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文檔簡介
1、病理液基細(xì)胞學(xué)及病理液基細(xì)胞學(xué)及HPV液基細(xì)胞學(xué)檢查(液基細(xì)胞學(xué)檢查(TCT)1人乳頭狀瘤病毒檢測(HPV)2遠(yuǎn)程病理會(huì)診3免疫組化檢查與診斷4檢查項(xiàng)目新1液基細(xì)胞學(xué)檢查(TCT)什么是液基細(xì)胞學(xué)檢查什么是液基細(xì)胞學(xué)檢查 液基薄層細(xì)胞學(xué)檢查是新近發(fā)展的較成熟的一種脫落細(xì)胞學(xué)的檢查方法。它的優(yōu)勢就是制片技術(shù)的先進(jìn),制出高質(zhì)量的細(xì)胞涂片。 外觀比較外觀比較優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)背景干凈細(xì)胞成分多,形態(tài)保存良好細(xì)胞分布均勻且單層的細(xì)胞薄片可重復(fù)制片液基薄層細(xì)胞學(xué)檢測明顯提高了細(xì)胞樣本的檢測質(zhì)量,明顯提高了腫瘤細(xì)胞的檢測率,及早發(fā)現(xiàn)腫瘤,及早及時(shí)治療。適用范圍適用范圍婦科液基細(xì)胞學(xué) TCT+HPV聯(lián)合檢查是早期宮頸
2、癌篩查的重要手段非婦科液基細(xì)胞學(xué) 胸腹水脫落細(xì)胞學(xué)檢查 痰液脫落細(xì)胞學(xué)檢查 尿沉渣細(xì)胞學(xué)檢查 支氣管刷片細(xì)胞學(xué)檢查2人乳頭狀瘤病毒檢測(HPV)HPVHPV檢測的意義檢測的意義高危型HPV的持續(xù)感染是宮頸癌發(fā)生發(fā)展的主要因素HPV分型檢測的意義: 1、用于宮頸病變的篩查 2、指導(dǎo)ASCUS、LISL、HISL患者的進(jìn)一步處理 3、對宮頸癌的復(fù)發(fā)有預(yù)測作用 定量:病毒載量是除亞型之外導(dǎo)致腫瘤發(fā)生發(fā)展的另一個(gè)關(guān)鍵因素定量:病毒載量是除亞型之外導(dǎo)致腫瘤發(fā)生發(fā)展的另一個(gè)關(guān)鍵因素 大量研究提示除大量研究提示除亞型外,亞型外,HPVHPV的的致癌性還與感染致癌性還與感染者的病毒載量相者的病毒載量相關(guān),病毒
3、載量被關(guān),病毒載量被認(rèn)為是一個(gè)潛在認(rèn)為是一個(gè)潛在的識(shí)別的識(shí)別CIN-CIN-及以上病理等級(jí)及以上病理等級(jí)的生物學(xué)指標(biāo)。的生物學(xué)指標(biāo)。 Nicolas Wentzensen,et al. 2012.Human Papillomavirus Load Measured by Linear Array Correlates with Quantitative PCR in Cervical Cytology Specimens. J. Clin. Microbiol. 50:1564 1570Maelle Saunier, et al. 2008. Analysis of Human Papillo
4、mavirus Type 16 (HPV16) DNA Load and Physical State for Identification of HPV16-Infected Women with High-Grade Lesions or Cervical Carcinoma. J. Clin. Microbiol. 46:3678 3685Xi LF, et al. 2011. Viral load in the natural history of human papillomavirus type 16 infection: a nested case-control study.
5、J. Infect. Dis. 203:14251433.Gravitt PE, et al. 2007. High load for most high risk human papillomavirus genotypes is associated with prevalent cervical cancer precursors but only HPV16 load predicts the development of incident disease. Int. J.Cancer 121:27872793.13842 specimens HPVHPV病毒載量與宮頸癌發(fā)生關(guān)鍵因素病
6、毒載量與宮頸癌發(fā)生關(guān)鍵因素凱杰HC2雜交捕獲技術(shù)13高危不分型半定量凱普21分型PCR+膜雜交法21種HPV分型定性檢測羅氏cobas 多重?zé)晒釶CR法14種高危型同時(shí)HPV16/18分型定性檢測豪洛捷AptimamRNA檢測14種高危型HPV16,18/45分型定性檢測碩世21HPV分型定量檢測多重?zé)晒釶CR法21種HPV分型同時(shí)標(biāo)準(zhǔn)化定量各亞型HPV檢測主要方法及進(jìn)展2003年2006年2012年2014年2015年不分型分型定性定量碩世21HPV分型定量檢測:首個(gè)、唯一采用標(biāo)準(zhǔn)化定量的HPV分型檢測HPV檢測精準(zhǔn)醫(yī)療的應(yīng)用: “分型+定量”CFDA批準(zhǔn):國械注準(zhǔn)20153400364,蘇
7、械注準(zhǔn)20152700105,專利號(hào):ZL 201110087602.1系統(tǒng)組成:全自動(dòng)核酸提取儀、實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀、21HPV分型定量檢測試劑盒、HPV分型定量報(bào)告軟件碩世21HPV分型定量檢測系統(tǒng),采用宮頸脫落細(xì)胞取樣處理標(biāo)準(zhǔn)化專利技術(shù)和多重?zé)晒釶CR定量技術(shù),可在2.5小時(shí)內(nèi)快速、準(zhǔn)確地區(qū)分受檢樣本中21種HPV基因亞型,包括13種高危型HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68,5種中危型HPV26、53、66、73、82和3種低危型HPV6、11、81;并同步對21種HPV亞型病毒載量進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化定量。碩世碩世HPVHPV檢測技術(shù)的創(chuàng)新與突破
8、檢測技術(shù)的創(chuàng)新與突破1 1:分管分型技術(shù):分管分型技術(shù)分型分型更為精準(zhǔn)更為精準(zhǔn)傳統(tǒng)分型技術(shù)(膜雜交/液體芯片雜交) 創(chuàng)新分型技術(shù)(碩世分管分型)PCR擴(kuò)增+膜/液態(tài)芯片雜交,時(shí)間長PCR擴(kuò)增同步分型,時(shí)間短PCR擴(kuò)增產(chǎn)物開蓋進(jìn)行雜交,易污染實(shí)時(shí)熒光PCR閉管擴(kuò)增分型,不易污染所有靶標(biāo)在同一管中擴(kuò)增,易競爭抑制每管僅擴(kuò)增3種型別,分型準(zhǔn)確碩世21HPV分型定量檢測:準(zhǔn)確分型,風(fēng)險(xiǎn)分層21種HPV亞型13種高危型HPV中國人群最常見 癌前病變高危險(xiǎn)型HPV16型HPV52型HPV58型HPV33型HPV18型一般高危型HPV31、35、39、45、51、56、59、68型5種中危型HPVHPV26
9、、53、66、73、82型3種低危型HPVHPV6、11、81型2%0%癌前病變風(fēng)險(xiǎn)陰道鏡閾值 10%30%Nicolas Wentzensen, 2015 碩世HPV檢測技術(shù)的創(chuàng)新與突破2:標(biāo)準(zhǔn)定量碩世分型定量檢測系統(tǒng)方案碩世分型定量檢測系統(tǒng)方案建立了病毒載量建立了病毒載量的數(shù)學(xué)模型,彌的數(shù)學(xué)模型,彌補(bǔ)了取樣的不均補(bǔ)了取樣的不均一性,并把數(shù)學(xué)一性,并把數(shù)學(xué)模型實(shí)體化為定模型實(shí)體化為定量分析軟件!量分析軟件! HPVHPV分型分型/ /定量系統(tǒng)相關(guān)性能定量系統(tǒng)相關(guān)性能1 1、分型檢測的靈敏度和特異性均在、分型檢測的靈敏度和特異性均在95%95%以上;以上;2 2、HPV21HPV21個(gè)亞型檢測
10、限:個(gè)亞型檢測限:10104 4 copies/ml copies/ml(20 copies/20 copies/反應(yīng));反應(yīng));3 3、HPV16HPV16亞型定量檢測以參考值亞型定量檢測以參考值16600 copies/1000016600 copies/10000個(gè)細(xì)胞判斷個(gè)細(xì)胞判斷CIN-CIN-及以上及以上病理等級(jí)時(shí),靈敏度為病理等級(jí)時(shí),靈敏度為72.62%72.62%(95%95%置信區(qū)間:置信區(qū)間:66.81%77.92%66.81%77.92%);特異度為);特異度為72.24%72.24%(95%95%置信區(qū)間:置信區(qū)間:66.19%77.76%66.19%77.76%);)
11、;20 copies/反應(yīng)反應(yīng)碩世碩世21HPV21HPV分型定量報(bào)告單分型定量報(bào)告單HPV風(fēng)險(xiǎn)分層列表HPV陽性亞型每10000個(gè)細(xì)胞數(shù)量中的病毒載量,對應(yīng)顯示為:6.82107HPV亞型病毒載量的百分比 HPVHPV檢查的臨床價(jià)值檢查的臨床價(jià)值HPV準(zhǔn)確分型是判斷HPV持續(xù)感染狀態(tài)的基礎(chǔ),是篩選宮頸癌高危人群的基礎(chǔ);HPV高危亞型病毒載量提示高度病變的風(fēng)險(xiǎn),跟蹤和隨訪提示病毒的清除或疾病的進(jìn)展。健康人群通過體檢篩查出感染HPV高危亞型的人群,進(jìn)行定期隨訪管理,可以最終消除宮頸癌。中國子宮頸癌的形勢依然嚴(yán)峻新發(fā)病例9.89萬死亡病例3.05萬發(fā)病率呈上升趨勢&年輕化趨勢2016年20
12、16年中國國家癌癥中心公布的估計(jì)數(shù)據(jù),2015.對不同年齡段的女性如何進(jìn)行宮頸癌篩查對不同年齡段的女性如何進(jìn)行宮頸癌篩查? ? 21歲 21-29歲 30-65歲 65歲 子宮切除后已接種HPV疫苗無需篩查細(xì)胞學(xué)篩查(3年一次)首選 HPV聯(lián)合細(xì)胞學(xué)篩查(5年一次)可接受 細(xì)胞學(xué)篩查(3年一次)之前篩查有足夠良好結(jié)果后無需篩查無需篩查遵照不同年齡段的篩查建議(與未接種疫苗婦女相同)3030歲及以上女性歲及以上女性HPVHPV檢測聯(lián)合細(xì)胞學(xué)篩查檢測聯(lián)合細(xì)胞學(xué)篩查 適用范圍適用范圍婦科液基細(xì)胞學(xué) TCT+HPV聯(lián)合檢查是早期宮頸癌篩查的重要手段非婦科液基細(xì)胞學(xué) 胸腹水脫落細(xì)胞學(xué)檢查 痰液脫落細(xì)胞學(xué)檢查 尿沉渣細(xì)胞學(xué)檢查 支氣管刷片細(xì)胞學(xué)檢查碩世21HPV分型定量檢測:準(zhǔn)確分型
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