飼料中粗蛋白測定方法最快

1、飼料中粗蛋白測定方法   1、 原理凱氏法測定試樣中的含氮量，即在催化劑作用下，用硫酸破壞有機(jī)物，使含氮物轉(zhuǎn)化成硫酸銨。加入強(qiáng)堿進(jìn)行蒸餾使氨逸出，用硼酸吸收后，再用酸滴定，測出氮含量，將結(jié)果乘以換算系數(shù)6.25，計(jì)算出粗蛋白含量。  2、試劑  2.1 硫酸（GB 625）：化學(xué)純，含量為98，無氮。    2.2 混合催化劑：0.4g硫酸銅，5個結(jié)晶水（GB 665），6g硫酸鉀（HG 3920）或硫酸鈉（HG 3908），

2、均為化學(xué)純，磨碎混勻。    2.3 氫氧化鈉（GB 629）：化學(xué)純，40水溶液（m/V）。   2.4 硼酸（GB 628）：化學(xué)純，2水溶液（m/V）。   2.5 混合指示劑：甲基紅（HG 3958）0.1乙醇溶液，溴甲酚綠（HG 31220）0.5乙醇溶液，兩溶液等體積混合，在陰涼處保存期為三個月。   2.6 鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液：鄰苯二甲酸氫鉀法標(biāo)定，按GB 601制備。

3、  2.6.1 鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液：c（HCl）=0.1mol/L。8.3mL鹽酸（GB 622，分析純），注入 1 000mL蒸餾水中。    2.6.2 鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液：c（HCl）=0.02mol/L。1.67mL鹽酸（GB 622，分析純），注入1 000mL蒸餾水中。    2.7 蔗糖（HG 31001）：分析純。    2.8 硫酸銨（GB 

4、1396）：分析純，干燥。    2.9 硼酸吸收液：1硼酸水溶液1 000mL，加入0.1溴甲酚綠乙醇溶液10mL，0.1甲基紅乙醇溶液7mL，4氫氧化鈉水溶液0.5mL，混合，置陰涼處保存期為一個月（全自動程序用）。   3、 儀器設(shè)備   3.1 實(shí)驗(yàn)室用樣品粉碎機(jī)或研缽。    3.2 分樣篩：孔徑0.45mm（40目）。   3.3 分析天平：感量0.000

5、1g。    3.4 消煮爐或電爐。    3.5 滴定管：酸式，10、25mL。  3.6 凱氏燒瓶：250mL。   3.7 凱氏蒸餾裝置：半微量水蒸氣蒸餾式。    3.8 錐形瓶：150、250mL。   3.9 容量瓶：100mL。    3.10 消煮管：250mL。 

6、; 3.11 定氮儀：以凱氏原理制造的各類型半自動。  4、 試樣的選取和制備選取具有代表性的試樣用四分法縮減至200g，粉碎后全部通過40目篩，裝于密封容器中，防止試樣成分的變化。   5 分析步驟   5.1.1 試樣的消煮稱取試樣0.51g（含氮量580mg）準(zhǔn)確至0.0002g，放入凱氏燒瓶中，加入6.4g混合催化劑，與試樣混合均勻，再加入12mL硫酸和2粒玻璃珠，將 凱氏燒瓶置于電爐上加熱，開始小火，待樣品焦化，泡沫消失后，再加強(qiáng)火力 

7、（360410）直至呈透明的藍(lán)綠色，然后再繼續(xù)加熱，至少2h。    5.1.2 氨的蒸餾：將試樣消煮液冷卻，加入20mL蒸餾水，轉(zhuǎn)入100mL容量瓶中，冷卻后用水稀釋至刻度，搖勻，做為試樣分解液。將半微量蒸餾裝置的冷凝管末端浸入裝有20mL硼酸吸收液和2滴混合指示劑的錐形瓶內(nèi)。蒸汽發(fā)生器 的水中應(yīng)加入甲基紅指示劑數(shù)滴，硫酸數(shù)滴，在蒸餾過程中保持此液為橙紅色，否則需補(bǔ)加硫酸。準(zhǔn)確移取試樣分解液1020mL注入蒸餾裝置的反應(yīng)室中，用少量蒸餾水沖洗進(jìn)樣入口，塞好入口玻璃塞，再加10mL氫氧化鈉溶液，小心提起玻璃塞使之流入反應(yīng)室，將玻璃塞塞

8、好，且在入口處加水密封，防止漏氣。蒸餾4min降下錐形瓶使冷凝管末端離開吸收液面，再蒸餾1min，用蒸餾水沖洗冷凝管末端，洗液均流入錐形瓶內(nèi)，然后停止蒸餾。   5.1.2.3 蒸餾步驟的檢驗(yàn)精確稱取0.2g硫酸銨，代替試樣，按5.1.2步驟進(jìn)行操作，測得硫酸銨含氮量為21.19±0.2，否則應(yīng)檢查加堿、蒸餾和滴定各步驟是否正確。     5.1.3 滴定用5.1.2.1或5.1.2.2法蒸餾后的吸收液立即用0.1mol/L或0.02mol/L（4.6.2）鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，溶液由藍(lán)綠

9、色變成灰紅色為終點(diǎn)。   6 、空白測定稱取蔗糖0.5g，代替試樣，按第5章進(jìn)行空白測定，消耗0.1mol/L鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積不得超過0.2mL。消耗0.02mol/L鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液體積不得超過0.3mL。   7、 分析結(jié)果的表述    7.1 計(jì)算見下式：    粗蛋白質(zhì)（）=（V2-V1）·c×0.0140×6.25/（m×V/V） ×100 

10、0;   式中：V2 滴定試樣時(shí)所需標(biāo)準(zhǔn)酸溶液體積，mL；     V1 滴定空白時(shí)所需標(biāo)準(zhǔn)酸溶液體積，mL；     c 鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，mol/L；     m 試樣質(zhì)量，g；     V 試樣分解液總體積，mL；     V 試樣分解液蒸餾用體積，mL；     0.0140 與1.00mL鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液c（HCl）=1.000mol/L相當(dāng)?shù)?、以克表示的氮的質(zhì)量。