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1、高考生物選修3知識(shí)點(diǎn)總結(jié)專題一 基因工程一、基因工程的基本工具1、“分子手術(shù)刀”限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)功能:能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開,因此具有專一性。結(jié)果:經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式:黏性末端和平末端。2、“分子縫合針”DNA連接酶(1)兩種DNA連接酶(E·coliDNA連接酶和T4DNA連接酶)的比較:相同點(diǎn):都縫合磷酸二酯鍵。區(qū)別:E·coliDNA連接酶只能連接黏性末端;T4DNA連接酶能縫合兩種末端,但效率較低。3、“分子運(yùn)輸車”運(yùn)載體(1)載體具備的條件:能在受
2、體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存。具有一至多個(gè)限制酶切點(diǎn),供外源DNA片段插入。具有標(biāo)記基因,供重組DNA的鑒定和選擇。(2)最常用的載體是:質(zhì)粒,它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單的、獨(dú)立于細(xì)菌染色體之外,并具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。(3)其它載體:噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒二、基因工程的基本操作程序1、目的基因的獲取從基因文庫(kù)中獲得、人工合成、PCR擴(kuò)增。人工合成目的基因的常用方法有反轉(zhuǎn)錄法_和化學(xué)合成法_。(了解基因組文庫(kù)和CDNA文庫(kù)?;如何從基因文庫(kù)中提取目的基因?)2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建(關(guān)鍵步驟)組成:目的基因啟動(dòng)子終止子標(biāo)記基因(1)啟動(dòng)子:是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段,位于基因的首端
3、,是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位,能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA,最終獲得所需的蛋白質(zhì)。(2)終止子:也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段,位于基因的尾端。(3)標(biāo)記基因的作用:是為了鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來。常用的標(biāo)記基因是抗生素基因。3、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞_(1)常用的轉(zhuǎn)化(導(dǎo)入)方法:導(dǎo)入植物細(xì)胞:常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法(雙子葉植物),其次還有基因槍法和花粉管通道法等。導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞:最常用的方法是顯微注射技術(shù)。此方法的受體細(xì)胞多是受精卵。導(dǎo)入微生物細(xì)胞:感受態(tài)細(xì)胞法。先用Ca2+處理細(xì)胞,使其成為感受態(tài)細(xì)胞,再將重組表達(dá)載體DNA分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合
4、,在一定的溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子,完成轉(zhuǎn)化過程。原核生物作為受體細(xì)胞的原因是繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少,最常用的原核細(xì)胞是大腸桿菌。(2)重組細(xì)胞導(dǎo)入受體細(xì)胞后,篩選含基因表達(dá)載體受體細(xì)胞的依據(jù)是標(biāo)記基因是否表達(dá)。4、目的基因的檢測(cè)和表達(dá)檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因,方法是采用DNA分子雜交技術(shù)。檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA,方法是采用用標(biāo)記的目的基因作探針與mRNA雜交。檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì),提取蛋白質(zhì),用相應(yīng)的抗體進(jìn)行抗原抗體雜交。有時(shí)還需進(jìn)行個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定。如轉(zhuǎn)基因抗蟲植物是否出現(xiàn)抗蟲性狀。三、蛋白質(zhì)工程的概念蛋白質(zhì)工程是指以蛋白
5、質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ),通過基因修飾或基因合成,對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造,或制造一種新的蛋白質(zhì),以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。(基因工程在原則上只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì))專題2 細(xì)胞工程一、植物細(xì)胞工程1、理論基礎(chǔ)(原理):植物細(xì)胞全能性2、植物組織培養(yǎng)技術(shù)(1)過程:離體的植物器官、組織或細(xì)胞愈傷組織試管苗植物體(2)用途:微型繁殖、作物脫毒、制造人工種子、單倍體育種、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。(3)地位:是培育轉(zhuǎn)基因植物、植物體細(xì)胞雜交培育植物新品種的最后一道工序。3、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)誘導(dǎo)融合的方法:物理法包括離心、振動(dòng)、電刺激等?;瘜W(xué)法用聚乙二醇(PEG)作誘導(dǎo)劑。原理
6、:細(xì)胞膜的流動(dòng)性。意義:克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。二、動(dòng)物細(xì)胞工程1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)(1)取動(dòng)物組織塊(動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織)剪碎用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞制成細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。(2)細(xì)胞貼壁:懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上。接觸抑制:細(xì)胞數(shù)目不斷增多,當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互抑制時(shí),會(huì)停止分裂增殖。(3)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要滿足以下條件無菌、無毒的環(huán)境:培養(yǎng)液應(yīng)進(jìn)行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素,以防培養(yǎng)過程中的污染。此外,應(yīng)定期更換培養(yǎng)液,防止代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞
7、自身造成危害。營(yíng)養(yǎng):糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無機(jī)鹽、微量元素等。需加入血清、血漿等天然成分。溫度:適宜溫度:哺乳動(dòng)物多是36.50.5;pH:7.27.4。氣體環(huán)境:95%空氣5%CO2。O2是細(xì)胞代謝所必需的,CO2作用是維持培養(yǎng)液的pH。2、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物(1)哺乳動(dòng)物核移植可以分為胚胎細(xì)胞核移植(比較容易)和體細(xì)胞核移植(比較難)。(2)選用去核卵(母)細(xì)胞的原因:卵(母)細(xì)胞比較大,容易操作;卵(母)細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)多,營(yíng)養(yǎng)豐富。3、動(dòng)物細(xì)胞融合(1)原理級(jí)方法:細(xì)胞膜的流動(dòng)性。誘導(dǎo)融合的方法:物理法包括離心、振動(dòng)、電刺激等?;瘜W(xué)法用聚乙二醇(PEG)作誘導(dǎo)劑。還可以用滅活的
8、病毒誘導(dǎo)。(2)動(dòng)物細(xì)胞融合的意義:克服了遠(yuǎn)緣雜交的不親和性。項(xiàng)目細(xì)胞融合的原理細(xì)胞融合的方法誘導(dǎo)手段用法植物體細(xì)胞雜交細(xì)胞膜的流動(dòng)性去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合物理法、化學(xué)法克服遠(yuǎn)緣雜交不親和性,獲得雜種植株動(dòng)物細(xì)胞融合細(xì)胞膜的流動(dòng)性使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合物理法、化學(xué)法、滅活的病毒誘導(dǎo)制備單克隆抗體的技術(shù)之一4、單克隆抗體(1)抗體:一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體。從血清中分離出的抗體產(chǎn)量低、純度低、特異性差。(2)雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn):既能大量繁殖,又能產(chǎn)生專一的抗體。(3)單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn):特異性強(qiáng),靈敏度高,并能大量制備。(4)單克隆抗體的作用:作為診斷試劑:準(zhǔn)確識(shí)別各種抗原物質(zhì)的細(xì)
9、微差異,并跟一定抗原發(fā)生特異性結(jié)合,準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速。用于治療疾病和運(yùn)載藥物:主要用于治療癌癥治療,可制成“生物導(dǎo)彈”,也有少量用于治療其它疾病。專題3 胚胎工程一、動(dòng)物胚胎發(fā)育的基本過程1、胚胎工程是指對(duì)動(dòng)物早期胚胎或配子所進(jìn)行的多種顯微操作和處理技術(shù),如胚胎移植、體外受精、胚胎分割、胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)。經(jīng)過處理后獲得的胚胎,還需移植到雌性動(dòng)物體內(nèi)生產(chǎn)后代,以滿足人類的各種需求。2、動(dòng)物胚胎發(fā)育的基本過程(1)精子的發(fā)生:細(xì)胞核為精子頭的主要部分,高爾基體發(fā)育為頂體,中心體演變?yōu)榫拥奈?,線粒體在尾基部形成線粒體鞘膜,其他物質(zhì)濃縮為原生質(zhì)滴直至脫落。(2)卵子的發(fā)生:在胎兒時(shí)期,卵原
10、細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂演變成初級(jí)卵母細(xì)胞,減一分裂在排卵前后完成,形成次級(jí)卵母細(xì)胞和第一極體進(jìn)入輸卵管;減二分裂是在受精過程中完成的。(3)受精:精子獲能(在雌性動(dòng)物生殖道內(nèi));卵子的準(zhǔn)備(排出的卵子要在輸卵管中進(jìn)一步成熟到減二中期才具備受精能力);受精階段:透明帶反應(yīng):防止多精子入卵受精的第一道屏障。卵黃膜的封閉作用:它是防止多精子入卵受精的第二道屏障。受精標(biāo)志是第二極體的形成;受精完成標(biāo)志是雌雄原核融合成合子。受精場(chǎng)所是母體的輸卵管上段。(4)胚胎發(fā)育:卵裂期桑椹胚(全能細(xì)胞)囊胚:開始出現(xiàn)分化(該時(shí)期細(xì)胞的全能性仍比較高)。聚集在胚胎一端個(gè)體較大的細(xì)胞稱為內(nèi)細(xì)胞團(tuán),將來發(fā)育成胎兒的各種組織。中
11、間的空腔稱為囊胚腔。原腸胚:有了三胚層的分化,具有囊胚腔和原腸腔。二、體外受精1、卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng):對(duì)體型小的動(dòng)物用促性腺激素處理,從輸卵管沖取卵子(可直接受精);對(duì)體型大的動(dòng)物從卵巢中采集卵母細(xì)胞(要在體外培養(yǎng)成熟)2、精子的采集和獲能:對(duì)嚙齒動(dòng)物、兔、豬等的精子用培養(yǎng)法(放入人工配制的獲能液中);對(duì)牛、羊等精子用化學(xué)法(放在肝素或鈣離子載體溶液中)三、胚胎移植1、將雌性動(dòng)物的早期胚胎移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動(dòng)物的體內(nèi),使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的。通過轉(zhuǎn)基因、核移植、體外受精獲得的胚胎必須移植給受體才能獲得后代。2、優(yōu)勢(shì):可以充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個(gè)體的繁殖潛力,縮短供體本身的繁殖周期
12、。3、胚胎移植的生理學(xué)基礎(chǔ):動(dòng)物發(fā)情排卵后,同種動(dòng)物的供、受體生殖器官的生理變化是相同的。這就為供體的胚胎移入受體提供了相同的生理環(huán)境。早期胚胎形成后處于游離狀態(tài),為胚胎的收集提供可能;受體對(duì)移入子宮的外來胚胎基本不發(fā)生免疫排斥反應(yīng);為胚胎在受體的存活提供了可能。供體胚胎可與受體子宮建立正常的生理和組織聯(lián)系,遺傳特性在孕育過程中不受影響。4、胚胎移植的程序:對(duì)供、受體母牛進(jìn)行選擇,用促性腺激素進(jìn)行同期發(fā)情處理;對(duì)供體母牛用促性腺激素做超數(shù)排卵處理。選擇同種優(yōu)秀公牛配種;對(duì)胚胎進(jìn)行收集此時(shí)胚胎處于游離狀態(tài);對(duì)胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查此時(shí)胚胎應(yīng)發(fā)育到桑椹胚或囊胚;胚胎移植;檢查受體母牛是否受孕;產(chǎn)下胚胎移
13、植的犢牛。四、胚胎分割1、概念:將早期胚胎切割成2、4、8等分等,經(jīng)移植獲得同卵雙胎或多胎的技術(shù)。來自同一胚胎的后代具有相同的遺傳物質(zhì),屬于無性繁殖。2、操作要點(diǎn):選擇發(fā)育良好,形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚。內(nèi)細(xì)胞團(tuán)要均等分割,否則會(huì)影響胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。五、胚胎干細(xì)胞的移植(識(shí)記)1、含義:由早期胚胎囊胚或胎兒的原始性腺中分離出來的一類細(xì)胞,又叫ES或EK細(xì)胞。2、特征:形態(tài)上體積小、細(xì)胞核大、核仁明顯;功能上具有發(fā)育的全能性,即可分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。體外培養(yǎng)下,ES細(xì)胞可以只增殖不分化3、應(yīng)用:用于治療人類疾病,如利用ES細(xì)胞誘導(dǎo)其分化成新的組織細(xì)胞特性,移植ES細(xì)胞可使壞
14、死或退化的部位得以修復(fù)。專題五 生態(tài)工程的原理(識(shí)記)1、對(duì)象:以破壞的生態(tài)系統(tǒng)進(jìn)行修復(fù)和重建2、基本原理:物質(zhì)循環(huán)再生原理如無廢棄物農(nóng)業(yè)物種多樣性原理提高生態(tài)系統(tǒng)的抵抗力穩(wěn)定性協(xié)調(diào)與平衡原理處理生物與環(huán)境的協(xié)調(diào)與平衡,考慮環(huán)境容納量整體性原理考慮自然系統(tǒng)、經(jīng)濟(jì)系統(tǒng)和社會(huì)系統(tǒng)的統(tǒng)一系統(tǒng)性和工程學(xué)原理系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)決定功能原理:考慮系統(tǒng)內(nèi)部不同組分之間的結(jié)構(gòu),通過改變和優(yōu)化結(jié)構(gòu),達(dá)到改善系統(tǒng)功能的目的;系統(tǒng)整體性原理:實(shí)現(xiàn)總體功能大于各部分之和的效果相關(guān)考題:一、 一對(duì)表現(xiàn)型正常的夫婦,生了一個(gè)鐮刀型細(xì)胞貧血癥(常染色體隱性遺傳?。┗純?。在他們欲生育第二胎時(shí),發(fā)現(xiàn)妻子的雙側(cè)輸卵管完全堵塞,不能完成體
15、內(nèi)受精。醫(yī)生為該夫婦實(shí)施了體外受精和產(chǎn)前基因診斷,過程如下圖。請(qǐng)回答:(1)過程是指在體外進(jìn)行的_處理,從而使精子與卵子結(jié)合形成受精卵;過程稱為_。(2)在對(duì)胎兒進(jìn)行鐮刀形細(xì)胞貧血癥的產(chǎn)前基因診斷時(shí),要先從羊水中的胎兒細(xì)胞提取物質(zhì)_進(jìn)行PCR擴(kuò)增。然后用Mst 對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行切割,產(chǎn)生多個(gè)片段的酶切產(chǎn)物。據(jù)此判斷,Mst 是一種_酶。(3)不同長(zhǎng)度的酶切產(chǎn)物在電泳時(shí)移動(dòng)的速率不同,形成不同的電泳條帶。該家庭成員的鐮刀型細(xì)胞貧血癥基因分析的電泳帶譜如,據(jù)此判斷胎兒為_(填“正?!薄ⅰ盎颊摺被颉皵y帶者”)。二、自1981年Evans和Kaufman首次成功分離小鼠胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞),醫(yī)學(xué)界對(duì)其
16、的研究雖頗有爭(zhēng)議但也如火如荼,下圖表示利用胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞)所做的一系列研究,請(qǐng)據(jù)圖分析回答:(1)過程將胚胎干細(xì)胞置于用射線滅活的鼠胎兒成纖維細(xì)胞的飼養(yǎng)層上,并加入動(dòng)物血清、抗生素等物質(zhì),維持細(xì)胞不分化的狀態(tài)。在此過程中,飼養(yǎng)層提供干細(xì)胞增殖所需的_,加入抗生素是為了_,這對(duì)于研究細(xì)胞分化和細(xì)胞凋亡的機(jī)理具有重要意義。(2)過程將帶有遺傳標(biāo)記的ES細(xì)胞注入早期胚胎的囊胚腔,通過組織化學(xué)染色,用于研究動(dòng)物器官形成的時(shí)間、發(fā)育過程以及影響的因素,這項(xiàng)研究利用了胚胎干細(xì)胞具有_的特點(diǎn)。在哺乳動(dòng)物早期發(fā)育過程中,囊胚的后一個(gè)階段是_。(3)過程中目的基因?qū)肱咛ジ杉?xì)胞最常用的方法是_,將獲得的目
17、的基因轉(zhuǎn)入胚胎干細(xì)胞前需構(gòu)建基因表達(dá)載體,其目的是_ (4)過程得到的小鼠畸胎瘤里面全是軟骨、神經(jīng)管、橫紋肌和骨骼等人類組織和器官。實(shí)驗(yàn)時(shí),必須用X射線照射去除胸腺的小鼠,獲得免疫缺陷小鼠,其目的是_該過程研究的意義在于解決_問題。三、胚胎工程技術(shù)包含的內(nèi)容很豐富,如圖是胚胎工程技術(shù)研究及應(yīng)用的相關(guān)情況,其中供體1是良種荷斯坦高產(chǎn)奶牛,供體2是黃牛,請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題:(1)應(yīng)用1中獲得的小牛,其遺傳物質(zhì)來源于,細(xì)胞B的名稱是。(2)應(yīng)用2中牛完成體內(nèi)受精的場(chǎng)所是_,剛種植在子宮內(nèi)的胚胎其發(fā)育程度一般為,胚胎種植后可以通過_從母體獲得正常發(fā)育所需要的物質(zhì)。這種試管牛的產(chǎn)生,采用的胚胎工程技術(shù)有 (至少答出2種)等。(3)應(yīng)用3中細(xì)胞C取自牛胎兒的,或細(xì)胞。(4)應(yīng)用4中通過技術(shù)獲得二分胚和,得到兩只小牛,可以通過PCR技術(shù)進(jìn)行小牛早期胚胎性別鑒定;也可以在細(xì)胞水平
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