9、載脂蛋白B標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(APOB)

1、 標(biāo)準(zhǔn)操作程序項 目：載脂蛋白B方 法：免疫比濁法前 言為使臨床檢驗操作規(guī)范化，指導(dǎo)檢驗人員嚴(yán)格按規(guī)程進(jìn)行正確的常規(guī)操作，保證檢驗質(zhì)量，特制定本操作規(guī)程。本規(guī)程的編寫遵循了ISO 15189醫(yī)學(xué)實驗室關(guān)于質(zhì)量和能力的特殊要求及WS/T 227-2002 臨床檢驗操作規(guī)程編寫要求的有關(guān)規(guī)定并結(jié)合產(chǎn)品實際情況制訂，作為本產(chǎn)品的標(biāo)準(zhǔn)操作程序。本規(guī)程從2007年5月2日起實施，每2年復(fù)審1次。本規(guī)程由浙江伊利康生物技術(shù)有限公司編制。本規(guī)程起草單位：伊利康生物技術(shù)有限公司技術(shù)部。本規(guī)程主要起草人：蒙 凱、蔡其浩。本規(guī)程首次起草。 目  錄1 檢驗申請32 標(biāo)本采集與處理33 試劑及成

2、份 44方法原理.45 儀 器.46 校準(zhǔn)液及校準(zhǔn)模式47質(zhì)控品與室內(nèi)質(zhì)控規(guī)則 48標(biāo)本檢測步驟.59 結(jié)果計算510 操作性能 511試劑使用的注意事項.512參考范圍及醫(yī)學(xué)決定水平.513檢驗結(jié)果的報告及范圍.514臨床意義.615結(jié)果審核分析以及相關(guān)項目的聯(lián)系.616威脅生命的“緊急值”及報告規(guī)定. .617有關(guān)引用程序與文件.618參考文獻(xiàn)附錄A XXX型全自動生化分析儀參數(shù)載脂蛋白B測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程1.檢驗申請單獨檢驗項目申請：血清載脂蛋白B（Apolipoprotein B；,縮寫ApoB）測定；組合項目申請：血脂測定，血清載脂蛋白測定。臨床醫(yī)生根據(jù)需要提出檢驗申請。2.標(biāo)本采集與

3、處理 2.1 受檢者的準(zhǔn)備： 采血前2周保持平時的飲食習(xí)慣，3d內(nèi)避免高脂飲食，24h內(nèi)不飲酒，空腹12h后采集標(biāo)本。體檢對象抽血前應(yīng)有兩周的正常狀況記錄。注意有無應(yīng)用影響測試項目的藥物。此外，對于體檢者，采血的季節(jié)都應(yīng)做相關(guān)記錄，因為樣本中各項目的含量有季節(jié)性變動，為了前后比較應(yīng)在每年同一季節(jié)檢驗。應(yīng)囑體檢對象在抽血前24小時內(nèi)不做劇烈運動。2.2標(biāo)本采集2.2.1除非是臥床的病人，一般在采血時取坐位。體位影響水分在血管內(nèi)外的分布，會影響測試項目的濃度。在采血前至少應(yīng)靜坐5分鐘，一般從肘靜脈取血，使用止血帶的時間不超過1分鐘，穿刺成功后立即松開止血帶，不抗凝，置普通試管中?；虿捎煤蛛x膠的黃

4、色蓋子SST真空采血管，如為急診標(biāo)本，使用淺綠色蓋子PST試管。 2.2.2檢驗申請單和血標(biāo)本試管上統(tǒng)一且唯一的標(biāo)識符。 2.2.3標(biāo)本采集后，在檢驗申請單上填寫標(biāo)本采集時間，如為急診標(biāo)本，加上急查標(biāo)識。2.2.4標(biāo)本采集后與檢驗申請單一起及時運送至檢驗科。專人負(fù)責(zé)標(biāo)本的接收并記錄標(biāo)本的狀態(tài)，對不合格標(biāo)本予以拒收。 2.2.5下列標(biāo)本為不合格標(biāo)本 2.2.5.1標(biāo)本量不足：少于0.3ml的全血標(biāo)本，或少于0.1ml的血清或血漿。 2.2.5.2對反應(yīng)吸光度有干擾的標(biāo)本，包括嚴(yán)重溶血、黃疸和渾濁的標(biāo)本。 2.2.5.3對無法確認(rèn)標(biāo)本與申請單對應(yīng)關(guān)系的。 2.2.5.4其他如標(biāo)識涂改、標(biāo)本試管破裂

5、等。 2.3標(biāo)本處理 2.3.1接收標(biāo)本在室溫放置30min45min后離心分離血清或血漿。吸出血清/血漿。處理樣品時要將其當(dāng)成生物污染品。2.3.2標(biāo)本保存時間：室溫（1525）下可穩(wěn)定1d，普通冰箱中（28）穩(wěn)定7d。-20可保存數(shù)月；-70至少保存半年；避免反復(fù)凍溶。為避免標(biāo)本中水分揮發(fā)使血清濃縮，對保存時間超過1d的標(biāo)本均加塞密閉或覆蓋濕巾。2.3.3已完成測試的標(biāo)本保持完整的識別號，置28冰箱內(nèi)保存7d。 2.4標(biāo)本的注意事項 2.4.1不建議采集抗凝標(biāo)本，如果必須使用血漿，推薦的抗凝劑是肝素。 2.4.2妊娠后期各項血脂都會增高，應(yīng)在產(chǎn)后或終止哺乳后3個月查血才能反映基本血脂水平。

6、 2.4.3采血前最好停用影響血脂的藥物（如調(diào)脂藥、避孕藥、某些降壓藥、激素等）數(shù)天或數(shù)周，否則應(yīng)記錄用藥情況。2.4.4血清標(biāo)本出現(xiàn)溶血、脂血、黃疸或抗壞血酸的干擾情況參見抗干擾能力。3.試劑及成份3.1試劑本科使用的載脂蛋白B檢測試劑盒，由浙江伊利康生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)，產(chǎn)品貨號為:XXX，試劑為液體雙試劑，其組份如下：試劑組成主要成份濃度R1三羥甲基氨基甲烷緩沖液100mmol/L聚乙二醇40g/LR2羊抗人APOB抗體適 量疊氮鈉適 量 3.2試劑盒保存及效期未啟封試劑盒在28保存，可儲存至失效期。啟封使用的試劑置儀器試劑倉冰箱內(nèi)穩(wěn)定30d。開蓋后避免污染。當(dāng)試劑變混濁，或者未開蓋的液

7、體有沉淀時，表明試劑已變質(zhì)，不能繼續(xù)使用。新打開試劑不宜與已用過的試劑混合在一起,否則易造成試劑穩(wěn)定性下降。3.3試劑盒準(zhǔn)備液態(tài)試劑型，即開即用，無特殊準(zhǔn)備。4.方法原理4.1測定方法：終點法。4.2原理：樣品中ApoB抗原與試劑中相應(yīng)的ApoB抗體在溶液中相遇，立即形成抗原抗體復(fù)合物，并形成一定濁度。該濁度的高低在一定量抗體存在時與抗原的含量成正比。通過與同樣處理的校準(zhǔn)液比較，計算樣品中的ApoB含量。5.儀器XXX型全自動生化分析儀器。6.校準(zhǔn)品與校準(zhǔn)模式 6.1校準(zhǔn)品：使用試劑盒附送的同批號APOB標(biāo)準(zhǔn)液。其中包含APOB的定值。6.2標(biāo)準(zhǔn)類型和校準(zhǔn)點數(shù)目：多點非線性模式(Logit-4

8、P或Spline)，5個校準(zhǔn)點。6.3校準(zhǔn)周期：全點定標(biāo)：更換試劑批號或出現(xiàn)質(zhì)控漂移時；儀器進(jìn)行全面保養(yǎng)后；儀器的重要零件更換后；均須需要全點定標(biāo)。 7.質(zhì)控品與室內(nèi)質(zhì)控規(guī)則7.1質(zhì)控品采用由XXX公司提供的兩個不同水平定值質(zhì)控血清。7.2質(zhì)控液重建方法：用XXX.00ml蒸餾水溶解，輕輕混勻，20min后即可使用。7.3質(zhì)控品測定：在每一批標(biāo)本中測定至少兩個水平質(zhì)控血清各一次。7.4質(zhì)控規(guī)則：采用Westgard多規(guī)則質(zhì)控規(guī)則，由計算機(jī)程序進(jìn)行檢索與判斷。7.5如出現(xiàn)失控情況，按室內(nèi)質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)操作程序采取各種有效的糾正措施及時糾正，并在確認(rèn)重新回復(fù)到控制狀態(tài)后開始標(biāo)本檢測。8.標(biāo)本檢測步驟 裝

9、載試劑 進(jìn)行校準(zhǔn)進(jìn)行質(zhì)控輸入標(biāo)本檢測項目加載標(biāo)本標(biāo)本測定結(jié)果復(fù)核報告。9.結(jié)果計算ApoB（g/L）= CS × AT/AS（g/L）式中：AT以空白管吸光度作對照的樣品管吸光度值A(chǔ)S以空白管吸光度作對照的校準(zhǔn)管吸光度值C S 校準(zhǔn)液中ApoB的濃度10.操作性能10.1精密度：批內(nèi)CV 4.0，批間相對極差CV8.0。 10.2 準(zhǔn)確度：測量結(jié)果在質(zhì)控血清靶值±2SD范圍內(nèi)。不同方法學(xué)試劑的質(zhì)控結(jié)果之間會存在差異，使用時請確保質(zhì)控選擇與試劑的方法學(xué)保持一致。10.3線性范圍：0.052.00 g/L10.4方法的有限性及干擾因素：當(dāng)樣品中抗壞血酸濃度1704mol/L，膽

10、紅素濃度598mol/L，血紅蛋白濃度5.00g/L，甘油三酯濃度22.6 mmol/L時對測定結(jié)果有干擾。11.試劑使用的注意事項11.1本試劑僅應(yīng)用于體外診斷。11.2扔棄廢物應(yīng)符合當(dāng)?shù)氐姆ㄒ?guī)要求。12.參考范圍及醫(yī)學(xué)決定水平 參考范圍： 0.61.1 g/L。13.檢驗結(jié)果的報告及范圍13.1結(jié)果的報告13.1.1結(jié)果經(jīng)審核確認(rèn)準(zhǔn)確無誤后發(fā)出報告。13.1.2報告單上標(biāo)明結(jié)果的計量單位、參考區(qū)間、報告日期、時間、操作者和審核者簽名，并有與申請單相同的醫(yī)學(xué)信息。13.1.3如收到標(biāo)本的質(zhì)量可能對測定結(jié)果有影響的也在報告單上指出。13.2報告范圍：血清與試劑用量之比為1:100時，測定上限為

11、2.0g/L。超過此范圍的結(jié)果報告時必須附有證明該結(jié)果準(zhǔn)確可靠的文字說明，并經(jīng)上級主管技師審核后報告。14.臨床意義 14.1血清中的apoB絕大部分存在于低密度脂蛋白LDL中，在IDL、VLDL和脂蛋白（a）中也各有一分子apoB，故血清apoB水平主要反映LDL水平，與LDL-C呈明顯的正相關(guān)。 14.2流行病學(xué)與臨床研究結(jié)果已確認(rèn)，高濃度apoB是冠心病的危險因素，且apoB是各項血脂指標(biāo)中較好的動脈粥樣硬化標(biāo)志物。 14.3冠心病高apoB血癥的藥物干預(yù)實驗結(jié)果表明，降低apoB水平可以減少冠心病發(fā)病及促進(jìn)粥樣斑塊的消退。目前的研究結(jié)果表明：冠心病患者一般具有比較低的APO A1水平和比較高的APO B水平。15.結(jié)果審核分析以及相關(guān)項目的聯(lián)系15.1由資深專業(yè)人員負(fù)責(zé)檢驗結(jié)果的審核。15.2審核者認(rèn)真審核每一個測定結(jié)果，對發(fā)出報告結(jié)果的可靠性負(fù)責(zé)，并在報告單的審核者處簽名。15.3相關(guān)項目：審核與血脂其他指標(biāo)和載脂蛋白等的關(guān)系，apoB一般與LDL-C呈正相關(guān)。如出現(xiàn)與臨床不符甚至相悖的情況，應(yīng)分析與查找原因。16.威脅生命的“緊急值”及報告規(guī)定通常無威脅生命的“緊急值”。17.有關(guān)引