免疫球蛋白 Immunoglobulin課件

1、第四章第四章免疫球蛋白免疫球蛋白Chapter 4 Immunoglobulin 抗體抗體（antibody,Ab）：）：B B細(xì)胞識(shí)別抗原后增殖分細(xì)胞識(shí)別抗原后增殖分化為漿細(xì)，由漿細(xì)胞所產(chǎn)生的，能與抗原發(fā)生特化為漿細(xì)，由漿細(xì)胞所產(chǎn)生的，能與抗原發(fā)生特異性結(jié)合的球蛋白。主要存在于血清等體液中，異性結(jié)合的球蛋白。主要存在于血清等體液中，具有免疫功能。具有免疫功能。免疫球蛋白免疫球蛋白（immunoglobulin,Ig）：）：是指具有是指具有抗體活性或化學(xué)結(jié)構(gòu)與抗體相似的球蛋白?？贵w活性或化學(xué)結(jié)構(gòu)與抗體相似的球蛋白。分泌型分泌型（secreted Ig, sIg）：）：主要存在于體液中，主要存在

2、于體液中，具有抗體的各種功能。具有抗體的各種功能。膜型膜型( (membrance Ig, mIg) ) ：B B細(xì)胞膜上的抗原細(xì)胞膜上的抗原受體。受體。第一節(jié)第一節(jié) 免疫球蛋白的結(jié)構(gòu)免疫球蛋白的結(jié)構(gòu) 一、免疫球蛋白的基本結(jié)構(gòu)一、免疫球蛋白的基本結(jié)構(gòu) Ig Ig 的基本單位都是四肽鏈的對(duì)稱結(jié)構(gòu)，由兩條相同的重鏈的基本單位都是四肽鏈的對(duì)稱結(jié)構(gòu)，由兩條相同的重鏈（heavy chain, Hheavy chain, H鏈）和兩條相同的輕鏈（鏈）和兩條相同的輕鏈（light chain, light chain, L L鏈）通過鏈間二硫鍵連接而成的四肽鏈結(jié)構(gòu)。鏈）通過鏈間二硫鍵連接而成的四肽鏈結(jié)構(gòu)。

3、（一）四肽鏈結(jié)構(gòu)（一）四肽鏈結(jié)構(gòu)（二）重鏈和輕鏈（二）重鏈和輕鏈根據(jù)抗原根據(jù)抗原性的差異性的差異重鏈重鏈輕鏈輕鏈、和和鏈鏈型型和和型型不同重鏈與輕鏈組成完整的分子分別為不同重鏈與輕鏈組成完整的分子分別為IgM、IgD、IgG14、IgA12和和IgEMolecular structure of ImmunoglobulinBasic structure of ImmunoglobulinHeavy chain and light chain（三）可變區(qū)和恒定區(qū)（三）可變區(qū)和恒定區(qū)1 . 可變區(qū)可變區(qū)（variable region, V區(qū)區(qū)）在四肽鏈結(jié)構(gòu)的在四肽鏈結(jié)構(gòu)的N N端，端，輕鏈的輕鏈

4、的1/2與重鏈的與重鏈的1/4或或1/5的的氨基酸序列變化很大，稱此區(qū)為氨基酸序列變化很大，稱此區(qū)為V區(qū)。區(qū)。高變區(qū)高變區(qū)（hypervariable region, HVR) 在在V區(qū)內(nèi)，重鏈和輕鏈分別有三處氨基酸殘基的組成和區(qū)內(nèi)，重鏈和輕鏈分別有三處氨基酸殘基的組成和排列順序比可變區(qū)內(nèi)其他位置上的氨基酸殘基更容易變排列順序比可變區(qū)內(nèi)其他位置上的氨基酸殘基更容易變化，稱高變區(qū)?；?，稱高變區(qū)。 高變區(qū)為高變區(qū)為IgIg與特異性抗原的決定簇相結(jié)合的位置，因與特異性抗原的決定簇相結(jié)合的位置，因而稱為而稱為決定簇互補(bǔ)區(qū)（決定簇互補(bǔ)區(qū)（complementarity-determining regio

5、n, CDR) )高變區(qū)也是高變區(qū)也是Ig Ig 獨(dú)特型決定簇（獨(dú)特型決定簇（idiotypic idiotypic determinant )determinant )存在的主要部位。存在的主要部位。 Ig Ig 分子可變區(qū)球形頂分子可變區(qū)球形頂端凹陷的立體結(jié)構(gòu)。端凹陷的立體結(jié)構(gòu)。Variable region and constant region2. 恒定區(qū)恒定區(qū)( ( constant region , C 區(qū)）區(qū)） C端輕鏈的端輕鏈的1/2和重鏈的和重鏈的3/4或或4/5區(qū)域的氨基酸數(shù)量、種類、區(qū)域的氨基酸數(shù)量、種類、排列順序及含糖量在同一種屬動(dòng)物排列順序及含糖量在同一種屬動(dòng)物IgI

6、g同一同一L L鏈和同一類鏈和同一類H H鏈鏈中都比較恒定，故稱為中都比較恒定，故稱為恒定區(qū)恒定區(qū)位于位于CH1與與CH2之間，含有豐富的脯氨酸，因此易伸展彎之間，含有豐富的脯氨酸，因此易伸展彎曲，而且易被木瓜蛋白酶、胃蛋白酶等水解。鉸鏈區(qū)連接曲，而且易被木瓜蛋白酶、胃蛋白酶等水解。鉸鏈區(qū)連接抗體的抗體的Fab段和段和Fc段，使兩個(gè)段，使兩個(gè)Fab段易于移動(dòng)和彎曲，從段易于移動(dòng)和彎曲，從而可與不同距離的抗原部位結(jié)合。而可與不同距離的抗原部位結(jié)合。 五類五類Ig或亞類的鉸鏈或亞類的鉸鏈區(qū)不盡相同，例如區(qū)不盡相同，例如IgG1、IgG2、IgG4和和IgA的鉸鏈區(qū)較的鉸鏈區(qū)較短，而短，而IgG3和

7、和IgD的鉸鏈區(qū)較長(zhǎng)。的鉸鏈區(qū)較長(zhǎng)。IgM和和IgE無鉸鏈區(qū)。無鉸鏈區(qū)。（四）（四） 鉸鏈區(qū)鉸鏈區(qū)(hinge region)（五）（五） 結(jié)構(gòu)域結(jié)構(gòu)域（domain)Ig Ig 的多肽分子可折疊成幾個(gè)由鏈內(nèi)二硫鍵連的多肽分子可折疊成幾個(gè)由鏈內(nèi)二硫鍵連接的球形結(jié)構(gòu)，稱為接的球形結(jié)構(gòu)，稱為 Ig Ig 功能區(qū)。功能區(qū)。輕鏈有輕鏈有VL和和CL兩個(gè)結(jié)構(gòu)域；兩個(gè)結(jié)構(gòu)域；IgG、IgA和和IgD重重鏈有鏈有VH、CH1、CH2和和CH3四個(gè)結(jié)構(gòu)域；四個(gè)結(jié)構(gòu)域；IgM和和IgE重鏈有五個(gè)結(jié)構(gòu)域，比重鏈有五個(gè)結(jié)構(gòu)域，比IgG多一個(gè)多一個(gè)CH4。* 免疫球蛋白各結(jié)構(gòu)域的功能免疫球蛋白各結(jié)構(gòu)域的功能4. Ig

8、G的的CH3可與單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、可與單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、B 細(xì)胞和細(xì)胞和NK細(xì)胞表面的細(xì)胞表面的IgG Fc受體（受體（FcR）結(jié)合，）結(jié)合，IgE的的 CH2和和CH3可與肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞的可與肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞的IgE Fc受體受體 （FcR）結(jié)合）結(jié)合1. VH和和VL是結(jié)合抗原的部位，其中是結(jié)合抗原的部位，其中HVR（CDR）是）是V區(qū)中區(qū)中與抗原表位互補(bǔ)結(jié)合的部位。與抗原表位互補(bǔ)結(jié)合的部位。2. CH1和和CL上上具有部分同種異型具有部分同種異型（allotype）的遺傳標(biāo)志。的遺傳標(biāo)志。3. IgG的的CH2和和IgM的的CH3具有補(bǔ)體具有補(bǔ)體

9、C1q結(jié)合位點(diǎn)，可啟結(jié)合位點(diǎn)，可啟動(dòng)補(bǔ)體活化經(jīng)典途徑。動(dòng)補(bǔ)體活化經(jīng)典途徑。 IgG可借助可借助CH2主動(dòng)通過胎盤。主動(dòng)通過胎盤。The function of Immunoglobin domains（一）（一） J鏈（鏈（joining chain）J鏈（鏈（joining chain）是一條多肽鏈，富含半胱氨酸，由漿）是一條多肽鏈，富含半胱氨酸，由漿細(xì)胞合成。細(xì)胞合成。J鏈可連接鏈可連接Ig 單體形成二聚體、五聚體或多聚體。單體形成二聚體、五聚體或多聚體。兩個(gè)單體兩個(gè)單體IgA由由J鏈連接形成二聚體，五個(gè)單體鏈連接形成二聚體，五個(gè)單體IgM由二硫鍵由二硫鍵相互連接，并通過二硫鍵與相互連接，

10、并通過二硫鍵與J鏈連接形成五聚體。鏈連接形成五聚體。IgG、IgD、IgE為單體，無為單體，無J鏈。鏈。二、免疫球蛋白的其他成分二、免疫球蛋白的其他成分（二）（二）分泌片分泌片（secretory piece, SP）是分泌型是分泌型IgA分子上的一個(gè)輔助成分，為一種含糖的肽鏈，由分子上的一個(gè)輔助成分，為一種含糖的肽鏈，由粘膜上皮細(xì)胞合成和分泌，以非共價(jià)形式結(jié)合到二聚體上，粘膜上皮細(xì)胞合成和分泌，以非共價(jià)形式結(jié)合到二聚體上，并一起被分泌到粘膜表面。分泌片具有保護(hù)分泌型并一起被分泌到粘膜表面。分泌片具有保護(hù)分泌型IgA的鉸鏈的鉸鏈區(qū)免受蛋白水解酶降解的作用，并介導(dǎo)區(qū)免受蛋白水解酶降解的作用，并介

11、導(dǎo)IgA二聚體從粘膜下通二聚體從粘膜下通過粘膜等細(xì)胞到粘膜表面的轉(zhuǎn)運(yùn)。過粘膜等細(xì)胞到粘膜表面的轉(zhuǎn)運(yùn)。Other structures of ImmunoglobulinJ J鏈和分泌片鏈和分泌片(Joining chain and secretory piece)(Joining chain and secretory piece)三、免疫球蛋白的水解片段三、免疫球蛋白的水解片段* 木瓜蛋白酶水解片段木瓜蛋白酶水解片段木瓜蛋白酶水解木瓜蛋白酶水解IgG的部位是在鉸鏈區(qū)二硫鍵的部位是在鉸鏈區(qū)二硫鍵連接的兩條重鏈的近連接的兩條重鏈的近N端。端。裂解后可得到三個(gè)片段：裂解后可得到三個(gè)片段： 2個(gè)相同

12、的個(gè)相同的Fab段即抗原結(jié)合片段（段即抗原結(jié)合片段（fragment antigen binding, Fab）,相當(dāng)于抗體分子的兩個(gè)臂，相當(dāng)于抗體分子的兩個(gè)臂，每個(gè)每個(gè)Fab段由一條完整的輕鏈和重鏈的段由一條完整的輕鏈和重鏈的VH和和CH1功功能區(qū)組成。能區(qū)組成。Fab段為單價(jià)，與抗原結(jié)合后，不能形成段為單價(jià)，與抗原結(jié)合后，不能形成凝集反應(yīng)或沉淀反應(yīng)凝集反應(yīng)或沉淀反應(yīng)。Fragmentation of Ig by proteolytic cleavageProteolytic cleavage with papain胃蛋白酶在鉸鏈區(qū)連接重鏈的二硫鍵近胃蛋白酶在鉸鏈區(qū)連接重鏈的二硫鍵近C C端

13、水解端水解IgGIgG，獲得一個(gè)，獲得一個(gè)F(ab)2F(ab)2片段，由于抗體分子的片段，由于抗體分子的兩個(gè)臂仍由二硫鍵連接，因此兩個(gè)臂仍由二硫鍵連接，因此F(ab)2F(ab)2片段為雙片段為雙價(jià)，與抗原結(jié)合可發(fā)生凝集反應(yīng)和沉淀反應(yīng)。價(jià)，與抗原結(jié)合可發(fā)生凝集反應(yīng)和沉淀反應(yīng)。* 胃蛋白酶水解片段胃蛋白酶水解片段 1個(gè)個(gè)Fc段（段（fragment crystallizable,Fc），即可結(jié)），即可結(jié)晶片段。晶片段。Fc段相當(dāng)于段相當(dāng)于IgG 的的CH2和和CH3功能區(qū)，無功能區(qū)，無抗原結(jié)合活性，是抗體分子與效應(yīng)分子和細(xì)胞相互抗原結(jié)合活性，是抗體分子與效應(yīng)分子和細(xì)胞相互作用的部位。作用的部位

14、。Ig同種型的抗原性主要存在于同種型的抗原性主要存在于Fc段段。Proteolytic cleavage with pepsinIg 的抗原性的抗原性第二節(jié)第二節(jié) 免疫球蛋白的異質(zhì)性免疫球蛋白的異質(zhì)性抗體的異質(zhì)性即抗體分子的不均一性，抗體是由抗體的異質(zhì)性即抗體分子的不均一性，抗體是由多種多樣的多種多樣的IgIg分子所組成。分子所組成。一、免疫球蛋白的類型一、免疫球蛋白的類型1.1.類：類：同一種屬所有個(gè)體內(nèi)的同一種屬所有個(gè)體內(nèi)的IgIg，根據(jù)其重鏈，根據(jù)其重鏈免疫原性不同，可分為免疫原性不同，可分為、5類，類，由由它們組成的它們組成的IgIg分別稱為分別稱為IgM、IgD、IgG、IgA和和I

15、gE2.2.亞類：亞類：同一類同一類Ig，根據(jù)其重鏈恒定區(qū)氨基酸組根據(jù)其重鏈恒定區(qū)氨基酸組成的較小差異，以及二硫鍵位置、數(shù)目不同，又成的較小差異，以及二硫鍵位置、數(shù)目不同，又可分為亞類可分為亞類IgM1-2、 IgG1-4、IgA1-23.3.型：型：同一種屬所有個(gè)體內(nèi)的同一種屬所有個(gè)體內(nèi)的IgIg，根據(jù)其輕鏈恒定區(qū)結(jié)構(gòu)，根據(jù)其輕鏈恒定區(qū)結(jié)構(gòu)（氨基酸的組成和排列順序）與免疫原性不同，可分為（氨基酸的組成和排列順序）與免疫原性不同，可分為型型和和型。同一天然的型。同一天然的IgIg分子其兩條輕鏈的型別必定相同。分子其兩條輕鏈的型別必定相同。4.4.亞型：亞型：所有所有鏈恒定區(qū)的結(jié)構(gòu)基本相同，但鏈

16、恒定區(qū)的結(jié)構(gòu)基本相同，但鏈鏈之間其恒定區(qū)之間其恒定區(qū)個(gè)別氨基酸殘基的差異，可分為個(gè)別氨基酸殘基的差異，可分為1、 2、 3、 4。二、外界因素所致的異質(zhì)性二、外界因素所致的異質(zhì)性- -免疫球蛋白的多樣性免疫球蛋白的多樣性不同的抗原表位刺激機(jī)體后，均可選擇表達(dá)相應(yīng)不同的抗原表位刺激機(jī)體后，均可選擇表達(dá)相應(yīng)BCR的的B細(xì)胞，使其增殖分化并產(chǎn)生針對(duì)該表位的特異性抗體。細(xì)胞，使其增殖分化并產(chǎn)生針對(duì)該表位的特異性抗體。三、內(nèi)源因素所致的異質(zhì)性三、內(nèi)源因素所致的異質(zhì)性-免疫球蛋白的血清型免疫球蛋白的血清型免疫球蛋白分子中包含有多種不同的抗原表位，呈現(xiàn)不同的免疫球蛋白分子中包含有多種不同的抗原表位，呈現(xiàn)不同

17、的免疫原性，有三類不同的抗原表位：免疫原性，有三類不同的抗原表位：同種異型同種異型(Allotype)(Allotype)：同一種屬不同個(gè)體間：同一種屬不同個(gè)體間Ig CIg C區(qū)也具有不區(qū)也具有不同抗原特異性標(biāo)志。同抗原特異性標(biāo)志。同種型同種型(Isotype)(Isotype)：同一種屬所有個(gè)體的：同一種屬所有個(gè)體的IgIg分子共有的抗原特分子共有的抗原特異性標(biāo)志。異性標(biāo)志。獨(dú)特型獨(dú)特型(Idiotype)(Idiotype)：同一種屬、同一個(gè)體來源的抗體分子，：同一種屬、同一個(gè)體來源的抗體分子，其免疫原性不盡相同。其免疫原性不盡相同。IgM、IgG (IgG1、IgG2和和IgG3)與相

18、應(yīng)的抗原結(jié)合后，與相應(yīng)的抗原結(jié)合后，可因構(gòu)象改變而使其可因構(gòu)象改變而使其CH3/CH2結(jié)構(gòu)域內(nèi)的補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)暴結(jié)構(gòu)域內(nèi)的補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)暴露，通過經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體系統(tǒng)；聚合的露，通過經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體系統(tǒng)；聚合的IgA可通過旁路可通過旁路途徑激活補(bǔ)體系統(tǒng)途徑激活補(bǔ)體系統(tǒng)。 二、二、C區(qū)的功能區(qū)的功能（一）激活補(bǔ)體一）激活補(bǔ)體第三節(jié)第三節(jié) 免疫球蛋白的功能免疫球蛋白的功能一、一、V區(qū)的功能：區(qū)的功能：識(shí)別并特異性結(jié)合抗原識(shí)別并特異性結(jié)合抗原The functions of Immunoglobulin(Complement activation)Specific antigen binding（二）二）通

19、過與通過與Fc受體結(jié)合發(fā)揮多種生物學(xué)效應(yīng)受體結(jié)合發(fā)揮多種生物學(xué)效應(yīng)1. 調(diào)理作用調(diào)理作用(opsonization)抗體的調(diào)理作用是指抗體的調(diào)理作用是指IgG抗體（特別是抗體（特別是IgG1和和IgG3）的）的Fc段與中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞上的段與中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞上的IgG Fc受體結(jié)合，從而增強(qiáng)吞噬細(xì)胞的吞噬作用。受體結(jié)合，從而增強(qiáng)吞噬細(xì)胞的吞噬作用。IgA也具有調(diào)理作用。也具有調(diào)理作用。Performing mutiple biological effects by binding with Fc receptors2. 抗體依賴的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用抗體依賴的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用(an

20、tibody dependent cell-mediated cytotoxicity, ADCC)IgG抗體與帶有相應(yīng)抗原的靶細(xì)胞結(jié)合后，表達(dá)抗體與帶有相應(yīng)抗原的靶細(xì)胞結(jié)合后，表達(dá)FcR的的NK細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞，可通細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞，可通過與過與IgG Fc段的結(jié)合，而直接殺傷被段的結(jié)合，而直接殺傷被IgG抗體包被抗體包被的靶細(xì)胞。的靶細(xì)胞。NK細(xì)胞是介導(dǎo)細(xì)胞是介導(dǎo)ADCC的主要細(xì)胞。抗的主要細(xì)胞。抗體與靶細(xì)胞上的抗原結(jié)合是特異性的，而表達(dá)體與靶細(xì)胞上的抗原結(jié)合是特異性的，而表達(dá)FcR的細(xì)胞其殺傷作用是非特異性的。的細(xì)胞其殺傷作用是非特異性的。 抗體分子與靶細(xì)胞表面抗原結(jié)

21、合后，可通過抗體分子與靶細(xì)胞表面抗原結(jié)合后，可通過FcFc段段與有與有FcRFcR的殺傷細(xì)胞結(jié)合，促進(jìn)對(duì)靶細(xì)胞的殺傷的殺傷細(xì)胞結(jié)合，促進(jìn)對(duì)靶細(xì)胞的殺傷作用。作用。（三）（三） 穿過胎盤和粘膜穿過胎盤和粘膜IgG穿過胎盤的作用是一種重要的自然被動(dòng)免疫機(jī)穿過胎盤的作用是一種重要的自然被動(dòng)免疫機(jī)制，對(duì)于新生兒抗感染具有重要意義。制，對(duì)于新生兒抗感染具有重要意義。在人類，在人類，IgG是唯一能通過胎盤的免疫球蛋白。是唯一能通過胎盤的免疫球蛋白。機(jī)制：機(jī)制：胎盤母體一側(cè)的滋養(yǎng)層細(xì)胞表達(dá)一種特異性胎盤母體一側(cè)的滋養(yǎng)層細(xì)胞表達(dá)一種特異性IgG輸送輸送蛋白，稱為蛋白，稱為FcRn。IgG可選擇性與可選擇性與F

22、cRn結(jié)合，從而轉(zhuǎn)結(jié)合，從而轉(zhuǎn)移到滋養(yǎng)層細(xì)胞內(nèi)，并主動(dòng)進(jìn)入胎兒血循環(huán)中。移到滋養(yǎng)層細(xì)胞內(nèi)，并主動(dòng)進(jìn)入胎兒血循環(huán)中。3. 介導(dǎo)介導(dǎo)型超敏反應(yīng)型超敏反應(yīng)IgE的的Fc段可與肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞表面的高親和力段可與肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞表面的高親和力IgE Fc受體（受體（FcRI）結(jié)合，促使這些細(xì)胞合成和釋放生）結(jié)合，促使這些細(xì)胞合成和釋放生物活性物質(zhì)，引起物活性物質(zhì)，引起型超敏反應(yīng)型超敏反應(yīng) 。Mediating type hypersensitivityCross placenta and mucous membrane第四節(jié)第四節(jié) 五類免疫球蛋白的特性與作用五類免疫球蛋白的特性與作用IgG

23、：* *脾、淋巴結(jié)漿細(xì)胞產(chǎn)生脾、淋巴結(jié)漿細(xì)胞產(chǎn)生* *IgG含量最多含量最多（占血清（占血清Ig總量的總量的75%85%）* *半衰期較長(zhǎng)半衰期較長(zhǎng)* *唯一通過胎盤唯一通過胎盤* *其他：其他：調(diào)理吞噬、調(diào)理吞噬、ADCC* *主要抗感染的抗體主要抗感染的抗體 Characteristics and Functions of the five classes of ImmunoglobulinIgA：*IgA1：血清中，：血清中，85%，單體，全身作用單體，全身作用* IgA2：外分泌液，：外分泌液，15%，雙體，局部作用雙體，局部作用IgM：*分子量最大分子量最大，19s*無鉸鏈區(qū)無鉸鏈區(qū)

24、*產(chǎn)生早產(chǎn)生早*調(diào)理、溶血比調(diào)理、溶血比IgG強(qiáng)強(qiáng)* B抗原識(shí)別受體抗原識(shí)別受體 正常人血清正常人血清IgD濃度很低，平均約濃度很低，平均約0.03mg/ml。IgD可在個(gè)體發(fā)育的任何時(shí)間產(chǎn)生?？稍趥€(gè)體發(fā)育的任何時(shí)間產(chǎn)生。5類類Ig中，中，IgD的鉸鏈區(qū)較長(zhǎng)，易被蛋白酶水解，故其半壽的鉸鏈區(qū)較長(zhǎng)，易被蛋白酶水解，故其半壽期很短（僅期很短（僅3天）。血清天）。血清IgD的確切功能仍不清的確切功能仍不清楚。楚。B細(xì)胞表面的細(xì)胞表面的mIgD可作為可作為B細(xì)胞分化發(fā)育成細(xì)胞分化發(fā)育成熟的標(biāo)志，熟的標(biāo)志，未成熟未成熟B細(xì)胞僅表達(dá)細(xì)胞僅表達(dá)mIgM，成熟，成熟B細(xì)細(xì)胞可同時(shí)表達(dá)胞可同時(shí)表達(dá)mIgM和和m

25、IgD，這種，這種B細(xì)胞也稱為細(xì)胞也稱為初始初始B細(xì)胞（細(xì)胞（naive B cell），活化的），活化的B細(xì)胞或記細(xì)胞或記憶憶B細(xì)胞的細(xì)胞的mIgD逐漸消失逐漸消失。IgD： 是正常人血清中含量最少的是正常人血清中含量最少的Ig，血清濃度極低，血清濃度極低，約為約為510-5 mg/ml。IgE為親細(xì)胞抗體，其為親細(xì)胞抗體，其CH2和和CH3功能區(qū)可與肥大細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞上的高親功能區(qū)可與肥大細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞上的高親和力和力FcRI結(jié)合，結(jié)合，引起引起I型超敏反應(yīng)。型超敏反應(yīng)。IgE：Artifical Antibody 大多數(shù)抗原分子具有多個(gè)抗原決定基或稱表位大多數(shù)抗原分子具有多個(gè)抗原

26、決定基或稱表位（epitope），每一種表位均可刺激機(jī)體一個(gè)），每一種表位均可刺激機(jī)體一個(gè)B B細(xì)胞克細(xì)胞克隆產(chǎn)生一種特異性抗體。傳統(tǒng)制備抗體的方法是用包隆產(chǎn)生一種特異性抗體。傳統(tǒng)制備抗體的方法是用包含多種抗原決定基的抗原物質(zhì)免疫動(dòng)物，從而刺激多含多種抗原決定基的抗原物質(zhì)免疫動(dòng)物，從而刺激多個(gè)個(gè)B B細(xì)胞克隆產(chǎn)生針對(duì)多種抗原表位的不同抗體。因細(xì)胞克隆產(chǎn)生針對(duì)多種抗原表位的不同抗體。因此，所獲得的免疫血清實(shí)際上是含有多種抗體的混合此，所獲得的免疫血清實(shí)際上是含有多種抗體的混合物，稱為多克隆抗體物，稱為多克隆抗體( (polyclonal antibody，pAb)。一、多克隆抗體：一、多克隆抗體

27、：(polyclone antibody, pAb)二、單克隆抗體：二、單克隆抗體：(Monoclonal antibody, McAb) 克隆是指由一個(gè)祖先細(xì)胞經(jīng)分化、增殖所產(chǎn)克隆是指由一個(gè)祖先細(xì)胞經(jīng)分化、增殖所產(chǎn)生的遺傳性狀完全相同的細(xì)胞系或細(xì)胞群。生的遺傳性狀完全相同的細(xì)胞系或細(xì)胞群。 由單由單一一B淋巴細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的、只作用于某一特定淋巴細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的、只作用于某一特定抗原決定簇的均一抗體稱為抗原決定簇的均一抗體稱為單克隆抗體單克隆抗體（Monoclonal antibody，簡(jiǎn)稱，簡(jiǎn)稱McAb）。）。 1975年，年，Kohler和和Milstein采用細(xì)胞融合技術(shù)，采用細(xì)胞融合

28、技術(shù)，使小鼠免疫脾細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合，形成使小鼠免疫脾細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合，形成雜交瘤細(xì)胞，后者即可產(chǎn)生只針對(duì)某一特定抗原雜交瘤細(xì)胞，后者即可產(chǎn)生只針對(duì)某一特定抗原決定簇的單克隆抗體。決定簇的單克隆抗體。雜交瘤技術(shù)制備單克隆抗體的主要步驟包括：雜交瘤技術(shù)制備單克隆抗體的主要步驟包括：（1 1）抗原制備）抗原制備（2 2）免疫動(dòng)物）免疫動(dòng)物（3 3）免疫脾細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的制備）免疫脾細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的制備 （4 4）細(xì)胞融合）細(xì)胞融合 （5 5）雜交瘤細(xì)胞的選擇培養(yǎng)）雜交瘤細(xì)胞的選擇培養(yǎng) （6 6）雜交瘤細(xì)胞的篩選）雜交瘤細(xì)胞的篩選 （7 7）雜交瘤細(xì)胞的克隆化）雜交瘤細(xì)胞的克隆化（

29、8 8）單克隆抗體的檢定）單克隆抗體的檢定 （9 9）分泌單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞系的建立）分泌單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞系的建立 （1010）單克隆抗體的大量制備）單克隆抗體的大量制備即保持單克隆抗體均一性、特異性強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn)，即保持單克隆抗體均一性、特異性強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn)，又能克服其為鼠源性的不足。又能克服其為鼠源性的不足。三、基因工程抗體三、基因工程抗體將部分或全部人源抗體的編碼基因克隆到真核或?qū)⒉糠只蛉咳嗽纯贵w的編碼基因克隆到真核或原核表達(dá)系統(tǒng)中，體外表達(dá)人原核表達(dá)系統(tǒng)中，體外表達(dá)人- -鼠嵌合或人源化鼠嵌合或人源化抗體；或轉(zhuǎn)基因至剔除自身抗體編碼基因的小鼠抗體；或轉(zhuǎn)基因至剔除自身抗體編碼基因的小鼠體內(nèi)，

30、主動(dòng)免疫誘生人源抗體。體內(nèi)，主動(dòng)免疫誘生人源抗體。人人- -鼠嵌合抗體、改型抗體、雙特異性抗體、鼠嵌合抗體、改型抗體、雙特異性抗體、小分子抗體及人源抗體等。小分子抗體及人源抗體等。Genetically engineering antibodiesA type of glycoprotein molecule, also called immunoglobulin (Ig), produced by B lymphocytes, that binds antigens, often with a high degree of specificity and high affinity.Anti

31、bodySummaryAn antibody is a flexible Y-shaped molecule composed of four polypeptide chains:two identical heavy chain and two identical light chains held together by inter-chain disulfide bonds.Base struction of IgThe Fab fragments involve the domains for antigen recognition and bindings, which the F

32、c fragments are functional domains.The heavy and light chains are composed of variable (V) and constant (C) regions. The variations in amino acid sequence are not equally distributed in the V region.The C region of the heavy chain determines the isotype and functional characteristics of the antibodi

33、es.Hypervariable regions(HVR), containing the antigen-binding sites of Ig, are also called the complementarity-determining regions(CDR) because the spatial structure precisely complements the antigenic determinants. Thus, CDR is important for specific antigen binding. Major Classes of Human Immunoglobuli