五豐液相培訓技巧小結

1、五豐液相培訓小結上海彩邇文生化科技有限公司目錄： 1.液相使用注意事項 2.泵故障及處理 3.泵的維護 4.檢測器故障及處理 5.流通池的清洗維護 6.過濾頭的清洗 7.小結安全注意事項1.1.有機溶劑易揮發(fā)，務必使環(huán)境保持通風，適時打有機溶劑易揮發(fā)，務必使環(huán)境保持通風，適時打開排風系統(tǒng)，謹防高濃度有機相氣體聚集對人體產開排風系統(tǒng)，謹防高濃度有機相氣體聚集對人體產生危害。生危害。2.2.處理溶劑時戴防護眼鏡，以防溶劑濺到眼睛處理溶劑時戴防護眼鏡，以防溶劑濺到眼睛里，如溶劑飛濺到皮膚上，應立即用大量清水里，如溶劑飛濺到皮膚上，應立即用大量清水沖洗，嚴重的情況應立即就醫(yī)。沖洗，嚴重的情況應立即就醫(yī)

2、。儀器注意事項3.管路中有使用PEEK樹脂材料處，盡量不要使用下列流動相：二氯甲烷，三氯甲烷，四氫呋喃，丙酮，二氯乙酸，二甲基亞砜等，此類流動相可以使樹脂部件變脆，引起管路斷裂和流動相泄露。（如果采用丙酮含量低于0.5%的水溶液作為流動相，則影響不大。）4.鹵離子可以腐蝕不銹鋼管路材料，因此應盡量避免諸如HCL,KCL,NaCL，NH4CL等，如必須使用，則分析結束后立即用去離子水沖洗整個管路不小于1小時。（沖洗時不要連接色譜柱）5.流動相使用前需要脫氣，否則在溶劑混合或改變溫度、壓力時易產生氣泡，從而使輸液泵產生脈動，檢測器產生噪音。進樣針不要弄錯6.液相進樣針為平頭進樣針（外徑0.75mm

3、），切記不能錯拿尖頭進樣針，否則會損壞進樣閥定子密封，造成不必要的成本。含緩沖鹽流動相的問題7.使用含緩沖鹽溶液的流動相分析前，先用10%甲醇水溶液（或乙腈水溶液），1ml/min的流速，將保存在甲醇（或者乙腈）中的反相色譜柱沖洗30分鐘，使反相色譜柱充滿10%的甲醇水溶液（或者乙腈水溶液），再更換含有緩沖鹽溶液的流動相，穩(wěn)定后，做樣品。做完樣品后，用10%甲醇水溶液（或者乙腈水溶液），泵的流速：1ml/min沖洗色譜柱30分鐘。再用甲醇（或者乙腈）沖洗系統(tǒng)，并將反相色譜柱和系統(tǒng)保存在甲醇（或者乙腈）中。清洗時間至少為30分鐘。高壓恒流泵故障的簡高壓恒流泵故障的簡易診斷與處理方法易診斷與處理方

4、法儀器開機無反應，顯示屏不亮檢查電路，電線，接頭，保險絲更換顯示屏或返修。 泵易出問題的地方：帶柱后清洗裝置泵無壓力1.無液體出來是否走空？觀察泵頭管路是否有大氣泡，若有則針筒抽液； 入口單向閥紅寶石小球與球座之間有異物，使得小球無法正?；芈淝蜃驘o法與球座嚴合，導致液體全部回流，此時清洗單向閥即可； 吸濾頭或泵頭管路堵，可以斷開管路，儲液瓶高放，看液體是否暢 快流出，若堵，則純水超聲清洗或換。2.泵頭漏液、接頭漏液、排空閥未關擰緊至不漏或更換接頭、管路，關排空閥，檢查泵密封圈是否損壞。 泵 頭吸入閥寶石球與球坐粘連，吸入閥不能導通活塞向后運動泵 座排出閥關閉液流方向泵吸液過程有故障情況： 吸

5、入閥寶石球粘連泵腔體內沒有液體流入寶石活塞桿密封圈 排出閥導通泵 座寶石活塞桿密封圈吸入閥寶石球與球座之間有雜質，液體反向泄漏液流方向泵排液過程有故障情況： 寶石球與球座之間有雜質反向泄漏液流方向反向漏液方向活塞向前運動泵壓力低壓力偏低小漏，找出漏點，擰緊； 密封圈或柱塞桿磨損，更換密封圈、柱塞桿，無操作經(jīng)驗的可考慮返修； 雙泵的情況下可考慮是否某個泵無壓力，A調100%看壓力情況，再換B調100%看壓力情況。壓力低且不穩(wěn)，流速不準泵頭或管路內有氣泡，逐段排查，排氣泡；單向閥密封不嚴，清洗單向閥；密封圈或柱塞桿磨損，更換密封圈、柱塞桿或返修?？捎昧客埠陀嫊r器測量實際流速。 泵 頭吸入閥關閉泵

6、座寶石活塞桿密封圈排出閥導通液流方向（壓力下降）密封圈泄漏產生的故障現(xiàn)象：密封圈與寶石桿之間存在間隙，導致漏液和壓力下降泵腔體活塞向前運動泵壓力高壓力不穩(wěn)梯度壓力變化為正?，F(xiàn)象。泵頭、單向閥或系統(tǒng)內有氣泡，排氣泡、流動相脫氣。單向閥損壞，更換。泵密封損壞，更換。壓力在一定范圍內上升下降，排除其他原因后，考慮阻尼器失靈，聯(lián)系廠家確認后，返修。泵的日常維護 在使用有緩沖鹽溶液的流動相后，需要對柱塞桿、密封圈等部件及時清洗，因為在柱塞桿來回運動過程中不可避免地會滲透出部分緩沖溶液，液體揮發(fā)干后或遇到有機相會析出，導致柱塞桿和密封圈磨損。所以配有自動柱后清洗功能的儀器則通過電磁閥調節(jié)清洗流量，用10%

7、異丙醇水溶液（0.45um濾膜過濾過）進行清洗，若是手動清洗，則分析結束后，用注射器吸取30ml的10%異丙醇水溶液注射清洗兩次，以延長元件使用壽命。 如果一定需要拆下泵清洗，則需要將泵頭內的柱塞桿縮進去再拆泵，以保護柱塞桿，拆時，手指按著泵頭，左右螺絲對稱擰松，輕輕拿下，清洗完成后，原樣裝回，再同樣操作拆另外一個泵。 超聲清洗單向閥時，請豎直超聲，否則有超散單向閥的風險。 柱塞桿密封圈是高壓恒流泵易損件之一，在使用中發(fā)現(xiàn)實測流量低于設定值，差值逐漸增大，壓力波動大而難于達到高壓，密封圈泄漏傳感器報警等，檢查沒有其他外部原因適，須及時更換受損的密封圈。 清洗泵頭時用清潔綢布或棉球沾蒸餾水或溶劑

8、輕輕擦去泵頭、泵座的表面、孔上臟物。請勿用硬物劃傷柱塞桿、孔周圍表面而破壞密封性。兩種柱后清洗模式：手動柱后清洗手動柱后清洗自動柱后清洗自動柱后清洗 輸入單向閥的拆卸從輸入單向閥上擰下不銹鋼輸液管手擰接頭。用8mm的扳手旋松并取下輸入單向閥。 輸出單向閥的拆卸 用5/16”的扳手將不銹鋼單向閥輸出管接頭從單向閥上擰下，另一頭從排空閥上擰下。（單向閥輸出管有左右之分，建議分開拆卸，并做好相應標記） 用8mm的扳手逆時針方向旋松并取下單向閥。 泵頭的拆卸 分別拆下單向閥輸入、輸出管和輸入、輸出單向閥 用配套的內六角扳手均勻地旋松泵頭上二個螺釘(對左側螺釘旋松約1/4 圈，換到右側螺釘旋松約1/4

9、圈)，左右交替均衡旋下二個螺釘。注意：請勿單獨旋下一側螺釘。使泵頭傾斜折斷柱塞桿。拆之前請將柱塞桿縮至最里面。 用手托住泵頭緩慢旋下二個螺釘。平穩(wěn)地取下泵頭放在瓷盤內濾紙上，防止零件丟失。 輸入單向閥輸入單向閥輸出單向閥寶石球座寶石球球閥 p 恒流泵中氣泡的排除（1）首先，檢查流動相儲液瓶中的溶劑過濾頭是否阻塞。具體做法：將輸入三通器上的溶劑塑料連接管的卸下，將流動相儲液瓶置于高位，利用壓差使溶液流出。如果溶劑流的很順暢，說明溶劑過濾頭是好的。如果是一滴一滴的流出，則說明過濾頭阻塞，需要超聲清洗，復原。（2）將儀器所配的注射器及塑料連接管插到放空閥的導管上，逆時針旋放開空閥旋鈕12圈，抽液5-

10、10mL，將泵的流速設定在每分鐘一毫升的流速。啟動泵，觀察塑料連接管的流動溶液是否還有氣泡。如沒有氣泡說明從過濾頭到放空閥這一段已將氣泡排除。（3）將泵關閉，關閉放空閥旋鈕，放空泵輸出口，將泵的流速設定在3-5mL每分鐘，將泵內的阻尼器和壓力傳感器的氣泡趕出，流出溶液10-15mL后將泵關閉。連接上色譜柱，將流速設定在每分鐘一毫升，啟動泵，觀察壓力及壓力脈動。（4）應用快速降壓法趕出氣泡：用小堵頭將泵的流動相輸出口堵上，將流速設定在1毫升/分，將柱前壓力升至20Mpa左右，將排空閥快速打開，重復23即可。紫外檢測器故障的簡易紫外檢測器故障的簡易診斷與處理方法診斷與處理方法1.吸光度與樣品池光強

11、度值出現(xiàn)脈沖式波動。原因：有氣泡通過或附著在流通池，流動相過濾脫氣，沖洗流通池；若波動小且無規(guī)則，則可能是氘燈突然閃一下導致。2.基線噪聲。原因：流通池中有氣泡或污染，可不接柱子大流速沖洗，壓力不超過3MPa；環(huán)境溫度或氣流不穩(wěn)，需保持環(huán)境穩(wěn)定；氘燈年限已到；接地線是否正常。3.基線漂移。原因：池窗污染，沖洗去污或更換新；池體有小氣泡，沖洗除氣泡；檢測器溫度變化，控制溫度穩(wěn)定；池內原先流動相未置換完全，等待置換完全。4.光強度下降，噪聲大。原因：氘燈發(fā)光能力下降，需更換；若只是樣品池光強度下降，則樣品池污染，需沖洗去污。5.出現(xiàn)負峰：檢測器輸出信號的極性相反；樣品的吸收小于流動相，流動相不純；

12、樣品溶劑干擾；示差折光檢測器中樣品的折射率較低；進樣中帶入氣泡。流動相輸入輸液單元色譜柱高壓恒流輸出液晶顯示器鍵 盤 主 機 板串行接口板USB接口RS232接口RS485接口樣品注入氘燈電源樣品輸出進樣器光柵檢測器清洗：流通池內有氣泡或污染物會影響吸光度測量，出現(xiàn)噪聲增大、基線漂移嚴重的現(xiàn)象。需要沖洗流通池，去除氣泡或污染物。1.用純甲醇作流動相，流速1.0，波長：254nm，記錄樣品池和參比池光強度值，供沖洗后進行比較。2.關閉泵和檢測器，將注射器連接件連接到流通池輸入口，在注射器中吸入異丙醇，將異丙醇注入流通池，清洗流通池（可反復數(shù)次）。3.在注射器中吸入流動相，注入流通池中，進一步清洗

13、流通池（可反復數(shù)次）4.打開檢測器，觀察光強度值變化和沖洗效果，若光強明顯改善，則可將管路重新連接好。5.若上述處理仍無法清除污染，則需送廠處理或更換新的流通池，注：流通池更換需整體拆下，整體安裝，非專業(yè)人員嚴禁拆開流通池部件。檢測器維護注意事項1.每天分析完后要沖洗整個管路，保持流通池干凈，定期用強溶劑反相沖洗檢測器（斷開柱子），以清洗流通池。2.流動相要脫氣，防止氣泡滯留在流通池內，影響分析結果。3.注意氘燈的保養(yǎng)，不分析時請關氘燈，以延長氘燈使用壽命，最好在需關燈時間超過4小時才關燈，因為頻繁地開關等同樣縮短使用壽命。濾頭問題 流動相過濾頭在日常使用過程中可能會被大家所遺忘，平時流動相都

14、會用0.45um濾膜過濾，所以儀器有問題時也不太可能會第一時間想到它。 其實，濾頭作為液相系統(tǒng)的第一道大門是很重要的一部分。濾頭在使用過一段時間后可能會變臟，尤其是在水相或含有緩沖鹽溶液的流動相里，從而導致泵吸不上液，泵壓力高，吸入泵內的液體含有氣泡等。濾頭清洗 判斷濾頭是否臟或堵，先目視是否有異物，再斷開與泵連接的管路，儲液瓶高放，看液體是否暢快流出。如果過濾頭已經(jīng)堵塞，則沒有溶劑或只有很少的溶劑滴出，此時需要清洗濾頭了。 不銹鋼過濾頭（五豐、島津、waters）清洗時可以用甲醇、異丙醇或純水超聲清洗，而安捷倫的濾頭由于是玻璃或陶瓷材料制成，超聲可能損壞玻璃過濾頭的過濾板，推薦用稀硝酸（35%左右）浸泡，浸泡大約一個小時后，再用水洗凈過濾頭。 洗干凈的濾頭先用針筒往里打滿流動相，再接到管路上，防止殘留空氣在里面。注意事項1.流動相一定要0.45um濾膜過濾、超聲后使用。水要使用超純水或二次蒸餾水，有機相盡量選擇高品質色譜級試劑。2.當使用水或緩沖鹽做流動相時，一定要經(jīng)常更換流動相，水最好每天更換，至少兩天換一次，緩沖鹽最好現(xiàn)配現(xiàn)用。如果不及時更換容易變質的流動相