酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測血清中丙型肝炎病毒抗體灰區(qū)的復(fù)檢結(jié)果分析

1、    酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測血清中丙型肝炎病毒抗體灰區(qū)的復(fù)檢結(jié)果分析    湯興芳摘  要：目的  評估酶聯(lián)免疫吸附試驗（elisa）檢測血清中丙型肝炎病毒抗體（抗-hcv抗體）灰區(qū)結(jié)果。方法  選擇2017年1月2020年1月期間于重慶市長壽區(qū)中醫(yī)院采用elisa檢測血清抗-hcv結(jié)果呈灰區(qū)的135例患者所呈標(biāo)本為研究樣本，對處于灰區(qū)的樣本選用化學(xué)發(fā)光微粒子免疫分析法（cmia法）檢測，并進(jìn)行核酸檢測（nat）確認(rèn)。統(tǒng)計分析elisa檢測結(jié)果呈灰區(qū)患者的cmia及nat復(fù)檢陽性率。結(jié)果  抗-hcv單、雙試劑（即

2、同種試劑雙孔復(fù)試）灰區(qū)的結(jié)果經(jīng)cmia、nat復(fù)檢后均能檢出陽性結(jié)果，且抗-hcv單試劑灰區(qū)復(fù)檢結(jié)果陽性標(biāo)本檢出率（即灰區(qū)樣本復(fù)檢結(jié)果呈陽性的標(biāo)本例數(shù)/灰區(qū)樣本總例數(shù)）高于雙試劑灰區(qū)，nat法陽性檢出率更高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（p關(guān)鍵詞：酶聯(lián)免疫吸附試驗;丙型肝炎病毒抗體;灰區(qū)中圖分類號：r511    文獻(xiàn)標(biāo)識碼：a    文章編號：1009-8011（2021）-13-0182-02酶聯(lián)免疫吸附試驗（elisa）是臨床常用的丙型病毒性肝炎檢測方法，但有研究指出，elisa過程中存在多種影響因素，會影響檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，尤其是臨界值附近結(jié)果，有時甚至?xí)?/p>

3、同一實驗室不同批次結(jié)果或是不同實驗室試驗結(jié)果不一致的現(xiàn)象1-2。對于部分丙肝“窗口期”感染患者，采用elisa法檢測血清中丙型肝炎病毒抗體（抗-hcv）易出現(xiàn)漏檢、誤診等情況3。在這種情況下，使用elisa獲取的結(jié)果存在明顯風(fēng)險，有可能影響到疾病的診斷及治療方案的合理選擇，甚至延誤病情，造成不良后果。本次研究通過對檢測結(jié)果進(jìn)行復(fù)檢，評估分析elisa檢測血清中丙型肝炎病毒抗體（抗-hcv抗體）灰區(qū)結(jié)果。詳細(xì)報告如下。1  資料與方法1.1  一般資料選取重慶市長壽區(qū)中醫(yī)院2017年1月2020年1月期間采用elisa檢測血清抗-hcv抗體結(jié)果呈灰區(qū)的135例患者標(biāo)本作為研究

4、對象。其中男性67例，女性68例;年齡3462歲，平均年齡（49.20±8.20）歲;病程311年，平均病程（6.79±2.40）年。研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會審核批準(zhǔn)，患者均簽署知情同意書。1.2  納排標(biāo)準(zhǔn)納入標(biāo)準(zhǔn)：臨床資料齊全;無其他嚴(yán)重臟器功能損傷情況。排除標(biāo)準(zhǔn)：其他肝臟病變疾患者;對研究知情不同意;依從性低。1.3  方法儀器設(shè)備：丙型肝炎病毒抗體診斷試劑盒（化學(xué)發(fā)光法）（生產(chǎn)企業(yè)：日本希森美康）、丙型肝炎病毒核酸定量檢測試劑盒（生產(chǎn)企業(yè)：湖南圣湘生物科技有限公司）、丙型肝炎抗體室間質(zhì)評血清（生產(chǎn)企業(yè)：重慶臨檢中心）、cfx96熒光定量pcr儀（生產(chǎn)

5、企業(yè)：伯樂公司）、hiscl-5000全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀（生產(chǎn)企業(yè)：日本希森美康）。在準(zhǔn)備好儀器與試劑后，分別獲取患者的血清，進(jìn)行化學(xué)發(fā)光微粒子免疫分析法（cmia法）檢測以及核酸檢測（nat）。檢測過程嚴(yán)格遵循檢測試劑盒的說明書和臨床檢驗操作sop文件進(jìn)行相關(guān)操作。1.4  觀察指標(biāo)elisa檢測結(jié)果呈灰區(qū)患者的cmia及nat復(fù)檢陽性率。結(jié)果判定：抗-hcv elisa法檢測：選擇初篩樣本0.81.0者為陽性。hcv-rna熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（fq-pcr）檢測：陽性結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)為>25 iu/ml4。復(fù)檢陽性率=復(fù)檢陽性標(biāo)本例數(shù)/灰區(qū)樣本例數(shù)×100%。

6、1.5  統(tǒng)計學(xué)處理采用spss 21.0對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析。計量資料采用（x±s）表示，行t檢驗;計數(shù)資料采用n（%）表示，行2檢驗。p<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。2  結(jié)果cmia復(fù)檢陽性20例，抗-hcv單試劑灰區(qū)cmia復(fù)檢陽性率高于雙試劑灰區(qū)，差異存在統(tǒng)計學(xué)意義（2=5.484，p<0.05）。見表1。3  討論丙型病毒性肝炎因感染丙型肝炎病毒（hcv）導(dǎo)致，以慢性肝臟損害為主，屬于乙類傳染病。丙型病毒性肝炎主要傳播途徑是血液傳播，輸血或血液透析過程中血液制品的污染是醫(yī)院感染的主要原因。人群普遍易感，且被感染后產(chǎn)生的抗-hcv并非

7、保護(hù)性抗體，痊愈后仍可再患。hcv是一種于1989年經(jīng)分子克隆技術(shù)發(fā)現(xiàn)的具有較強(qiáng)傳染性的病毒，主要通過性行為、血液、母嬰途徑傳播。所致的丙型肝炎呈全球性分布，目前，全球范圍內(nèi)有1.8億以上hcv攜帶者。該疾病進(jìn)展緩慢，對人體肝臟的破壞極為隱匿，很多丙肝病毒感染患者的肝功能檢查結(jié)果往往顯示正常，容易造成誤診與漏診，但是人體一旦感染丙肝病毒，容易轉(zhuǎn)化成慢性肝炎并發(fā)展為肝硬化甚至肝細(xì)胞癌，不僅威脅患者的身體健康，還會威脅患者的生命安全。目前，體外免疫檢測技術(shù)很多，且隨著抗體制備和標(biāo)記技術(shù)的提升，靈敏度和特異性都有了很大的提高，但elisa作為一種傳統(tǒng)經(jīng)典的檢測技術(shù)，是我國醫(yī)學(xué)實驗室用于檢測感染性疾病

8、抗體的常用方法，具有檢測快速便捷、成本較低、獲取結(jié)果速度快等優(yōu)點。目前，一些血站、急救中心對于血液制品的管理與樣本檢測多采用elisa法。elisa法檢測的基本原理為抗原、抗體的特異性反應(yīng)，該方法快速、敏感、簡便、易標(biāo)準(zhǔn)化、便捷，具有靈敏度和特異性高的優(yōu)勢。應(yīng)用實踐中，一些實驗室應(yīng)用工作臨界值即設(shè)立“灰區(qū)”，將推薦的判定值下調(diào)，以達(dá)到防止弱陽性標(biāo)本漏檢的目的5。本次研究選取近三年來重慶市長壽區(qū)中醫(yī)院經(jīng)elisa檢測的血清抗-hcv抗體結(jié)果呈灰區(qū)的135例患者血清標(biāo)本作為研究對象，并進(jìn)行化學(xué)發(fā)光法聯(lián)合hcv抗原復(fù)檢，并進(jìn)行核酸檢測（nat）確認(rèn)，對檢測后的結(jié)果進(jìn)行比較。結(jié)果顯示，抗-hcv單、雙

9、試劑灰區(qū)結(jié)果經(jīng)cmia、nat復(fù)檢后均能檢出陽性結(jié)果，抗-hcv單試劑灰區(qū)復(fù)檢結(jié)果陽性標(biāo)本檢出率（即灰區(qū)樣本復(fù)檢結(jié)果呈陽性的標(biāo)本例數(shù)/灰區(qū)樣本總例數(shù)）高于雙試劑灰區(qū)，并且nat陽性檢出率更高 （p<0.05）?？梢哉J(rèn)為，elisa法對抗-hcv檢測的結(jié)果存在一定范圍內(nèi)的偏差，需要方法上的改進(jìn)和更新。但有研究提示6，由于hcv-rna在hcv感染的急性期、慢性轉(zhuǎn)換期或感染恢復(fù)期時難以被檢出，單純依靠nat復(fù)檢elisa抗-hcv灰區(qū)仍然存在出現(xiàn)錯誤結(jié)果的風(fēng)險。筆者認(rèn)為，適當(dāng)調(diào)整灰區(qū)設(shè)置，或采用fq-pcr擴(kuò)增、抗原檢測等方法能夠進(jìn)一步矯正試驗結(jié)果。綜上所述，采用elisa法對抗-hcv進(jìn)行

10、檢測有一定的局限性，對處于灰區(qū)的標(biāo)本進(jìn)行復(fù)檢，能夠有效提高檢出率。一方面能夠針對丙肝患者給予相應(yīng)的早期診斷對于及時制定治療方案有積極意義，另一方面能夠減輕患者心理負(fù)擔(dān)，同時避免醫(yī)療糾紛的發(fā)生。參考文獻(xiàn)1吳漢鐘，曾媛媛.無償獻(xiàn)血者梅毒抗體elisa法陽性與tppa確證比對分析j.現(xiàn)代臨床醫(yī)學(xué)，2018，44（4）：302-303.2宋慶召.血液透析患者丙型肝炎病毒非輸血感染的危險因素及其預(yù)防j.醫(yī)學(xué)新知雜志，2019，29（3）：284-287.3王瑞，葛紅衛(wèi)，黃力勤，等.使用相同抗-hcvelisa試劑的6家血站實驗室灰區(qū)設(shè)定分析j.中國輸血雜志，2018，31（2）：105-109.4周軍杰.核酸檢測對酶聯(lián)免疫吸附試驗法檢測乙型肝炎表面抗原、丙型肝炎病毒抗體結(jié)果呈灰區(qū)及弱反應(yīng)性標(biāo)本復(fù)檢的必要性探討j.中國醫(yī)學(xué)工程，2017，25（7）：73-75.5伊學(xué)軍，翟建新.酶聯(lián)免疫吸附試驗與化學(xué)發(fā)光微粒子檢查丙肝結(jié)果對比分析j.中國社區(qū)醫(yī)師，2016，32（19）：111，114.6嚴(yán)謹(jǐn)，徐磊，曾文娟.2種方法檢測血清中抗-hcv灰區(qū)結(jié)果分析j.臨床血液學(xué)雜志（輸血與檢驗），2017，30（3）：464-467.中華養(yǎng)生保健2021年13期中華養(yǎng)生保健的其它文章圍手術(shù)期心理護(hù)理對