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1、專題一基因工程重組技術(shù)的基本工具教案案一、基因工程的基本工具.限制性核酸內(nèi)切酶“分子手術(shù)刀”()來源:主要是從 中分離純化出來的。()功能:能夠識別雙鏈分子的某種 ,并且使每一條鏈中 特定部位的兩個核苷酸之間的斷開。(一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列,并且能在特定的切點上切割分子,因此具有 性。)()結(jié)果:經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的片段末端通常有兩種形式:和。.連接酶一一“分子縫合針”根據(jù)連接酶的來源不同,可以將它分為兩類:一類是從分離得到的,稱為 E coli連接酶。E coli連接酶只能將 _連接起來,不能將雙鏈片段平末端之間進行連接。另一類是從 分離出來的,稱為連接酶。連接酶既可以“縫合”
2、雙鏈片段互補的 ,又可以“縫合”雙鏈片段的 ,但連接之間的效率比較低。.基因進入受體細胞的載體一一“分子運輸車”()基因操作過程中使用載體兩個目的:一是用它作為運載工具,將目的基因轉(zhuǎn)移到宿主細胞中去;二是利用它在宿主細胞內(nèi)對目的基因進行大量的復(fù)制。()載體具備的條件: 能在受體細胞中 。 具有一至多個,供外源片段插入。 具有,供重組的鑒定和選擇。()最常用的載體是,它獨立于擬核之外,是一種有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀分子。()其它載體:和等。二、基因工程的概念基因工程是指按照人們的愿望,進行嚴(yán)格的設(shè)計,通過體外 和_,賦予生物以新的遺傳特性,創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。由于基因工
3、程是在 水平上進行設(shè)計和施工的,因此又叫做 【課時訓(xùn)練】.基因工程要用到的操作工具限制性核酸內(nèi)切酶,主要存在于原核生物中,一種限制 酶只能識別一種特定的核苷酸序列,并且能在特定的切點上切割分子,這體現(xiàn)了酶的().高效性具有多樣性 .專一性催化活性受外界條件影響、如圖所示,兩個核酸片段在適宜條件下,經(jīng)酶的催化作用,發(fā)生下述變化。則酶是A-C-GA-A-T-T-OC-T1II11 H 1卜卜Atta a6-d-AX酶VA-OD-TT 心;-TII1t11db1”卜C-clt-卜心心C-卜人連接酶聚合酶聚合酶限制酶.如圖為分子的切割和連接過程:()是一種酶,其識別序列是 ,切割點是與之間的鍵。切割結(jié)果產(chǎn)生的片段末端形式為 。()不同來源片段結(jié)合, 在這里需要的酶應(yīng)是 連接酶,此酶是通過在與之間形成鍵,而起“縫合”作用的。還有一種連接平末端的連接酶4 八化 I Ft * 4*14| C T T扎彳C T舟也心RT1 ( A A T T Cr<T | A A T T C )fC TA A 1
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