項目三子項目一色譜分析檢測技術

1、 色譜分析檢測技術色譜分析檢測技術食品分院食品分院劉深勇劉深勇 1 概述概述一、一、 “色譜法色譜法” 名稱的由來名稱的由來石油醚石油醚(流動相流動相)碳酸鈣碳酸鈣( (固定相固定相) )色色譜譜帶帶 現(xiàn)在的色譜法早已不局限于色素的分離，其方法也早已得到了極大的發(fā)展，但其分離的原理仍然是一樣的。我們?nèi)匀唤兴V分析。 色譜法的分離原理就是利用待分離的各種物質(zhì)在兩相中的分配系數(shù)、吸附能力等親和能力的不同來進行分離的。 使用外力使含有樣品的流動相（氣體、液體）通過一固定于柱中或平板上、與流動相互不相溶的固定相表面。當流動相中攜帶的混合物流經(jīng)固定相時，混合物中的各組分與固定相發(fā)生相互作用。 是利用混

2、合物不同組分在是利用混合物不同組分在和和中分配系數(shù)中分配系數(shù)(或吸附系數(shù)、滲透或吸附系數(shù)、滲透性等性等)的差異，使不同組分在作相對的差異，使不同組分在作相對運動的兩相中進行反復分配，實現(xiàn)分運動的兩相中進行反復分配，實現(xiàn)分離的分析方法。離的分析方法。色譜法色譜法 2 色譜法的分類色譜法的分類根據(jù)流動相的根據(jù)流動相的物態(tài)可分為物態(tài)可分為氣相色譜氣相色譜(GC)液相色譜液相色譜(LC)氣氣-固色譜固色譜(GSC)氣氣-液色譜液色譜(GLC)液液-固色譜固色譜(LSC)液液-液色譜液色譜(LLC)3、氣相色譜分離過程、氣相色譜分離過程 分離過程（以分離分離過程（以分離A、B兩組分為例）兩組分為例）為：

3、為：混合組混合組分的分分的分離過程離過程及檢測及檢測器對各器對各組分在組分在不同階不同階段的響段的響應應0246810120246810024681012024681002468101202468101.1.分離效能高分離效能高2.2.靈敏度高靈敏度高 可檢測可檢測10-1110-13g, ,適于痕量分析適于痕量分析. .色譜分析需試樣量極少色譜分析需試樣量極少( ( g g或或ng)ng). .3.3.分析速度快分析速度快 4.4.應用范圍廣應用范圍廣缺點：對未知物的定性分析比較困難。缺點：對未知物的定性分析比較困難。 方向：高選擇性檢測器；聯(lián)用技術方向：高選擇性檢測器；聯(lián)用技術（ GC-M

4、S、GC-FTIR、LC-MS、LC-NMR等）。等）。 從載氣帶著組分進入色譜柱起就用檢測器檢測流出柱后的氣體，并用記錄器記錄信號隨時間變化的曲線，此曲線就叫色譜流出曲線，當待測組分流出色譜柱時，檢測器就可檢測到其組分的濃度，在流出曲線上表現(xiàn)為峰狀，叫色譜峰。 如果進樣量很小，濃度很低，在吸附等溫線（氣固吸附色譜）如果進樣量很小，濃度很低，在吸附等溫線（氣固吸附色譜）或分配等溫線（氣液分配色譜）的線性范圍內(nèi)，則色譜峰是對稱或分配等溫線（氣液分配色譜）的線性范圍內(nèi)，則色譜峰是對稱的。的。5 5 色譜圖及常用術語色譜圖及常用術語一、一、 基線基線當沒有待測組分進入檢測器時當沒有待測組分進入檢測器

5、時, ,在實驗操作條件下，在實驗操作條件下，反映檢測器噪聲隨時間變化的曲線稱為基線，穩(wěn)定的基反映檢測器噪聲隨時間變化的曲線稱為基線，穩(wěn)定的基線應該是一條水平直線。線應該是一條水平直線。二、二、峰高（峰高（h h）和峰面積）和峰面積 色譜峰頂點與基線的距離叫峰高。色譜峰與峰底基線色譜峰頂點與基線的距離叫峰高。色譜峰與峰底基線所圍成區(qū)域的面積叫峰面積。所圍成區(qū)域的面積叫峰面積。三、保留值三、保留值 1.1.保留值的定義保留值的定義(1)(1)死時間死時間tM 不被固定相吸附或溶解的物質(zhì)進入色譜柱時，從進樣到出現(xiàn)不被固定相吸附或溶解的物質(zhì)進入色譜柱時，從進樣到出現(xiàn)峰極大值所需的時間稱為死時間峰極大值

6、所需的時間稱為死時間. .MLtuL為柱長為柱長(cm)為流動相平均線速度為流動相平均線速度(cm/s)(2) 保留時間保留時間tR 試樣從進樣到柱后出現(xiàn)峰極大點時所經(jīng)過的時間，稱為保留試樣從進樣到柱后出現(xiàn)峰極大點時所經(jīng)過的時間，稱為保留時間時間.(3)調(diào)整保留時間調(diào)整保留時間t tR R tR = tR tM 由于組分在色譜柱中的保留時間由于組分在色譜柱中的保留時間t tR R包含了組分隨流動相通過包含了組分隨流動相通過柱子所需的時間和組分在固定相中滯留所須的時間，柱子所需的時間和組分在固定相中滯留所須的時間，所以所以t tR R 實實際上是組分在固定相中保留的總時間。際上是組分在固定相中保

7、留的總時間。保留時間是色譜法定性的基本依據(jù)保留時間是色譜法定性的基本依據(jù). 但同一組分的保留時間常受到流動相流速的影響，因此色譜但同一組分的保留時間常受到流動相流速的影響，因此色譜工作者有時用保留體積來表示保留值。工作者有時用保留體積來表示保留值。(4)(4)死體積死體積V VM不被保留的組分通過色譜柱所消耗的流動相的體積不被保留的組分通過色譜柱所消耗的流動相的體積. . VM = FctM(5) (5) 保留體積保留體積VR 指從進樣開始到被測組分在柱后出現(xiàn)濃度極大點時所通過指從進樣開始到被測組分在柱后出現(xiàn)濃度極大點時所通過的流動相的體積。保留時間與保留體積關系：的流動相的體積。保留時間與保

8、留體積關系： VR = FctR(6)(6)調(diào)整保留體積調(diào)整保留體積V VR R 某組分的保留體積扣除死體積后，稱為該組分的調(diào)整保留體某組分的保留體積扣除死體積后，稱為該組分的調(diào)整保留體積。積。 VR = VR VM = tR Fc (7) (7)相對保留值相對保留值 某組分某組分2 2的調(diào)整保留值與組分的調(diào)整保留值與組分1 1的調(diào)整保留值之比，稱為相對的調(diào)整保留值之比，稱為相對保留值。保留值。由于相對保留值只與柱溫及固定相性質(zhì)有關，而與柱徑、柱由于相對保留值只與柱溫及固定相性質(zhì)有關，而與柱徑、柱長、填充情況及流動相流速無關，因此，它在色譜法中，特別是長、填充情況及流動相流速無關，因此，它在色

9、譜法中，特別是在氣相色譜法中，廣泛在氣相色譜法中，廣泛用作定性的依據(jù)用作定性的依據(jù)。 在定性分析中，通常固定一個色譜峰作為標準（在定性分析中，通常固定一個色譜峰作為標準（s），然），然后再求其它峰（后再求其它峰（i）對這個峰的相對保留值）對這個峰的相對保留值 。1 ,21212RRRRVVtt2,1/ i s6 6、區(qū)域?qū)挾取^(qū)域?qū)挾?色譜峰的區(qū)域?qū)挾仁巧V流出曲線的重色譜峰的區(qū)域?qū)挾仁巧V流出曲線的重要參數(shù)之一，可用于衡量色譜柱的柱效及反要參數(shù)之一，可用于衡量色譜柱的柱效及反映色譜操作條件下的動力學因素。寬度越窄，映色譜操作條件下的動力學因素。寬度越窄，其效率越高，分離的效果也越好。其效率越

10、高，分離的效果也越好。 1. 分配系數(shù)（平衡常數(shù)）分配系數(shù)（平衡常數(shù)）K指在一定和溫度和壓力下，組分在兩相間達到指在一定和溫度和壓力下，組分在兩相間達到分配平衡時，組分在固定相中的濃度分配平衡時，組分在固定相中的濃度cs與組分在流與組分在流動相中的濃度動相中的濃度cm之比。之比。smcKcK： 與溫度、壓力有關外，還與組分性質(zhì)、固定相與溫度、壓力有關外，還與組分性質(zhì)、固定相 和流動相性質(zhì)有關。和流動相性質(zhì)有關。 不同組分不同組分K值的差異，是實現(xiàn)色譜分離的先決條件。值的差異，是實現(xiàn)色譜分離的先決條件。7、分配系數(shù)和容量因子、分配系數(shù)和容量因子 在一定條件下，各種物質(zhì)的在一定條件下，各種物質(zhì)的K

11、是不是不同的。同的。K較小的組分在色譜分析中每次較小的組分在色譜分析中每次分配后在氣相中的濃度較大，因此較分配后在氣相中的濃度較大，因此較早流出色譜柱。早流出色譜柱。K較大的組分每次分配較大的組分每次分配后在氣相中濃度較小，因此較晚流出后在氣相中濃度較小，因此較晚流出色譜柱。某組分的色譜柱。某組分的K=0時，即不被固時，即不被固定相保留，最先流出。定相保留，最先流出。從色譜流出曲線中，可得許多重要信息：從色譜流出曲線中，可得許多重要信息： (1) (1) 根據(jù)色譜峰的個數(shù)根據(jù)色譜峰的個數(shù)，可以判斷樣品中所含組分的最少個數(shù)；，可以判斷樣品中所含組分的最少個數(shù)； (2) (2) 根據(jù)色譜峰的保留值

12、根據(jù)色譜峰的保留值，可以進行定性分析；，可以進行定性分析； (3) (3) 根據(jù)色譜峰的面積或峰高根據(jù)色譜峰的面積或峰高，可以進行定量分析；，可以進行定量分析； (4) (4) 色譜峰的保留值及其區(qū)域?qū)挾壬V峰的保留值及其區(qū)域?qū)挾?，是評價色譜柱分離效能的依，是評價色譜柱分離效能的依據(jù)；據(jù)； (5) (5) 色譜峰兩峰間的距離色譜峰兩峰間的距離，是評價固定相（或流動相）選擇是否，是評價固定相（或流動相）選擇是否合適的依據(jù)。合適的依據(jù)。 下圖是下圖是 A、B兩組分沿色譜柱移動時，不同位置處兩組分沿色譜柱移動時，不同位置處的濃度輪廓。的濃度輪廓。 濃度濃度沿柱移動距離沿柱移動距離 LABABKA K

13、B若要使若要使A A、B B組分完全分離，必須滿足以下三點：組分完全分離，必須滿足以下三點：第一第一，兩組分的分配系數(shù)必須有差異；，兩組分的分配系數(shù)必須有差異；第二第二，區(qū)域擴寬的速率應小于區(qū)域分離的速度；，區(qū)域擴寬的速率應小于區(qū)域分離的速度；第三第三，在保證快速分離的前提下，提供足夠長的色譜柱。，在保證快速分離的前提下，提供足夠長的色譜柱。8 色譜法基本理論色譜法基本理論 第一、二點是完全分離的必要條件第一、二點是完全分離的必要條件。作為一個色譜理論，它不僅應說明組分在作為一個色譜理論，它不僅應說明組分在色譜柱中移動的速率，而且應說明組分在色譜柱中移動的速率，而且應說明組分在移動過程中引起區(qū)

14、域擴寬的各種因素。移動過程中引起區(qū)域擴寬的各種因素。塔塔板理論和速率理論均以色譜過程中分配系板理論和速率理論均以色譜過程中分配系數(shù)恒定為前提數(shù)恒定為前提，故稱為線性色譜理論。，故稱為線性色譜理論。 1 1 塔板理論塔板理論 把色譜柱比作一個精餾塔，即色譜柱是由一系列連續(xù)把色譜柱比作一個精餾塔，即色譜柱是由一系列連續(xù)的、相等的水平塔板組成。每一塊塔板的高度用的、相等的水平塔板組成。每一塊塔板的高度用 H 表示，表示，稱為塔板高度，簡稱板高。稱為塔板高度，簡稱板高。塔板理論假設：在每一塊塔板上，溶質(zhì)在兩相間很快塔板理論假設：在每一塊塔板上，溶質(zhì)在兩相間很快達到分配平衡，然后隨著流動相按一個一個塔板

15、的方式向達到分配平衡，然后隨著流動相按一個一個塔板的方式向前轉(zhuǎn)移。對一根長為前轉(zhuǎn)移。對一根長為 L 的色譜柱，溶質(zhì)平衡的次數(shù)應為：的色譜柱，溶質(zhì)平衡的次數(shù)應為： n 稱為理論塔板數(shù)稱為理論塔板數(shù)n 越大或越大或 H 越小越小, ,柱效率越高柱效率越高, ,分離能力越強分離能力越強. .LnH 塔板理論指出塔板理論指出：第一第一，當溶質(zhì)在柱中的平衡次數(shù)，即理論塔板數(shù)，當溶質(zhì)在柱中的平衡次數(shù)，即理論塔板數(shù) n 大于大于50時時，可得到基本對稱的峰形曲線。在色譜柱中，可得到基本對稱的峰形曲線。在色譜柱中，n 值一般很大，值一般很大，如氣相色譜柱的如氣相色譜柱的 n 約為約為103 -106 ，因而這

16、時的流出曲線可，因而這時的流出曲線可趨近于正態(tài)分布曲線。趨近于正態(tài)分布曲線。第二第二，當樣品進入色譜柱后，只要各組分在兩相間的分配系，當樣品進入色譜柱后，只要各組分在兩相間的分配系數(shù)有微小差異，經(jīng)過反復多次的分配平衡后，仍可獲得良數(shù)有微小差異，經(jīng)過反復多次的分配平衡后，仍可獲得良好的分離。好的分離。第三第三，n 與半峰寬及峰底寬的關系式為：與半峰寬及峰底寬的關系式為： 式中式中tR 與與W1/2 ( Wb )應采用同一單位（時間或距離）。應采用同一單位（時間或距離）。tR 一定時，色譜峰越窄，一定時，色譜峰越窄，n 越大，越大，H 越小，柱效能越高。越小，柱效能越高。222/11654. 5b

17、RRWtWtn在實際工作中，計算出來的在實際工作中，計算出來的 n 和和 H 值有時并不能值有時并不能充分地反映色譜柱的分離效能，因為采用充分地反映色譜柱的分離效能，因為采用tR計算時，沒計算時，沒有扣除死時間有扣除死時間tM， 所以常用有效塔板數(shù)所以常用有效塔板數(shù) n有效有效 表示柱效：表示柱效：有效板高有效板高 ：222/11654. 5bRRWtWtn有效有效有效nLH1.用熱力學的觀點闡明了溶質(zhì)在色譜柱中的分配平衡用熱力學的觀點闡明了溶質(zhì)在色譜柱中的分配平衡和分離過程和分離過程2.解釋了流出曲線的形狀及濃度極大值的位置解釋了流出曲線的形狀及濃度極大值的位置3.提出了計算和評價柱效的參數(shù)

18、提出了計算和評價柱效的參數(shù)一種半經(jīng)驗性的平衡理論一種半經(jīng)驗性的平衡理論塔板理論塔板理論貢獻貢獻缺點缺點1. 不能解釋造成譜帶擴張的原因和影響板高的各種因素不能解釋造成譜帶擴張的原因和影響板高的各種因素2. 不能說明同一溶質(zhì)為什么在不同的流速下，可以測得不不能說明同一溶質(zhì)為什么在不同的流速下，可以測得不同的理論塔板數(shù)同的理論塔板數(shù)2 2 速率理論速率理論 19561956年荷蘭學者年荷蘭學者van Deemter（范第姆特）等在研究（范第姆特）等在研究氣液色譜氣液色譜時，提出了色譜過程動力學理論時，提出了色譜過程動力學理論速率理論速率理論。他們吸收了塔板理論中他們吸收了塔板理論中板高板高的概念，

19、并充分考慮了組分在的概念，并充分考慮了組分在兩相間的擴散和傳質(zhì)過程，從而在動力學基礎上較好地解兩相間的擴散和傳質(zhì)過程，從而在動力學基礎上較好地解釋了影響板高的各種因素。該理論模型對氣相、液相色譜釋了影響板高的各種因素。該理論模型對氣相、液相色譜都適用。都適用。 van Deemter方程方程的數(shù)學簡化式為的數(shù)學簡化式為 為流動相的平均線速度，單位：為流動相的平均線速度，單位：cm/s； A、B、C、為常數(shù)，分別代表渦流擴散系數(shù)、分子、為常數(shù)，分別代表渦流擴散系數(shù)、分子擴散項系數(shù)、傳質(zhì)阻力項系數(shù)。擴散項系數(shù)、傳質(zhì)阻力項系數(shù)。uCuBAH （1 1）渦流擴散項）渦流擴散項 A 在填充柱中，由于受到

20、固定相顆在填充柱中，由于受到固定相顆粒的阻礙，組份在遷移過程中隨流動粒的阻礙，組份在遷移過程中隨流動相不斷改變方向，形成紊亂的相不斷改變方向，形成紊亂的“渦渦流流”。從圖中可見，因填充物顆粒大。從圖中可見，因填充物顆粒大小及填充的不均勻性小及填充的不均勻性同一組分運同一組分運行路線長短不同行路線長短不同流出時間不同流出時間不同峰形展寬。展寬程度以峰形展寬。展寬程度以A表示：表示：A=2 dp其中其中dp填充物平均直徑；填充物平均直徑； 填填充不規(guī)則因子。充不規(guī)則因子。 可見，使用細粒的固定相并填充可見，使用細粒的固定相并填充均勻可減小均勻可減小A，提高柱效。對于空心，提高柱效。對于空心毛細管柱

21、，無渦流擴散，即毛細管柱，無渦流擴散，即A=0。 ：彎曲因子，填充柱色譜，彎曲因子，填充柱色譜， 1。Dg：試樣組分分子在氣相中的擴散系數(shù)：試樣組分分子在氣相中的擴散系數(shù)（cm2s-1）。）。與組分性質(zhì)、載氣性質(zhì)、與組分性質(zhì)、載氣性質(zhì)、柱溫、柱壓等因素有關。柱溫、柱壓等因素有關。 宜采用宜采用相對分子質(zhì)量較大的相對分子質(zhì)量較大的載氣（如載氣（如N2），較高載氣線速度，），較高載氣線速度，較低柱溫。較低柱溫。2gBD(3) (3) 傳質(zhì)阻力項傳質(zhì)阻力項 C C 物質(zhì)系統(tǒng)由于濃度不均勻而發(fā)生的物質(zhì)遷移過程，稱為物質(zhì)系統(tǒng)由于濃度不均勻而發(fā)生的物質(zhì)遷移過程，稱為傳質(zhì)傳質(zhì)。影響該過程的阻力，稱為。影響該

22、過程的阻力，稱為傳質(zhì)阻力傳質(zhì)阻力。傳質(zhì)阻力系數(shù)傳質(zhì)阻力系數(shù)C C包括氣相傳質(zhì)阻力系數(shù)包括氣相傳質(zhì)阻力系數(shù)C Cg g和液相傳質(zhì)阻力和液相傳質(zhì)阻力系數(shù)系數(shù)C C1 1兩項，即兩項，即 C = Cg+ C1 氣相傳質(zhì)過程是指試樣組分從氣相移動到固定相表面的過氣相傳質(zhì)過程是指試樣組分從氣相移動到固定相表面的過程。程。采用粒度小的填充物和相對分子質(zhì)量小的氣體（如氫采用粒度小的填充物和相對分子質(zhì)量小的氣體（如氫氣）做載氣，可使氣）做載氣，可使Cg減小，提高柱效。減小，提高柱效。 液相傳質(zhì)過程是指試樣組分從固定相的氣液相傳質(zhì)過程是指試樣組分從固定相的氣/ /液界面液界面移動到液相內(nèi)部，并發(fā)生質(zhì)量交換，達到

23、分配平衡移動到液相內(nèi)部，并發(fā)生質(zhì)量交換，達到分配平衡，然，然后又返回氣后又返回氣/ /液界面的傳質(zhì)過程。液界面的傳質(zhì)過程。降低固定液的含量，可以降低液膜厚度，但降低固定液的含量，可以降低液膜厚度，但k值隨之變值隨之變小，又會使小，又會使C1增大。增大。當固定液含量一定時，液膜厚度隨載體的比表面積增當固定液含量一定時，液膜厚度隨載體的比表面積增加而降低，因此，一般采用比表面積較大的載體來降低液膜加而降低，因此，一般采用比表面積較大的載體來降低液膜厚度。雖然提高柱溫可增大厚度。雖然提高柱溫可增大D1，但會使，但會使 k 值減小，為了保持值減小，為了保持適當?shù)倪m當?shù)腃1值，應控制適宜的柱溫。值，應控

24、制適宜的柱溫。 當固定液含量較高，液膜較厚，載氣以在中當固定液含量較高，液膜較厚，載氣以在中等的線速下時，板高主要受液相傳質(zhì)系數(shù)等的線速下時，板高主要受液相傳質(zhì)系數(shù)C Cl l的控的控制。此時，氣相傳質(zhì)系數(shù)值很小，可以忽略。制。此時，氣相傳質(zhì)系數(shù)值很小，可以忽略。 然而，隨著快速色譜的發(fā)展，當采用低固定然而，隨著快速色譜的發(fā)展，當采用低固定液含量柱和高載氣線速進行分析時，氣相傳質(zhì)阻液含量柱和高載氣線速進行分析時，氣相傳質(zhì)阻力就會成為影響塔板高度的重要因素。力就會成為影響塔板高度的重要因素。將上面式總結(jié)，即可得將上面式總結(jié)，即可得氣液色譜板高方程氣液色譜板高方程 這一方程對選擇色譜分離條件具有實

25、際指導意義，它指這一方程對選擇色譜分離條件具有實際指導意義，它指出了色譜柱填充的均勻程度，填料顆粒的大小，流動相的種出了色譜柱填充的均勻程度，填料顆粒的大小，流動相的種類及流速，固定相的液膜厚度等對柱效的影響。類及流速，固定相的液膜厚度等對柱效的影響。 由上式可知，在由上式可知，在液液色譜中提高柱效液液色譜中提高柱效可采用以下方法：可采用以下方法：1、減小填料顆粒粒度、減小填料顆粒粒度dp；2、用黏度較低的溶劑作流動相；、用黏度較低的溶劑作流動相；3、采用低流速流動相；、采用低流速流動相；4、減小填料空穴深度；、減小填料空穴深度；5、適當提高柱溫。、適當提高柱溫。13-51 1、柱效和選擇性、

26、柱效和選擇性理論塔板數(shù)理論塔板數(shù) n 是衡量柱效的指標是衡量柱效的指標， 反映了色譜分離過程反映了色譜分離過程動力學性質(zhì)動力學性質(zhì)。選擇性因子選擇性因子 是衡量色譜柱選擇性的指標，是衡量色譜柱選擇性的指標， 取決于組分在固定相上的取決于組分在固定相上的熱力學性質(zhì)熱力學性質(zhì)。2 2、分離度的定義、分離度的定義分離度又叫分辨率或分辨度，既能反映分離度又叫分辨率或分辨度，既能反映柱效率柱效率又能反映又能反映選擇選擇性性的指標，是的指標，是衡量分離效能的總指標。衡量分離效能的總指標。 定義：定義：)()()()(21AbBbARBRsWWttR一般說，當一般說，當Rs1時，兩峰有部分時，兩峰有部分重疊

27、；當重疊；當Rs=1時，時，分離程度可達分離程度可達98%；當；當Rs=1.5時，時，分離程度可達分離程度可達99.7%。 通常用通常用Rs=1.5作為相鄰兩作為相鄰兩組分已完全分離組分已完全分離的標志。的標志。sRn增加柱長，可提高分離度，但延長了分析時增加柱長，可提高分離度，但延長了分析時間，因此降低板高，提高柱效，才是提高分離度間，因此降低板高，提高柱效，才是提高分離度的好方法。的好方法。LnH 9 色譜定性和定量分析色譜定性和定量分析一一 定性分析定性分析1 用已知純物質(zhì)用已知純物質(zhì) 對照定性對照定性單柱比較法單柱比較法雙柱比較法雙柱比較法峰高增加法定峰高增加法定性性 二二 定量分析定

28、量分析定量基礎定量基礎AiiimfAhiiimfh或或Ahiiff和是絕對校正因子。 1 1、響應信號的測量、響應信號的測量（1 1）對稱形峰面積的測量）對稱形峰面積的測量 峰高乘以半峰寬法峰高乘以半峰寬法 A = 1.065 h W1/2（2）不）不對稱形峰面積的測量對稱形峰面積的測量 峰高乘以平均峰寬法峰高乘以平均峰寬法 A = 1/2 h（W0.15 + W0.85）（3）自動電學積分儀）自動電學積分儀（4 4）用峰高表示峰面積）用峰高表示峰面積在痕量分析中，峰高法的準確度較高。峰面積法適用于各在痕量分析中，峰高法的準確度較高。峰面積法適用于各種形狀的峰，精度較好。種形狀的峰，精度較好。

29、峰面積的大小不易受操作條件如柱溫、流動相的流速、進峰面積的大小不易受操作條件如柱溫、流動相的流速、進樣速度等的影響，故適于作定量分析的參數(shù)。樣速度等的影響，故適于作定量分析的參數(shù)。 2 2、校正因子、校正因子 （1 1）絕對校正因子）絕對校正因子 受儀器及操作條件影響很大，使用受到限制。受儀器及操作條件影響很大，使用受到限制。（2 2）相對校正因子）相對校正因子定義：定義：AhiiiiiimmffAh和AAisissisAiisisfA mAmfAmfA mi：組分組分S：標準物質(zhì)：標準物質(zhì) 相對校正因子可以把各個組分的峰面積分別換算成與其質(zhì)相對校正因子可以把各個組分的峰面積分別換算成與其質(zhì)量相等的標準物的峰面積，則比較標準統(tǒng)一起來。量相等的標準物的峰面