161.11曹文軍，陳瑞芬，劉國貞，等槲皮素對缺血再灌注大鼠心肌損傷的保護作用J.首都醫(yī)科大學學報，2004，25(3)：311.12Zeng Jing，Huang Xian-hua，Lai Fei，et a1Antiarrhythmic Efects of PolygoauraBistorta LAgueous extractJ.Drug Development Research，2002，55(4)：264.13曾靖，單熱愛，鐘 聲，等拳參水提取物鎮(zhèn)痛作用的實驗觀察J.中國臨床康復(fù)，2005，9(6)：80.14曾靖，黃志華，葉和楊，等拳參正丁醇提取物中樞抑制作用的研究J.贛南醫(yī)學院學報，2003，23(4)：359.15黃玉珊，曾靖，葉和楊，等拳參正丁醇提取物的鎮(zhèn)痛作用的研究J.贛南醫(yī)學院學報，2004，24(1)：12.16葉和楊，汪秀榮，黃志華，等拳參正丁醇提取物對心肌缺血的