最新報(bào)告基因原理及應(yīng)用精品課件ppt教學(xué)內(nèi)容

1、報(bào)告基因原理及應(yīng)用Tianjin Sungene Biotech Co.,Ltd Tel:Email : techsupport 報(bào)告基因（reporter gene） 報(bào)告基因報(bào)告基因 (reporter (reporter gene)gene)是一種編碼可被檢是一種編碼可被檢測(cè)的蛋白質(zhì)或酶的基因，測(cè)的蛋白質(zhì)或酶的基因，是一個(gè)其表達(dá)產(chǎn)物非常容是一個(gè)其表達(dá)產(chǎn)物非常容易被鑒定的基因。易被鑒定的基因。 常見的報(bào)告基因有常見的報(bào)告基因有-半乳半乳糖苷糖苷酶酶 、-葡萄糖醛酸葡萄糖醛酸酶和熒光素酶等，其中熒酶和熒光素酶等，其中熒光素酶應(yīng)用最為廣泛。光素酶應(yīng)用最為廣泛。Tia

2、njin Sungene Biotech Co.,LtdTianjin Sungene Biotech Co.,LtdTianjin Sungene Biotech Co.,LtdTianjin Sungene Biotech Co.,Ltd Tel:Email : techsupport 檢測(cè)原理熒光素酶（熒光素酶（luciferase）可以催化）可以催化luciferin氧化成氧化成oxyluciferin，在，在反應(yīng)反應(yīng)過過程中會(huì)發(fā)出生物熒光，然后通過熒光測(cè)定儀器測(cè)定程中會(huì)發(fā)出生物熒光，然后通過熒光測(cè)定儀器測(cè)定luciferinluciferin氧化過程氧化過

3、程中釋放的生物熒光量中釋放的生物熒光量 ，經(jīng)過數(shù)據(jù)處理計(jì)，算出被測(cè)樣品中，經(jīng)過數(shù)據(jù)處理計(jì)，算出被測(cè)樣品中l(wèi)uciferase的的含量。含量。通過熒光素和熒光素酶這一生物發(fā)光體系，可以極其靈敏、高效地檢測(cè)通過熒光素和熒光素酶這一生物發(fā)光體系，可以極其靈敏、高效地檢測(cè)基因的表達(dá)?；虻谋磉_(dá)。 luciferinoxyluciferinTianjin Sungene Biotech Co.,Ltd Tel:Email : techsupport 檢測(cè)流程待測(cè)樣品檢測(cè)液檢測(cè)熒光強(qiáng)度制作標(biāo)曲和檢測(cè)樣品時(shí)都要設(shè)置對(duì)照孔制作標(biāo)曲和檢測(cè)樣品時(shí)都要設(shè)置對(duì)照孔熒光素酶底物檢測(cè)液緩沖液充

4、分混合代入標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算熒光素酶含量培養(yǎng)細(xì)胞加入待測(cè)化合物等體積反應(yīng)室溫孵育，避光Tianjin Sungene Biotech Co.,Ltd Tel:Email : techsupport 熒光素酶底物加入檢測(cè)緩沖液中混勻檢測(cè)液加入孔中，測(cè)定發(fā)光值待測(cè)樣品加入96孔板中Tianjin Sungene Biotech Co.,Ltd Tel:Email : techsupport Amplite Fluorimetric Sphingomyelinase Assay Kit鞘磷脂酶SMase檢測(cè)試劑盒磷酸膽堿磷酸膽堿SMaseSMase鞘

5、磷脂鞘磷脂應(yīng)用：應(yīng)用：Quantifying sphingomyelinase in blood, cell extracts Quantifying sphingomyelinase in blood, cell extracts and solutions.and solutions.靈敏度靈敏度:as low as of 0.15 mU/mL phingomyelinase in solution.:as low as of 0.15 mU/mL phingomyelinase in solution. Tianjin Sungene Biotech Co.,Ltd Tel:Email : techsupport Amplite Fluorimetric Lysyl Oxidase Assay Kit賴氨酸氧化酶檢測(cè)試劑盒 生物樣品中賴氨酰氧化酶的活性傳統(tǒng)方法：H3氚 放射性同位素標(biāo)記 試劑盒：HRP-coupled來檢測(cè)底物L(fēng)OX中 H2O2的釋