食品儀器分析-高效液相色譜參考答案

1、高效液相色譜 習(xí) 題一、填空題1.高效液相色譜分析是將流動(dòng)相用高壓泵輸送，使壓力高達(dá) 5 MPa以上，并采用新型的 化學(xué)鍵合固定相 ，是分離效率很高的液相色譜法。2.高效液相色譜法的特點(diǎn)是 分離性能高 、 分析速度快 、 檢測(cè)器靈敏度高 、 應(yīng)用范圍廣 。3.高效液相色譜法和氣相色譜法的共同之處是 分離功能 、 分析功能 、 在線分析 。4.高效液相色譜分析根據(jù)分離機(jī)理不同可分為四種類型，即 液固 色譜、 液液 色譜、 鍵合相 色譜、 凝膠 色譜。5.高效液相色譜中的液一液分配色譜采用的新型固定相叫 化學(xué)鍵合相 ，它是利用 化學(xué) 方法將固定液 官能團(tuán)鍵合 在載體表面上的。6.通常把固定相極性大

2、于流動(dòng)相極性的一類色譜稱為 正相 色譜。反之稱為 反相 色譜。7.高效液相色譜儀通常由 儲(chǔ)液器 、 輸液泵 、 梯度淋洗器 、 進(jìn)樣器 、 色譜柱 、 檢測(cè)器 、 色譜工作站 七部分組成。8.高效液相色譜儀中使用最廣泛的檢測(cè)器為 紫外檢測(cè)器 ，另外還有 折光 檢測(cè)器、 熒光 檢測(cè)器等等。9.高效液相色譜主要用于 分析沸點(diǎn)高 的、 分子量大 的、 受熱易分解 的以及具有生理活性物質(zhì)的分析。二、判斷題Ö、Ö、´、´、Ö、Ö、´、Ö、´、Ö、´、Ö、Ö、´、&#

3、214;、´、´、Ö、´、Ö、Ö、´、´、´、´、´、´、´、Ö、´ 1液一液色譜流動(dòng)相與被分離物質(zhì)相互作用，流動(dòng)相極性的微小變化，都會(huì)使組分的保留值出現(xiàn)較大的改變。 （ Ö ）2利用離子交換劑作固定相的色譜法稱為離子交換色譜法。 （ ）3紫外吸收檢測(cè)器是離子交換色譜法通用型檢測(cè)器。 （× ）4檢測(cè)器性能好壞將對(duì)組分分離產(chǎn)生直接影響。 （ × ）5高效液相色譜適用于大分子，熱不穩(wěn)定及生物試樣的分析。 （Ö

4、）6高效液相色譜中通常采用調(diào)節(jié)分離溫度和流動(dòng)相流速來改善分離效果。 （ × ）7鍵合固定相具有機(jī)械性能穩(wěn)定，可使用小粒度固定相和高柱壓來實(shí)現(xiàn)快速分離。（ ）8在液相色譜中為避免固定相的流失，流動(dòng)相與固定相的極性差別越大越好。 （ × ）9正相分配色譜的流動(dòng)相極性大于固定相極性。 （ × ）10反相分配色譜適于非極性化合物的分離。 （ ）11高效液相色譜法采用梯度洗脫，是為了改變被測(cè)組分的保留值，提高分離度（× ）12液相色譜柱一般采用不銹鋼柱、玻璃填充柱。 （ × ）13液相色譜固定相通常為粒度510m。 （ × ） 14示差折光檢測(cè)

5、器是屬于通用型檢測(cè)器，適于梯度淋洗色譜。 （ × ）15離子交換色譜主要選用有機(jī)物作流動(dòng)相。 （ × ）16體積排阻色譜所用的溶劑應(yīng)與凝膠相似，主要是防止溶劑吸附。 （ × ）17在液一液色譜中，為改善分離效果，可采用梯度洗脫。 （ ）18化學(xué)鍵合固定相具有良好的熱穩(wěn)定性，不易吸水，不易流失，可用梯度洗脫。（ × ）19液相色譜的流動(dòng)相又稱為淋洗液，改變淋洗液的組成、極性可顯著改變組分分離效果。（ ）20液相色譜指的是流動(dòng)相是液體，固定相也是液體的色譜。 （ × ）21高效液相色譜柱柱效高，能用液相色譜分析的樣品不用氣相色譜法分析。（ 

6、5; ）22在液相色譜中，流動(dòng)相的流速變化對(duì)柱效影響不大。 （ × ）23正相鍵合色譜的固定相為非（弱）極性固定相，反相色譜的固定相為極性固定相。 （ × ）24某人用凝膠色譜分離易高聚物樣品，分離情況很差，他改變流動(dòng)相的組成后，分離情況大為改進(jìn)，這種說法對(duì)嗎？ （ × ）25在離子交換色譜中使用的固定相也屬于一種鍵合固定相。 （ ）三、選擇題1在液相色譜法中，按分離原理分類，液固色譜法屬于（ D ）。A、分配色譜法 B、排阻色譜法 C、離子交換色譜法 D、吸附色譜2. 在高效液相色譜流程中，試樣混合物在（ C ）中被分離。A、檢測(cè)器 B、記錄器 C、色譜柱 D、

7、進(jìn)樣器3. 液相色譜流動(dòng)相過濾必須使用何種粒徑的過濾膜？( B )A、0.5m B、0.45m C、0.6m D、0.55m4在液相色譜中，為了改變色譜柱的選擇性，可以進(jìn)行如下哪些操作？( C )A、改變流動(dòng)相的種類或柱子 B、改變固定相的種類或柱長(zhǎng)C、改變固定相的種類和流動(dòng)相的種類 D、改變填料的粒度和柱長(zhǎng)5. 下列用于高效液相色譜的檢測(cè)器，（ D ）檢測(cè)器不能使用梯度洗脫。A、紫外檢測(cè)器 B、熒光檢測(cè)器C、蒸發(fā)光散射檢測(cè)器 D、示差折光檢測(cè)器6. 在高效液相色譜中，色譜柱的長(zhǎng)度一般在（ A ）范圍內(nèi)。A、1030cm B、2050m C、12m D、25m7. 在液相色譜中，某組分的保留值

8、大小實(shí)際反映了哪些部分的分子間作用力。（ C ）A、組分與流動(dòng)相 B、組分與固定相C、組分與流動(dòng)相和固定相 D、組分與組分8. 液相色譜中通用型檢測(cè)器是（ B ）。A、紫外吸收檢測(cè)器 B、示差折光檢測(cè)器C、熱導(dǎo)池檢測(cè)器 D、氫焰檢測(cè)器9. 在液相色譜法中，提高柱效最有效的途徑是（ D ）。A、提高柱溫 B、降低板高C、降低流動(dòng)相流速 D、減小填料粒度10在液相色譜中，不會(huì)顯著影響分離效果的是（ B ）。A、改變固定相種類 B、改變流動(dòng)相流速C、改變流動(dòng)相配比 D、改變流動(dòng)相種類11. 高效液相色譜儀與氣相色譜儀比較增加了（ D ）。A、恒溫箱 B、進(jìn)樣裝置C、程序升溫 D、梯度淋洗裝置12.

9、在高效液相色譜儀中保證流動(dòng)相以穩(wěn)定的速度流過色譜柱的部件是（ B ）。A、貯液器 B、輸液泵C、檢測(cè)器 D、溫控裝置13. 高效液相色譜分析用標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制一般使用（ A ）。A、國標(biāo)規(guī)定的一級(jí)、二級(jí)去離子水 B、國標(biāo)規(guī)定的三級(jí)水C、不含有機(jī)物的蒸餾水 D、無鉛（無重金屬）水14. 高效液相色譜儀與普通紫外-可見分光光度計(jì)完全不同的部件是（ A ）。A、流通池 B、光源 C、分光系統(tǒng) D、檢測(cè)系統(tǒng)15. 高效液相色譜儀中高壓輸液系統(tǒng)不包括（ E ）。A、貯液器 B、高壓輸液泵 C、過濾器 D、梯度洗脫裝置 E、進(jìn)樣器16. 在液相色譜中，為了獲得較高柱效能，常用的色譜柱是（ B ）。A、毛細(xì)管

10、柱 B、直形柱 C、U形柱 D、螺旋形柱 17. 在色譜法中，任何組分的分配系數(shù)都比1小的是（ D ）。A、離子交換色譜 B、氣固色譜 C、氣液色譜 D、空間排阻色譜18. 反相液液色譜適合于分離（ D ）。A、低沸點(diǎn)液體 B、高分子化合物 C、極性化合物 D、非極性化合物四、簡(jiǎn)答題（略）1從分離原理、儀器構(gòu)造及應(yīng)用范圍上簡(jiǎn)要比較氣相色譜及液相色譜的異同點(diǎn)。答：共同點(diǎn)：高效、高速、高選擇性，兼具分析和分離功能，均可在線分析。不同點(diǎn)：（1）流動(dòng)相不同（2）固定相不同，GC粒度粗（100250um），HPLC采用化學(xué)鍵合固定相，粒度?。?-10um）（3）應(yīng)用范圍不同（4）結(jié)構(gòu)不同，HPLC有高壓

11、輸液泵，GC的檢測(cè)器更多。各有所長(zhǎng)，互為補(bǔ)充。2在液相色譜中, 提高柱效的途徑有哪些?其中最有效的途徑是什么?答：液相色譜中提高柱效的途徑主要有： （1）提高柱內(nèi)填料裝填的均勻性； （2）改進(jìn)固定相： （3）粒度; 選擇薄殼形擔(dān)體; 選用低粘度的流動(dòng)相; （4）適當(dāng)提高柱溫 其中，減小粒度是最有效的途徑。. 3液相色譜有幾種類型? 它們的保留機(jī)理是什么？在這些類型的應(yīng)用中，最適宜分離的物質(zhì)是什么？答：液相色譜有以下幾種類型：液-液分配色譜；液-固吸附色譜；化學(xué)鍵合色譜；離子交換色譜；離子對(duì)色譜；空間排阻色譜等。液液分配色譜的保留機(jī)理是通過組分在固定相和流動(dòng)相間的多次分配進(jìn)行分離的?？梢苑蛛x各種

12、無機(jī)、有機(jī)化合物。 液-固吸附色譜是通過組分在兩相間的多次吸附與解吸平衡實(shí)現(xiàn)分離的。最適宜分離的物質(zhì)為中等相對(duì)分子質(zhì)量的油溶性試樣，凡是能夠用薄層色譜分離的物質(zhì)均可用此法分離?；瘜W(xué)鍵合色譜中由于鍵合基團(tuán)不能全部覆蓋具有吸附能力的載體，所以同時(shí)遵循吸附和分配的機(jī)理，最適宜分離的物質(zhì)為與液-液色譜相同。離子交換色譜是通過組分與固定相間親合力差別而實(shí)現(xiàn)分離的。各種離子及在溶液中能夠離解的物質(zhì)均可實(shí)現(xiàn)分離，包括無機(jī)化合物、有機(jī)物及生物分子，如氨基酸、核酸及蛋白質(zhì)等?？臻g排阻色譜是利用凝膠固定相的孔徑與被分離組分分子間的相對(duì)大小關(guān)系，而分離、分析的方法。最適宜分離的物質(zhì)是：蛋白質(zhì)等生物分子的分離、高聚物

13、等大分子分離（分子量大于2000）。4在液-液分配色譜中，為什么可分為正相色譜及反相色譜？答：采用正相及反相色譜的分類法，是為了選擇與固定相性能匹配的流動(dòng)相，以降低固定液在流動(dòng)相中的溶解度從而避免固定液的流失。當(dāng)然，分離的對(duì)象也隨之發(fā)生改變。5何謂化學(xué)鍵合固定相？它有什么突出的優(yōu)點(diǎn)？答：利用化學(xué)反應(yīng)將固定液的官能團(tuán)鍵合在載體表面形成的固定相稱為化學(xué)鍵合固定相。 優(yōu)點(diǎn)：固定相表面沒有液坑,比一般液體固定相傳質(zhì)快的多；無固定相流失，增加了色譜柱的穩(wěn)定性及壽命；可以鍵合不同的官能團(tuán)，能靈活地改變選擇性，可應(yīng)用與多種色譜類型及樣品的分析；有利于梯度洗提，也有利于配用靈敏的檢測(cè)器和餾分的收集。6何謂梯度洗脫？它與氣相色譜中的程序升溫有何異同之處？答：在一個(gè)分析周期內(nèi)，按一定程序不斷改變流動(dòng)相的組成或濃度配比，稱為梯度洗提，是改進(jìn)液相色譜分離的重要手段。 梯度洗提與氣相色譜中的程序升溫類似，但是前者連續(xù)改變的是流動(dòng)相的極性、pH或離子強(qiáng)度，而后者改變的溫度。程序升溫也是改進(jìn)氣相色譜分離的重要手段。 7高效液相色譜進(jìn)樣技術(shù)與氣相色譜進(jìn)樣技術(shù)有何不同之處？答：在高效液相色譜中為了承受高壓，常采用進(jìn)樣閥進(jìn)樣的方式，定量準(zhǔn)確、重復(fù)性好。在GC中通常采用注射器進(jìn)樣，缺點(diǎn)是定量不準(zhǔn)確。書是我們時(shí)代的生命別林斯基書籍是巨大的力量列寧書是人類進(jìn)步的階梯高爾基書籍是人類知識(shí)的總統(tǒng)莎士比亞書籍是人類思想的寶庫