原發(fā)性膽汁性肝硬化特征性自身抗體研究進展-論文

1、518臨床檢驗雜志 (電子版 2014年 3月第 3卷第 1期 Clinical Laboratory Journal(ElectronicEdition , Vol.3, No.1, Mar ,2014論 著原發(fā)性膽汁性肝硬化特征性自身抗體研究進展譚延國,閆惠平,高祖華 1 譚延國,在讀博士,副教授,首都醫(yī)科大學(xué)附屬復(fù)興醫(yī)院檢驗科副主任,主要從事 臨床免疫學(xué)檢驗和實驗診斷學(xué)相關(guān)研究。摘要 原發(fā)性膽汁性肝硬化(PBC 是不明原因?qū)е碌母蝺?nèi)小膽管的進行性破壞,最后可導(dǎo)致肝硬化、 肝衰竭。 AMA(抗線粒體抗體 在 PBC 的診斷中具有獨特的地位, 是疾病診斷標志之一。 但是, PBC 中尚有 1

2、0%左右的個體 AMA 陰性,在這部分人群中,有將近半數(shù)具有特征性抗核抗體的檢出。本文 就 PBC 具有疾病特征性的自身抗體與 PBC 的關(guān)系作一綜述。關(guān)鍵詞 原發(fā)性膽汁性肝硬化;自身抗體;線粒體抗體; Sp100; gp210中圖分類號R446.62文獻標志碼A文章編號2095-2775(2014 01-0518-06Pr ogr ess of the r ela tionship between cha ra cter istic autoantibodies a nd primar y bilia ry cirr hosisAbstractPrimary biliary cirrhosi

3、s is a chronic disease with progressive destruction of intrahepatic bileducts by unknown etiology. The ultimate clinical outcome of PBC is liver cirrhosis and failure. Anti-mitochondrial antibody (AMAisunique in the diagnosis of PBC, because it is one of the criterion of the disease. There are aroun

4、d 10%PBC patients whose AMAs are negative, and among those patients, about a half are positive for specific anti-nuclear antibodies. We review the latest advances on the relationship between characteristic antibodies and PBC in this article.Keywor dsprimary biliary cirrhosis; autoantibodies; anti-mi

5、tochondrial antibodies; Sp100; gp210基金項目 基金資助:首都衛(wèi)生發(fā)展專項基金 (2011-2018-05作者簡介 譚延國,在讀博士,主任檢驗技師。主要從事檢驗醫(yī)學(xué)和實驗診斷學(xué)研究 作者單位 100038北京首都醫(yī)科大學(xué)附屬復(fù)興醫(yī)院檢驗科 (譚延國 ; 100069北京首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京佑安醫(yī)院感染與免疫研究中心(閆惠平 ; 100069北京首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京佑安醫(yī)院病理科(高祖華通訊作者 閆惠平:y 536。高祖華:z 原 發(fā) 性 膽 汁 性 肝 硬 化 (primary biliary cirrhosis , PBC 是自身免疫性肝病中最為常見的 一種

6、膽汁淤積性肝臟疾患,以中年女性好發(fā),慢 性、進程緩慢,最終發(fā)展為肝硬化、肝衰竭、需 要肝移植 1。 在大于 40歲的女性之中, 該病發(fā)病 率估計為 1/10002。與大多數(shù)自身免疫疾病類似, PBC 的發(fā)病機 制尚不明確,環(huán)境因素作用于遺傳易感性個體是 重要的原因之一 3。 T 細胞介導(dǎo)的細胞免疫據(jù)報 道在 PBC 的發(fā)病機制中發(fā)揮了主要作用, 而陸續(xù)的研究成果顯示 B 細胞介導(dǎo)的體液免疫在其中也 扮演了重要的角色,逐漸引起關(guān)注。而且使用最 先進的檢測方法,抗線粒體抗體及其 M2亞型抗 體(AMA-M2可以在將近 95%的 PBC 患者檢 測出來, 是最直接并具有高度特異性的自身免疫 標志物,

7、 為國際公認診斷標志之一。 但遺憾的是, 至今尚未證實 AMA 與 PBC 的發(fā)生和臨床進程具 有相關(guān)性,以及血清 AMA 陽性的動物模型并非 總是發(fā)展為 PBC 樣肝損傷, AMA 在 PBC 的免疫 病理和發(fā)病機制中所起的作用仍是不清楚的。 雖hp u-hua.gao mcgill.ca臨床檢驗雜志 (電子版 2014年 3月第 3卷第 1期 Cli nical Laboratory Journal(Electronic Edition , Vol.3, No.1, Mar , 2014519然多數(shù)研究支持在觀察期間 AMA 水平不受治療 的影響的觀點 4,但由于 AMA-M2在 PBC

8、診斷 中的獨特地位, 以及 AMA-M2陰性的 PBC 患者 的存在, 對 AMA 以及其他 PBC 特異性自身抗體 進行深入的認識和探討便顯得尤為必要。因此, 本文就此問題作一綜述。1PBC 相關(guān)的自身抗體及其靶抗原自身抗體的檢出是發(fā)現(xiàn)和正確診斷 PBC 的 重要手段之一,因 PBC 患者也可以與干燥綜合 征(SS 、自身免疫性甲狀腺炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié) 炎、乳糜瀉等自身免疫性疾病并存, 12%20%的 PBC 患者有自身免疫性肝炎 (AIH 的特征 5。 所以 PBC 中檢測自身抗體具有重要的診斷和鑒 別診斷意義。Berg 等發(fā)現(xiàn), 多數(shù) PBC 特異性的 AMA 在 體外能夠結(jié)合到胰蛋白酶敏

9、感的線粒體內(nèi)膜的 抗原上, 這些抗原可以用 FOF1-ATPase 從所有被 測試的器官、 甚至包含真菌共純化而來。 由于心 磷 脂(梅毒 相關(guān) 的線 粒體 抗原 已 被命 名為 AMA-M1,這些抗原此后被命名為 AMA-M2。 這個小組確定了一套 AMA 靶抗原分類體系, 包 括 M1-M9。同 M2類似, M4(亞硫酸鹽氧化酶 、 M8(未被鑒定的胰蛋白酶敏感抗原以及 M9 (糖原磷酸化酶也可以特異性的同 PBC 血清 結(jié)合。 Berg 后來鑒定了 M4抗原, 證明為丙酮酸 脫氫酶復(fù)合體的一個亞單位 PDC-E16,最近又 鑒定出 FOF1-ATPase 亞 單位為 AMA 的 靶抗原

10、8。除了 M2外,從獨立研究機構(gòu)得到的結(jié)果未 能夠展示其他抗原的任何診斷相關(guān)性 7。在 AMA 及其靶抗原的性質(zhì)得以 闡明的同 時,另外三個 PBC 相關(guān)的抗核抗體(ANA 熒 光模型被鑒定出來:細胞核多點型、 核膜型和著 絲點型。 細胞核多點型所對應(yīng)的靶抗原是 Sp100、 Sp140、 PML(早幼粒細胞白血病核體蛋白,但 在絕大多數(shù)組織都存在 、 NDP52以及 SUMO (小 的泛素樣調(diào)控制子 ;而細胞核核膜型抗體則針 對的是 gp210和 nucleoporin p62(核孔蛋白 p62 抗原。 這兩種 ANA 類型都能在至少 30%的 PBC 患者中發(fā)現(xiàn),并且顯示了很強的疾病特異性

11、 7。 在缺乏 AMA 、 而臨床又高度懷疑 PBC 時, 它們 的出現(xiàn)可用作 PBC 的輔助診斷。盡管 Sp100被 認為是 PBC 特異性的,但于 AIH (自身免疫性 肝炎 、系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE 、干燥綜合征等 疾病也可檢出。 gp210和著絲點型抗體可在肝衰 竭和門脈高壓患者中較多出現(xiàn) 4。部分 PBC 患者有可能重疊其他自身免疫性 肝病(AILD ,如 AIH 或原發(fā)性硬化性膽管炎 (PSC ,稱為自身免疫性肝病重疊綜合征。常 規(guī)血清學(xué)檢查還可以檢測其他的自身抗體 9。參 照國際自身免疫性肝炎小組(IAIHG 發(fā)布的評 分系統(tǒng),以及由美國肝病研究會(AASLD 發(fā) 布的關(guān)于 AI

12、H 的建議,同 AIH 特別相關(guān)的自身 抗體有助于 AILD 患者診斷分類。 如抗 -肌動蛋白 (anti-F-actin 、 抗 -肝 腎 微 粒 體 -1型 (anti-LKM-1 、抗 -肝細胞溶質(zhì)抗原(anti-LC1 以及抗 -可溶性肝抗原 (anti-SLA 等。 PBC 患者 檢測到以上自身抗體是很強烈地提示其有重疊 AIH 的可能性。 不過,文獻也有報道 AMA 在將 近 5%的 AIH 患者存在, 而這些 AIH 患者并無其 他膽道異常的特征。 抗平滑肌抗體 (SMA 能夠 以很大比例存在于 PBC 患者, p-ANCA 不僅存 在 于 PSC , 而且也 以一定 比例存 在

13、于 PBC 和 AIH 。需要強調(diào)的是,重疊綜合征必須結(jié)合臨床 和其他生化、 免疫及病理特點做出診斷,臨床和 組織學(xué)的真正重疊是很少見的, 很難定義, 而且 重疊綜合征與單一疾病的治療方式也是不同的 10。2AMA-M22.1AMA-M2的靶抗原AMA-M2的靶抗原于 20世紀 80年代被鑒 定為 2-氧酸脫氫酶復(fù)合體的組份, 這些酶催化酮 酸的氧化脫羧,都參與了線粒體生物產(chǎn)能過程。 采用 Western blot 方法可以發(fā)現(xiàn)它具有 5個靶抗 原的條帶:M2a (70-74kDa 、 M2b (56kDa 、 M2c (45-48kDa 、 M2d (36-41kDa 、 M2e (31-3

14、6kDa 。 M2a 是主要的靶抗原,被鑒定為 丙酮酸脫氫酶的 74kDa 的 E2亞單位 (PDC-E2 。 隨后的研究顯示, 其余的靶抗原為 PDC 的 E3結(jié) 合蛋白 (E3BP-即 PDC-X (M2b 、 2-酮戊二酸脫 氫 酶 復(fù) 合 體 (2-oxoglutarate dehydrogenase complex, OGDC 的 E2亞單位、支鏈 2氧酸脫 氫 酶 復(fù) 合 體 (branched-chain 2-oxoacid dehydrogenase complex, BCOADC, M2c 以 及520臨床檢驗雜志 (電子版 2014年 3月第 3卷第 1期 Clinical

15、 Laboratory Journal(ElectronicEdition , Vol.3, No.1, Mar , 2014PDC-E1和 E1亞單位 (M2d, e 。 而且 BCOADC 的 E1亞單位也被報道為 PBC 患者自身抗體的 靶抗原。2.2AMA-M2對靶抗原的識別Anti-M2識別所有三種 2-氧酸脫氫酶復(fù)合體 中高度保守的與硫辛?；?lipoyl 結(jié)合的 E2亞 單位, 較低程度的與 E1和 E3亞單位結(jié)合。 連接 到 AMA 表位上的硫辛酸殘基對抗體的結(jié)合是必 須的 11。 高達 90%的 anti-M2直接指向 PDC-E2、 而 50%的 同 OGDC-E2和 BC

16、OADC-E2、 同 PDC-E1和 PDC-E1發(fā)生反應(yīng)的概率更小。 同時 結(jié)合到三種 E2亞單位的只見于少于 50%的 PBC 患者。更有趣的是,組織學(xué)證實的 PBC 病例, 有 4%13%只與 BCOADC 或 OGDC 反應(yīng), 而不 與 PDC-E2反應(yīng) 。所有 的與 PDC-E2起反應(yīng) 的 PBC 血清, 顯示出同 PDC-E3結(jié)合蛋白有明顯的 交叉反應(yīng)。 幾個關(guān)于 PDC-E2的研究已經(jīng)繪制出 了主要的抗原表位區(qū)域, 指向了內(nèi)部的硫辛酸結(jié) 合區(qū)域 -E2亞單位最保守的部分以及活性中心。 來自 PBC 患者的、 PDC-E2特異性的 anti-M2, 在體外能夠抑制 PDC-E2的酶

17、活性。 一些 PDC-E2的外部區(qū)域也是一些病例自身抗體指向的靶位。 表 1和表 2為 PBC 常見的特異性抗體及其對應(yīng) 的靶抗原。表 1PBC 常見自身抗體的靶抗原和抗體 3PBC 患者中特征性抗體對應(yīng)的靶抗原線粒體抗原 (>95%2-OADC-E2亞單位 PDC-E2 OGDC-E2 B COADC-E2 PDC E3BPPDC-E1細胞核抗原(50% 核孔復(fù)合體 Gp210Nucleoporin62多核點 Sp100PML cells 表 2PBC 中 ANA 的常見類型及檢出率在 AMA 陽性 PBC 中的檢出率 (% 在 AMA 陰性 PBC 中的檢出率 (%ANA 陽性 47

18、-4868-85多核點 12-2438-41核 膜型 (perinuclear/rimlikemembranous 6-1431-50斑點型(speckled 2441-46著絲點抗體 14-2014-23Anti-Sp10024-3138-54Anti-gp21016-1815-45注 :BCOADC, branched-chain 2-oxo-acid dehydrogenase complex; E3BP, E3-binding prot ein;gp210, glycoprotei n 210; OGDC, oxoglutarate dehydrogenase complex; s p

19、100, nuclear body speckl ed 100kDa; PDC, pyruvate dehydrogenas e complex; PML, promyelocytic leukemia;2-OADC, 2-oxo-acid dehydrogenase complex 。臨床檢驗雜志 (電子版 2014年 3月第 3卷第 1期 Cli nical Laboratory Journal(Electronic Edition , Vol.3, No.1, Mar , 20145212.3AMA-M2的臨床意義高滴 度的 IgG 型 anti-M2約 在 90%的 PBC 患者中被發(fā)

20、現(xiàn),具有 PBC 的確定診斷價值,但 同 PBC 的進展或疾病分期的相關(guān)性報道不一 12; Anti-M2可以在明顯的臨床癥狀出現(xiàn)前幾年便可 被檢測出來,并且被視為 PBC 發(fā)展的預(yù)測指標 12。在一些 報道中, IgA 型和 IgG3型 anti-M2被描述為或者同組織破壞或疾病進程的嚴重程 度相關(guān)。然而無論 IgA 型和 IgG3型、以及 IgM 型 AMA , 鑒于 PBC 被臨床認識的局限性, 該自 身抗體在臨床實驗室一般未視為常規(guī)檢測項目。 AMA-M2抗體檢測有助于 PBC 的早期發(fā)現(xiàn) 或預(yù)警。最初并無膽汁淤積性肝病的 AMA-M2陽性個體,大多數(shù)隨著時間的推移發(fā)展為 PBC 的縱

21、向研究也表明, 這些自身抗體的確對發(fā)展演 化 為 PBC 是 很早 期的、 很特 異性 的指 標 1。 AMA-M2同病理生理的關(guān)聯(lián)性仍不清楚 13,因 為這些抗體在正常人群有將近 1%的流行率,而 PBC 在世界 各地的流行率僅為 <0.1%。而且, AMA 將很典型的重現(xiàn)于經(jīng)過移植的 PBC 患者, 但僅有少數(shù)個體有重新出現(xiàn)的 PBC 組織學(xué)特征。 對 大樣 本的 無癥 狀的 、沒 有初 始膽 汁淤 積的 AMA-M2陽性個體的前瞻性研究將是有提示作 用的, 患者需要被隨訪二十或三十年, 但尚無此 類研究。3PBC 的自身抗體與疾病AMA 及 PBC 有關(guān)的 ANA 等自身抗體的發(fā)

22、現(xiàn),使 PBC 的早期診斷成為可能。因此,在許 多情況下, 血清學(xué)陽性有助于 UDCA (熊去氧膽 酸的及時使用。在 PBC 的早期階段, UDCA 保護處于炎癥狀態(tài)的膽管細胞不受膽酸的毒性 作用, 以及恢復(fù)肝細胞分泌功能, 導(dǎo)致非移植患 者生存期的延長。在臨床懷疑 PBC 的情況下, 準確和及時的自身抗體檢測是至關(guān)重要的。 自身抗體陽性高度的診斷價值已經(jīng)被兩個 共識所強調(diào),即美國肝病研究協(xié)會(AASLD 和歐洲肝病研究會(EASL 14。疾病相關(guān)的自 身抗體、 更特異的 AMA , 是確定診斷 PBC 的三 個標準之一。 當(dāng)然在 AMA 陰性的情況下臨床懷 疑 PBC 也是可能的,此時要綜合

23、考慮其他兩個 標準:即反應(yīng)膽汁淤積的酶(ALP 和肝臟組織 病理學(xué)診斷。由于常規(guī)檢查中被診斷為 PBC 患者數(shù)量的 增多,而且 PBC 的診斷絕大多數(shù)受自身抗體檢 測結(jié)果的支持,所以自身抗體對診斷 PBC 的重 要性顯得更為突出。 總之,患者通常具有膽管上 皮細胞破壞所致較高水平的膽固醇、 堿性磷酸酶 (ALP 、以及-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶(-GT ,也伴有 多克隆 B 細胞激活導(dǎo)致的 IgM 增高。自身抗體 血清學(xué)陽性和膽汁瘀滯的證據(jù)而不是肝細胞破 壞 (AST<5倍上限 ,提示 PBC 而不是 AIH 或藥 物誘導(dǎo)的肝炎。 PBC 患者經(jīng)常出現(xiàn)非特異的癥 狀, 如瘙癢和疲勞,由于以上原因,患

24、者經(jīng)常到 皮膚科、內(nèi)分泌、神經(jīng)科或風(fēng)濕科首先就診。 需 要注意的是:AMA-M2在急性肝衰竭和藥物誘 導(dǎo)的膽汁淤積病例中也可被檢出, 但通常是短暫 的,然而其 AMA 的存在具有重要的診斷價值、 臨床和致病意義。 AMA 在后者人群中的解釋應(yīng) 該根據(jù)臨床特點和個體關(guān)鍵的臨床病史綜合考 慮 15-16。4PBC 相關(guān)自身抗體的檢測技術(shù)和試劑最古老的方法檢測 AMA 是補體結(jié)合試驗, 這只是一個適度可重復(fù)性的試驗, 已被其它現(xiàn)代 技 術(shù) 取 代 。 間 接 免 疫 熒 光 法 (indirect immunofluorescence, IIF 檢測 AMA 基本 依據(jù) Deborah Doniac

25、h 等于 1960年建立的方法進行, 使用富含線粒體的組織切片, 如肝臟、 腎臟和胃 組織作為檢測基質(zhì)。 IIF 被認為是檢測 AMA 和 其它 AILD 相關(guān)的抗體首選的方法。 當(dāng)由經(jīng)驗豐 富 的 專 家 進 行 實 驗 操 作 時 , 其 敏 感 度 達 到 75%95%。AMA 陽性表現(xiàn)為明亮一致的顆粒性細胞質(zhì) 熒光,主要是遠端腎小管上皮細胞、胃壁細胞、 以及心 肌細胞。近些年, Hep-2細胞這種檢 測 ANA 的標準基質(zhì), 也被用來檢測 AMA 。 但為了 恰當(dāng)?shù)膮^(qū)分 PBC 出現(xiàn)的 AMA 與 ANA ,平行使 用 Hep-2細胞和嚙齒類組織是更好的。 同其他技 術(shù)相比, IIF

26、法可以同時測定多種自身抗體,協(xié) 助 AILD 的鑒別診斷。 然而 IIF 也有一定局限性, 例如, 需要有經(jīng)驗的專家觀察組織細胞中的熒光 模式, 費時費力,也容易產(chǎn)生個體間判讀誤差或 錯誤,如將 anti-LKM-1誤判為 AMA 。當(dāng) 2-氧酸脫氫酶復(fù)合體作為 AMA-2的靶抗 原確定以后, 開發(fā)一系列的固相檢測方法已成為522臨床檢驗雜志 (電子版 2014年 3月第 3卷第 1期 Clinical Laboratory Journal(ElectronicEdition , Vol.3, No.1, Mar , 2014可能。如微量滴定板 ELISA 、膜 ELISA (如斑點 法或條帶

27、法 、以及以熒光珠為基礎(chǔ)的試驗方法 17,能達到 95%的敏感性,和 >98%的特異性。 這些方法已經(jīng)和正在被開發(fā)為商用試劑盒廣泛 使用。 這些商用試劑盒可能使用來自豬或牛心的 PDC 、 或重組表達的人 E2亞單位的混合物、 包括 所 有 三 種 E2亞 單 位 的 最 新 的 抗 原 (designer antigens 、或者由純化的 PDC-E2和三種 E2重組 抗 原 的 混 合 物 構(gòu) 成 的 檢 測 系 統(tǒng) (anti-M2-3E ELISA 18。通常,使用純化抗原的方法,其敏 感性可以達到 85%,而得分最高的檢測方法為使 用最新的包含三種 E2亞單位的抗原(MIT3

28、。 然 而 僅 依 賴 重 組 的 E2抗 原 亞 單 位 或 者 designer antigens 可能 導(dǎo)致 假陰性 ,它 們沒能 考慮 針對 PDC-E1亞單位的抗體 19。 anti-M2-3E ELISA 可 能達到 93.6%的診斷敏感性,而 MIT3ELISA 、 純 化 PDC ELISA 、 IIF 法則 敏感性分 別為 91.3%、 83.8%和 87.3%,而特異性都能達到 98.8%。使用 免疫印跡技術(shù)顯示, anti-M2-3E ELISA 陽性而與 純化 PDC 不反應(yīng)的血清,可以識別其他兩種 2-氧 酸脫氫酶復(fù)合物的重組的 E2亞單位; 而且那些同 MIT3無反

29、應(yīng)的血清則可能與 PDC 亞單位 E1或 E1起反應(yīng)。最近有些廠商又開發(fā)出組合的檢測方法, 聯(lián) 合使用 PBC 相關(guān)的 ANA 靶抗原、 AIH 相關(guān)的自 身抗原、 2-氧 -酸脫氫酶復(fù)合體等作為檢測抗原。 這些檢測試劑盒或者被用作多特異性微量反應(yīng) 板 ELISA 的過篩試驗, 用于協(xié)同檢測 anti-Sp100, anti-gp210以及 AMA 20(總體的敏感性為 83.8%, 特異性為 94.7% ?；蛘呤褂枚鄥?shù)的膜 ELISA 法 , 可 以 同 時 檢 測 PBC 特 異 性 的 抗 體 , 如 AMA-M2、 anti-Sp100、 anti-gp210,以及 AIH 特 異的

30、自身抗體如 anti-SLA , anti-LKM1, anti-LC1以及其他參數(shù)。 這些多參數(shù)檢測方法的診斷效能 已經(jīng)被單個或多中心的研究所評估, 報告稱多參 數(shù)測定總體上使 PBC 相關(guān)的抗體更加容易的被 檢測出來。另外,還有用線粒體提取物或純化的 PDC 為基礎(chǔ)的 Western blot 方法,這些方法主要是為 了檢測個體 AMA 的抗原特異性,或者為了某些 研究的特殊目的。5臨床實踐中 PBC 患者自身抗體檢測的策略 間接免疫熒光法(IIF 目前公認仍是檢測 ANA 、 AMA 等自身抗體的首選方法,是自身抗 體的初篩試驗, 也可以檢測多種 AILD 相關(guān)的自 身抗體,在臨床實驗室

31、被廣泛使用。因為 IIF 可 以聯(lián)合其他的組織底物 (腎、 胃、 肝 以及 HEp-2細胞, 以及人類乙醇固定的中性粒細胞,在多數(shù) 情況下, 可以準確的鑒定 AMA 、 ASMA , ANCA 等 AILD 相關(guān)的特異性指標,可以由 ANA 特征 性熒光模式發(fā)現(xiàn)對 PBC 具有診斷價值的自身抗 體。但僅僅采用 IIF 法,可能有少數(shù) PBC 患者 AMA 陰性。 如果同時使用包含三種 E2抗原的新 型抗原分析系統(tǒng)平行檢測 AMA ,可以顯著地減 少所謂的血清學(xué)陰性的 PBC 病例。最近的研究 顯示, E2designer antigen 在 ELISA 中的使用將 PBC 中 AMA 陰性的比

32、例降低到 7%,而 IIF 中 這一比例可能為 13%。以往有研究把 AMA 及 anti-M2陰性、血清 ANA 高滴度陽性的 PBC 稱為自身免疫性膽管炎 (autoimmunecholangitis , AIC ,但 研究顯 示, AIC 并不是一類有別于 PBC 而單獨的疾病,雖 然其 ALP 、總膽紅素、總膽固醇和血清 IgM 水 平比 AMA-M2陽性患者水平低,但其平滑肌抗 體陽性率更高。 免疫印跡法檢測 AMA-M2發(fā)現(xiàn), AIC 患者 IgA 、 IgM 、或 IgA 和 IgM 陽性患者分 別檢出 13%、 17%和 22%。而 IgG 類 anti-M2在 所有 PBC

33、中均檢出, 且 48%的 AIC 患者也陽性。 而組織學(xué)顯示其多為早期階段的 PBC (78% , 所以對于某些患者,為了檢出 anti-M2,可以使 用免疫 印跡法同時檢測 IgM 、 IgG 和 IgA 型的 anti-M2抗體 21。此外,在 PBC 血清學(xué)檢查中,還需要包含 以 下 同 自 身 免 疫 肝 病 相 關(guān) 的 自 身 抗 體 : anti-Sp100、 anti-PML 和 anti-gp210, anti-SLA 以 及 anti-LC-1。 免疫印跡法檢測自身抗體雖然敏感 性較低, 某些自身抗體檢測結(jié)果與其他方法比較 有一定誤差, 但其具有操作簡便、 經(jīng)濟實用等優(yōu) 點,

34、 依然有廣泛的使用空間。 如果以上針對 PBC 的抗體均為陰性,當(dāng)沒有 PBC 組織學(xué)特征同臨 床相符時, PBC 診斷可以被排除。 需要尋找其他膽汁淤積的潛在原因。 如果所有的自身抗體結(jié)果 都是陰性,但有膽汁淤積的證據(jù),并符合 PBC臨床檢驗雜志 (電子版 2014 年 3 月第 3 卷第 1 期 Cli nical Laboratory Journal(El ectronic Edition， Vol.3， No.1 ，Mar ，2014 523 的組織學(xué)特征，也應(yīng)考慮 PBC， 可進行相應(yīng)的治 療以觀察進展?？傊?，實驗室應(yīng)針對自身抗體檢 測的特征性科學(xué)合理地選擇檢測方法， 實驗室應(yīng) 該報

35、告檢測 AMA 和 ANA 的方法學(xué)，以利于臨 床醫(yī)師正確的評估檢驗結(jié)果。 【參考文獻】 1 Bogdanos DP, Komorowski L. Disease-specific aut oanti bodies in primary biliary cirrhosis. Cl in Chim Acta. 2011, 412(7-8: 502-512. 2 Lindor KD, Gershwi n ME, Poupon R, et al. Primary bili ary cirrhosis. Hepatology, 2009, 50(1: 291-308. 3 Hirschfield GM

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