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文檔簡(jiǎn)介
1、高一生物 實(shí)驗(yàn)二 生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn)點(diǎn)撥1、生物學(xué)中物質(zhì)的鑒定與化學(xué)中物質(zhì)的鑒定,其原理是一致的?;瘜W(xué)中被鑒定的物質(zhì)與所用的化學(xué)試劑要么發(fā)生顏色反應(yīng),要么產(chǎn)生沉淀, 在生物學(xué)中物質(zhì)鑒定的理念是:某些化學(xué)試劑能夠使生物組織中的有關(guān)有機(jī)化合物產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng).可溶性還原糖+ 斐林試劑磚紅色沉淀.(水浴加熱)脂肪小顆粒 + 蘇丹染液橘黃色小顆粒.(要顯微鏡觀察)蛋白質(zhì) + 雙縮脲試劑紫色反應(yīng).(要先加A液NaOH 溶液再加B液CuSO4 溶液)2、可溶性還原糖的鑒定實(shí)驗(yàn)中:應(yīng)選擇含糖量較高,顏色為白色或近白色的植物組織。以蘋果,梨為最好。且先要制備組織樣液。研磨時(shí),可加石英砂
2、和水一起研磨。3、斐林試劑要兩液混合均勻且現(xiàn)配現(xiàn)用,切勿將甲液和乙液分別加入組織樣液中。斐林試劑的配制過程示意:斐林試劑甲液( 0.1 g/ml的 NaOH 溶液)斐林試劑乙液( 0.05 g/ml的 CuSO4 溶液)4.關(guān)于鑒定還原糖的實(shí)驗(yàn),在加熱試管中的溶液時(shí),應(yīng)該用試管夾夾住試管上部,并放入盛開水的大燒杯中加熱。注意試管底部不要接觸燒杯底部,同時(shí)試管口不要朝向?qū)嶒?yàn)者,以免試管內(nèi)溶液沸騰時(shí)沖出試管,造成燙傷。如果試管內(nèi)溶液過于沸騰,可以上提試管夾,使試管底部離開大燒杯中的開水。5.做鑒定還原糖的實(shí)驗(yàn)時(shí),在鑒定之前,可以留出一部分樣液,以便與鑒定后的樣液的顏色變化作對(duì)比,這樣可以增強(qiáng)說服力
3、。6、脂肪的鑒定實(shí)驗(yàn)中:實(shí)驗(yàn)材料應(yīng)選擇富含脂肪的種子,以花生種子為最好。實(shí)驗(yàn)前浸泡3h4h(浸泡時(shí)間太短,不容易切片;浸泡時(shí)間過長(zhǎng),組織太軟,切下來的薄片不易成形),最適宜切片。7、實(shí)驗(yàn)中學(xué)生應(yīng)分工合作。在“還原糖的鑒定”實(shí)驗(yàn)中,當(dāng)每組兩個(gè)學(xué)生中的一個(gè)制備生物組織樣液時(shí),另一個(gè)學(xué)生可以用酒精燈將水煮開,以便縮短實(shí)驗(yàn)的等待時(shí)間。在“脂肪的鑒定”實(shí)驗(yàn)中,一個(gè)學(xué)生整理臨時(shí)裝片時(shí),另一個(gè)學(xué)生則可以調(diào)試顯微鏡。另外,在完成前兩個(gè)實(shí)驗(yàn)時(shí),一個(gè)學(xué)生洗刷試管、清洗玻片和整理顯微鏡,另一個(gè)學(xué)生則可以進(jìn)行后一個(gè)實(shí)驗(yàn)的操作。8、蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn):可用浸泡1d2d的黃豆種子(或用豆?jié){,或用雞蛋蛋白稀釋液).9、雙縮脲
4、試劑的使用,一定要先加入A液(即0.1 g/ml的 NaOH 溶液),再加入雙縮脲試劑B液(即0.01 g/ml的 CuSO4 溶液).10、還可設(shè)計(jì)一只加底物的試管,不加雙縮脲試劑,進(jìn)行空白對(duì)照,說明顏色反應(yīng)的引起是蛋白質(zhì)的存在與雙縮脲試劑發(fā)生反應(yīng),而不是空氣的氧化引起.實(shí)驗(yàn)報(bào)告提出問題1、 怎樣鑒定生物組織中的還原糖?斐林試劑怎樣配制和使用?選材;制備組織樣液;取組織樣液;加斐林試劑 (由斐林試劑甲液和乙液充分混合而成,不能分別加入);水浴加熱;觀察溶液顏色變化:淺藍(lán)色棕色磚紅色.結(jié)論:還原糖與斐林試劑在加熱煮沸的過程中生成磚紅色沉淀2、 脂肪的鑒定實(shí)驗(yàn)中,如何觀察?若有脂肪,可觀察到什么
5、現(xiàn)象?取材;切片;滴蘇丹染液染色、去浮色、制成臨時(shí)裝片;觀察:先在低倍鏡下,找到材料的脂肪滴,然后,轉(zhuǎn)為高倍鏡觀察.結(jié)論:細(xì)胞中的圓形脂肪小顆粒已經(jīng)被染成橘黃色.3、 蛋白質(zhì)的鑒定使用什么試劑?與斐林試劑相比有哪些相同點(diǎn)和不同點(diǎn)?雙縮脲試劑;斐林試劑和雙縮脲試劑的比較相同點(diǎn):都由NaOH溶液和CuSO4溶液構(gòu)成;斐林試劑甲液和雙縮脲試劑A都為0.1g/mL NaOH溶液.不同點(diǎn):CuSO4溶液濃度不一樣:斐林試劑乙液為 0.05 g/mLCuSO4溶液,雙縮脲試劑 B為 0.01g/mLCuSO4溶液.配制比例不一樣.使用方法不一樣:斐林試劑是甲,乙液一起混合后再使用,雙縮脲試劑則是先向待鑒定
6、材料加入A試劑搖勻后,再加入試劑B.鑒定的對(duì)象不一樣:斐林試劑鑒定的是還原糖,雙縮脲試劑鑒定的是蛋白質(zhì).反應(yīng)本質(zhì)及顏色反應(yīng)不一樣.用品準(zhǔn)備1.可溶性還原糖的鑒定實(shí)驗(yàn):選擇含糖量較高,顏色為白色或近白色的植物組織,以蘋果,梨為最好.2.脂肪的鑒定實(shí)驗(yàn):選擇富含脂肪的種子,以花生種子為最好(實(shí)驗(yàn)前浸泡3h4h).3.蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn):可用浸泡1d2d的黃豆種子(或用豆?jié){,或用雞蛋蛋白).4.儀器:剪刀,解剖刀,雙面刀片,試管,試管架,試管夾,大小燒杯,小量筒,滴管,玻璃漏斗,酒精燈,三腳架,石棉網(wǎng),火柴,研缽,石英砂,紗布,載玻片,蓋玻片,毛筆,吸水紙,顯微鏡.5、試劑:斐林試劑(0.1g/L的N
7、aOH溶液+ 0.05g/mL的CuSO4溶液);蘇丹染液;雙縮脲試劑; 體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精溶液;蒸餾水.探究過程可溶性還原糖脂肪蛋白質(zhì)原理與斐林試劑反應(yīng)生成磚紅的沉淀被蘇丹染液染成橘黃色(或被蘇丹染成紅色)與雙縮脲試劑反應(yīng)產(chǎn)生紫色物質(zhì)探究步驟樣液制備選材含糖較高、顏色白色或近于白色的植物組織,蘋果、梨最好富含脂肪的種子,以花生最好浸泡1-2d的黃豆種子(或用豆?jié){)或用雞蛋蛋白方法蘋果切塊研磨過濾濾液整理花生種子的切片黃豆浸泡切片研磨過濾濾液鑒定步驟樣液加斐林試劑振蕩水浴加熱煮沸切片染色漂洗鏡檢組織樣液加雙縮脲試劑A再加雙縮脲試劑B觀察顏色變化探究記錄1、藍(lán)色2、脂肪被染液染成(或被蘇丹染
8、成紅色)3、加無明顯變化,加后溶液變成探究思考4、選材要用含較高、顏色色或近于色的植物組織。斐林試劑不穩(wěn)定,一般配成A液()和B液()來保存,用時(shí)必須將A、B兩液后使用,切勿加入組織樣液中進(jìn)行檢測(cè)5、 切片要盡可能的 染色后一定要用溶液洗去浮色為什么觀察處最好只有1-2層細(xì)胞?6、用雞蛋蛋白時(shí),為什么一定要加以稀釋? 使用時(shí)雙縮脲試劑時(shí),為什么應(yīng)先加A液再加B液?討論與交流1、鑒定實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的理念是什么?請(qǐng)與同學(xué)討論一下具體原理。2、在探究過程中,哪一步實(shí)驗(yàn)使用了顯微鏡?哪一步實(shí)驗(yàn)需要水浴加熱?3、本實(shí)驗(yàn)使用的試劑是不是唯一的試劑?還可用什么代替?實(shí)驗(yàn)拓展1、
9、在鑒定尿液中是否含有葡萄糖時(shí)還能用其他那些鑒定方法?2、據(jù)藥理研究,一種茅草的根內(nèi)含有降血糖的因子及多種益于健康的成分,某公司將它開發(fā)為一種保健飲料。該產(chǎn)品是否適用于糖尿病患者,生物興趣小組的同學(xué)依次作為研究課題,請(qǐng)你完成下面的實(shí)驗(yàn)鑒定報(bào)告。實(shí)驗(yàn)?zāi)康模鸿b定一種茅草的根是否含有還原性糖和淀粉。實(shí)驗(yàn)原理:還原性糖可用 試劑鑒定,淀粉可用 試劑來鑒定。實(shí)驗(yàn)器材:一種茅草的根、所需試劑、刀
10、片、載玻片、酒精燈、試管夾、火柴、滴管。實(shí)驗(yàn)步驟:)鑒定還原性糖: )鑒定淀粉: &
11、#160; 實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象: &
12、#160; 結(jié)果分析: &
13、#160; 。在鑒定還原性糖的實(shí)驗(yàn)操作中應(yīng)注意: 。3、下列物質(zhì)中,能被蘇丹IV染液
14、染成紅色的是( )A.馬鈴薯塊莖 B.浸軟的蓖麻種子C.蛋清液 D.蘋果4、用斐林試劑可以鑒定生物組織中還原糖的的存在,用雙縮脲試劑可以鑒定蛋白質(zhì)的存在,醫(yī)學(xué)上,用上述兩種試劑能夠診斷的疾病是( )A.糖尿病,腸炎 B.糖尿病,胃炎 C.糖尿病,腎炎 D. 腎炎,胃炎5、將面團(tuán)包在紗布中在清水中搓洗,鑒定黏留在紗布上的黏稠物質(zhì)和洗出的白漿用的試劑分別是( )A.碘液,蘇丹溶液 B.雙縮脲試劑,碘液C.亞甲基藍(lán)溶液,蘇丹 D.碘液,斐林試劑實(shí)驗(yàn)練習(xí)1.用于還原糖鑒定的實(shí)驗(yàn)材料中經(jīng)比較,顏色反應(yīng)的明顯程度依次是( )A.蘋果白蘿卜白色甘藍(lán)葉梨 B. 梨蘋果白蘿卜白色甘藍(lán)葉C. 蘋果梨白蘿卜白色甘藍(lán)
15、葉 D. 蘋果梨白色甘藍(lán)葉白蘿卜2. 下列哪組試劑在使用過程中,必須經(jīng)過加熱( ) A.斐林試劑鑒定還原糖的過程中B.蘇丹和蘇丹染液在鑒定動(dòng)物組織中的脂肪時(shí)C.雙縮脲試劑鑒定蛋白質(zhì)時(shí)D.碘化鉀溶液鑒定淀粉時(shí)3. 用蘇丹染液對(duì)脂肪組織進(jìn)行染色時(shí),可用來沖洗浮色的藥品是( ) A.吸水紙 B.H2O C.50%的酒精 D.無水酒精4. 下列哪個(gè)實(shí)驗(yàn)用到顯微鏡( )A.還原糖的鑒定 B.蛋白質(zhì)的鑒定C.脂肪的鑒定 D.淀粉的鑒定5,與硫酸銅溶液在堿性環(huán)境中反應(yīng),生成紫色物質(zhì)的是( )A.淀粉 B.脂肪 C.蛋白質(zhì) D.核酸6.用斐林試劑鑒定還原糖時(shí),必須注意以下幾點(diǎn):(1)被鑒定材料應(yīng)選擇含 較高,
16、顏色為 的植物組織,以 為最好.(2)斐林試劑很不。 必須 時(shí)再配制并立即使用.配制的方法是將4- 5滴 滴入2m1 中.(3)鑒定反應(yīng)必須在 中進(jìn)行.7.在鑒定花生種子細(xì)胞內(nèi)含脂肪的實(shí)驗(yàn)過程中,應(yīng)先將花生子葉薄片用 染色,然后用 洗去 ,再制成 最后,鏡檢結(jié)果是 .8.鑒定豆?jié){中的蛋白質(zhì)時(shí),應(yīng)先加入2m1 ,搖蕩均勻后,再加入3-4滴 ,再搖蕩均勻后,顏色變化是 .9.鑒定脫脂奶粉是否為偽劣產(chǎn)品,需用的化學(xué)試劑是( )A.斐林試劑 B. 蘇丹染液 C. 雙縮脲試劑 D.紅墨水10.對(duì)斐林試劑和雙縮脲試劑的配方,敘述不正確的是( )A.都含有NaOH溶液和CuSO4溶液B.斐林試劑的配制是將4
17、-5滴0.05g/ml的CuSO4溶液滴入2ml 0.1g/ml的 NaOH溶液中即成C.雙縮脲試劑是將3-4滴0.01g/ml的CuSO4溶液滴入2ml0.1g/ml的 NaOH溶液中混合而成的D.雙縮脲試劑含有兩種試劑:質(zhì)量濃度為0.1g/ml的NaOH溶液和質(zhì)量濃度為0.O1g/ml的CuSO4溶液11.鑒定蛋白質(zhì)樣品時(shí)加雙縮脲試劑的正確做法是( )先加A液,混合后再加B液搖勻觀察 先加B液,混合后再加A液搖勻觀察C.A,B液混合后加入,搖勻后觀察D.A,B液同時(shí)加入樣液,搖勻后觀察參考答案實(shí)驗(yàn)一實(shí)驗(yàn)報(bào)告: 提出問題1、選材;制備組織樣液;取組織樣液;加斐林試劑 (由斐林試劑甲液和乙液充
18、分混合而成,不能分別加入);水浴加熱;觀察溶液顏色變化:淺藍(lán)色棕色磚紅色。結(jié)論:還原糖與斐林試劑在加熱煮沸的過程中生成磚紅色沉淀2、取材;切片;滴蘇丹染液染色、去浮色、制成臨時(shí)裝片;觀察:先在低倍鏡下,找到材料的脂肪滴,然后,轉(zhuǎn)為高倍鏡觀察.結(jié)論:細(xì)胞中的圓形脂肪小顆粒已經(jīng)被染成橘黃色.3、雙縮脲試劑;斐林試劑和雙縮脲試劑的比較:相同點(diǎn):都由NaOH溶液和CuSO4溶液構(gòu)成;斐林試劑甲液和雙縮脲試劑A都為0.1g/mL NaOH溶液.不同點(diǎn):CuSO4溶液濃度不一樣:斐林試劑乙液為 0.05 g/mLCuSO4溶液,雙縮脲試劑 B為 0.01g/mLCuSO4溶液.配制比例不一樣.使用方法不一樣:斐林試劑是甲,乙液一起混合后再使用,雙縮脲試劑則是先向待鑒定材料加入A試劑搖勻后,再加入試劑B.鑒定的對(duì)象不一樣:斐林試劑鑒定的是還原糖,雙縮脲試劑鑒定的是蛋白質(zhì).反應(yīng)本質(zhì)及顏色反應(yīng)不一樣.探究過程1、 棕色磚紅色沉淀; 2、蘇丹;橘黃色(或
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