人類疾病動模型評估及分類課件

1、人類疾病動模型評估及分類1第八章第八章 人類疾病動物模型人類疾病動物模型第一節(jié)第一節(jié) 人類疾病動模型評估及分類人類疾病動模型評估及分類第二節(jié)第二節(jié) 腫瘤疾病動物模型腫瘤疾病動物模型第三節(jié)第三節(jié) 心血管疾病動物模型心血管疾病動物模型第四節(jié)第四節(jié) 呼吸、消化疾病動物模型呼吸、消化疾病動物模型第五節(jié)第五節(jié) 內(nèi)分泌、營養(yǎng)疾病動物模型內(nèi)分泌、營養(yǎng)疾病動物模型第六節(jié)第六節(jié) 神經(jīng)系統(tǒng)疾病動物模型神經(jīng)系統(tǒng)疾病動物模型第七節(jié)第七節(jié) 骨骼系統(tǒng)疾病動物模型骨骼系統(tǒng)疾病動物模型人類疾病動模型評估及分類2第一節(jié)第一節(jié) 人類疾病動模型評估及分類人類疾病動模型評估及分類人類疾病動物模型人類疾病動物模型(Animal mod

2、els of human diseases)： 是指醫(yī)學(xué)研究中建立的具有人類疾病模擬表現(xiàn)是指醫(yī)學(xué)研究中建立的具有人類疾病模擬表現(xiàn)的動物實驗對象和相關(guān)材料。的動物實驗對象和相關(guān)材料。 人類疾病動模型評估及分類3一、復(fù)制人類疾病動物模型的評估一、復(fù)制人類疾病動物模型的評估 1相似性相似性 復(fù)制的動物模型應(yīng)盡可能近似人類疾病，最好復(fù)制的動物模型應(yīng)盡可能近似人類疾病，最好能找到與人類疾病相同的自發(fā)性疾病。能找到與人類疾病相同的自發(fā)性疾病。2重復(fù)性重復(fù)性 理想的人類疾病動物模型應(yīng)該是可重復(fù)的，應(yīng)理想的人類疾病動物模型應(yīng)該是可重復(fù)的，應(yīng)是可標(biāo)準化的，不能重復(fù)的動物模型是無法進行應(yīng)用是可標(biāo)準化的，不能重復(fù)的

3、動物模型是無法進行應(yīng)用研究的。研究的。 人類疾病動模型評估及分類4 3可靠性可靠性 復(fù)制的動物模型應(yīng)力求可靠地反映人類疾病，即復(fù)制的動物模型應(yīng)力求可靠地反映人類疾病，即 可特異地反映該種疾病或某種機能、代謝、結(jié)構(gòu)變化，可特異地反映該種疾病或某種機能、代謝、結(jié)構(gòu)變化， 同時應(yīng)具備該種疾病的主要癥狀和體征，并經(jīng)受一系同時應(yīng)具備該種疾病的主要癥狀和體征，并經(jīng)受一系 列檢測列檢測(如心電圖、臨床生理、生化指標(biāo)檢驗、病理切如心電圖、臨床生理、生化指標(biāo)檢驗、病理切片等片等)得以證實。得以證實。 人類疾病動模型評估及分類54適用性和可控性適用性和可控性 設(shè)計復(fù)制人類疾病動物模型，應(yīng)盡量考慮在今后設(shè)計復(fù)制人類

4、疾病動物模型，應(yīng)盡量考慮在今后臨床能應(yīng)用和便于控制其疾病的發(fā)展，以便于開展研臨床能應(yīng)用和便于控制其疾病的發(fā)展，以便于開展研究工作。究工作。 5 5易行性和經(jīng)濟性易行性和經(jīng)濟性 復(fù)制動物模型設(shè)計，應(yīng)盡量做到方法容易執(zhí)行和復(fù)制動物模型設(shè)計，應(yīng)盡量做到方法容易執(zhí)行和合乎經(jīng)濟原則。合乎經(jīng)濟原則。 人類疾病動模型評估及分類6二、動物模型的分類二、動物模型的分類 按產(chǎn)生原因分類按產(chǎn)生原因分類1誘發(fā)性動物模型誘發(fā)性動物模型(Experimental animal model)： 是指研究者通過使用物理的、化學(xué)的、生物的和復(fù)合的致是指研究者通過使用物理的、化學(xué)的、生物的和復(fù)合的致病因素作用于動物，造成動物組織

5、、器官或全身一定的損害，出病因素作用于動物，造成動物組織、器官或全身一定的損害，出現(xiàn)某些類似人類疾病時的功能、代謝或形態(tài)結(jié)構(gòu)方面的病變，即現(xiàn)某些類似人類疾病時的功能、代謝或形態(tài)結(jié)構(gòu)方面的病變，即為人工誘發(fā)出特定的疾病動物模型。為人工誘發(fā)出特定的疾病動物模型。 人類疾病動模型評估及分類7物理因素物理因素 ：機械損傷、放射線損傷、氣壓、手術(shù)機械損傷、放射線損傷、氣壓、手術(shù)化學(xué)因素化學(xué)因素 ：化學(xué)藥致癌、化學(xué)毒物中毒、強酸強堿燒：化學(xué)藥致癌、化學(xué)毒物中毒、強酸強堿燒 傷、某種有機成分的增加或減少導(dǎo)致營養(yǎng)傷、某種有機成分的增加或減少導(dǎo)致營養(yǎng) 性疾病等。性疾病等。生物因素生物因素 ：細菌、病毒、寄生蟲、

6、生物毒素等：細菌、病毒、寄生蟲、生物毒素等 。復(fù)合因素復(fù)合因素 ： 人類疾病動模型評估及分類82自發(fā)性動物模型自發(fā)性動物模型 (Spontaneous animal model)： 指實驗動物未經(jīng)任何人工處置，在自然條件下動物自然指實驗動物未經(jīng)任何人工處置，在自然條件下動物自然發(fā)生、或由于基因突變的異常表現(xiàn)通過遺傳育種保留下來的動物發(fā)生、或由于基因突變的異常表現(xiàn)通過遺傳育種保留下來的動物模型。模型。 優(yōu)點：優(yōu)點：完全在自然條件下發(fā)生的疾病，排除了人為的完全在自然條件下發(fā)生的疾病，排除了人為的 因素，疾病的發(fā)生、發(fā)展與人類相應(yīng)的疾病很因素，疾病的發(fā)生、發(fā)展與人類相應(yīng)的疾病很 相似。相似。 缺點：

7、缺點：來源比較困難，種類有限。來源比較困難，種類有限。 人類疾病動模型評估及分類93抗疾病型動物模型抗疾病型動物模型 (Negative animal model)： 是指特定的疾病不會在某種動物身上發(fā)生，從而是指特定的疾病不會在某種動物身上發(fā)生，從而可以用來探討為何這種動物對該疾病有天然的抵抗力可以用來探討為何這種動物對該疾病有天然的抵抗力 的動物模型的動物模型。4生物醫(yī)學(xué)動物模型生物醫(yī)學(xué)動物模型 (Biomedical animal model)： 是指利用健康動物生物學(xué)特征來提供人類疾病相是指利用健康動物生物學(xué)特征來提供人類疾病相似表現(xiàn)的疾病模型。似表現(xiàn)的疾病模型。 人類疾病動模型評估及

8、分類10第二節(jié)第二節(jié) 腫瘤疾病動物模型腫瘤疾病動物模型分類：分類：自發(fā)性腫瘤（自發(fā)性腫瘤（spontaneous tumorspontaneous tumor）動物模型：）動物模型： 指實驗動物未經(jīng)任何有意識的人工處置，在自然情況下發(fā)生的指實驗動物未經(jīng)任何有意識的人工處置，在自然情況下發(fā)生的腫瘤所形成的模型。腫瘤所形成的模型。誘發(fā)性腫瘤（誘發(fā)性腫瘤（induced tumorinduced tumor）動物模型：）動物模型： 是使用致癌因素在實驗條件下誘發(fā)動物發(fā)生腫瘤的動物模型。是使用致癌因素在實驗條件下誘發(fā)動物發(fā)生腫瘤的動物模型。移植性腫瘤（移植性腫瘤（transplant tumortra

9、nsplant tumor）動物模型：）動物模型： 指將動物或人體腫瘤移植同種或異種動物連續(xù)傳代而培養(yǎng)出的指將動物或人體腫瘤移植同種或異種動物連續(xù)傳代而培養(yǎng)出的模型。模型。 人類疾病動模型評估及分類11誘發(fā)性腫瘤模型：誘發(fā)性腫瘤模型：方法：方法：原位誘發(fā)：原位誘發(fā)：指將致癌物直接與動物靶組織或靶器官接觸而誘發(fā)該指將致癌物直接與動物靶組織或靶器官接觸而誘發(fā)該組織或器官發(fā)生腫瘤，接觸方法可通過涂抹、灌注、喂養(yǎng)或埋置組織或器官發(fā)生腫瘤，接觸方法可通過涂抹、灌注、喂養(yǎng)或埋置等等 。異位誘發(fā)：異位誘發(fā)：將與致癌物接觸后的動物組織或器官埋置于該動物或?qū)⑴c致癌物接觸后的動物組織或器官埋置于該動物或另一正常動

10、物皮下而產(chǎn)生的該組織或器官的腫瘤。另一正常動物皮下而產(chǎn)生的該組織或器官的腫瘤。異位誘發(fā)腫瘤異位誘發(fā)腫瘤具有易于觀察和取材的優(yōu)點。具有易于觀察和取材的優(yōu)點。誘癌物：誘癌物： 放射線局部照射、化學(xué)致癌物（放射線局部照射、化學(xué)致癌物（烷化劑、亞硝胺類、芳香胺烷化劑、亞硝胺類、芳香胺類類）、生物毒素（）、生物毒素（黃曲酶毒素黃曲酶毒素）、細菌（）、細菌（幽門螺桿菌幽門螺桿菌）、腫瘤病毒）、腫瘤病毒感染。感染。 人類疾病動模型評估及分類12舉例：舉例：二乙基亞硝胺二乙基亞硝胺(DEN)誘發(fā)誘發(fā)小鼠肺癌小鼠肺癌： 采用小鼠皮下注射采用小鼠皮下注射1DEN水溶液，每周一次，水溶液，每周一次，(每次每次劑量為

11、劑量為56mg/kg體重，總劑量為體重，總劑量為868mg)。觀察時間為。觀察時間為100d左右。此模型誘發(fā)率約左右。此模型誘發(fā)率約40%。若將。若將DEN總劑量增到總劑量增到1176mg時，半年誘發(fā)率可達時，半年誘發(fā)率可達90以上。以上。亞胺基偶氮甲苯亞胺基偶氮甲苯(OAAT)(OAAT)誘發(fā)誘發(fā)小鼠肝癌小鼠肝癌： 用用l lOAATOAAT苯溶液涂于動物兩肩胛間皮膚上，隔日苯溶液涂于動物兩肩胛間皮膚上，隔日1 1次，次，每次每次2323滴、一般涂滴、一般涂100100次。次。7 7個月以上誘發(fā)肝腫瘤約個月以上誘發(fā)肝腫瘤約5555。黃曲霉素誘發(fā)黃曲霉素誘發(fā)大鼠肝癌大鼠肝癌： 在大鼠飼料中加入

12、黃曲霉素，含在大鼠飼料中加入黃曲霉素，含0.011-0.015ppm0.011-0.015ppm，喂，喂養(yǎng)養(yǎng)6 6個月，誘發(fā)率達個月，誘發(fā)率達8080。 人類疾病動模型評估及分類13注意：注意：必須適當(dāng)選擇：必須適當(dāng)選擇：致瘤方法致瘤方法、動物種系動物種系、致癌物種類致癌物種類與溶劑與溶劑、給藥劑量與途徑給藥劑量與途徑及及觀察時間觀察時間等盡量簡便可等盡量簡便可行，有較好的重復(fù)性，并有利于與人腫瘤比較行，有較好的重復(fù)性，并有利于與人腫瘤比較。方法和種系應(yīng)對所用致瘤物敏感方法和種系應(yīng)對所用致瘤物敏感。1.1.致癌物的致癌物的劑量劑量應(yīng)能保證動物存活率較高、誘發(fā)期較應(yīng)能保證動物存活率較高、誘發(fā)期較

13、短而又可誘發(fā)較高頻率的腫瘤短而又可誘發(fā)較高頻率的腫瘤 人類疾病動模型評估及分類14移植性腫瘤模型：移植性腫瘤模型：方法方法：實體瘤移植：實體瘤移植： 腫瘤細胞皮下接種腫瘤細胞皮下接種7-10d處死荷瘤動處死荷瘤動物物選擇生長良好、無壞死液化的瘤組織選擇生長良好、無壞死液化的瘤組織2-3mm3+生理鹽水或其它營養(yǎng)液生理鹽水或其它營養(yǎng)液無菌套管無菌套管針抽吸針抽吸接種同種受體動物右前腋窩皮下。接種同種受體動物右前腋窩皮下。腹水瘤移植：腹水瘤移植： 腫瘤細胞皮下接種腫瘤細胞皮下接種7-10d處死荷瘤動物處死荷瘤動物取腹水取腹水含葡萄糖平衡鹽水稀釋至適當(dāng)濃度含葡萄糖平衡鹽水稀釋至適當(dāng)濃度腹腹腔注射（腹

14、水瘤）或皮下注射（實體瘤）。腔注射（腹水瘤）或皮下注射（實體瘤）。人類疾病動模型評估及分類15評價評價:同時接種同樣量的瘤細胞，生長速度較一致，個體同時接種同樣量的瘤細胞，生長速度較一致，個體差異較小。差異較小。接種成活率近接種成活率近100%100%。對宿主影響相類似。對宿主影響相類似?？蛇B續(xù)傳代，試驗周期短，條件易于控制。可連續(xù)傳代，試驗周期短，條件易于控制。1.1.主要問題是主要問題是宿主對移植物產(chǎn)生免疫排斥反應(yīng)宿主對移植物產(chǎn)生免疫排斥反應(yīng)。人類疾病動模型評估及分類16第三節(jié)第三節(jié) 心血管疾病動物模型心血管疾病動物模型高脂飼料誘發(fā)高血脂及動脈粥樣硬化癥高脂飼料誘發(fā)高血脂及動脈粥樣硬化癥模

15、型模型非喂養(yǎng)法誘發(fā)高血脂及動脈粥樣硬化癥非喂養(yǎng)法誘發(fā)高血脂及動脈粥樣硬化癥模型模型人類疾病動模型評估及分類17高脂飼料誘發(fā)高血脂及動脈粥樣硬化癥模型高脂飼料誘發(fā)高血脂及動脈粥樣硬化癥模型 造模機制：造模機制：動物飼料中加入過量的膽固醇和脂肪，飼養(yǎng)一定動物飼料中加入過量的膽固醇和脂肪，飼養(yǎng)一定時間后，其主動脈及冠狀動脈處逐漸形成粥樣硬時間后，其主動脈及冠狀動脈處逐漸形成粥樣硬化斑塊，并出現(xiàn)高血脂癥?；邏K，并出現(xiàn)高血脂癥。1.1.高膽固醇和高脂飲食，加入少量膽酸鹽，可增加高膽固醇和高脂飲食，加入少量膽酸鹽，可增加膽固醇的吸收，如再加入甲狀腺抑制藥膽固醇的吸收，如再加入甲狀腺抑制藥-甲基硫甲基硫氧

16、嘧啶氧嘧啶或或丙基硫氧嘧啶丙基硫氧嘧啶可進一步加速病變的形成?？蛇M一步加速病變的形成。 人類疾病動模型評估及分類18造模方法造模方法: : 1. 1.小型豬：小型豬： 選用選用GottigenGottigen系小型豬較為理想，用系小型豬較為理想，用1 12 2高脂食物飼高脂食物飼喂喂6 6個月即可形成動脈粥樣硬化病變。個月即可形成動脈粥樣硬化病變。 評價：評價：形成動脈粥樣硬化形成動脈粥樣硬化病變特點病變特點及及分布分布都與人類近似。都與人類近似。 2.2.猴：猴： 選用選用3.53.510.5kg10.5kg，3 36 6歲的恒河猴飼喂高脂飼料歲的恒河猴飼喂高脂飼料( (5050麥麥粉、粉、

17、8 8玉米粉、玉米粉、8 8麥麩、麥麩、1 1膽固醇、膽固醇、8 8蛋黃、蛋黃、8 8豬油、豬油、1717白糖及適量的小蘇打和食鹽白糖及適量的小蘇打和食鹽) )。1 1個月后造成猴的實驗性高個月后造成猴的實驗性高血脂癥。血清膽固醇較正常時升高血脂癥。血清膽固醇較正常時升高3.13.13.23.2倍。倍。 評價：評價：猴的膽固醇代謝、血漿脂蛋白組成及高脂血癥與人相猴的膽固醇代謝、血漿脂蛋白組成及高脂血癥與人相似，是較理想的模型。似，是較理想的模型。 人類疾病動模型評估及分類19 3. 3. 兔：兔： 選用選用2kg2kg左右體重，每天膽固醇左右體重，每天膽固醇0.3g0.3g，4 4個月后形成主

18、動個月后形成主動脈粥樣硬化斑塊；劑量增至脈粥樣硬化斑塊；劑量增至0.5g0.5g，3 3個月個月出現(xiàn)斑塊；增至出現(xiàn)斑塊；增至1.0g1.0g，可縮為可縮為2 2個月個月。在飼料中加人在飼料中加人1515蛋黃粉蛋黃粉、0.50.5膽固醇膽固醇和和5%5%豬豬油油，3 3周后，將膽固醇減去再喂周后，將膽固醇減去再喂3 3周，可使斑塊發(fā)生率達周，可使斑塊發(fā)生率達100100，血清膽固醇可升高至血清膽固醇可升高至2000mg%2000mg%。 評價：評價：對喂飼膽固醇非常敏感，在短期內(nèi)便能出現(xiàn)明顯的病對喂飼膽固醇非常敏感，在短期內(nèi)便能出現(xiàn)明顯的病變。因為兔對外源性膽固醇的變。因為兔對外源性膽固醇的吸收

19、率吸收率可高達可高達75759090，對高，對高血脂的血脂的清除能力低清除能力低( (靜脈注射膽固醇后，高脂血癥可持續(xù)靜脈注射膽固醇后，高脂血癥可持續(xù)3 34 4天天) )。 但兔作模型不夠理想，主要表現(xiàn)為但兔作模型不夠理想，主要表現(xiàn)為血源性泡沫細胞增多血源性泡沫細胞增多，且且病變分布病變分布與人的病變也有差異。與人的病變也有差異。人類疾病動模型評估及分類20 4. 4.大鼠大鼠： 配方一飼料配方一飼料( (1 1-4-4膽固醇、膽固醇、1010豬油，豬油，0.2%0.2%甲基硫氧嘧啶、甲基硫氧嘧啶、8989-86-86基礎(chǔ)飼料基礎(chǔ)飼料) )，喂服，喂服7 71010天。天?？尚纬筛吣懝檀佳Y

20、。可形成高膽固醇血癥。 配方二飼料配方二飼料( (1010蛋黃粉、蛋黃粉、5 5豬油、豬油、0.50.5膽膽鹽、鹽、8585基礎(chǔ)飼料基礎(chǔ)飼料) )，喂服，喂服7 7天可形成高膽固醇血癥。天可形成高膽固醇血癥。 評價：評價：飼養(yǎng)方便、抵抗力強、食性與人相近。所形飼養(yǎng)方便、抵抗力強、食性與人相近。所形成的病理改變與人早期者相似，不易形成似人體的成的病理改變與人早期者相似，不易形成似人體的后期病變后期病變，較易形成血栓。，較易形成血栓。人類疾病動模型評估及分類21 5. 5.小鼠：小鼠： 雄性小鼠飼以雄性小鼠飼以1 1膽固醇及膽固醇及1010豬油豬油的高脂飼料，的高脂飼料，7 7天后血清膽固醇即升為

21、天后血清膽固醇即升為34334315mg15mg；若在飼料中再；若在飼料中再加入加入0.30.3的膽酸的膽酸，連飼，連飼7 7天，血清膽固醇可高達天，血清膽固醇可高達53053036mg36mg 評價：評價：容易飼養(yǎng)和節(jié)省藥品等優(yōu)點，但是取血不便，容易飼養(yǎng)和節(jié)省藥品等優(yōu)點，但是取血不便，難做動態(tài)觀察，所以較少采用。難做動態(tài)觀察，所以較少采用。人類疾病動模型評估及分類22 6. 6.雞：雞： 4 48 8周的萊克亨雞，在飼料中加入周的萊克亨雞，在飼料中加入1 1-2-2膽固膽固醇或醇或1515蛋黃粉蛋黃粉，再加，再加5 51010豬油豬油，經(jīng)過，經(jīng)過6 61010周，血膽固醇即升至周，血膽固醇即

22、升至1000mg1000mg4000mg4000mg，胸主動，胸主動脈斑塊發(fā)生率達脈斑塊發(fā)生率達100100。 評價：評價：雞為雜食動物，僅在普通飼料中加入膽固醇，雞為雜食動物，僅在普通飼料中加入膽固醇，就可形成動脈粥樣硬化斑塊。就可形成動脈粥樣硬化斑塊。病變發(fā)生較快病變發(fā)生較快，在斑，在斑塊中有時伴有塊中有時伴有鈣化鈣化和形成和形成潰瘍潰瘍。人類疾病動模型評估及分類23非喂養(yǎng)法誘發(fā)高血脂及動脈粥樣硬化癥模型非喂養(yǎng)法誘發(fā)高血脂及動脈粥樣硬化癥模型 造模方法造模方法: : 1. 1.免疫法：免疫法： 將大鼠主動脈勻漿給兔注射，可引起血膽固將大鼠主動脈勻漿給兔注射，可引起血膽固醇、醇、脂蛋白及甘油

23、三酯升高。給兔注射馬血脂蛋白及甘油三酯升高。給兔注射馬血清清10ml/kg/10ml/kg/次，共次，共4 4次，每次間隔次，每次間隔1717天。天。 評價評價: : 動脈內(nèi)膜損傷率為動脈內(nèi)膜損傷率為8888，冠狀動脈亦有粥樣硬，冠狀動脈亦有粥樣硬化的病變，若同時給予高膽固醇飼料，病變更加明顯。化的病變，若同時給予高膽固醇飼料，病變更加明顯。人類疾病動模型評估及分類24 2. 2.兒茶酚胺法：兒茶酚胺法： 給兔靜脈滴注去甲腎上腺素給兔靜脈滴注去甲腎上腺素lmg/24hlmg/24h，時間為，時間為30min30min。一種方法是先滴。一種方法是先滴15min15min，休息，休息5min5mi

24、n后再滴后再滴15min15min。另一種方法是每次點滴。另一種方法是每次點滴5min5min和休息和休息5min5min，反復(fù)反復(fù)6 6次。次。 評價評價: : 持續(xù)兩周，均可引起主動脈病變，呈現(xiàn)血管持續(xù)兩周，均可引起主動脈病變，呈現(xiàn)血管壁中層弱性纖維拉長、劈裂或斷裂，病變中出現(xiàn)壁中層弱性纖維拉長、劈裂或斷裂，病變中出現(xiàn)壞死及鈣化。壞死及鈣化。人類疾病動模型評估及分類25 3. 3.半胱氨酸法：半胱氨酸法： 給兔皮下注射同型半胱氨酸硫代內(nèi)酯每天給兔皮下注射同型半胱氨酸硫代內(nèi)酯每天202025mg/kg(25mg/kg(以以5 5葡萄糖溶液配成葡萄糖溶液配成lmg/mllmg/ml的濃的濃度度

25、) )，連續(xù)，連續(xù)20202525天。天。 評價：評價： 成年兔及幼兔均可出現(xiàn)動脈粥樣硬化的典型成年兔及幼兔均可出現(xiàn)動脈粥樣硬化的典型病變。冠狀動脈管腔變窄、動脈壁內(nèi)膜肌細胞增病變。冠狀動脈管腔變窄、動脈壁內(nèi)膜肌細胞增生、纖維狀異物質(zhì)。如同時在飲料中加入生、纖維狀異物質(zhì)。如同時在飲料中加入2020的的膽固醇，則出現(xiàn)顯著的動脈粥樣硬化病變。膽固醇，則出現(xiàn)顯著的動脈粥樣硬化病變。人類疾病動模型評估及分類26 4. 4.表面活化劑法：表面活化劑法： 給大鼠腹腔注射給大鼠腹腔注射Troton WRl339 300mg/kgTroton WRl339 300mg/kg體重體重。 評價評價: : 給藥給藥

26、9h9h后可使血清膽固醇升高后可使血清膽固醇升高3 34 4倍；倍；20h20h后后雄性大鼠血清膽固醇仍為正常的雄性大鼠血清膽固醇仍為正常的3-43-4倍，而雌性大倍，而雌性大鼠卻為鼠卻為6 6倍左右。用藥后倍左右。用藥后24h24h左右升脂作用達最高左右升脂作用達最高點，點，48h48h左右恢復(fù)正常。其中以甘油三酯升高最強，左右恢復(fù)正常。其中以甘油三酯升高最強，其次是磷脂、游離膽固醇，對膽固醇酯沒有影響其次是磷脂、游離膽固醇，對膽固醇酯沒有影響。人類疾病動模型評估及分類27第四節(jié)第四節(jié) 呼吸、消化疾病動物模型呼吸、消化疾病動物模型肝纖維化動物模型肝纖維化動物模型支氣管哮喘動物模型支氣管哮喘動

27、物模型人類疾病動模型評估及分類28 肝纖維化動物模型肝纖維化動物模型 模型概述：模型概述：任何可引起肝損傷的因素任何可引起肝損傷的因素長期、反復(fù)作用長期、反復(fù)作用于肝臟，于肝臟，均可產(chǎn)生肝細胞均可產(chǎn)生肝細胞變性、壞死變性、壞死，繼而肝細胞，繼而肝細胞再生再生和和纖纖維組織增生維組織增生，導(dǎo)致肝纖維化。，導(dǎo)致肝纖維化。1.1.已有已有化學(xué)性損傷化學(xué)性損傷、免疫性免疫性、生物學(xué)生物學(xué)、酒精性酒精性和和營養(yǎng)營養(yǎng)性性肝纖維化模型。每種方法因致病因素不同，給藥肝纖維化模型。每種方法因致病因素不同，給藥途徑不同，產(chǎn)生肝硬化的途徑不同，產(chǎn)生肝硬化的機理機理、纖維化、纖維化出現(xiàn)早晚出現(xiàn)早晚、穩(wěn)定性穩(wěn)定性、出現(xiàn)

28、率出現(xiàn)率、重復(fù)性重復(fù)性及機體自然患病過程相似及機體自然患病過程相似程度等都不盡相同。程度等都不盡相同。 人類疾病動模型評估及分類29造模方法：造模方法： 1.1.免疫法：免疫法： 免疫性肝纖維化產(chǎn)生的機理是免疫性肝纖維化產(chǎn)生的機理是型變態(tài)反應(yīng)引起，白型變態(tài)反應(yīng)引起，白蛋白和血清的大分子物質(zhì)，作為異種抗原進入大鼠體內(nèi)后，蛋白和血清的大分子物質(zhì)，作為異種抗原進入大鼠體內(nèi)后，刺激其產(chǎn)生相應(yīng)的抗體，當(dāng)抗原再次進人機體后抗原抗體刺激其產(chǎn)生相應(yīng)的抗體，當(dāng)抗原再次進人機體后抗原抗體結(jié)合，形成抗原結(jié)合，形成抗原抗體免疫復(fù)合物抗體免疫復(fù)合物(IC)(IC)，抗原的反復(fù)、長，抗原的反復(fù)、長期刺激，過量的免疫復(fù)合物

29、來不及被清除，沉積于肝臟的期刺激，過量的免疫復(fù)合物來不及被清除，沉積于肝臟的血管壁內(nèi)外，引起血管炎，造成肝損傷。反復(fù)導(dǎo)致肝細胞血管壁內(nèi)外，引起血管炎，造成肝損傷。反復(fù)導(dǎo)致肝細胞變性、壞死，再生，纖維增生等變化，最后發(fā)展為肝纖維變性、壞死，再生，纖維增生等變化，最后發(fā)展為肝纖維化、肝硬化?；?、肝硬化。 動物選用雄性動物選用雄性WistarWistar大鼠，體重大鼠，體重130g130g左右。取豬血清左右。取豬血清0.5ml0.5ml，腹腔內(nèi)注射，每周，腹腔內(nèi)注射，每周2 2次，共次，共8 8次次( (豬血清的制備：取豬血清的制備：取新鮮豬血，離心制血清，濾過除菌，分裝放低溫冰箱備用新鮮豬血，離心

30、制血清，濾過除菌，分裝放低溫冰箱備用) )。人類疾病動模型評估及分類30 評價評價: : 大鼠第大鼠第3 3周出現(xiàn)肝細胞變性、壞死，第周出現(xiàn)肝細胞變性、壞死，第4 4周增生的膠原纖維形周增生的膠原纖維形成纖維束，從中央靜脈到門管區(qū)之間相互伸延，發(fā)生纖維化。成纖維束，從中央靜脈到門管區(qū)之間相互伸延，發(fā)生纖維化。 模型特點：模型特點： 肝纖維化出現(xiàn)早，出現(xiàn)率高；肝纖維化出現(xiàn)早，出現(xiàn)率高； 動物整體損傷輕微，毛發(fā)、生長情況正常；動物整體損傷輕微，毛發(fā)、生長情況正常； 纖維化組織中大量膠原增生，纖維化組織中大量膠原增生，、型前膠原型前膠原mRNAmRNA增多。增多。 慢性活動性肝炎患者循環(huán)免疫復(fù)合物多

31、為陽性，豬血清模型慢性活動性肝炎患者循環(huán)免疫復(fù)合物多為陽性，豬血清模型可用慢性肝炎所致肝纖維化的研究，對于研究免疫復(fù)合物的形成，可用慢性肝炎所致肝纖維化的研究，對于研究免疫復(fù)合物的形成，沉積和清除及對于防治免疫損傷性肝纖維化有效藥物的篩選，具沉積和清除及對于防治免疫損傷性肝纖維化有效藥物的篩選，具有意義。有意義。人類疾病動模型評估及分類31指標(biāo)指標(biāo)豬血清模型豬血清模型白蛋白模型白蛋白模型方法方法簡單復(fù)雜價格價格經(jīng)濟較貴出現(xiàn)率出現(xiàn)率86.7%77.7%死亡率死亡率040% /31.6%周期周期28d95d豬血清模型與白蛋白模型相比豬血清模型與白蛋白模型相比人類疾病動模型評估及分類32 2. 2.

32、化學(xué)性損傷法化學(xué)性損傷法： 雄性雄性WistarWistar大鼠，體重大鼠，體重130 g130 g左右，用硫代乙酰胺腹腔左右，用硫代乙酰胺腹腔內(nèi)注射，第內(nèi)注射，第1 1次次20mg/100g20mg/100g體重，從第二次起體重，從第二次起12mg/100g12mg/100g體重，體重，每周注射每周注射2 2次，共次，共8 8周。周。 評價評價: : 第第3 3周，在肝小葉間中間帶出現(xiàn)大片的肝細胞變性壞死周，在肝小葉間中間帶出現(xiàn)大片的肝細胞變性壞死和炎細胞浸潤，炎細胞浸潤、壞死細胞數(shù)和程度超過豬血和炎細胞浸潤，炎細胞浸潤、壞死細胞數(shù)和程度超過豬血清模型。清模型。6 6周后出現(xiàn)增生纖維束，纖維

33、增生晚于和少于豬血周后出現(xiàn)增生纖維束，纖維增生晚于和少于豬血清模型。大鼠肝纖維組織中有清模型。大鼠肝纖維組織中有I I型膠原的型膠原的mRNAmRNA增多。增多。人類疾病動模型評估及分類33 3. 3.四氯化碳法：四氯化碳法： 180180200g Wistar200g Wistar或或SDSD大鼠，大鼠，皮下注射皮下注射40%-50%CCl40%-50%CCl4 4，油溶液油溶液(0.3ml/100g)(0.3ml/100g)，每周，每周2 2次，第次，第2 2周始，隔日以周始，隔日以2020-30-30酒精酒精lmllml灌胃灌胃( (或作為唯一飲料或作為唯一飲料) )，飼以飼以單純玉米面

34、單純玉米面( (混以混以0.50.5膽固醇膽固醇) )，共，共1010周。周。 評價：評價：第第2 2周出現(xiàn)小葉中心小片狀肝細胞變性壞死，第周出現(xiàn)小葉中心小片狀肝細胞變性壞死，第4 4周開周開始有較薄的纖維間隔形成，第始有較薄的纖維間隔形成，第6 6周肝臟間隔進一步增厚，有假周肝臟間隔進一步增厚，有假小葉形成：第小葉形成：第8 8周形成厚的纖維間隔，分割形成假小葉。大鼠周形成厚的纖維間隔，分割形成假小葉。大鼠成活率成活率60%-80%60%-80%。 該模型是目前國內(nèi)外常采用的動物模型，可靠且復(fù)制時該模型是目前國內(nèi)外常采用的動物模型，可靠且復(fù)制時間短，肝纖維化進展穩(wěn)定，適合于肝硬化過程的動態(tài)研

35、究。間短，肝纖維化進展穩(wěn)定，適合于肝硬化過程的動態(tài)研究。人類疾病動模型評估及分類34 支氣管哮喘動物模型支氣管哮喘動物模型 大鼠、豚鼠和狗最常用。根據(jù)制模方式可分為：最常用。根據(jù)制模方式可分為：主動免疫致敏動物模型：主動免疫致敏動物模型： 利用哺乳類大動物利用哺乳類大動物( (如狗、羊和猴如狗、羊和猴) )在自然狀態(tài)下感染線圓蟲在自然狀態(tài)下感染線圓蟲類寄生蟲類寄生蟲( (主要是蛔蟲主要是蛔蟲) )，血清中長期存在高滴度的抗某一寄生，血清中長期存在高滴度的抗某一寄生蟲抗原的特應(yīng)性抗體蟲抗原的特應(yīng)性抗體(IgE)(IgE)，再次受到這一寄生蟲抗原的攻擊，再次受到這一寄生蟲抗原的攻擊，即迅速地產(chǎn)生抗

36、原抗體反應(yīng)，并使呼吸道產(chǎn)生支氣管嗜喘反應(yīng)即迅速地產(chǎn)生抗原抗體反應(yīng)，并使呼吸道產(chǎn)生支氣管嗜喘反應(yīng)；被動免疫致敏動物模型：被動免疫致敏動物模型： 在實驗前，用特殊的抗原及免疫輔佐劑注入動物體內(nèi)，使動在實驗前，用特殊的抗原及免疫輔佐劑注入動物體內(nèi)，使動物致敏后，制備抗血清輸入動物使其被動致敏，再用同一抗原物致敏后，制備抗血清輸入動物使其被動致敏，再用同一抗原進行攻擊建立哮喘模型。進行攻擊建立哮喘模型。 人類疾病動模型評估及分類35卵白蛋白激發(fā)哮喘模型卵白蛋白激發(fā)哮喘模型造模機制：造模機制： 過敏原卵白蛋白注入豚鼠體內(nèi)，其可溶性抗原刺激機體產(chǎn)過敏原卵白蛋白注入豚鼠體內(nèi)，其可溶性抗原刺激機體產(chǎn)生生IgE

37、IgE抗體，使機體處于致敏狀態(tài)。當(dāng)豚鼠再次接觸此抗原時，抗體，使機體處于致敏狀態(tài)。當(dāng)豚鼠再次接觸此抗原時，IgEIgE介導(dǎo)發(fā)生抗原抗體反應(yīng)，使細胞脫顆粒，釋放出活性化學(xué)物介導(dǎo)發(fā)生抗原抗體反應(yīng)，使細胞脫顆粒，釋放出活性化學(xué)物質(zhì)如組胺、嗜酸性粒細胞趨化因子等，作用于支氣管引起氣道高質(zhì)如組胺、嗜酸性粒細胞趨化因子等，作用于支氣管引起氣道高反應(yīng)致哮喘。反應(yīng)致哮喘。 人類疾病動模型評估及分類36造模方法：造模方法：豚鼠：豚鼠： 200200300g300g豚鼠，第豚鼠，第1 1天和天和8 8天，天，0.50.5卵白蛋白溶于生卵白蛋白溶于生理鹽水理鹽水10ml10ml加至超聲霧化吸入器，用簡易面罩霧化吸入

38、加至超聲霧化吸入器，用簡易面罩霧化吸入10min10min，第第16201620天將致敏動物置于密閉的容器內(nèi)，用天將致敏動物置于密閉的容器內(nèi)，用1 1卵白蛋白氣霧卵白蛋白氣霧激發(fā)，使動物暴露在卵白蛋白氣霧中激發(fā)，使動物暴露在卵白蛋白氣霧中101030min30min，至出現(xiàn)哮喘樣，至出現(xiàn)哮喘樣發(fā)作。發(fā)作。 評價：評價： 出現(xiàn)咳嗽、煩躁、口唇和四肢紫紺，呼吸費力。生理記錄出現(xiàn)咳嗽、煩躁、口唇和四肢紫紺，呼吸費力。生理記錄儀描記呼吸曲線，出現(xiàn)呼吸頻率加快和呼吸加深。病理檢查發(fā)儀描記呼吸曲線，出現(xiàn)呼吸頻率加快和呼吸加深。病理檢查發(fā)現(xiàn)毛細血管擴張，嗜酸性粒細胞浸潤，腺體分泌活動亢進?，F(xiàn)毛細血管擴張，嗜

39、酸性粒細胞浸潤，腺體分泌活動亢進。 該模型是國內(nèi)外常用的方法，方法簡單，復(fù)制性強，且豚該模型是國內(nèi)外常用的方法，方法簡單，復(fù)制性強，且豚鼠是最好的顯示氣道高反應(yīng)型的特征動物，其哮喘發(fā)作與人表鼠是最好的顯示氣道高反應(yīng)型的特征動物，其哮喘發(fā)作與人表現(xiàn)相似。主要用于哮喘發(fā)病機制的研究和治療觀察。現(xiàn)相似。主要用于哮喘發(fā)病機制的研究和治療觀察。人類疾病動模型評估及分類37大鼠：大鼠： 4 46 6周齡周齡120120180g180g雄性雄性SDSD大鼠，腹腔注射卵白蛋大鼠，腹腔注射卵白蛋白白100mg100mg抗原液抗原液1ml1ml，滅活百日咳桿菌疫苗，滅活百日咳桿菌疫苗5 510109 9個和氫氧化

40、鋁個和氫氧化鋁干粉干粉100mg100mg致敏。致敏。2 2周后用超聲霧化器向箱內(nèi)噴霧周后用超聲霧化器向箱內(nèi)噴霧1 1卵白蛋白，卵白蛋白，吸入吸入20min20min激發(fā)。激發(fā)。 評價：評價： 表現(xiàn)呼吸氣促，嚴重者呼吸減慢或節(jié)律不齊、輕度紫紺、表現(xiàn)呼吸氣促，嚴重者呼吸減慢或節(jié)律不齊、輕度紫紺、四肢癱軟、行動遲滯或俯伏不動、反應(yīng)遲鈍，連續(xù)激發(fā)后大鼠四肢癱軟、行動遲滯或俯伏不動、反應(yīng)遲鈍，連續(xù)激發(fā)后大鼠體重減輕、毛色失去光澤、反應(yīng)遲鈍。本模型適用于特異性抗體重減輕、毛色失去光澤、反應(yīng)遲鈍。本模型適用于特異性抗原抗體反應(yīng)的研究，有速發(fā)和遲發(fā)雙相反應(yīng)。原抗體反應(yīng)的研究，有速發(fā)和遲發(fā)雙相反應(yīng)。人類疾病動

41、模型評估及分類38鄰苯二甲酸酐鄰苯二甲酸酐(PA)(PA)致變應(yīng)性哮喘模型致變應(yīng)性哮喘模型機制：機制： 苯酐是小分子化合物，屬半抗原。由于半抗原不能刺激機體苯酐是小分子化合物，屬半抗原。由于半抗原不能刺激機體產(chǎn)生免疫反應(yīng)，故需與蛋白結(jié)合成全抗原，形成新的抗原決定簇產(chǎn)生免疫反應(yīng)，故需與蛋白結(jié)合成全抗原，形成新的抗原決定簇而發(fā)揮致敏作用。據(jù)此實驗制備了兩種不同載體的苯酐全抗原即而發(fā)揮致敏作用。據(jù)此實驗制備了兩種不同載體的苯酐全抗原即PA-HASPA-HAS和和PA-BSAPA-BSA。用致敏的抗血清給正常動物注射使其致敏，并。用致敏的抗血清給正常動物注射使其致敏，并在相應(yīng)抗原吸入攻擊下同樣可誘發(fā)出

42、哮喘。在相應(yīng)抗原吸入攻擊下同樣可誘發(fā)出哮喘。人類疾病動模型評估及分類39方法：方法： 2-32-3月齡月齡250300g250300g豚鼠。用豚鼠。用30mg30mg苯酐以苯酐以lmllml丙酮溶解后，加丙酮溶解后，加入入4242HAS 9%HAS 9%碳酸氫鈉溶液中，并攪拌碳酸氫鈉溶液中，并攪拌1h1h形成形成PAHSAPAHSA。同法。同法制備制備PABSAPABSA。將制備的抗原與弗氏完全佐劑等量研磨，使之成。將制備的抗原與弗氏完全佐劑等量研磨，使之成油包水狀。腹腔或后腿肌肉注射油包水狀。腹腔或后腿肌肉注射0.20.20.3ml/0.3ml/只只( (含蛋白含蛋白4-6mg)4-6mg)

43、。注射注射3 38 8周后抗原吸入激發(fā)。動物俯臥固定，激發(fā)前描記正常的周后抗原吸入激發(fā)。動物俯臥固定，激發(fā)前描記正常的呼吸曲線。用呼吸曲線。用1:1000 HSA1:1000 HSA鹽水溶液霧化后吸入鹽水溶液霧化后吸入1 13min3min，觀察記，觀察記錄錄0.5h0.5h。人類疾病動模型評估及分類40模型評價：模型評價： 豚鼠吸入抗原后豚鼠吸入抗原后1-10min1-10min內(nèi)，表現(xiàn)為呼吸頻率加快，由內(nèi)，表現(xiàn)為呼吸頻率加快，由100100120120次次/min/min增加到增加到140140160160次次/min/min；呼吸幅度增大，同時伴有咳；呼吸幅度增大，同時伴有咳嗽、噴啑，重

44、者呼吸極度費力、掙扎，有短暫窒息甚至死亡。發(fā)嗽、噴啑，重者呼吸極度費力、掙扎，有短暫窒息甚至死亡。發(fā)作一般持續(xù)作一般持續(xù)303050min50min。 PA是確切的職業(yè)性致喘物質(zhì)。苯酐哮喘屬變應(yīng)性哮喘，患者是確切的職業(yè)性致喘物質(zhì)。苯酐哮喘屬變應(yīng)性哮喘，患者體內(nèi)可測出特異性抗體，苯酐抗原吸入激發(fā)試驗常呈現(xiàn)陽性。本體內(nèi)可測出特異性抗體，苯酐抗原吸入激發(fā)試驗常呈現(xiàn)陽性。本模型的建立，為進一步研究該哮喘的病理變化提供了條件。模型的建立，為進一步研究該哮喘的病理變化提供了條件。人類疾病動模型評估及分類41血小板活性因子血小板活性因子(PAF)(PAF)誘發(fā)哮喘模型誘發(fā)哮喘模型 造模機制造模機制 PAFP

45、AF是目前已知的唯一能引起氣道高反應(yīng)性炎癥介質(zhì)。是目前已知的唯一能引起氣道高反應(yīng)性炎癥介質(zhì)。PAFPAF引發(fā)哮喘發(fā)作的原因可能是引發(fā)哮喘發(fā)作的原因可能是PAFPAF通過嗜酸性粒細胞的活化趨向、通過嗜酸性粒細胞的活化趨向、脫顆粒、釋放嗜酸性細胞蛋白脫顆粒、釋放嗜酸性細胞蛋白X(Epx)X(Epx)、嗜酸性細胞陽離子蛋白、嗜酸性細胞陽離子蛋白(ECP)(ECP)和堿性蛋白等細胞毒性物質(zhì)引起氣道上皮細胞損傷和脫落。和堿性蛋白等細胞毒性物質(zhì)引起氣道上皮細胞損傷和脫落。另外，激活的嗜酸性細胞本身又合成和釋放另外，激活的嗜酸性細胞本身又合成和釋放PAFPAF，使這一過程加，使這一過程加劇，最終引起氣道高反

46、應(yīng)性。劇，最終引起氣道高反應(yīng)性。 人類疾病動模型評估及分類42 方法方法: : 300500g300500g雄性豚鼠，激發(fā)實驗當(dāng)天，采用含雄性豚鼠，激發(fā)實驗當(dāng)天，采用含0.25%BSA0.25%BSA生理生理鹽水，將鹽水，將PAFPAF稀釋成稀釋成500ug/ml500ug/ml，按，按1500ug/kg1500ug/kg的劑量霧化吸入，即的劑量霧化吸入，即引起豚鼠哮喘發(fā)作。引起豚鼠哮喘發(fā)作。 評價評價: : PAFPAF激發(fā)豚鼠哮喘發(fā)作不需致敏過程，直接利用其特性而引激發(fā)豚鼠哮喘發(fā)作不需致敏過程，直接利用其特性而引發(fā)氣道的高反應(yīng)性，本模型主要用于研究哮喘病因?qū)W和發(fā)病機制發(fā)氣道的高反應(yīng)性，本模

47、型主要用于研究哮喘病因?qū)W和發(fā)病機制的研究。的研究。人類疾病動模型評估及分類43第五節(jié)第五節(jié) 內(nèi)分泌、營養(yǎng)疾病動物模型內(nèi)分泌、營養(yǎng)疾病動物模型糖尿病動物模型糖尿病動物模型缺鐵性貧血動物模型缺鐵性貧血動物模型維生素維生素D缺乏性佝僂病動物模型缺乏性佝僂病動物模型人類疾病動模型評估及分類44模型概述模型概述 糖尿病動物模型復(fù)制方法主要包括糖尿病動物模型復(fù)制方法主要包括5 5種：種：注射致高血糖因子，如生長激素、胰高糖素、糖皮質(zhì)激素以及注射致高血糖因子，如生長激素、胰高糖素、糖皮質(zhì)激素以及兒茶酚胺類激素等，復(fù)制出某些繼發(fā)性糖尿病模型。兒茶酚胺類激素等，復(fù)制出某些繼發(fā)性糖尿病模型。1.1. 注射化學(xué)物質(zhì)

48、引起胰島注射化學(xué)物質(zhì)引起胰島細胞的損傷，如鏈脲佐菌素細胞的損傷，如鏈脲佐菌素(STZ)(STZ)、四、四氧嘧啶、二苯硫代卡肥腙可造成胰島氧嘧啶、二苯硫代卡肥腙可造成胰島細胞不可逆損傷；環(huán)丙細胞不可逆損傷；環(huán)丙庚哌、天門冬素酶、庚哌、天門冬素酶、66氨基尼克酰胺、氨基尼克酰胺、22脫氧葡萄糖、甘露脫氧葡萄糖、甘露庚酮糖可引起庚酮糖可引起細胞可逆性損傷。細胞可逆性損傷。糖尿病動物模型糖尿病動物模型人類疾病動模型評估及分類45注射生物及生物制品引起注射生物及生物制品引起細胞破壞，如鼠腦炎、心肌炎病毒細胞破壞，如鼠腦炎、心肌炎病毒M M型變異可誘發(fā)若干品系的成年小鼠糖尿病，型變異可誘發(fā)若干品系的成年小

49、鼠糖尿病，IL1IL1在一定劑量在一定劑量和范圍內(nèi)對和范圍內(nèi)對細胞有選擇性細胞毒作用，導(dǎo)致細胞有選擇性細胞毒作用，導(dǎo)致IDDMIDDM。手術(shù)切除胰腺的大部分或全部，并給予高糖飲食刺激，引起繼手術(shù)切除胰腺的大部分或全部，并給予高糖飲食刺激，引起繼發(fā)性永久性糖尿病。發(fā)性永久性糖尿病。篩選、引種、繁殖遺傳性及自發(fā)性糖尿病，這類動物模型更接篩選、引種、繁殖遺傳性及自發(fā)性糖尿病，這類動物模型更接近人類糖尿病的自然起病及發(fā)展，尤其適于研究糖尿病的病因近人類糖尿病的自然起病及發(fā)展，尤其適于研究糖尿病的病因?qū)W。學(xué)。人類疾病動模型評估及分類46造模方法造模方法 病毒誘發(fā)法病毒誘發(fā)法 DBA/2DBA/2雌性小鼠

50、，皮下接種腦炎、心肌炎病毒雌性小鼠，皮下接種腦炎、心肌炎病毒M M型變異株型變異株4747天后出現(xiàn)明顯的高血糖，伴有血中及天后出現(xiàn)明顯的高血糖，伴有血中及胰腺中胰島素含量降低。胰腺中胰島素含量降低。 評價：評價： 其高血糖為特發(fā)性，伴明顯低胰島素血癥，在其高血糖為特發(fā)性，伴明顯低胰島素血癥，在某些小鼠中可自然緩解，但糖耐量異常及高血糖在某些小鼠中可自然緩解，但糖耐量異常及高血糖在恢復(fù)期中仍將存在，其生化方面與人類恢復(fù)期中仍將存在，其生化方面與人類MODPMODP相似。相似。人類疾病動模型評估及分類47四氧嘧啶法四氧嘧啶法 SDSD大鼠大鼠200g200g左右，左右，40mg/kg40mg/kg

51、四氧嘧啶靜脈注射四氧嘧啶靜脈注射1 1次，觀察血糖次，觀察血糖300mg/l300mg/l，持續(xù)，持續(xù)2 2周可以認為造模成功。周可以認為造模成功。鏈脲佐菌致糖尿病鏈脲佐菌致糖尿病WistarWistar大鼠大鼠 鏈脲佐菌素可造成動物胰島鏈脲佐菌素可造成動物胰島細胞大量壞死，細胞大量壞死，通過不同給藥方法，可復(fù)制出速發(fā)型類似通過不同給藥方法，可復(fù)制出速發(fā)型類似NIDDMNIDDM和遲和遲發(fā)型類似發(fā)型類似IDDMIDDM的動物模型。的動物模型。人類疾病動模型評估及分類48速發(fā)型：速發(fā)型： STZSTZ用用0.1mmol/L0.1mmol/L無菌枸櫞酸無菌枸櫞酸枸櫞酸鈉緩沖液新鮮配制成枸櫞酸鈉緩沖

52、液新鮮配制成2 2溶液，調(diào)節(jié)溶液，調(diào)節(jié)pHpH至至4.54.5，濾菌器過濾除菌。大鼠禁食，濾菌器過濾除菌。大鼠禁食10h10h按按505065mg/kg65mg/kg腹腔內(nèi)或尾靜脈一次性注射，腹腔內(nèi)或尾靜脈一次性注射，24h24h內(nèi)隨機血糖內(nèi)隨機血糖16.7mmol/L16.7mmol/L，穩(wěn)定，穩(wěn)定5d5d即可作為成功模型。即可作為成功模型。遲發(fā)型：遲發(fā)型： 鏈脲佐菌配制同前，福氏佐劑鏈脲佐菌配制同前，福氏佐劑(CFA)(CFA)按按4:14:1稱取液體石蠟和稱取液體石蠟和羊毛脂，研碎混勻，經(jīng)高壓消毒后低溫保存，使用前按羊毛脂，研碎混勻，經(jīng)高壓消毒后低溫保存，使用前按1.5mg/0.5ml1

53、.5mg/0.5ml加入無菌滅活卡介苗。第加入無菌滅活卡介苗。第1 1天腹腔注射天腹腔注射0.5mlCFA0.5mlCFA，次日按次日按25mg/kg25mg/kg腹腔內(nèi)注射腹腔內(nèi)注射STZSTZ溶液。每周溶液。每周1 1次，連續(xù)次，連續(xù)3 3周，第周，第2 2周部分大鼠就可成模型，第周部分大鼠就可成模型，第3 3周成模率周成模率87.587.5。人類疾病動模型評估及分類49評價：評價：速發(fā)型速發(fā)型 一次足量給予鏈脲佐菌素，造成一次足量給予鏈脲佐菌素，造成細胞大量損傷，胰細胞大量損傷，胰島素合成和分泌減少，引起糖代謝紊亂，導(dǎo)致糖尿病。速發(fā)型島素合成和分泌減少，引起糖代謝紊亂，導(dǎo)致糖尿病。速發(fā)型

54、模型較適于模型較適于NIDDMNIDDM的相關(guān)研究。通常單劑量達的相關(guān)研究。通常單劑量達50mg/kg50mg/kg體重不出體重不出現(xiàn)自然緩解現(xiàn)象，第現(xiàn)自然緩解現(xiàn)象，第6 62727天，胰島有一定程度再生，功能部分天，胰島有一定程度再生，功能部分恢復(fù)，但仍處于高血糖狀態(tài)。恢復(fù)，但仍處于高血糖狀態(tài)。1.1.遲發(fā)型遲發(fā)型 福氏完全佐劑可激發(fā)機體免疫功能，將小劑量福氏完全佐劑可激發(fā)機體免疫功能，將小劑量STZSTZ和和CFACFA聯(lián)合使用，可激活大鼠體內(nèi)淋巴細胞誘導(dǎo)胰島聯(lián)合使用，可激活大鼠體內(nèi)淋巴細胞誘導(dǎo)胰島細胞發(fā)生輕細胞發(fā)生輕度改變，被激活的度改變，被激活的HLCHLC可將輕度變性的細胞作靶細胞攻

55、擊，導(dǎo)致可將輕度變性的細胞作靶細胞攻擊，導(dǎo)致自身免疫，胰島自身免疫，胰島細胞損害加重，引起糖尿病。遲發(fā)型模型有細胞損害加重，引起糖尿病。遲發(fā)型模型有免疫學(xué)的改變，更接近人類免疫學(xué)的改變，更接近人類IDDMIDDM的發(fā)生發(fā)展變化，有報道可測的發(fā)生發(fā)展變化，有報道可測得大鼠體內(nèi)抗胰島細胞抗體。得大鼠體內(nèi)抗胰島細胞抗體。人類疾病動模型評估及分類50化學(xué)誘導(dǎo)是一種簡便，價廉的方法。其中化學(xué)誘導(dǎo)是一種簡便，價廉的方法。其中STZSTZ優(yōu)于四氧嘧啶，優(yōu)于四氧嘧啶，其造模穩(wěn)定，快速，無自然緩解，種屬選擇性不強其造模穩(wěn)定，快速，無自然緩解，種屬選擇性不強( (豚鼠只能豚鼠只能用鏈脲菌素造模用鏈脲菌素造模) )

56、，復(fù)制前不需禁食。糖尿病形成后無需特意，復(fù)制前不需禁食。糖尿病形成后無需特意安排動物飼養(yǎng)條件。安排動物飼養(yǎng)條件。 STZSTZ可作用于對四氧嘧啶致糖尿作用有抵可作用于對四氧嘧啶致糖尿作用有抵抗的豚鼠。但價格較四氧嘧啶貴?？沟碾嗍?。但價格較四氧嘧啶貴。四氧嘧啶和鏈脲菌素均為一種可以選擇性作用于胰島四氧嘧啶和鏈脲菌素均為一種可以選擇性作用于胰島細胞的細胞的化學(xué)物質(zhì)，其作用機制目前有不同認識，有人認為是破壞了細化學(xué)物質(zhì)，其作用機制目前有不同認識，有人認為是破壞了細胞本身，有人則認為僅是細胞脫顆?；蚴前ど掀咸烟鞘荏w的胞本身，有人則認為僅是細胞脫顆?；蚴前ど掀咸烟鞘荏w的變化。變化。人類疾病動模型評估

57、及分類51高糖飼喂誘發(fā)法高糖飼喂誘發(fā)法 選用選用SHR/NLHCPSHR/NLHCP大鼠大鼠5 5周齡，喂飼含周齡，喂飼含5454庶糖飲庶糖飲食。食。1 1個月時，觀察到個月時，觀察到OGTTOGTT異常，異常，6.56.5個月時胰島素個月時胰島素反應(yīng)異常，反應(yīng)異常，9 9個月時可見體重減輕，衰弱。個月時可見體重減輕，衰弱。 評價：評價： 一些動物品系有自發(fā)或在施加誘導(dǎo)的條件下發(fā)生一些動物品系有自發(fā)或在施加誘導(dǎo)的條件下發(fā)生糖尿病的傾向。糖尿病的傾向。SHR/NLH-CPSHR/NLH-CP大鼠模型某些代謝和組大鼠模型某些代謝和組織病理特征與人類非胰島素依賴性糖尿病相似，該織病理特征與人類非胰島

58、素依賴性糖尿病相似，該模型還可觀察糖尿病肝腎損害。模型還可觀察糖尿病肝腎損害。人類疾病動模型評估及分類52缺鐵性貧血動物模型缺鐵性貧血動物模型 缺鐵性貧血（缺鐵性貧血（IDAIDA）發(fā)生的主要原因是由于鐵的攝）發(fā)生的主要原因是由于鐵的攝入不足和入不足和/ /或鐵丟失過多，引起機體血紅蛋白合成障礙或鐵丟失過多，引起機體血紅蛋白合成障礙導(dǎo)致。導(dǎo)致。IDAIDA模型有大鼠、小鼠、兔、雞、貓、狗、猴等，模型有大鼠、小鼠、兔、雞、貓、狗、猴等，其中以大鼠最為常用。其中以大鼠最為常用。人類疾病動模型評估及分類53 方法：方法：給予低鐵飲食。給予低鐵飲食。飼料含鐵量飼料含鐵量50mg/kg50mg/kg能滿

59、足大鼠的基本需能滿足大鼠的基本需要，低鐵飼料的鐵含量要，低鐵飼料的鐵含量10mg/kg10mg/kg，標(biāo)準飼料鐵含量為，標(biāo)準飼料鐵含量為220-220-270mg/kg270mg/kg。飼料配方以酪蛋白或脫脂奶粉作為蛋白來源，玉米。飼料配方以酪蛋白或脫脂奶粉作為蛋白來源，玉米淀粉或蔗糖作為碳水化合物來源，加入植物油，混合維生素和淀粉或蔗糖作為碳水化合物來源，加入植物油，混合維生素和混合無機鹽配制。近來通過絡(luò)合劑混合無機鹽配制。近來通過絡(luò)合劑1%EDTA-2Na1%EDTA-2Na除去國產(chǎn)飼料中除去國產(chǎn)飼料中的鐵，取得滿意的實驗結(jié)果。的鐵，取得滿意的實驗結(jié)果。 給動物逐次少量放血，造成鐵的慢性丟

60、失。給動物逐次少量放血，造成鐵的慢性丟失。通常采用通常采用剪尾的方法，一方面放血不但引起鐵的丟失，而且還可以引起剪尾的方法，一方面放血不但引起鐵的丟失，而且還可以引起其它營養(yǎng)素的丟失；另一方面剪尾易引起動物感染而死亡。其它營養(yǎng)素的丟失；另一方面剪尾易引起動物感染而死亡。低鐵飲食輔以定期少量放血。低鐵飲食輔以定期少量放血。人類疾病動模型評估及分類54 評價：評價：IDAIDA大鼠早期大鼠早期(Hb100g/L)(Hb100g/L)表現(xiàn)為毛發(fā)生長差、脫毛、眼球腫表現(xiàn)為毛發(fā)生長差、脫毛、眼球腫脹突出、蒼白、興奮為主，晚期脹突出、蒼白、興奮為主，晚期(Hb60g/L)(Hb60g/L)表現(xiàn)為倦怠、活表