2019年乙型肝炎病毒標(biāo)志物表面抗原、表面抗體、e抗原、e抗體、核心抗體檢測試劑盒膠體金法

1、血清乙型肝炎病毒 HBsAg抗HBs HBeAg抗HBa 抗HBc 檢測作業(yè)指導(dǎo)書1 .目的：建立乙型肝炎病毒 HBsAg抗HB& HBeAg抗HBs 抗HBc定性 檢測標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，確保檢測結(jié)果的確鑿。2 .范圍：適用于檢驗科免疫實驗室。3 .規(guī)程：3.1 標(biāo)本的收集與準(zhǔn)備：3.2 用未加抗凝劑的真空抽血管抽取靜脈血 2ml。3.3 標(biāo)本完全凝固后才能離心，并分離血清。3.4 如試驗8小時內(nèi)不能完成，血清標(biāo)本放 28c保存。3.5 5標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn)：危機脂血、溶血、黃疸。4、測定原理：本試劑盒采用膠體金標(biāo)記免疫層析技術(shù)，將 HBsAg抗HB& HBeAg抗 HBe抗HBc單項膠體金標(biāo)記免疫層析

2、檢測條組裝成聯(lián)合檢測卡。樣品加到檢測 卡各項加樣孔后，再借助毛細(xì)作用移行至層析區(qū)，于檢測區(qū)和對照區(qū)，膠體金標(biāo)記顆 粒由于抗原抗體反應(yīng)形成富聚，形成或不形成肉眼可見的膠體金顆粒反應(yīng)帶，從而 實現(xiàn)對HBsAg抗HB$ HBeAg抗HBe 抗HBc的檢測，并作出存在與否的判 定。HBsAg用雙抗體夾心法檢測，膠體金標(biāo)記抗 HBs鼠單抗）與樣品中的HBsAg 結(jié)合形成復(fù)合物，再借助毛細(xì)作用復(fù)合物沿層析條向前移行，與檢測線區(qū)預(yù)包被的 抗HBs瞅單抗）形成A戰(zhàn)HBs岷單抗）-HBsAg抗HBs（鼠單抗）-固相材料”夾心物 而凝聚顯色。游離膠體金標(biāo)記抗 HBs瞅單抗）則在對照線處與羊抗鼠IgG抗體結(jié) 合而富

3、集顯色。陰性標(biāo)本則僅在對照線處顯色。結(jié)果于30分鐘內(nèi)判定?？笻Bs用雙抗原夾心法檢測膠體金標(biāo)記 HBsAg與樣品中的抗HBs結(jié)合形成 復(fù)合物，再借助毛細(xì)作用復(fù)合物沿層析條向前移行，與檢測線區(qū)預(yù)包被的HBsAg形成“A-HBsAg抗HBs-HBsA現(xiàn)相材料”夾心物而凝聚顯色。游離膠體金標(biāo)記 HBsAg則在對照線處與羊抗HBs結(jié)合而富集顯色。陰性標(biāo)本則僅在對照線處顯 色。結(jié)果于30分鐘內(nèi)判定。HBeAg用雙抗體夾心法檢測膠體金標(biāo)記抗 HBe（鼠單抗）與樣品中的HBeAg結(jié) 合形成復(fù)合物，再借助毛細(xì)作用復(fù)合物沿層析條向前移行，與檢測線區(qū)預(yù)包被的 抗HBe（鼠單抗）形成A啦HBe（鼠單抗）-HBeAg

4、抗HBe（鼠單抗）-固相材料”夾心物 而凝聚顯色。游離膠體金標(biāo)記抗 HBe（鼠單抗）則在對照線處與羊抗鼠IgG抗體結(jié) 合而富集顯色。陰性標(biāo)本則僅在對照線處顯色。結(jié)果于30分鐘內(nèi)判定。抗HBe用競爭法檢測樣品中的抗 HBe與膠體金標(biāo)記1號抗HBe（鼠單抗）競 爭性地與HBeAg結(jié)合，形成復(fù)合物，再借助毛細(xì)作用沿層析條向前移行，與檢 測線區(qū)預(yù)包被的2號抗HBe（鼠單抗）二次競爭結(jié)合，這樣抗HBe陽性時檢測線區(qū) 不能形成A啦HBe（鼠單抗）-HBeAg抗HBe（鼠單抗卜固相材料”膠體金顆粒凝聚 反應(yīng)物而顯色。與HBeAg相結(jié)合的膠體金標(biāo)記1號抗HBe（鼠單抗）復(fù)合物于對照 線與羊抗鼠IgG抗體結(jié)合而

5、富集顯色。陰性標(biāo)本則在檢測線區(qū)及對照線處均顯 色。結(jié)果于30分鐘內(nèi)判定?？笻Bc用競爭法檢測樣品中的抗 HBc與膠體金標(biāo)記抗HBc（l單抗）借助毛細(xì) 作用沿層析條向前移行，于檢測線處競爭性地與HBcAg結(jié)合，形成復(fù)合物，這樣抗HBc陽性時檢測線處不能形成“A-抗HBc（鼠單抗）-HBcAg周相材料”膠體金 顆粒凝聚反應(yīng)物，結(jié)果無著色；樣品抗HBc陰性時，則形成有色沉淀。與此同 時，游離的膠體金標(biāo)記抗 HBc瞅單抗）于對照線與羊抗鼠IgG抗體結(jié)合而富集顯 色。陰性標(biāo)本則在檢測線處及對照線處均顯色。結(jié)果于30分鐘內(nèi)判定。5、試劑：哎康生物技術(shù)有限公司5.1 組成：5.1.1. 型肝炎病毒 HBsA

6、g抗HBs HBeAg抗HBe 抗HBc聯(lián)合檢測卡5 項/卡5.1.1.1 HBsAg膠體金標(biāo)記免疫層析檢測條1條/卡5.1.1.2 抗HBs膠體金標(biāo)記免疫層析檢測條1條/卡5.1.1.3 HBeAg膠體金標(biāo)記免疫層析檢測條1條/卡5.1.1.4 抗HBe膠體金標(biāo)記免疫層析檢測條1條/卡5.1.1.5 抗HBc膠體金標(biāo)記免疫層析檢測條1條/卡5.1.2. 采樣吸管1支/卡5.1.3. 說明書1份/盒5.2 儲存：試劑盒應(yīng)置4c30c中避光保存，有效期十八個月。6、試驗方 法：6.1. 檢測前將待測標(biāo)本和檢測卡恢復(fù)至室溫；6.2. 自鋁箔袋中將檢測卡取出，水平放置并作好標(biāo)記；6.3. 用吸管吸取

7、血清/血漿標(biāo)本，逐滴加入檢測卡的五個加樣孔內(nèi)，每孔 1 2 滴(50100ul)。7、注意事項1.1 乙型肝炎病毒HBsAg抗HBs HBeAg抗HBe抗HBc檢測試劑盒適 用于測試血清或血漿標(biāo)本，用其他標(biāo)本或溶液測試可能出現(xiàn)異常結(jié)果。1.2 檢測結(jié)果的質(zhì)量控制：對照線無顯色時，表示實驗失敗；1.3 .本品僅供體外診斷用；1.4 .試劑啟用后應(yīng)盡快用完；1.5 .臨床標(biāo)本均應(yīng)視為有潛在傳染性，請按傳染疾病實驗室檢查規(guī)程操作。1.6 本產(chǎn)品為目視讀取結(jié)果，為保證判斷結(jié)果的正確，請勿在光線漆黑處對 結(jié)果進(jìn)行判斷。1.7 測試結(jié)果應(yīng)在測試開始后15分鐘開始讀取，30分鐘后判斷失效。1.8 請保證適量

8、標(biāo)本進(jìn)行檢測，過多過少的標(biāo)本量都有可能導(dǎo)致結(jié)果出現(xiàn)偏 差。8、臨床意義：用于人血清或血漿樣品中 HBsAg抗HBs HBeAg抗HBs抗HBc的聯(lián)合 檢測，適用于急性、慢性乙型肝炎的輔助診斷。乙型肝炎病毒是乙型肝炎的病原體。乙型肝炎是一種危機危害人類康健的 疾病。其危機后果是直接導(dǎo)致急性乙型肝炎、慢性乙型肝炎、肝硬化、肝衰竭 或死亡，并與某些人群的肝細(xì)胞癌（HCC的發(fā)生密切相關(guān)構(gòu)成繁復(fù)的乙型肝炎疾 病譜。乙型肝炎病毒還可通過母嬰傳播，危害極大。大樣本調(diào)查顯示我國HBsAg攜帶率約10%,慢性無癥狀HBV攜帶者（AsC丹 能超過1.2億人，成為HBV傳播最嚴(yán)重的傳染源。乙型肝炎病毒為DNA病毒，

9、其負(fù)鏈上有S、C P、及X這4個開放讀碼框 架，分別編碼HBsAg前S1多肽、前S2蛋白、HBcAg DNA多聚酶及HBxAg, HBcAg被蛋白酶水解后形成HBeAg人類感染乙型肝炎病毒后，可于體內(nèi)分別 產(chǎn)生抗HB3抗S1、抗S2、抗HBg抗HBe及抗HBx這些對應(yīng)的抗體，形成繁 復(fù)的抗原抗體系統(tǒng)。其中用于乙型肝炎病毒感染診斷及預(yù)后估計以HBsAgHBeAg 抗HBs抗HBg抗HBe最為常用。HBsAg HBeAg是乙型肝炎病毒的結(jié)構(gòu)成分，抗HB&抗HBa抗HBc為人類 感染乙型肝炎病毒后所產(chǎn)生的對應(yīng)抗體。它們均是乙型肝炎病毒感染的標(biāo)志物，但意義各有不同。HBsAg為乙型肝炎病毒感染的直接標(biāo)志物；抗 HBs見于HBV 感染或接種乙型肝炎疫苗，自然感染乙型肝炎病毒抗HBs陽轉(zhuǎn)多表示病情趨于穩(wěn) 定和恢復(fù)，預(yù)后優(yōu)良；HBeAg