食品安全檢測技術(shù)學(xué)習(xí)教案

1、會計(jì)學(xué)1食品安全檢測食品安全檢測(jin c)技術(shù)技術(shù)第一頁，共41頁。第2頁/共41頁第二頁，共41頁。樣品樣品(yngpn)采集采集提取凈化提取凈化(jnghu)索氏提取、液液、固液、索氏提取、液液、固液、微波、超聲、柱層析等微波、超聲、柱層析等儀器分析儀器分析根據(jù)目標(biāo)物的性質(zhì)根據(jù)目標(biāo)物的性質(zhì)選擇不同方法選擇不同方法儀器方法的檢測流程儀器方法的檢測流程第3頁/共41頁第三頁，共41頁。儀器檢測儀器檢測(jin c)技術(shù)技術(shù)痕量痕量(hn lin)無機(jī)無機(jī)物定量物定量無 機(jī) 元 素 形 態(tài)無 機(jī) 元 素 形 態(tài)(xngti)分析分析氣相色譜或液相色譜氣相色譜或液相色譜電感耦合等離子體質(zhì)譜聯(lián)用

2、電感耦合等離子體質(zhì)譜聯(lián)用電感耦合等離子體質(zhì)譜電感耦合等離子體質(zhì)譜(ICP-MS）原子發(fā)射光譜（原子發(fā)射光譜（AES）原子吸收光譜（原子吸收光譜（AAS）毛細(xì)管電泳毛細(xì)管電泳質(zhì)譜（質(zhì)譜（CE-MS）氣相色譜氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜串聯(lián)質(zhì)譜 (GC-MS/MS)色譜色譜質(zhì)譜聯(lián)用質(zhì)譜聯(lián)用高效液相色譜高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜（串聯(lián)質(zhì)譜（LC-MS/MS）高效液相色譜高效液相色譜質(zhì)譜（質(zhì)譜（LC-MS）氣相色譜氣相色譜質(zhì)譜質(zhì)譜 （GC-MS）色譜色譜液相色譜液相色譜氣相色譜氣相色譜第4頁/共41頁第四頁，共41頁。俄國植物學(xué)家Tswett于1901年發(fā)現(xiàn)：利用吸附原理分離(fnl)植物色素。1906年Tswett

3、創(chuàng)立(chungl)“chromatography”“色譜法”新名詞；1907年在德國生物會議上第一次向世界公開展示顯現(xiàn)彩色環(huán)帶的柱管；1930年R.Kuhn用色譜柱分離出胡蘿卜素。第5頁/共41頁第五頁，共41頁。1935年Adams and Holmes 發(fā)明了苯酚-甲醛型離子交換樹脂， 進(jìn)一步發(fā)明了離子色譜1938年Izmailov 發(fā)明薄層色譜1941年Martin & Synge 發(fā)明了液-液分配色譜1944年Consden,Gordon & Martin 發(fā)明紙色譜1952年Martin & Synge 發(fā)明氣-液色譜1953年Janak發(fā)明氣-固色譜195

4、4年Ray發(fā)明熱導(dǎo)(r do)檢測器1955年世界第一臺商品化氣相色譜儀1957年Martin & Golay 發(fā)明毛細(xì)管色譜1959年P(guān)orath & Flodin 發(fā)明凝膠色譜1960年液相色譜技術(shù)完善第6頁/共41頁第六頁，共41頁。高選擇性高選擇性 分離單組份定性定量分離單組份定性定量 高效能高效能高靈敏度高靈敏度 檢出限量低至檢出限量低至10-11 g/kg的物質(zhì)，適于微量和痕量的物質(zhì)，適于微量和痕量(hn lin)分析分析第7頁/共41頁第七頁，共41頁。第8頁/共41頁第八頁，共41頁。第9頁/共41頁第九頁，共41頁。第10頁/共41頁第十頁，共41頁。第11頁

5、/共41頁第十一頁，共41頁。 第12頁/共41頁第十二頁，共41頁。第13頁/共41頁第十三頁，共41頁。氣相色譜與質(zhì)譜的聯(lián)用氣相色譜與質(zhì)譜的聯(lián)用-分析實(shí)例分析實(shí)例第14頁/共41頁第十四頁，共41頁。第15頁/共41頁第十五頁，共41頁。第16頁/共41頁第十六頁，共41頁。第17頁/共41頁第十七頁，共41頁。第18頁/共41頁第十八頁，共41頁。第19頁/共41頁第十九頁，共41頁。 333變性、退火延伸變性、退火、延伸3第20頁/共41頁第二十頁，共41頁。RiboPrinter 全自動微生物鑒定全自動微生物鑒定(jindng)系統(tǒng)系統(tǒng)BAX系統(tǒng)目前可檢測系統(tǒng)目前可檢測： 沙門氏菌，

6、 大腸桿菌O157:H7, 單增李斯特菌， 李斯特菌， 板歧腸桿菌 可鑒定到菌株可鑒定到菌株。開放式的數(shù)據(jù)庫（菌庫）內(nèi)有5700多種基因指紋模式，歸屬180余屬，1200余種。包括腐敗菌、病原菌、有益菌及環(huán)境微生物。另外，用戶可自建菌庫。 第21頁/共41頁第二十一頁，共41頁。第22頁/共41頁第二十二頁，共41頁。ELISAELISA的種類的種類(zhngli)(zhngli)和變化和變化 （一）雙抗體夾心法（一）雙抗體夾心法（二）間接（二）間接(jin ji)(jin ji)法法（三）競爭法（三）競爭法 （四）雙位點(diǎn)一步法（四）雙位點(diǎn)一步法（五）捕獲法測（五）捕獲法測IgMIgM抗體抗體

7、（六）應(yīng)用親和素和生物素的（六）應(yīng)用親和素和生物素的ELISA ELISA 第23頁/共41頁第二十三頁，共41頁。雙抗體雙抗體(kngt)夾心法夾心法第24頁/共41頁第二十四頁，共41頁。間接法是檢測抗體最常用的方法，其原理間接法是檢測抗體最常用的方法，其原理(yunl)(yunl)為利為利用酶標(biāo)記的抗抗體以檢測已與固相結(jié)合的受檢抗體，故用酶標(biāo)記的抗抗體以檢測已與固相結(jié)合的受檢抗體，故稱為間接法。稱為間接法。第25頁/共41頁第二十五頁，共41頁。此法可用于抗原和半抗原的定量測定此法可用于抗原和半抗原的定量測定(cdng)，也可用于測定，也可用于測定(cdng)抗體抗體 。第26頁/共41

8、頁第二十六頁，共41頁。 食品中農(nóng)藥、獸藥的測定食品中農(nóng)藥、獸藥的測定 食品中毒素食品中毒素(d s)(d s)的測定（主要包括黃曲霉的測定（主要包括黃曲霉毒素毒素(d s)(d s)， 簡曲霉毒素簡曲霉毒素(d s) (d s) ） 食品中有害微生物的快速篩檢食品中有害微生物的快速篩檢 （如沙門氏菌（如沙門氏菌 ）第27頁/共41頁第二十七頁，共41頁。第28頁/共41頁第二十八頁，共41頁。Different DNA probes (各種各種( zhn) DNA 探針探針 )Clinical DNA Samples(臨床臨床(ln chun)樣本樣本)Microarray(微陣列過程微陣列

9、過程(guchng)Hybridization(雜交過程)Scanning( (掃描過程) )Glass slide(玻片)Image Image analysis (芯片圖象分析)基因芯片的制造與檢測技術(shù)基因芯片的制造與檢測技術(shù)Luminescence orelectrochemical detection第29頁/共41頁第二十九頁，共41頁。 Gene Expression(1) Identification of all common variants(2) Simultaneous monitoring of the expression of all genes(3) Generi

10、c tools for manipulating cell circuitry(4) Re-sequencing of megabase regions(5) Monitoring the levels and modification state of all proteins(6) Systematic catalogues of protein interactions(7) Identification of all basic protein shapesSYT13第30頁/共41頁第三十頁，共41頁。Mutation detectionSNP: Single Nucleotide

11、Polymorphysm-gtacatcaggatcgatacgtagctagctagctaaaatcgatcatccacatccgtac-cgtagctaactagctaaaatcgatcatccaca-cgtagctagctagctagaatcgatcatccaca-cgtagctagctagctaaaatcgattatccaca-cgtagctagctagctaa labelinghybridizationcgtagctaactagctaaWild:Mutant 1:Mutant 2:Mutant 3:aatcgatcatccacaaatcgattatccacatagctaaaatcga

12、tagctagaatcga第31頁/共41頁第三十一頁，共41頁。Fabrication of DNA Microarray(DNA芯片芯片(xn pin)制作技術(shù)類型制作技術(shù)類型)第32頁/共41頁第三十二頁，共41頁。高密度點(diǎn)樣機(jī)高密度點(diǎn)樣機(jī)(yn(yn j) j)Designed Density: 20,000-100,000 probes in one glass slide (每玻片最多可排列(pili)100000個探針)Printhead can hold up to 32print pins to carry 32 samples第33頁/共41頁第三十三頁，共41頁。第34頁/共41頁第三十四頁，共41頁。第35頁/共41頁第三十五頁，共41頁。電信號電信號待檢測待檢測(jin c)物物生物敏感膜生物敏感膜物理變化物理變化此界面發(fā)生此界面發(fā)生生物學(xué)反應(yīng)生物學(xué)反應(yīng)( (分子識別過分子識別過程程) )此界面發(fā)生此界面發(fā)生能量轉(zhuǎn)換能量轉(zhuǎn)換( (轉(zhuǎn)換成電信轉(zhuǎn)換成電信號號) )此處