華南農(nóng)業(yè)大學(xué)試驗報告氣質(zhì)聯(lián)用儀法GC-MS分析測定檀香籽油主成分

1、華南農(nóng)業(yè)大學(xué)綜合性實驗報告實驗工程名稱：氣質(zhì)聯(lián)用儀法GC-M0分析測定檀香籽油主成分實驗工程性質(zhì)：綜合性實驗所屬課程名稱：食品儀器分析綜合實驗 I班級：13級食品質(zhì)量與平安4班姓名：黃嘉源學(xué)號：2021305204041實驗試劑與儀器安捷倫7890A/5975C-GC/MSD檀香籽油2試驗方法與原理2.1 儀器根本原理和應(yīng)用范圍質(zhì)譜法可以進行有效的定性分析,但對復(fù)雜有機化合物的分析就顯得無能 為力；而色譜法對有機化合物是一種有效的別離分析方法,特別適合于進行有機化合物的定量分析,但定性分析那么比擬困難.因此,這兩者的有效結(jié)合必將為化 學(xué)家及生物化學(xué)家提供一個進行復(fù)雜有機化合物高效的定性、定量分

2、析工具.像這種將兩種或兩種以上方法結(jié)合起來的技術(shù)稱之為聯(lián)用技術(shù),將氣相色譜儀和質(zhì)譜儀聯(lián)合起來使用的儀器叫做氣-質(zhì)聯(lián)用儀.氣質(zhì)聯(lián)用儀是利用試樣中各組份在氣相和固定液兩相間的分配系數(shù)不同,當(dāng)汽化后的試樣被載氣帶入色譜柱中運行時, 組份就在其中的兩相間進行反復(fù)屢次 分配,由于固定相對各組份的吸附或溶解水平不同,因此各組份在色譜柱中的運行速度就不同,經(jīng)過一定的柱長后,便彼此別離,按順序離開色譜柱進入檢測器 質(zhì)譜儀,產(chǎn)生的離子流訊號經(jīng)放大后,在記錄器上描繪出各組份的色譜峰.氣質(zhì)聯(lián)用儀的工作過程是高純載氣由高壓鋼瓶中流出,經(jīng)減壓閥降壓到所需壓力后,通過凈化枯燥管使載氣凈化,再經(jīng)穩(wěn)壓閥和轉(zhuǎn)子流量計后,以穩(wěn)定

3、的壓 力、恒定的速度流經(jīng)氣化室與氣化的樣品混合,將樣品氣體帶入色譜柱中進行分 離.別離后的各組分隨著載氣先后流入檢測器 質(zhì)譜儀,然后載氣放空.檢測器 將物質(zhì)的濃度或質(zhì)量的變化轉(zhuǎn)變?yōu)橐欢ǖ碾娦盘? 經(jīng)放大后在記錄儀上記錄下來, 就得到色譜流出曲線.根據(jù)色譜流出曲線上得到的每個峰的保存時間,可以進行定性分析,根據(jù)峰面積或峰高的大小,可以進行定量分析.2.2 定性分析原理將待測物質(zhì)的譜圖與譜庫中的譜圖比照定性.2.3 定量分析原理相對定量方法峰面積歸一法：由氣質(zhì)聯(lián)用儀得到的總離子色譜圖或質(zhì)量 色譜圖,其色譜峰面積與相應(yīng)組分含量成正比,可對某一組分進行相對定量.絕對定量法標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)標(biāo)定法：配制一組適宜濃

4、度的標(biāo)準(zhǔn)樣品,在最正確測 定條件下,由低濃度到高濃度依次測定它們的吸光度 A,以吸光度A對濃度C作 圖得A-C標(biāo)準(zhǔn)曲線.在相同的測定條件下,測定未知樣品的吸光度,從A-C標(biāo)準(zhǔn) 曲線上用內(nèi)插法求出未知樣品中被測元素的濃度.2.4 實驗條件索氏提取檀香種子油脂,經(jīng)甲酯化處理后上GC-MS檢測脂肪酸組成.柱子型號：DB-5色譜條件：初溫：120C,保持5min；以5C/min升至220C,保持1min；再以4c /min ,升至250 c/min,保持5min.載氣為高純氮氣.進樣口溫度：250 c ;分 流比：20: 1.質(zhì)譜條件：離子源EI,電離電壓：70Ev離子源230C.質(zhì)量范圍：40-40

5、0Amu3實驗步驟3.1 香精油提取目前迷迭香精油的提取有冷磨法、冷榨法、蒸儲法、浸提法、吸取法和超臨 界萃取法等方法,其中蒸儲法操作簡便,本錢較低,是最常用的方法.本實驗的精油由研究生師兄師姐們提供,具體制備方法不介紹.3.2 使用GC-MS勺步驟順序3.2.1 開、關(guān)機順序開機：通氮氣-開電源-設(shè)置溫度柱箱、汽化-加熱-通空氣、氫氣 -點火-調(diào)準(zhǔn)基線-進樣關(guān)機：關(guān)氫氣、空氣-關(guān)掉加熱器-通者氮氣降溫至室溫-關(guān)電源-關(guān)氮 氣3.2.2 溫度設(shè)定1柱溫設(shè)定范圍：-99C399C、進樣器溫度設(shè)定范圍：099C2 了解溫度設(shè)定情況3監(jiān)測實際溫度4設(shè)定溫度的啟動和停止3.2.3檢測器1 選擇檢測器,

6、2 設(shè)置檢測器量程3 .2.4分析當(dāng)柱溫箱、汽化室溫度設(shè)定好后,按 STARTS,開始升溫到設(shè)定的溫度.當(dāng) 柱室溫度到達所設(shè)定溫度土 1C以內(nèi)時,READYT亮.但因溫度穩(wěn)定到達所設(shè)定 值之前,會略有波動,REDAYT會閃爍一、二次,但很快就會穩(wěn)定.當(dāng)柱箱和汽 化室溫度到達設(shè)定的溫度時,就可以進樣分析了.分析條件：1氣相色譜條件：色譜柱DB-5,前進樣口溫度：270C,升溫程序為：50C 保持1分鐘,以5C/min速率升溫到200c保持3min,整個程序為34min,分流比 為 40: 1.(2)質(zhì)譜條件：四級桿溫度：150C,離子源(EI):70ev,230c .4 .2.5數(shù)據(jù)處理所得譜圖

7、經(jīng)譜庫檢索結(jié)合手工檢索,并查閱有關(guān)資料進行精油組分定性4實驗結(jié)果用氣相色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng),以峰面積歸一法測得其中各組分的相對百分含量, 對總離子流圖中的各峰經(jīng)質(zhì)譜掃描后得到質(zhì)譜圖經(jīng)過NIST質(zhì)譜計算機數(shù)據(jù)系統(tǒng)檢索,結(jié)合人工譜圖解析,結(jié)果檀香籽油別離出28個色譜峰,共鑒定出21個化 學(xué)成分,占總成分含量的96.11%,具體如表1.一當(dāng)軍校索出告數(shù)推辭鏡：E：余雪妙.氣竟實驗課2021.11.1伯n3pE片處推文件二五洲一組Q宋集 :18 Nov 3014 1:44犢 樣品 ：其世 ：ALS樣品跖二1哇品孟程因子工1檢索庫* DANISTO0 L最小,旗母10荒£普圖t 事點法分事件化學(xué)二

8、井某粗勺鋅-events6闡I包工 商段%參比器CA&J St*1 20 940 0.10 D:MST0519-Hexacle；Enaic acid metfiyl esier, 11 1 925 001120-25-S 39 -Methyl hexadec-GHgnoate 111879 010030-74-7 99 9-Hexaijecenoic acid, methyl ester 111920 G01120-25-8 99 億卜2 21 037 0 03 D：NlST0rLG-HcMadetenoic Scid Ethyl esierL 1" 1925 Ml 120-

9、25-8 39 億卜Q-HexadeCenoic 總匚id Ethyl esier, 1 , 1920 tXJl 120-25-8 39 (Z)-i-Hexadcenok; acid, methyl cater 1119CS 05500C-42-5 993 51.128 0 01 D:NISTOB.L9-Hexadecencjic acid methyl esterL 111925 001120-25-8 39 憶卜Methyl hexadeC-Snenoate111679 01003074-7 99S*Hexadecenoic addL methyl esier 111920 OOi 120

10、字合的 億卜4 21.459 1.30 D:NIST08.LHexadecanoic acid, methyl ester 113682 0001124&-0 99Hexadecanoic acid: methyl ester 113690 0001123%0 97Hexadecanoic acid, methyl ester 113688 0001124&-0 965 24.673 0.27 D:NIST08.L10,13-Octadecadienoic acid, methyl 132267 056554-62*2 99 ester9,12-Octadecadienoic

11、acid, methyl 132282 0C2566-97-4 99 ester,舊 E卜Methyl 10-trans.12-cis-octadecadie 132261 10C0336-44-2 99 noate6 24.847 12.88 D:NISTO8.LS-Octadeceno«c acid (2卜,methyl e 133714 OO 112W2-9 9g ster9-Oetsdeeenoic acid, methyl ester, 133720 001937-62*8 99(訃9-Oct3decenoic acid, methyl ester, 133723 0019

12、37-62-8 99 (斗7 24 906 036 D:NIST08.L9-Octadecenoic acid, methyl estert 133723 001Q37-62*fi 99(E)cis-13-Octadecenoic acid, methyl e 133713 1000333-5S-3 99 ster11-Octadecenoic acid, methyl ester 133708 C52380-33-3 998 25.126 0.07 D:NIST08.Ltrans-13-Octadecenoic acidt methyl 133727 1000332-61-3 91 este

13、r7,10.13-Hexadecatrienoic acid, met 108848 055554-3(M 70hyl esterBicyclo3.3.0oct-2-e n-7-one. 6-me 16318 1000150-43-7 64thyl-9 25.261 1.43 D:NIST08.L135a81 000112.61.B 99135390 000112-61-8 99135188 000112-61.B 98Octadecanoic acid, methyl ester Octadecanoic acid, methyl ester Octadecanoic acid, methy

14、l ester10 25.467 2.04 D:NlST08.L9-Oetsdeeynoic acid, methyl ester 132244 001120-32-7 91E,Z-1.3,12.Nonadecatriere107440 1000131-11-3 78Cyciodecene. 1-methyl- 24992 066633-38-3 76122781 000506.17.2 96 108g22 0s95122794 00-0112-79-8 9511 25.554 0.19 D:NISTO8.L cis-Vaccenic acid5.17.Octadecadienal. (Z&g

15、t;- 9-Octadecenoic acid, (E>-12 25.655 0.57 D:NISTO8.LMethyl I0-transj2-cis-octadecadie 132261 1000336-44-2 99 noateMethyl 9-cist11 -transoctadecadien 132260 1000336-44Q 97 oate9.12-Octadecadienoic acid (Z.Z>-, 132273 000112-63) 94 methyl ester13 26.121 0.07 D:NISTO8.LMethyl I0-transj2-cis-oct

16、adecadie 132261 1000336-44-2 97 noateMethyl 9-cis,11 -trans-octadecadien 132260 1000336-44-0 968,11 -Octadecadienoic acid, methyl 132258 05659&-58-7 94 ester14 26.463 1.41 D:NlST08.LMethyl io.trars.12is<x:tadecadie 132261 1000336-44-2 99 noateMethyl 9-cis,11 -transoctadecadien 132260 1000336-

17、44-0 97 oateMethyl 6.11-octadecadienoate132235 10003363-2 9415 27.368 45.84 D:kNlST08.LMethyl octadeca-9-yn-11-trans-enoa 130768 1000336-41-9 99 teBicydo2.2.1heptane, 2.2-dimethy 15691 00097-32-5 83l-5-methylene- Gannolenic Acid119795 000506-26-3 7216 27.469 27.60 D:NlST08.LMethyl octadeca-9-yn-11-t

18、rans-enoa 130768 1000336-41 -5 95 teB icy cl o(2.2.1 hepta ne. 2.2 -d i methy 15691 000497-32-5 83I. 5-methyl 豈 ne-Cyclobutanio, 1.3-butadionyl-, (Z)- 5442 080344-4 5-2 5017 27.925 1.24 D:NlST08.L cis-7,10.13.16-Doco-satetraeno<c ac 169546 1 COO 333-54-8 87 id. methyl ester Arachidonic acid13goe4

19、 000506-32-1 80Cyciopropane. (R,R>- 23602 077210-40-5 68enyl >-2-etrienyl-18 28.486 0.14 D:NlST08.L Methyl octadeca-O-yn-11-tranB-«no» 130768 1000336-41 *10 99 te 1.3-Cyclododecadiene. (E.Z>-33065 001129926 943a,6-Methano-3a H-inden-5(4H)-one. 23459 016489-26-2 87 hexa hydro-19 28

20、.580 0.43 D:NlST09.LMethyl dt 10-epoxyoctadecanoate 143848 1000336*4 7-9 87Oxiraneoctanoic acid. 3-octyl-, me 145869 002566-91-8 76 thyl ester, cis- 7*OctadFcenoic acid methyl aster 1336的6420 28.761 0.46 D.NlST08.L cis-11-Eicosenoic acid, methyl est 154536 1 000333-63-8 99 er11-Eicosenoi acid, methy

21、l ester 154532 00394S)8-5 99 cis-13-Eicosenoic acid, methyl est 154535 1000333-52-1 99 er21 28.809 0.35 D:NISTO8.LMethyl 8,10-octadecadiynoate129248 1000336-48-2 589.12-Octadecadiynoic acid, methyl 12S270 1000333-56-4 55 esterI0,12.0ctadecadiynoic acid 118366 007333-25-7 5022 28.967 1.48 D:NIST08.LM

22、ethyl 10.12-octadecadiynoate 129252 1000336-47-7 87 Methyl 8,10-octadecadiynoate 129248 1000336-4B-2 589,12-Octadecadiynoic acid, methyl 129270 1000333-S6-4 58 ester23 29.168 0.05 D:NISTO8.L9-Hydroxypentadecanoic acid, methy 115237 067401-19-8 74 I esterOctadecanoic acidv 9-hydroxy-, met 147395 0024

23、47-53-2 49 hyl esterThiazoiidme. 2-(2-furyl)-27512 051859-«0-0 3824 29.262 0.20 D:NIST08.LMethyl 16-memyinonadecanoate156020 1000352-20-C 99Eicosanoic acid, methyl ester 156024 001120-28-1 99 Eicosanoic acid, methyl ester 156023 001120-28-1 9925 29.544 0.33 D:NIST08.L8,11 -Eicosadlenoic acid, m

24、ethyl es 153172 056599-56-5 99 teriso-Propyl 9- cis .11- trans -octa 153178 1000336*68-5 93 decadienoate11J 3-Ei-cosadienoic acidT methyl e 153174 056599-57-6 93 ster26 30.108 0.13 D:NIST08.L8,11-Eicosadienoic acid, methyl es 153172 056599-56-5 的 ter10.13-Eicosadienoic acid, methyl e 153175 03022S-5

25、0-8 94 ster11.13-Eicosadienoic acid, methyl e 153174 056599-57-6 94 ster27 30.791 0.10 D:NIST08.LNaphthalene, decahydro-1.1-dinnethy 34469 035431-04-0 47卜Benzene, 4.ethy1.1,2«<limethoxy- 34115 005688-51-7 417,7a-Dimethyl-33.4.5.7a-tetrahydro 34218 1000136-11-2413H-b enzofura n-2-one28 31.087

26、 0.12 D:NIST08.Ll-CyclododecadieneJEZh33c65 001129-92-6 93Methyl octadeca-9-yn-11-trans-enoa 130768 100033641© 87te3a 6-Methano-3aH-mden-5(4H)-one, 2s459 016489-26-2 86 hexahydro-豐度_GCMBJSMT|T1 C MM一組.Ddata.ns5.5e+07'5e+074.5e+074e+073.5e+073e+072.5e+072e+07.1.5e+07-1e+075000000Il! 1I i-, I

27、 i0r-寸,占比心9*：4 ：.、y i i i i ! i i i i i i !1 -i i i i i i !) i i i i i i i i I i i i i 1 p i i i i i i p i i i i i | i p i I i i i6.00 8.00 10.0012.00 14.00 16.00 1 8.00 20.0022.00 24.0026.00 28.00 30.00圖1檀香籽油主要成分分析譜圖表1檀香籽油主要成分及其質(zhì)量分數(shù)保存時間化合物分子式質(zhì)量分數(shù)編RtR / min(Compound )(MolecularRelativeFormular )Cont

28、ent/ %120.940(Z)-十六烯酸甲酯C18H38O4S.Na0.10%methyl (9E)-hexadec-9-enoateC17H32O2221.031(Z)-十六烯酸甲酯C18H38O4S.Na0.03%11-Hexadecenoic acid methyl esterC17H32 O2321.128(Z)-十六烯酸甲酯C18H38O4S.Na0.81%methyl (9E)-hexadec-9-enoateC17H32O2421.459棕桐酸甲酯；十六酸甲酯；十六烷酸甲酯C17H34 O21.30%524.67310,13-Octadecadienoic acid methy

29、l esterC19H34O20.27%9,12-Octadecadienoicacid, methyl ester624.847油酸甲酯；Methyl 9-(Z)-octadecenoateC19H36O212.88%724.906Methyl 9-(Z)-octadecenoate ；C19H36O20.36%METHYL 11-OCTADECENOATE825.1267,10,13-Hexadecatrienoic acid, methylC17H28O20.07 %ester925.261硬脂酸甲酯；十八碳酸甲酯C19H38O21.43%1025.4679-煥十八酸甲酯C19H34O2

30、2.04%1125.554順式-十八碳烯酸C18H34O20.19%9,17-Octadecadienal,(9Z)-;C18H32O9,17-Octadecadienal,(Z)-;(Z)-9,17-Octadecadienal反油酸；反式-9-十八碳烯酸；凝油酸；洋橄欖C18H34O2油酸1225.655亞油酸甲酯；(Z,Z)-9,12-十八烷二烯酸甲C19H34O20.57%酯；9,12-十八烷二烯酸甲酯;順-9,12-十八碳二烯酸甲酯1326.121一C19H34O20.07%141526.46327.368一2,2-Dimethyl-5-methylenebicyclo2.2.1h

31、eptane.;2,2-Dimethyl-5-methylenebicyclo2.2.1heptane.;2,2-Dimethyl-5-methylenenorbornane一1.41%45.84%1627.4692,2-Dimethyl-5-methylenebicyclo2.2.1h eptane.;2,2-Dimethyl-5-methylenebicyclo 2.2.1heptane.;2,2-Dimethyl-5-methylen enorbornane27.60%1727.925花生四烯酸;5,8,11,14-二十碳四烯酸C20 H32O21.24%1828.4861,3-Cyclododecadiene,(1E,3Z)-;1,3-Cyclo dodecadiene,(E,Z)-(8CI,9CI);cis,trans-1,3-CyclododecadieneC12H200.14%1928.580一一0.43%2028.76111-Icosenoic acid methyl ester021H40O20.46%2128.809一0.35%2228.987一1.48%2329.168一0.05%2429.262二十酸甲酯；花生酸甲酯C21H42O20.20%2529.