排石膠囊對腎結石模型大鼠的防治作用

1、排石膠囊對腎結石模型大鼠的防治作用                      作者：石磊 葉其正 羅宇慧 沈明勤 王志剛 丁永芳 彭蘊茹  【摘要】  目的觀察排石膠囊對腎結石模型大鼠的防治作用，初步探討其作用機制。方法采用乙二醇加氯化銨法制作大鼠腎結石模型，觀察排石膠囊同步給藥后對大鼠24 h排尿量、腎臟器系數(shù)、腎組織病理學、血清尿素氮、肌酐、鈣含量及腎組

2、織鈣含量、24 h尿鈣分泌量影響。結果排石膠囊可顯著增加24 h排尿量、降低大鼠的腎組織腫脹（P<0.050.01），明顯減少腎組織內草酸鈣結晶、腎小管擴張程度、壞死及炎性滲出等（P<0.010.001），顯著降低血清尿素氮(BUN)、肌酐(Crea)水平（P<0.050.001），顯著降低腎組織鈣含量和24 h尿鈣分泌量（P<0.05）。結論 排石膠囊可增加排尿量、促進腎和血液中Ca2+排泄和代謝，減輕大鼠腎組織因結石引起的損傷和病變，減少腎內草酸鈣結晶，從而防治腎結石。 【關鍵詞】  排石膠囊 腎結石 動物疾病模型Abstract：ObjectiveTo

3、observe the preventive effects of  Paishi Capsule on experimental renal calculus in rats, and explore its mechanism. MethodsThe rat model of renal calcium oxalate stones was induced by administrating ethylene glycol and ammonia chloride.The 24 h urinary output, coefficient and histopathological

4、 status of kidneys, the serum creatinnine and blood urea nitrogen levels, renal tissue calcium content and 24 h urinary calcium were detected.ResultsPaishi Capsule could markedly increase the 24 h urinary output and decrease the degrees of the kidneys swelled in rats（P<0.050.01）, decrease the cal

5、cium oxalate deposits in the kidneys and the pathological change degrees of the kidneys（P<0.010.001）.The serum creatinnine and blood urea nitrogen levels were decreased significantly（P<0.050.001）, and the renal tissue calcium content and 24 h urinary calcium were decreased significantly（P<0

6、.05）. ConclusionPaishi Capsule can increase the urinary output, improve the elimination and metabolism of  Ca2+ in the blood and kidneys, decrease the damage caused by the renal stone, obviously inhibit the formation of the kidney calcium oxalate stone in rats.Key words：Paishi Capsule；  Re

7、nal Stone；  Animal disease model排石膠囊（金錢草、石韋、徐長卿、車前子、木通、甘草）為清熱利濕、通淋排石的臨床經驗方，主治結石。本實驗主要觀察排石膠囊對腎結石模型大鼠的防治作用，并初步探討其作用機制。1  器材1.1  動物 SD大鼠，清潔級，體重180220 g ，雄性，健康，購于上海斯萊克實驗動物有限責任公司，合格證號：SCXK(滬)2002-0010。1.2  藥物 排石膠囊(深棕色清膏)，含35 g生藥/ml，批號20050509, 江蘇省中醫(yī)藥研究院藥物分析室提供； 排石顆粒（無糖型），含11

8、 g生藥/g，批號050401，南京同仁堂藥業(yè)有限責任公司生產。1.3  試劑 肌酐試劑盒、尿素氮試劑盒、鈣測定試劑盒、蛋白測定試劑盒，批號20050811，南京建成生物工程研究所提供。1.4  儀器 752s型紫外可見分光光度計，上海棱光技術有限公司生產；脫水機，Hypercentre XP型，包埋機Histocentre 2型，英國Shandon公司生產；切片機，HM340E型，德國Zeiss公司生產；顯微鏡，BX41型，日本Olympus公司生產；病理圖文分析系統(tǒng)，HPIAS-1000型，華海公司。百事通2  方法132.1 造模、給藥及

9、指標檢測大鼠60只，于清潔級環(huán)境中適應性飼養(yǎng)1周后隨機均分為6組，每組10只，分別為正常對照組、模型對照組、陽性藥（排石顆粒，原劑型）對照組、排石膠囊大、中、小劑量組。除正常對照組每天灌胃給予蒸餾水10 ml/kg外，其余5組大鼠造模（每天均用含1%乙二醇的冷開水作為飲用水，另用2%氯化銨按2 ml/只灌胃），同時陽性藥對照組、排石膠囊大、中、小劑量組分別按56，56，28，14 g生藥/kg的劑量灌胃給藥，模型對照組灌胃給予蒸餾水，各組動物給藥容量均為10 ml/kg。連續(xù)造模且灌胃給藥4周。實驗結束前1 d用代謝籠分別收集各大鼠24h空腹尿液，測定24 h排尿量及24 h尿鈣（Ca2+）分

10、泌量(甲基百里香酚藍比色法測定)。末次給藥1h后，大鼠采血，離心取上層血清用于生化測定：二乙酰-肟比色法測血清尿素氮(BUN) 水平、除蛋白法測肌酐(Crea)水平。大鼠處死后取兩側腎稱重，計算腎臟的臟器系數(shù)。每只大鼠取右腎10%甲醛溶液固定，用于腎組織病理學檢查；左腎超低溫(-65)保存，用于測定腎組織總鈣（Ca2+）含量。2.2 腎組織病理組織學檢查觀察腎皮、髓質分界是否清晰，腎小球、腎小管等有無異常改變，腎間質內有無炎細胞浸潤及變性、出血等癥狀，重點觀測腎小管內的草酸鈣結晶形成情況，以及周圍組織的病變、壞死等。觀測指標為腎組織內草酸鈣結晶情況、炎性滲出及壞死物的出現(xiàn)、腎小管的擴張情況，按

11、-、+、+、+、+分級。統(tǒng)計處理及評分方法: -、+、+、+、+分別記為1，2，3，4，5分。各給藥組實驗結果與模型對照組進行組間t檢驗統(tǒng)計處理。3  結果3.1  排石膠囊對結石大鼠腎組織病理學影響結果見表1。模型組可見腎組織內大量急、慢性炎細胞浸潤，大量腎小管高度擴張，管內充滿塊狀半透明的草酸鈣結晶，腎小管周圍腎小球被擠壓，面積減小，腎皮、髓質內可見多處腎小管內有炎性滲出物及壞死，與正常對照組比較，上述3個指標均有統(tǒng)計學差異(P<0.01)。與模型對照組比較，除排石膠囊小劑量外的各給藥組大鼠腎結石情況有不同程度的顯著減少，且腎小管內壞死及炎性滲出物顯著輕(P<

12、;0.010.001)；各給藥組大鼠腎小管擴張程度顯著減小（P<0.050.001）。3.2   排石膠囊對結石大鼠腎臟重量、24h排尿量的影響結果見表2。與模型對照組比較，大劑量組大鼠腎臟重量、腎臟系數(shù)顯著減輕，24 h排尿量顯著增加(P<0.050.01)。表1  排石膠囊防治給藥對結石大鼠腎組織病理學影響(略)表2  排石膠囊防治給藥對結石大鼠腎臟重量、24h排尿量的影響(略)3.3  排石膠囊對結石大鼠血清尿素氮、肌酐、鈣含量及腎組織鈣含量、24 h尿鈣分泌量的影響結果見表3。與模型對照組比較，腎結石模型組大鼠血清尿素氮、肌

13、酐、腎組織鈣含量及24 h尿鈣分泌量顯著增加（P<0.001）；排石膠囊大劑量組大鼠血清尿素氮和肌酐水平明顯降低、腎組織鈣含量和24 h尿鈣分泌量顯著減少（P<0.050.001），中劑量組大鼠腎組織鈣含量也明顯降低（P<0.05）。各給藥組大鼠血清鈣含量著降低（P<0.010.001）。表3   排石膠囊防治給藥對結石大鼠血清尿素氮、肌酐、鈣含量及腎組織鈣含量、24 h尿鈣分泌量的影響（略）4  討論泌尿系統(tǒng)結石屬于中醫(yī)學“淋證”“石淋”范疇，而草酸鈣結石約占尿石癥的80%，大鼠腎草酸鈣結石模型為尿石癥實驗研究的重要方法。其中，乙二醇加氯化銨法誘導大鼠腎草酸鈣結石形成效果顯著、簡便、穩(wěn)定2。腎結石模型大鼠同步灌服一定劑量排石膠囊后，能抑制因結石引起的組織水腫和腎臟重量增加，增加排尿量，促進腎臟組織和血液中Ca2+的排泄和代謝，減少腎組織中結石的形成，減緩大鼠腎組織因結石引起的損傷和病變，從而保護腎組織