淋球菌培養(yǎng)及鑒定ppt課件

1、1共同點(diǎn)：革蘭陰性球菌、單個(gè)或成雙排列、無芽孢、無鞭毛、有菌毛 觸酶試驗(yàn)（+） 氧化酶試驗(yàn)（+）不同點(diǎn)：對糖分解能力、硝酸鹽還原能力和DNA合成酶 淋球菌即淋病奈瑟菌，屬于奈瑟菌屬。淋球菌即淋病奈瑟菌，屬于奈瑟菌屬。2淋球菌，是一種革蘭陰性雙球菌，呈卵圓形或腎形，成對排列，直徑約0608m，常位于多形核白細(xì)胞的胞漿內(nèi)，慢性期則在細(xì)胞外。生長適宜溫度為3738，淋菌不耐熱，干燥環(huán)境存活12小時(shí)，555分鐘立即死亡，附著在衣褲和臥具上的淋菌最多只能生存24小時(shí)，一般消毒劑易將其殺死。34傳染方式：成人 性接觸 初生嬰兒 患病母親產(chǎn)道感染 致病物質(zhì)：菌毛 外膜蛋白PI：中性粒細(xì)胞受損 外膜蛋白PII

2、：黏附 外膜蛋白PIII：阻抑抗體活性 IgA1酶:破壞粘膜局部抗體5男性急性淋菌性前尿道炎 女性淋菌性宮頸炎、尿道炎 初生嬰兒膿漏眼 發(fā)展：男性后尿道炎、前列腺炎、精囊炎、附睪炎等 女性子宮內(nèi)膜炎、輸卵管炎等 后遺癥：不育、不孕、異位妊娠6淋病是由奈瑟淋球菌所致的泌尿生殖系統(tǒng)感染。不僅可引起男性尿道炎、女性宮頸或尿道炎，還可經(jīng)血行播散引起菌血癥。臨床表現(xiàn)因感染的人群不同，部位不同而有差別7直接涂片：取尿道或?qū)m頸膿性分泌物涂片，作革蘭染色，鏡下可見大量多形核白細(xì)胞，細(xì)胞內(nèi)可見數(shù)量不等的革蘭陰性雙球菌。涂片對女性檢出率低，有假陰性，必要時(shí)應(yīng)作培養(yǎng)。細(xì)菌培養(yǎng)：標(biāo)本在選擇性培養(yǎng)基上培養(yǎng)，可出現(xiàn)典型菌

3、落，氧化酶試驗(yàn)陽性，鏡檢可見到革蘭陰性雙球菌，還可用檢測淋球菌DNA，直接免疫熒光試驗(yàn)協(xié)助確診。8淋球菌是淋病的病原菌，為實(shí)驗(yàn)室確診淋病提供依據(jù)。（培養(yǎng)法為確診淋病的金標(biāo)準(zhǔn)）淋球菌藥敏試驗(yàn)，測定藥物抑菌或殺菌能力，以便準(zhǔn)確有效利用藥敏進(jìn)行治療。9淋球菌的營養(yǎng)要求較復(fù)雜，所用的培養(yǎng)基中應(yīng)含有動物蛋白及細(xì)菌生長所需的各種因子。目前國內(nèi)常用的是血液瓊脂或巧克力瓊脂。國外常用的培養(yǎng)基有Thayer-Martin(T-M)培養(yǎng)基、NewYork City(NYC)培養(yǎng)基和Martin-Lewis(ML)培養(yǎng)基等。10T-M培養(yǎng)基是在GC基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，加入血紅蛋白(1%)、抗生素(萬古霉素3g/ml、粘菌

4、素7.5g/ml和制霉菌素12.5g/ml)和淋球菌增菌劑，使絕大多數(shù)雜菌被抑制而淋球菌菌落長得較大，在乎皿中幾乎呈純培養(yǎng)，從而大大提高了由子宮頸、尿道，尤其是咽和直腸部位分離出淋菌的陽性率。 11淋球菌對外環(huán)境變化頗為敏感，對寒冷和干燥抵抗力很弱。因此，為了保證培養(yǎng)有足夠的成功率，取材后應(yīng)立即接種，標(biāo)本離體時(shí)間越短越好。培養(yǎng)的最適溫度為3537，超過38.5或低于30便生長不良。因此，孵育的溫度要恒定。淋球菌為需氧菌，但最初從人體分離時(shí)，為促進(jìn)生長，需用5%二氧化碳環(huán)境培養(yǎng)。12取材部位準(zhǔn)確女性病人標(biāo)本：取宮頸內(nèi)膜分泌物 男性病人標(biāo)本：取尿道口膿性分泌物培養(yǎng)基預(yù)溫立即接種最好床邊接種合適的培

5、養(yǎng)基CO2培養(yǎng)13分泌物分泌物直接涂片染色直接涂片染色 分離培養(yǎng)分離培養(yǎng)可疑菌落可疑菌落 涂片染色涂片染色生化反應(yīng)生化反應(yīng)初步報(bào)告初步報(bào)告生長特性生長特性14經(jīng)24h48h的培養(yǎng)后，可形成圓形、凸起、濕潤、光滑、半透明或灰白色菌落，似露水珠，易乳化，直徑為0.5mm 1.0mm。1516從菌落上取材作涂片，革蘭染色后可見到菌的大小及染色的深度有差異，排列也不一致，呈典型革蘭陰性雙球菌。1718來自泌尿生殖道符合初步鑒定標(biāo)準(zhǔn)的分離株，一般可診斷為淋球菌，準(zhǔn)確率達(dá)98%。對于菌落形態(tài)不典型的分離株，來自咽部、眼睛或其他泌尿生殖道外部位的分離株，應(yīng)作確診試驗(yàn)。19氧化酶試驗(yàn)糖分解試驗(yàn)（葡萄糖、麥芽糖

6、、蔗糖）30過氧化氫試驗(yàn)20形態(tài)染色典型：革蘭陰性球菌培養(yǎng)特性：光滑、濕潤、易乳化菌落生化反應(yīng)：氧化酶陽性、僅分解葡萄糖（麥芽糖、乳糖、蔗糖、果糖均不分解）21菌名菌名生長生長產(chǎn)酸產(chǎn)酸硝酸鹽還硝酸鹽還原原DNA酶酶巧克力平皿上特巧克力平皿上特點(diǎn)點(diǎn)巧克力或血瓊脂(22)營養(yǎng)瓊脂(35)葡萄糖麥芽糖乳糖蔗糖果糖淋病奈瑟菌淋病奈瑟菌-+-光滑,灰白色,透明腦膜炎奈瑟腦膜炎奈瑟菌菌-+-光滑,灰,無色,透明,個(gè)別淡黃粘膜奈瑟菌粘膜奈瑟菌+-+-黃綠,光滑卡他布蘭漢卡他布蘭漢d+-+灰白棕色、易乳化22分泌物分泌物男性確診男性確診女性（其女性（其他標(biāo)本）他標(biāo)本）直接涂片染色直接涂片染色 分泌物培養(yǎng)分泌物培養(yǎng)（巧克力色平板）巧克力色平板）可疑菌落（菌落形態(tài)、陰性雙球菌、可疑菌落（菌落形態(tài)、陰性雙