HIV篩查試驗SOP文件

1、HIV篩查實驗 SO汽件滸坑鴇礦職工醫(yī)院sop文件-HIV 檢測流水號:SOP100分類號:zz-01HIV篩查實驗規(guī)程編寫人：吳瑞宗編寫日期:2011年1月8日HIV初篩實驗技術(shù)操作規(guī)程1.目的保證艾滋病病毒抗體初篩檢測實驗的準(zhǔn)確性。2.適用范圍艾滋病病毒抗體實驗。3.具體要求3.1 樣品采集和處理樣品采集按HIV樣品的采集與處理規(guī)程進(jìn)行。采血時注意安全，用一次性注射 器謹(jǐn)慎操作，防止發(fā)生刺傷和造成外界污染。3.2 樣品運送樣品轉(zhuǎn)送，除特殊需要外，必須是血清或血漿，置于帶有蓋帽的試管內(nèi)，或?qū)?塑料試管用酒精燈封死，防止樣品流出。試管上標(biāo)明姓名、時間、編號，將試管放 入專門帶蓋的容器內(nèi)，容器的

2、材料要易于消毒處理，在所放試管周圍上下墊有軟性 物質(zhì)，以免碰碎，容器外標(biāo)有 HIV檢測專用字樣和生物危害標(biāo)志。路途較遠(yuǎn)或氣候 炎熱時，容器應(yīng)置于4以下運送。同時附送檢單。3.3 樣品登記收到樣品后，及時填寫標(biāo)本登記記錄表，送樣人、收樣人簽字。3.4 實驗準(zhǔn)備3.4.1 將試劑從冰箱中取出，按試劑盒要求時間恢復(fù)室溫。3.4.2 檢查并記錄冰箱、溫箱溫度。3.4.3 按照試劑盒要求，嚴(yán)格按HIV快速檢測（膠體金法）操作規(guī)程進(jìn)行操作， 并做好記錄、整個實驗過程中每一步操作都要在原始記錄表上詳細(xì)登記。3.5 結(jié)果登記和報告陰性結(jié)果出具HIV抗體篩查陰性報告單，陽性結(jié)果報告為“ HIV抗體待復(fù)檢” 并填

3、寫HIV抗體初篩陽性送檢單。3.6 標(biāo)本留存轉(zhuǎn)送陰性標(biāo)本收集血清冷凍保存一年，并填寫陰性血清保存記錄表。陽性標(biāo)本收集 血清封口包好，連同HIV抗體初篩陽性送檢單，冷藏運送到上一級實驗室。1滸坑鴇礦職工醫(yī)院sop文件-HIV 檢測流水號:SOP101分類號:zz-02HIV篩查實驗規(guī)程編寫人：吳瑞宗編寫日期:2011年1月8日HIV抗體快速診斷試劑保存和使用規(guī)范根據(jù)膠體金類試劑的特性，HIV抗體快速診斷試劑保存和使用過程中應(yīng)注意：1、HIV抗體快速診斷試劑是HIV的初篩試劑，不能用于HIV感染的確診，而且 膠體金類試劑的檢測靈敏度低于 HIV的ELISA試劑，對該類試劑有明確的使用范 圍。2、雖

4、然試劑本身不具有任何傳染性，但被檢對象可能含有HIV,具有傳染性，所以需按艾滋病實驗室檢查規(guī)程操作。3、HIV抗體診斷試劑一般為室溫保存，溫度應(yīng)低于30?,而對于含稀釋液的試劑，最好在4?保存，不要冷凍。4、無特殊說明，檢測時的環(huán)境溫度為室溫，最好為 15,30?,檢測前要平衡至 室溫后再開袋使用，高溫或低溫都可能影響檢測的靈敏度和特異性。5、膠體金類診斷試劑對濕度敏感，檢測時打開包裝袋后，應(yīng)在 1h內(nèi)進(jìn)行檢 測，以防試劑吸收水分后失效。6、一定要在規(guī)定時間內(nèi)判定結(jié)果，超出規(guī)定時間再判定結(jié)果無效。由于肉眼 判定可能存在一定的主觀性，對弱陽性反應(yīng)該由兩人以上共同判定結(jié)果，或重復(fù)測 試。7、使用后

5、的試條、包裝盒和其他物品，均應(yīng)視為感染性廢棄物統(tǒng)一銷毀、并 做好登記。2滸坑鴇礦職工醫(yī)院sop文件-HIV 檢測流水號:SOP102分類號:yq-01HIV篩查實驗規(guī)程編寫人：吳瑞宗編寫日期:2011年1月8日80-2型離心機標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程一、目的為保障標(biāo)本分離間80-2型離心機的安全正常運轉(zhuǎn)，特制作本規(guī)程。二、范圍-2型離心機離心操作和日常保養(yǎng)。適用80三、責(zé)任實驗室工作人員嚴(yán)格按80-2型離心機操作規(guī)程執(zhí)行。四、工作原理將裝有等量試液的離心容器對稱放置轉(zhuǎn)頭四周的孔內(nèi)，啟動機器后。電動機帶)使試液分離，相對離心力的大小取決動轉(zhuǎn)頭高速運轉(zhuǎn)所產(chǎn)生的相對離心力(RCF于試樣所處的位置至軸心的水平距離

6、即旋轉(zhuǎn)半徑r和轉(zhuǎn)速n,計算公式如下：52 RCF=1.118X 10?nrXg n-轉(zhuǎn)速(轉(zhuǎn)/分)r- 轉(zhuǎn)速半徑(厘米)五、技術(shù)指標(biāo)離心轉(zhuǎn)速1000-4000rpm 定時范圍0-60mins 最大相對離心力1420倍 分 離因數(shù)1.960 最大容量15mlX12電源220?22V 50Hz工作溫度范圍5? -35? 濕度？80%六、操作程序1:操作程序(1)把需要分離的物質(zhì)定量(不超過5ml為宜)放入離心管；每支離心管所加物質(zhì) 重量基本相等。(2)把離心管均勻分布插入離心頭孔中，合上蓋板。(3)如根據(jù)需要選擇合適的離心速度，調(diào)速開關(guān)指到“ 1”時，離心速度大約是1000轉(zhuǎn)/分，指到“2”時，離

7、心速度大約是2000轉(zhuǎn)/分，余“3”“4”時類推。(4)根據(jù)需要選擇定時時間，把定時旋鈕刻度線撥到所選定的定時時間位置， 例如定時選10分鐘，則把旋鈕刻度線撥到10處。3滸坑鴇礦職工醫(yī)院sop文件-HIV 檢測(5)接通電源，電源開關(guān)撥到“開” 一邊，電源指示燈亮，電機開始旋轉(zhuǎn)，樣 品開始離心分離，直到定時時間到，離心機分離結(jié)束。(6)關(guān)閉電源，停止轉(zhuǎn)動后打開離心機上蓋，取出離心管，至此本次離心操作 結(jié)束。2:注意事項*接1、為確保安全用電，要求供電電源用三芯安全插座引出，其接地端必須可地。2、工作中，離心頭在高速運轉(zhuǎn)，此時決不允許打開上蓋，更不允許在離心機 頭未停妥時企圖用手揪卡轉(zhuǎn)盤，以防意

8、外，工作結(jié)束時，首先切斷電源，待離心機 頭停妥，再取出離心管。3、本離心機不適用于密度過大的物質(zhì)，如金屬物，礦物等。4、每支離心管管內(nèi)所加的物質(zhì)應(yīng)盡量等重，（相對重量偏差3克），且離心 管在離心頭中應(yīng)盡量均勻分布，這樣有利于提高平穩(wěn)性，并能有效減低噪聲。5、若需低速運轉(zhuǎn)，應(yīng)將旋鈕撥至“ 4”（4000轉(zhuǎn)/分，待電機高速啟動后，再慢 慢降到1000轉(zhuǎn)/分以下運轉(zhuǎn)。七、轉(zhuǎn)速與相對離心力轉(zhuǎn)速（轉(zhuǎn)/分）相對離心力（倍）1000 881500 1992000 3552500 5933000 7993500 10874000 1420八、參考文件80-2型離心機使用說明書4滸坑鴇礦職工醫(yī)院sop文件-HI

9、V 檢測流水號:SOP103分類號:yq-02HIV篩查實驗規(guī)程編寫人：吳瑞宗編寫日期:2011年1月8日冰箱維護(hù)保養(yǎng)操作程序1 .目的：對冰箱進(jìn)行適當(dāng)?shù)木S護(hù)，以確保冰箱的正常使用。2 .適用冰箱范圍：本實驗室使用的各種品牌、型號的冰箱。3 .職責(zé)：,室負(fù)責(zé)人監(jiān)督落實。3.1實驗室工作人員均應(yīng)熟知并嚴(yán)格遵守本 SOP3.2本SOP勺改動，可由任一使用本SOP勺工作人員提出，并報經(jīng)科主任批準(zhǔn) 簽。4.操作方法4.1 冰箱應(yīng)放置于水平地面并留有一定的散熱空間。4.2 外接電源電壓必須匹配，并要求有良好的接地線。4.3 冰箱內(nèi)禁止存放與本實驗室無關(guān)的物品。4.4 放入冰箱內(nèi)的所有試劑、血液、樣品等必

10、須密封分類保存。4.5保持冰箱出水口通暢；非自動除霜冰箱應(yīng)定期除霜；定期清潔冰箱，清潔時切斷電源，用軟 布蘸水擦拭冰箱內(nèi)外，必要時可用中性洗滌劑。 4.6每日由專人負(fù)責(zé)觀察冰箱內(nèi) 溫度并記錄于表中，記錄表貼于門上，每月一張，一年裝訂成冊存檔。4.7 若溫度超出規(guī)定范圍，調(diào)節(jié)溫控使其回到正常范圍，并進(jìn)行記錄。4.8若溫控調(diào)節(jié)無效，報請設(shè)備科維修，修理后須驗收合格并簽字后方能正常使用。4.9定期用液體消毒劑消毒冰箱內(nèi)表面。5滸坑鴇礦職工醫(yī)院sop文件-HIV 檢測流水號:SOP104分類號:yq-03HIV篩查實驗規(guī)程編寫人：吳瑞宗編寫日期:2011年1月8日凈化工作臺操作規(guī)程1職責(zé)1.1 實驗室

11、工作人員均應(yīng)熟知并嚴(yán)格遵守本SOP室負(fù)責(zé)人監(jiān)督落實。1.2 本SOP勺改動，可由任一使用本SOP勺工作人員提出，并報經(jīng)科主任批準(zhǔn) 簽字。2儀器名稱與生產(chǎn)廠家醫(yī)用凈化工作臺蘇州凈化設(shè)備廠3工作原理空氣通過過濾系統(tǒng)時，其中的懸浮微粒被一定孔徑的過濾網(wǎng)捕獲，潔凈空氣進(jìn) 入工作區(qū)，使得工作區(qū)的達(dá)到相對無菌的標(biāo)準(zhǔn)。4技術(shù)參數(shù)尺寸:1450 X700X 460（寬、深、高 mm）潔凈度:? 35顆/升（對于粒徑？0.5um的塵埃）噪音:? 62dB （A）平均菌落數(shù):? 0.5個/皿.時振動:？ 3um（XYZ方向）平均風(fēng)速:0.32-0.48m/s電源:220V 50Hz操作程序55.1 新安裝或長期未

12、使用的工作臺，使用前必須用超凈真空吸塵器或不產(chǎn)生纖 維的物品認(rèn)真進(jìn)行清潔工作。5.2 接通電源，使用前應(yīng)提前15-30分鐘同時開啟紫外燈和風(fēng)機組工作。5.3 當(dāng)需要調(diào)節(jié)風(fēng)機風(fēng)速時，用工作臺操作面板上的風(fēng)速調(diào)節(jié)鈕進(jìn)行調(diào)節(jié)。調(diào) 節(jié)超凈空氣的流速為,這已足夠防止附近空氣可能襲擾而引起的污染5.4 工作臺面上禁止存放不必要的物品，以保持工作區(qū)的潔凈氣流不受干擾。 6滸坑鴇礦職工醫(yī)院sop文件-HIV 檢測5.5 禁止在工作臺面上記錄書寫，工作時應(yīng)盡量避免作明顯擾動氣流的動作；禁止在預(yù)過濾進(jìn)風(fēng)口部位放置物品，以免擋住進(jìn)風(fēng)口造成進(jìn)風(fēng)量減少，降低凈化能 力。5.6 使用結(jié)束后，用消毒液清理工作臺面后打開紫外

13、燈，1530分鐘后關(guān)閉紫外燈，關(guān)閉潔凈臺電源。5.7 長期不使用的工作臺請撥下電源插頭。6潔凈工作臺維護(hù)和保養(yǎng)程序6.1根據(jù)環(huán)境潔凈程度，定期將預(yù)過濾器中的濾料拆下清洗，一般間隔時間為-6個月。36.2 每次使用潔凈臺后，均需對潔凈臺進(jìn)行清潔。6.3 定期（一般每半年1次）計測工作區(qū)風(fēng)速，如發(fā)現(xiàn)不符合技術(shù)參數(shù)要求，則 可調(diào)大風(fēng)機供電電壓。當(dāng)風(fēng)機組電壓調(diào)到最大時，工作區(qū)風(fēng)速仍達(dá)不到0.3m/s,則必須更換高效空氣過濾器。（由廠家或院儀器維修人員進(jìn)行）6.4 做好維護(hù)記錄。7運行環(huán)境溫度:10-30攝氏度相對濕度:?75%8其他事項8.1 只有負(fù)責(zé)管理設(shè)備的人員有權(quán)關(guān)閉風(fēng)機。8.2 只有經(jīng)過培訓(xùn)和

14、指導(dǎo)的人員才能操作本設(shè)備。8.3 頂部通風(fēng)口不能被任何東西覆蓋以保證排氣通暢。8.4 其他事項請參見說明書。7滸坑鴇礦職工醫(yī)院sop文件-HIV 檢測流水號:SOP105分類號：yq-04HIV篩查實驗規(guī)程編寫人：吳瑞宗編寫日期:2011年1月8日移液器使用與校正移液器使用【操作步驟】1（設(shè)定容量值：根據(jù)試驗需要量設(shè)定容量值，在調(diào)整設(shè)定移液量的旋鈕時，不 要用力過猛，并應(yīng)注意使移液器顯示的數(shù)值不超過其可調(diào)范圍。2（預(yù)洗：當(dāng)裝上一個新吸頭時應(yīng)預(yù)洗吸頭，先吸入一次液體并將之排回原容器中。3（吸液：1選擇合適的吸頭安放在移液套筒上，稍加扭轉(zhuǎn)壓緊吸嘴使之與套筒之間無 空氣間隙。2取液之前，所取液體應(yīng)在

15、室溫（15?,25?）平衡。3把按鈕壓至第一停點，垂直握持加樣器，使吸頭浸入液面下23毫米處，然 后緩慢平穩(wěn)地松開按鈕，吸入液體，等一秒鐘，然后將吸頭提離液面，貼壁停留 2- 3秒，使管尖外側(cè)的液滴滑落。4（放液：1將吸頭口貼到容器內(nèi)壁底部并保持 10040?頃斜。2平穩(wěn)地把按鈕壓到第一停點，等一秒鐘后再把按鈕壓到第二停點以排出剩余液體。3壓住按鈕，同時提起加樣器，使吸頭貼容器壁擦過。4松開按鈕。5按吸頭彈射器除去吸頭。5（加樣器吸嘴為一次性使用。6、移液器的正確放置使用完畢，可以將其豎直掛在移液槍架上，但要小心別掉下來。當(dāng)移液器槍頭里有液體時，切勿將移液器水平放置或倒置，以免液體倒流腐蝕活塞

16、彈簧。移液器校正1、準(zhǔn)備超純水、萬分之一天平（假如校正0.52.5ul量程的，至少要十萬分之 一的天平）、溫濕度計、恒溫室，還需準(zhǔn)備一個小口容器，避免水分揮發(fā)。2、按移液器總量程的100% 50% 10附別停止第三和第四步。8滸坑鴇礦職工醫(yī)院sop文件-HIV 檢測3、吸頭要重復(fù)汲取超純水三次后，汲取固定容積的超純水，推入放置在天平上的小口容器中，待數(shù)據(jù)穩(wěn)定讀取天平數(shù)值，同時記錄溫度。重復(fù) 10次。4、將丈量的數(shù)據(jù)用iso8655中的計算公式計算獲得對應(yīng)溫度下的體積，取均 勻值。5、依據(jù)三個丈量點的偏向，用移液器專用的校正扳手通過移液器的校正窗停止調(diào)整。6、重復(fù)3、4步，直至偏向在ISO865

17、5的要求內(nèi)為止。維護(hù)方法維護(hù)保養(yǎng)時的注意事項如不使用，要把移液槍的量程調(diào)至最大值的刻度，使彈簧處于松弛狀態(tài)以保護(hù) 彈簧。最好定期清洗移液槍，可以用肥皂水或 60 ,的異丙醇，再用蒸儲水清洗，自然 晾干。校準(zhǔn)是可以在20-25度環(huán)境中，通過重復(fù)幾次秤量蒸儲水的方法來進(jìn)行。使用時要檢查是否有漏液現(xiàn)象。方法時吸取液體后懸空垂直放置幾秒中，看看液面是否下降。如果漏液，原因大致有一下幾方面 ：1、槍頭是否匹配；2、彈簧活塞是否正常；3、如果是易揮發(fā)的液體（許多有機溶劑都如此），則可能是飽和蒸汽壓的問題?？梢韵任艓状我后w，然后再移液。9滸坑鴇礦職工醫(yī)院sop文件-HIV 檢測流水號:SOP106分類號:

18、cz-01HIV篩查實驗規(guī)程編寫人：吳瑞宗編寫日期:2011年1月8日抽血標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程1適用范圍需做血液檢測的對象。2試劑與材料碘酒、酒精棉、棉簽、橡皮止血帶、注射器（一次性采血器）、試管、止 血棉。3操作步驟3.1 核對被檢者姓名并標(biāo)記試管；3.2 請被檢者入座，伸出手臂放在采血墊上；3.3 用橡皮止血帶扎緊并請被檢者握緊拳頭；3.4 選擇靜脈，用碘灑棉在采血部位由里向外擦拭 （直徑約6cm左右）消毒；3.5 用酒精棉脫碘；3.6 把一次性注射器（一次性采血器）打開，在采血部位穿刺靜脈，抽取血液；3.7 放松橡皮止血帶，拔出針頭，同時請被檢者用止血棉壓迫止血。3.8 一次性注射器（一次性采血

19、器）等廢棄物放指定地點統(tǒng)一收集、由清潔人員統(tǒng)一消毒處 理。10滸坑鴇礦職工醫(yī)院sop文件-HIV 檢測流水號:SOP107分類號:cz-02HIV篩查實驗規(guī)程編寫人：吳瑞宗編寫日期:2011年1月8日 標(biāo)本離心的標(biāo)準(zhǔn)操作程序【目的】血清或血漿標(biāo)本的離心處理。【操作步驟】1.未抗凝標(biāo)本（5毫升，紅色或紅/黑色蓋真空采血管）垂直放置30分鐘后離 心。2.標(biāo)本配平。3 .標(biāo)本放入離心機。4 .蓋上離心機蓋，鎖上安全鎖。5 .打開離心機電源，設(shè)定離心轉(zhuǎn)速及離心時間。6 .離心3000轉(zhuǎn)（rpm）7分鐘或2400轉(zhuǎn)（rpm）15分鐘。7 .待離心機轉(zhuǎn)速停止后或離心轉(zhuǎn)速降至 0時，輕輕取出標(biāo)本，關(guān)閉離心機

20、電 源。8.離心后立即將標(biāo)本轉(zhuǎn)移至干凈不含抗凝劑或防腐劑的試管，同時此管應(yīng)具 有可識別標(biāo)簽。11滸坑鴇礦職工醫(yī)院sop文件-HIV 檢測流水號:SOP108分類號:cz-03HIV篩查實驗規(guī)程編寫人：吳瑞宗編寫日期:2011年1月8日HIV樣品的采集和處理1樣品采集1.1 血清樣品采集：用注射器抽出3毫升靜脈血，室溫下自然放置1小時，待 血液凝固和血塊收縮后離心15分鐘，吸出血清備用。1.2 抗凝血樣品采集：用加有抗凝劑的真空采血管抽取靜脈血，轉(zhuǎn)移至加有抗 凝劑的試管。反復(fù)輕搖。分離血漿和血細(xì)胞備用。應(yīng)根據(jù)實驗要求選用適當(dāng)?shù)目鼓?劑（EDTA肝素、枸橡酸鈉等），如需進(jìn)行病毒RNAM定，應(yīng)在48

21、小時以內(nèi)分離血 漿。1.3采樣注意事項1.3.1 臨床采血技術(shù)規(guī)范及試劑說明書要求進(jìn)行。1.3.2 注意安全，直接接觸HIV感染者或艾滋病病人血液和體液的操作應(yīng)戴雙 層手套。建議采用真空采血管及蝶形針具，以免直接接觸血液。2樣品的保存2.1 用于抗體檢測的血清或血漿樣品應(yīng)存放于-20?以下，短期（1周）內(nèi)進(jìn)行檢 測的樣品可存放于2,8? o2.2 用于抗原和核酸檢測的血漿和血細(xì)胞樣品應(yīng)凍存于-20?以下，進(jìn)行病毒RNA僉測的樣品如長期（3個月以上）保存應(yīng)置于-80?3樣品的運送3.1 傳遞的樣品應(yīng)為血清或血漿，除特殊情況外一般不運送全血。樣品應(yīng)置于 帶蓋的試管內(nèi)，試管上應(yīng)有明顯的標(biāo)記，標(biāo)明樣品

22、的編號或受檢者姓名、種類和采 集時間。隨樣品應(yīng)附有送檢樣，送檢樣應(yīng)與標(biāo)本分開，不能混放。3.2 裝入專用帶蓋的容器內(nèi)，容器的材料要易于消毒處理。在試管的周圍應(yīng)墊 有緩沖吸水材料，以免碰碎。如果路程較遠(yuǎn)或氣候炎熱，應(yīng)在2,8?條件下運送。用于抗體檢測的樣品可在短期內(nèi)（48小時）室溫遞送。每一包裝的體積不得超過 50ml。運送感染性材料必須有記錄。3.3 如需對個別樣品進(jìn)行復(fù)測，可以用特快專遞形式投寄，但必須將盛樣品的 試管包扎好，避免使用玻璃容器，以保證不會破碎和溢漏。樣品的接收44.1含有感染性樣品的包果必須在具有處理感染源設(shè)備的實驗室內(nèi)由經(jīng)過培訓(xùn) 的工作人員打開，用后的包裹應(yīng)進(jìn)行消毒。4.2

23、核對標(biāo)本與送檢單，檢查樣品管有無破損和溢漏。如發(fā)現(xiàn)溢漏應(yīng)立即將尚 存留的樣品移出、對樣品管和盛器消毒，同時還要報告有關(guān)領(lǐng)導(dǎo)和專家。4.3檢查樣品的狀況，記錄有無嚴(yán)重溶血、微生物污染、血脂過多以及黃癥等情況。12滸坑鴇礦職工醫(yī)院sop文件-HIV 檢測流水號:SOP109分類號:cz-04HIV篩查實驗規(guī)程編寫人：吳瑞宗編寫日期:2011年1月8日HIV快速檢測（膠體金法）操作規(guī)程1、檢驗?zāi)康挠糜隗w外、肉眼觀察、定性的免疫分析，監(jiān)測血清或血漿中的 HIV-1和HIV-2 抗體，用于幫助檢測受感染個體的 HIV-1和HIV-2抗體。本品檢測陽性者，需進(jìn)一 步確證。、原理2利用雙抗原夾心法檢測HIV

24、抗體。標(biāo)本加入反應(yīng)板，若標(biāo)本中含有HIV抗體時，先與金標(biāo)抗原反應(yīng)，形成抗體-金標(biāo)抗體復(fù)合物，在虹吸作用下向前移動，遇 到包被抗原形成抗原-抗體-金標(biāo)抗原復(fù)合物，并出現(xiàn)紅色沉淀線。包被膜上同時帶 有一條質(zhì)控包被線作為對照，所以當(dāng)出現(xiàn)一條紅色質(zhì)控線和一條(或兩條)紅色反應(yīng)線時判斷為陽性。當(dāng)待測標(biāo)本中無 HIV抗體時，只出現(xiàn)一條紅色質(zhì)控線則判斷為陰 性。作為質(zhì)控，不管結(jié)果為陽性或陰性，都會出現(xiàn)一條紅色質(zhì)控線。如無紅色質(zhì)控 線(或只有反應(yīng)線)出現(xiàn)，則實驗無效。本方法適用于血清標(biāo)本初篩檢測，用于醫(yī) 院、海關(guān)及無償獻(xiàn)血員現(xiàn)場快速體檢等。3、標(biāo)本要求(1)標(biāo)本類型：血清(2)標(biāo)本采集：見標(biāo)本采集SO吁冊(3

25、)標(biāo)本儲存和運輸：新鮮血清2,8?貯存時間不超過72小時(4)標(biāo)本拒收狀態(tài)： 細(xì)菌污染，嚴(yán)重溶血或脂血標(biāo)本不能作測定。4、試劑(1)試劑名稱：人類免疫缺陷病毒(HIV-1+2)抗體診斷試劑(膠體金法)。(2)試 劑生產(chǎn)廠家：北京藍(lán)十字生物藥業(yè)有限公司。(3)包裝規(guī)格：1個測試/包裝袋;25個測試/盒。(4)試劑盒組成：單人份包裝測試板，每盒25人份。說明書一份。5、操作步驟HIV-1+2抗體診斷試劑盒操作流程(1)、撕開包裝有HIV-1+2抗體檢測板的袋，取出檢測板水平放置于實驗臺上。(2)、用塑料吸管吸2-3滴血清標(biāo)本(70-100微升)加入標(biāo)本孔中。(3)、15- 30分鐘內(nèi)觀察結(jié)果。6、

26、結(jié)果判斷13滸坑鴇礦職工醫(yī)院sop文件-HIV 檢測(1)、陽性：出現(xiàn)兩條或三條紅線均為陽性反應(yīng)。(2)、陰性：僅出現(xiàn)質(zhì)控一條紅線，則實驗結(jié)果為陰性。(3)、無效：如無紅線(或只有反應(yīng)線)出現(xiàn)，表明實驗無效，須重新檢測。7、質(zhì)量控制：陰性對照顯示為陰性；陽性對照顯示為陽性。8、干擾和交叉反應(yīng)其他體液或混合樣品可干擾反應(yīng)，不可用EDT刖凝的全血血漿。9、生物參考區(qū)間正常人為陰性10、檢驗結(jié)果的可報告區(qū)間陰性反應(yīng)報告為“ HIV抗體陰性(-)”；陽性反應(yīng)報告為“ HIV抗體待復(fù)檢”。11、臨床意義：監(jiān)測血清或血漿中的HIV-1和HIV-2抗體，用于初步篩查受感染個體的HIV-1和HIV-2抗體。本

27、品檢測呈陽性反應(yīng)的樣品，需要進(jìn)一步送上一級實驗室進(jìn)行復(fù)檢 試驗和確證試驗。14滸坑鴇礦職工醫(yī)院sop文件-HIV 檢測流水號:SOP110分類號:zd-01HIV篩查實驗規(guī)程編寫人：吳瑞宗編寫日期:2011年1月8日檢測結(jié)果的反饋與報告保密制度1、對HIV抗體陽性者應(yīng)作好咨詢、保密和報告工作。對HIV陰性者，如近期有高危行為如性亂史、吸毒史、受血史、獻(xiàn)血漿史，或有急性流感樣癥狀等情況，為排除窗口期的可能，建議每3個月復(fù)查一次，連續(xù)2次。對HIV抗體可疑的對象 要作好咨詢和隨訪工作。2、HIV抗體檢測實驗室要有專人負(fù)責(zé)妥善保存各種實驗記錄、感染者檔案，不 得擅自修改或銷毀；嚴(yán)格遵守保密制度，未經(jīng)

28、省級衛(wèi)生行政部門許可，不得向無關(guān) 人員或單位提供任何情況。3、HIV初篩實驗室檢測的陽性結(jié)果不是最終結(jié)果，應(yīng)及時進(jìn)一步確認(rèn)，初篩實 驗室不能出具HIV抗體陽性的結(jié)果報告，更不能告知被檢者本人。4、HIV抗體確認(rèn)實驗室確認(rèn)的陽性結(jié)果，以機密級向送檢單位出具陽性報告；送檢單位接到陽性報告后，應(yīng)報告當(dāng)?shù)匦l(wèi)生防疫和衛(wèi)生行政部門，在對陽性者告知 檢測結(jié)果時要先作好法律、醫(yī)學(xué)、生活等方面的咨詢。5、所有經(jīng)確認(rèn)陽性的標(biāo)本，包括在實驗室留存的標(biāo)本，應(yīng)送省級HIV抗體確認(rèn)中心或省級衛(wèi)生行政部門指定的單位保存，不得擅自處理。標(biāo)本保存時間至少5年。15滸坑鴇礦職工醫(yī)院sop文件-HIV 檢測流水號:SOP111分類

29、號:zd-02HIV篩查實驗規(guī)程編寫人：吳瑞宗編寫日期:2011年1月8日實驗室清潔消毒制度消毒和滅菌是確保生物安全實驗室安全和維持正常運行的重要環(huán)節(jié)，實驗室工 作人員應(yīng)掌握消毒和滅菌的基本知識，了解常規(guī)的消毒滅菌方法，并嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn) 的操作規(guī)程來執(zhí)行。艾滋病篩查實驗室檢測可疑樣品時，充分準(zhǔn)備好廢棄物消毒具及消毒藥液。1、實驗室清潔消毒的原則：實驗室的清潔工作要在保證生物安全的前提下進(jìn) 行，符合生物安全防護(hù)的要求，遵守先消毒后清潔的原則。一般情況下，生物安全 實驗室應(yīng)由專門人員進(jìn)行消毒，但每名實驗室工作人員都有責(zé)任做好實驗室清潔消 毒工作。2、清潔和消毒用品：實驗室應(yīng)備有必要的清潔和消毒用品，

30、主要包括拖把、抹 布或紗布、水桶、消毒液、配好的 75,乙醇等。消毒劑主要是過氧乙酸、含氯消毒 劑等。消毒器械主要有紫外線燈、紫外線燈車。消毒器械和消毒液應(yīng)有衛(wèi)生許可批 文。消毒用品應(yīng)在有效期內(nèi)使用，應(yīng)按照說明書標(biāo)示的作用濃度（或強度）、作用時問和使用方法進(jìn)行消毒操作。3、滅菌設(shè)備（高壓鍋）：應(yīng)定期測定滅菌效果。大型滅菌設(shè)備在正式使用前和大 修后，應(yīng)通過性能檢測，證明可以有效使用。4、消毒和滅菌的方法：要根據(jù)消毒對象和微生物的種類選擇合適的消毒和滅菌 方法。耐高溫、耐濕的物品和器材，首選高壓蒸汽滅菌 ；金屬、玻璃器材、油劑類 和干粉類等可選干熱滅菌。畏熱、畏濕、畏腐蝕及貴重物品，可選環(huán)氧乙烷熏

31、蒸消 毒、滅菌。5、實驗室地面的清潔消毒：實驗室地面要濕式拖掃，禁止干拖干掃。需消毒 時，可用0.1,過氧乙酸或有效氯為500,1000mg,L的含氯消毒液噴灑或拖地，消毒 液的用量不得少于100ml,L。6、實驗臺、桌、椅、凳、門把手的清潔消毒：可用0.1,過氧乙酸拖地或有效氯 為500,1000mg,L的含氯消毒液噴灑或擦拭，作用10,15min后及時用清水擦洗，以 除去殘留的消毒液。7、紡織品的清潔消毒：棉織工作服、帽子、口罩等放入專用的污物袋中，用 70? 以上熱水加洗滌劑洗滌；有明顯病原微生物污染時，隨時噴灑消毒液消毒或放人專 用污物袋中，進(jìn)行高壓蒸汽滅菌處理。16滸坑鴇礦職工醫(yī)院s

32、op文件-HIV 檢測8、儀器設(shè)備的清潔消毒：可用消毒液或75%醇擦拭表面消毒，再用中性洗滌 劑和清水擦洗去污。消毒劑擦拭消毒時，要將消毒液擦拭需要消毒物品的所有表面 并保持充分作用時間。9、一次性手套等一次性使用的物品，應(yīng)丟棄在一次性垃圾袋內(nèi)，統(tǒng)一銷毀。10、手的清洗：實驗室工作完畢后應(yīng)立即進(jìn)行手的清洗和消毒?？刹捎酶袘?yīng)式自動洗手設(shè)備，使用瓶裝式液體皂，洗手后可用一次性紙巾擦拭，最好用烘干機烘 干。11、廢棄物處理：從艾滋病篩查實驗室出來的所有廢棄物，包括不再需要的樣 品、包裝盒和其他物品，均應(yīng)視為感染性廢棄物統(tǒng)一銷毀、并做好登記。17滸坑鴇礦職工醫(yī)院sop文件-HIV 檢測流水號:SOP1

33、12分類號:zd-03HIV篩查實驗規(guī)程編寫人：吳瑞宗編寫日期:2011年1月8日實驗室安全防護(hù)制度為確保實驗室人員的工作安全，防止交叉感染，請嚴(yán)格遵守安全防護(hù)制度1、工作人員要完成與工作有關(guān)的充足有效的技術(shù)培訓(xùn)，要了解 HIV危害，提 高全員安全意識，實驗室安全負(fù)責(zé)人要對工作和環(huán)境的安全負(fù)責(zé)，所有工作人員都 有責(zé)任保護(hù)自己和他人的安全。2、實驗室工作人員年度采血檢測 HIV抗體和備案制度。3、對有放試劑、樣品血清的冰箱應(yīng)上鎖，專人管理。4、實驗人員應(yīng)熟練掌握操作知識和消毒技術(shù)。5、進(jìn)入實驗室應(yīng)穿隔離衣，戴手套，傳染性危險大時應(yīng)戴雙層手套，戴防護(hù) 鏡，口罩，如防護(hù)用具破損應(yīng)及時更換，不用戴手套

34、的手觸摸暴露的皮膚等部位。6、實驗期間盡量避免使用利器，易碎器皿，禁止采用口腔吸液管。7、送檢樣品應(yīng)視為有潛在傳染性，由專人接管，登記，存放，提取。8、對帶入和帶出實驗室的物品都應(yīng)進(jìn)行檢查，包裹必須在下列情況下打開 ；人 員在處理感染源方面受過訓(xùn)練；具有處理感染源設(shè)備的實驗室；穿防護(hù)服的工作人員 用后置可消毒的容器。9、實驗用吸頭、手套、隔離服、污染物、廢棄物均放在指定垃圾袋中由專人統(tǒng)一進(jìn)行消毒，焚燒到無害化處理。10、不得在實驗室中吃食物，化妝打扮等，不得在實驗室會客。11、實驗室用品（包括工作服）不得用于其他用途，不可將私人和無關(guān)的物品帶 入實驗室。12、工作完畢，脫去手套后洗手，再脫去工

35、作服，用肥皂和流動水洗手，洗手 后離開實驗室。13、實驗結(jié)束后，要對工作平臺、儀器、地面用 84消毒液進(jìn)行消毒處理。14、遇有意外事故，立即啟動并執(zhí)行實驗室緊急情況處理規(guī)程，并進(jìn)行局部處理，如含氯消毒劑浸泡傷口，洗眼，漱口等，如遇高危意外事故，除進(jìn)行局部處理外，同時應(yīng)立即采取預(yù)防措施，包括對其隨訪，HIV檢測，休息并暫離崗位二個月，按醫(yī)囑服用HIV藥物等。18滸坑鴇礦職工醫(yī)院sop文件-HIV 檢測流水號:SOP113分類號:zd-04HIV篩查實驗規(guī)程編寫人：吳瑞宗編寫日期:2011年1月8日實驗室緊急情況處理規(guī)程1（目的規(guī)范實驗室安全與緊急情況的處理工作。2（適用范圍微生物實驗室和微生物安全二級實驗室。3（職責(zé)所有工作人員嚴(yán)格按此規(guī)程處理。4（細(xì)則：4.1 造成或可能造成實驗室污染，但未造成人身傷害的實驗室事故，由實驗室 負(fù)責(zé)人處理。例如實驗過程中，由于標(biāo)本、試劑溢出濺落造成操作臺或地面的污染 等，應(yīng)立即噴灑消毒液并覆蓋浸透消毒液的紙巾，等消毒液徹底浸泡30分鐘后,對污染的物品進(jìn)行處理