林蛙卵卵磷脂對(duì)大鼠四氯化碳所致的肝損傷的影響

1、林蛙卵卵磷脂對(duì)大鼠四氯化碳所致的肝損傷的影響作者：鄔純鑫,王麗,呂集,杜景新,翟麗紅【關(guān)鍵詞】，林蛙卵卵磷脂；四氯化碳；肝損傷摘要 目的 探討林蛙卵卵磷脂對(duì)肝功能的調(diào)節(jié)。方法以中國(guó)林蛙卵提取物為主要原料制成的林蛙卵卵磷脂軟膠囊，進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，利用CCI4作為肝臟毒物造成急性肝損傷模型，觀察對(duì)動(dòng)物體重、 血清ALT AST TG的影響。結(jié)果林蛙卵卵磷脂軟膠囊高劑量組的 ALT AST及TG均低于陽(yáng)性對(duì)照組，差異有顯著性（分別為 Pv、Pv、PV）;中劑量組的ALT AST均低于陽(yáng) 性對(duì)照組，差異有顯著性（分別為 Pv、Pv）。高劑量組、中劑量組肝細(xì)胞病變 程度較陽(yáng)性對(duì)照組輕，差異有顯著性（分別為

2、Pv、Pv）。結(jié)論林蛙卵卵磷脂軟膠囊對(duì)肝損傷具有保護(hù)作用。關(guān)鍵詞林蛙卵卵磷脂；四氯化碳；肝損傷林蛙卵卵磷脂（lecithin of wood drug egg ）軟膠囊以中國(guó)林蛙（Rana temporaria chensinensis davia ）卵提取林蛙卵油的副產(chǎn)品林蛙 卵卵磷脂為主要原料。用林蛙卵卵磷脂軟膠囊進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，考察其對(duì)大鼠化學(xué) 性肝損傷的保護(hù)作用。有關(guān)專(zhuān)家已研究證實(shí)林蛙卵油具有抑制血小板聚集和降脂作用1及抗脂質(zhì)過(guò)氧化作用2，前期已對(duì)林蛙卵油進(jìn)行了同課題研究實(shí)驗(yàn)，證實(shí)林蛙卵油對(duì)化學(xué)性肝損傷具有保護(hù)作用3，本文對(duì)林蛙卵提取的林蛙卵卵磷脂所制成 的制劑對(duì)化學(xué)性肝損傷的保護(hù)進(jìn)行探

3、討，并與林蛙卵油（前期實(shí)驗(yàn)）相同方法。 證實(shí)林蛙卵卵磷脂與林蛙卵油皆具有保護(hù)化學(xué)性肝損傷的作用。1 材料與方法藥品 由通化市林蛙研究所提供林蛙卵卵磷脂軟膠囊，棕褐色；多 烯磷脂酰膽堿膠囊（易善復(fù)膠囊，批號(hào)：27361, 228 mg/片，由通化市中心醫(yī)院 提供）。肝損傷模型建立健康Wistar大鼠100只（由中國(guó)醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物部提供，批準(zhǔn)號(hào)：遼實(shí)動(dòng)物第010號(hào)，體重g，雄性）。實(shí)驗(yàn)大鼠首次以1% 四氯化碳（CCI4）皮下注射，劑量5 ml/kg，以后用4%CC由劑3 ml/kg，2次 /周，連續(xù)6周，第7周起改為每周1次，第9周末隨機(jī)抽12只大鼠心血做相關(guān) 生化檢測(cè)，其余全部大鼠肝活體組織行病理

4、學(xué)檢查，以所取肝組織切片形成纖維化作為轉(zhuǎn)入治療性實(shí)驗(yàn)標(biāo)志。全部大鼠實(shí)驗(yàn)前抽血做血清 ALT AST及 TG的檢測(cè)。試劑和儀器CCl4分析純、4%CCl4由劑，谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST、甘油三酯（TG，MICR銓化分析儀。分組隨機(jī)分實(shí)驗(yàn)1、實(shí)驗(yàn)2、實(shí)驗(yàn)3、溶媒對(duì)照、空白對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照6個(gè)組。實(shí)驗(yàn)組：將CCl4造成急性化學(xué)性肝損傷的受試動(dòng)物，給予不同 劑量的林蛙卵卵磷脂；溶媒對(duì)照組：將造成急性化學(xué)性肝損傷的受試動(dòng)物，給予 豆油；空白對(duì)照組：將造成急性化學(xué)性肝損傷的受試動(dòng)物，給予蒸餾水；陽(yáng)性對(duì) 照組：將造成急性化學(xué)性肝損傷的受試動(dòng)物，給予保肝藥易善復(fù)膠囊。實(shí)驗(yàn)方法（1、實(shí)驗(yàn)組：根據(jù)人

5、體推薦量的30、10、1倍設(shè)三個(gè)劑量組，分別為g/kg，g/kg，g/kg，用豆油稀釋至所需濃度，灌胃給予上述 不同的劑量的林蛙卵卵磷脂軟膠囊，bid，連續(xù)灌胃140天；溶媒對(duì)照組：灌胃 給予豆油，劑量mg/kg，bid，連續(xù)灌胃140天；空白組：灌胃給予蒸餾水，劑 量g/kg，tid，連續(xù)灌胃140天；陽(yáng)性對(duì)照組：灌胃給予易善復(fù)膠囊，劑量 g/kg,tid ，連續(xù)灌胃140天。觀察各組間體重的變化。（2）第141天（處死動(dòng)物 前12 h各組動(dòng)物禁食）取血分離血清，測(cè)定 ALT AST TG的含量，與實(shí)驗(yàn)前檢 測(cè)的量作比較，并取肝臟作病理切片，觀察肝臟的病理?yè)p傷情況，病理組織學(xué)觀 察以肝細(xì)胞“

6、變性、壞死”等作為觀察指標(biāo)，并根據(jù)每種病變程度進(jìn)行量化，按 （0 分）、+ （ 1 分）、+（ 2 分）、+ + +（ 3 分）、+ + + +（ 4 分）量化。統(tǒng)計(jì)學(xué)方法實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS軟件，方差分析法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。2 結(jié)果林蛙卵卵磷脂軟膠囊對(duì)動(dòng)物體重的影響見(jiàn)表1。由表1可見(jiàn)，各實(shí)驗(yàn)劑量組、空白對(duì)照組、溶媒對(duì)照組與陽(yáng)性對(duì)照組比較，動(dòng)物體重、增重差異 無(wú)顯著性（p）。表1林蛙卵卵磷脂軟膠囊對(duì)動(dòng)物體重的影響（略）林蛙卵卵磷脂軟膠囊對(duì)動(dòng)物血清 ALT AST TG的影響 見(jiàn)表2。由表2可見(jiàn)：林蛙卵卵磷脂軟膠囊高劑量實(shí)驗(yàn)組的 ALT AST TG均低于陽(yáng)性對(duì) 照組，差異有顯著性（分別為 Pv、Pv、

7、PV）;中劑量組的ALT AST均低于陽(yáng) 性對(duì)照組，差異有顯著性（分別為 Pv、Pv）。表2 林蛙卵卵磷脂軟膠囊對(duì)動(dòng)物血清 ALT AST TG的影響（略）&n bsp；林蛙卵卵磷脂軟膠囊對(duì)肝臟病變的影響見(jiàn)表3。由表3可見(jiàn)，林蛙卵卵磷脂軟膠囊各劑量組及模型組與模型對(duì)照組比較，動(dòng)物的肝體比值未見(jiàn)明顯差異；空白、溶媒對(duì)照組（以肝氣球樣變、脂肪變性、胞漿凝聚、肝細(xì)胞壞死四 種病變總積分為準(zhǔn)），肝細(xì)胞病變程度較陽(yáng)性對(duì)照組重。林蛙卵卵磷脂軟膠囊高 劑量組、中劑量組病變程度較陽(yáng)性對(duì)照組輕，差異有顯著性（分別為Pv，Pv）0表3 各組大鼠肝體比值及肝臟病理組織學(xué)檢查結(jié)果（略）3 討論本研究發(fā)現(xiàn)林蛙卵

8、卵磷脂軟膠囊對(duì) CCI4造成的急性化學(xué)性肝損傷模型 的各項(xiàng)指標(biāo)均有顯著性改善。對(duì)林蛙卵油和林蛙卵卵磷脂綜合性研究表明：二者 對(duì)肝臟均具有保護(hù)作用。林蛙卵油軟膠囊中含有維生素E及多種人體必需不飽和脂肪酸及微量 元素等成分，這些成分均具有抑制肝損傷的作用47;林蛙卵油中還含有大 量的雌二醇，近些年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)雌激素對(duì)肝纖維化和活性肝星狀細(xì)胞的增殖、轉(zhuǎn)化膠原的合成均有抑制作用8。林蛙卵卵磷脂的結(jié)構(gòu)與人體相同，其成分是由甘油、脂肪酸、磷酸、膽 堿結(jié)合而成的CH2CH2OH9,其中的膽堿對(duì)脂肪有親合力，如果人體膽堿不足則會(huì)影響脂肪代謝，造成脂肪在肝細(xì)胞內(nèi)積聚，形成脂肪肝甚至?xí)l(fā)炎腫脹，林 蛙卵卵磷脂不但可

9、以預(yù)防脂肪肝，還能促進(jìn)肝細(xì)胞再生，同時(shí)，磷脂可降低血清中膽固醇含量，防止肝硬化并有助于肝功能恢復(fù)，而且卵磷脂在治療高脂血癥中 能升高HDL及降低TCL/HDL值9。本研究證明，不僅林蛙卵油具有保護(hù)化學(xué)性肝損傷作用，而且林蛙卵卵磷脂同樣對(duì)化學(xué)性肝損傷具有保護(hù)作用，對(duì)預(yù)防中老年疾病具有很好的應(yīng)用保健 價(jià)值。參考文獻(xiàn)1 李成義，曲紹春，陳光榮，等中國(guó)林蛙卵油中的激素成分及卵油 對(duì)血小板聚集和血脂的影響.中草藥，1997,25 (11): 584-585.2 劉潔，曲紹春，劉宏雁，等.中國(guó)林蛙卵油防治實(shí)驗(yàn)性高脂血癥及 抗脂質(zhì)過(guò)氧化.白求恩醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，1997,23 (4): 365-367.3 呂集，杜景新，王麗，等.林蛙卵油軟膠囊以化學(xué)性肝損傷的影響. 中國(guó)老年報(bào)，20XX,23 (11) : 785-786.4 王雅凡，李奇芬，王洪，等.維生素E抗大鼠四氯化碳所致肝纖維 化的實(shí)驗(yàn)研究.中華消化雜志，1998,18 (2): 101-101.5 王雅凡，李奇芬，王洪，等.維生素E抗大鼠實(shí)驗(yàn)研究性肝纖維化 的作用.華人消化雜志，1998,6 (3) : 207-209.6 劉曉芳，夏元洵，仲來(lái)福，等.不同維生素E水平對(duì)四氯化碳肝損 害的影響.營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào)，1998,2 (2): 147-149.7 李青松，李章，孫平