培養(yǎng)基模擬灌裝無菌生產(chǎn)工藝驗證方案

1、 培養(yǎng)基模擬灌裝無菌生產(chǎn)工藝驗證方案 培養(yǎng)基模擬灌裝無菌生產(chǎn)工藝驗證方案目錄1 概述2 驗證目的3 適用范圍4 驗證小組成員與職責(zé)5 文件資料及培訓(xùn)確認(rèn)6 編制依據(jù)7 驗證計劃8風(fēng)險評估分析9 驗證內(nèi)容10驗證結(jié)果的分析與評價11驗證周期驗證立項申請表立項部門申請日期 年 月 日立項題目驗證原因驗證要求及目的： 車間主任： 日期： 年 月 日生產(chǎn)技術(shù)部意見： 部門負(fù)責(zé)人： 日期： 年 月 日工程部意見： 部門負(fù)責(zé)人： 日期： 年 月 日品管部意見： 部門負(fù)責(zé)人： 日期： 年 月 日驗證小組意見： 驗證小組組長： 日期： 年 月 日備注驗證方案會簽審批表驗證項目驗證方案編號起 草驗證方案起草部門

2、簽 名日 期會 簽部 門簽 名日 期小容量注射劑車間生產(chǎn)技術(shù)部工程部品管部批 準(zhǔn)部 門 簽 名日 期驗證小組組長備 注1、概述 1.1我公司小容量注射劑車間2號生產(chǎn)線，按GMP2010版及其附錄要求進(jìn)行設(shè)計，是專用于小容量注射劑非最終滅菌產(chǎn)品生產(chǎn)使用。維生素C注射液（5ml:0.5g）因無法進(jìn)行F08分鐘濕熱滅菌，以達(dá)到SAL10-6，但處方可以通過微生物滯留過濾器過濾，故采用除菌過濾和無菌工藝相結(jié)合的滅菌方法。1.2培養(yǎng)基灌裝驗證是用和實際生產(chǎn)工藝相同的條件與操作方法（包括生產(chǎn)環(huán)境），向安瓿內(nèi)灌裝經(jīng)除菌過濾的培養(yǎng)基，然后將此模擬制品在適當(dāng)條件下培養(yǎng)，以確認(rèn)工藝過程的可靠性。對設(shè)備、環(huán)境以及人

3、員操作的一種系統(tǒng)驗證，是判斷無菌保證水平的關(guān)鍵手段。在正式生產(chǎn)前必須按維生素C注射液（5ml:0.5g）生產(chǎn)工藝進(jìn)行培養(yǎng)基模擬灌裝驗證。1.3驗證次數(shù)按2010版GMP附錄1要求,因該生產(chǎn)線為新建設(shè)施，本次為規(guī)格為5ml培養(yǎng)基模擬灌裝試驗首次驗證，故需進(jìn)行連續(xù)三個批次的驗證活動。2、驗證目的2.1證明無菌生產(chǎn)區(qū)的設(shè)計及其設(shè)備布局，環(huán)境及衛(wèi)生狀態(tài)、人員無菌操作等各方面因素均能保證產(chǎn)品的無菌性。2.2確定生產(chǎn)最差條件下仍能保證產(chǎn)品的無菌性。2.3通過培養(yǎng)基模擬灌裝試驗確保生產(chǎn)符合現(xiàn)行GMP法規(guī)要求。3、驗證范圍本驗證方案適用于小容量注射劑車間無菌灌裝生產(chǎn)線（二線）正式投入使用前培養(yǎng)基模擬灌裝試驗的

4、驗證。4、驗證小組成員與職責(zé)4.1驗證小組成員部門與職務(wù)驗證分工簽名日期生產(chǎn)副總驗證小組組長小容量注射劑車間主任驗證小組副組長品管部長組員工程部長組員QC組員QA組員機修工組員配劑操作工組員洗瓶操作工組員灌封操作工組員統(tǒng)計員組員4.2職責(zé)驗證小組：準(zhǔn)備、檢查和實施確認(rèn)方案；設(shè)計、組織和協(xié)調(diào)驗證試驗；收集整理驗證數(shù)據(jù)，偏差處理，編寫確認(rèn)報告；再驗證周期的確定。驗證小組組長：組織編寫驗證方案,領(lǐng)導(dǎo)協(xié)調(diào)驗證項目的實施,協(xié)調(diào)驗證小組的工作,對驗證過程的技術(shù)負(fù)責(zé),審核批準(zhǔn)驗證方案、偏差及驗證報告。驗證小組副組長：負(fù)責(zé)起草驗證方案,編寫驗證報告，負(fù)責(zé)協(xié)調(diào)確認(rèn)方案的實施，相關(guān)操作規(guī)程的修訂，協(xié)助收集整理驗證

5、數(shù)據(jù)，對偏差提出糾正措施建議。品管部長：審核驗證過程的檢測數(shù)據(jù)，驗證數(shù)據(jù)的可靠性，負(fù)責(zé)驗證過程檢驗方法的確定及安排相關(guān)檢驗工作，負(fù)責(zé)簽發(fā)檢驗報告。QA：負(fù)責(zé)驗證過程中取樣、監(jiān)控。QC：負(fù)責(zé)微生物項目的檢測。機修工：負(fù)責(zé)驗證過程中設(shè)備的維修，參與驗證模擬維修活動，確保設(shè)備運行正常。配劑操作工：負(fù)責(zé)配料操作和除菌過濾操作。洗瓶操作工：負(fù)責(zé)洗瓶和安瓿滅菌操作。灌封操作工：負(fù)責(zé)灌封操作。統(tǒng)計員：負(fù)責(zé)驗證所需物料的領(lǐng)取工作，負(fù)責(zé)驗證資料、數(shù)據(jù)收集、記錄、整理。5、文件資料及培訓(xùn)確認(rèn)5.1確認(rèn)相關(guān)文件資料序號文件名稱編號結(jié)果01人員進(jìn)出C級潔凈區(qū)凈化更衣操作規(guī)程SOP-SC-WS3-00100有 無02人

6、員進(jìn)出A/B級潔凈區(qū)凈化更衣操作規(guī)程SOP-SC-WS3-00200有 無03物料、容器具進(jìn)出C級潔凈區(qū)凈化操作規(guī)程SOP-SC-WS3-00300有 無04物料、容器具進(jìn)出A/B級潔凈區(qū)凈化操作規(guī)程SOP-SC-WS3-00400有 無05稱量崗位操作規(guī)程SOP-SC-1-01000有 無06針劑配劑崗位操作規(guī)程SOP-SC-3-00100有 無07安瓿理瓶崗位操作規(guī)程SOP-SC-3-00200有 無08安瓿清洗、干燥滅菌崗位操作規(guī)程SOP-SC-3-00300有 無09B級區(qū)灌封崗位操作規(guī)程SOP-SC-3-00400有 無10燈檢崗位操作規(guī)程SOP-SC-3-00800有 無11脈動真

7、空滅菌柜的操作規(guī)程SOP-SB-3-00300有 無12配液罐操作規(guī)程SOP-SB-3-00500有 無13立式超聲波洗瓶機操作規(guī)程SOP-SB-3-00700有 無14隧道式滅菌烘箱操作規(guī)程SOP-SB-3-00900有 無15立式灌裝封口機操作規(guī)程SOP-SB-3-01100有 無16A/B級、C級潔凈區(qū)清潔消毒操作規(guī)程SOP-SC-WS3-00500有 無17A/B級、C級潔凈區(qū)容器具清潔滅菌操作規(guī)程SOP-SC-WS3-00600有 無18潔凈區(qū)衛(wèi)生潔具清潔消毒操作規(guī)程SOP-SC-WS1-00300有 無19A/B級、C級潔凈工作服清潔消毒（滅菌）操作規(guī)程SOP-SC-WS3-007

8、00有 無20過濾器清潔滅菌操作規(guī)程SOP-SC-WS3-00800有 無21立式超聲波洗瓶機清潔操作規(guī)程SOP-SB-WS3-00100有 無22隧道式滅菌烘箱清潔操作規(guī)程SOP-SB-WS3-00200有 無23立式灌裝封口機清潔操作規(guī)程SOP-SB-WS3-00300有 無24脈動真空滅菌柜清潔操作規(guī)程SOP-SB-WS3-00400有 無25配液系統(tǒng)清潔滅菌操作規(guī)程SOP-SB-WS3-00500有 無檢查人日期5.2培訓(xùn)確認(rèn)在進(jìn)行培養(yǎng)基無菌灌裝模擬試驗驗證之前，方案起草者對所有執(zhí)行本方案人員進(jìn)行了培訓(xùn)，使每個參與方案的執(zhí)行人員都理解方案內(nèi)容，具備確認(rèn)的前提條件。培訓(xùn)結(jié)果統(tǒng)計表培訓(xùn)日期

9、授課人組織部門培訓(xùn)地點培訓(xùn)內(nèi)容培訓(xùn)人員崗 位培訓(xùn)情況備 注組 長生產(chǎn)副總合格 不合格副組長小容量注射劑車間主任合格 不合格組 員品管部長合格 不合格工程部長合格 不合格QA合格 不合格QC合格 不合格統(tǒng)計員合格 不合格機修工合格 不合格崗位操作工合格 不合格6、編制依據(jù)6.1藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（2010年修訂）、附錄：無菌藥品6.2中國藥典2010年版二部6.3藥品GMP實施指南（無菌藥品）7、驗證時間計劃： 年 月 日至 年 月 日8、風(fēng)險評估分析通過風(fēng)險評估，確認(rèn)本次驗證活動需要驗證的項目風(fēng)險描述可能性嚴(yán)重性可測性風(fēng)險指數(shù)風(fēng)險控制措施驗證項目環(huán)境達(dá)不到相關(guān)生產(chǎn)要求中高高高建立廠房清潔消毒

10、規(guī)程定期環(huán)境監(jiān)測培養(yǎng)基灌裝全程對環(huán)境進(jìn)行動態(tài)監(jiān)測人員造成污染中高高高人員培訓(xùn)并更衣考核上崗，定期對進(jìn)入無菌區(qū)人員取樣監(jiān)控所有相關(guān)人員，模擬生產(chǎn)實際活動后取樣，對最多允許人數(shù)進(jìn)行挑戰(zhàn)滅菌后的衣服，器具等發(fā)生二次污染低高高高驗證滅菌后儲存方式和有效期，操作人員培訓(xùn)考核上崗，生產(chǎn)過程中進(jìn)行嚴(yán)格監(jiān)控，生產(chǎn)結(jié)束后與產(chǎn)品接觸表面取樣相關(guān)驗證操作與正常生產(chǎn)一致，生產(chǎn)結(jié)束后對關(guān)鍵表面取樣，儲存方式和有效期在相關(guān)清潔滅菌驗證中完成滅菌效果未達(dá)到低高中中所有滅菌裝載和參數(shù)須經(jīng)過驗證，按經(jīng)驗證的操作方式滅菌在設(shè)備驗證中完成配液/灌封超過規(guī)定時限低中低中工藝規(guī)程中明確規(guī)定時限按照工藝規(guī)定工序最大時間挑戰(zhàn)進(jìn)行驗證灌封設(shè)

11、備故障并維修中中低中人員培訓(xùn)，使用前通過試機，并定期設(shè)備維護保養(yǎng)模擬維修操作進(jìn)行挑戰(zhàn)驗證過濾系統(tǒng)有效性和污染低高高高過濾后對除菌過濾器進(jìn)行起泡點測試，使用前進(jìn)行清潔和滅菌處理在無菌過濾系統(tǒng)工藝驗證中完成，并取過濾后的藥液進(jìn)行無菌檢查取樣工具，記錄等傳入污染中低高高所有相關(guān)工具，記錄等進(jìn)入無菌區(qū)隨廠房消毒，臨時需要的用75%乙醇消毒在消毒效果驗證中完成清潔工具和清潔消毒劑使用帶來的污染低高高高清潔工具需滅菌，清潔劑消毒劑需除菌過濾后進(jìn)入無菌區(qū)在工器具清潔消毒效果驗證方案中完成灌封所用安瓿造成污染低高高高工藝規(guī)程規(guī)定安瓿的滅菌參數(shù)和暫存時間在洗烘線驗證中完成滅菌效果和單向流保護，動態(tài)監(jiān)測灌封前區(qū)域

12、，對滅菌后的安瓿進(jìn)行取樣生產(chǎn)過程中異常操作造成的風(fēng)險中低中中嚴(yán)格異常操作的要求，對于可能污染的藥品報廢處理模擬中控，倒瓶，倒液，破瓶等情況進(jìn)行挑戰(zhàn)驗證產(chǎn)品暴露時間過長帶來的風(fēng)險中低高低嚴(yán)格控制允許的灌封速度挑戰(zhàn)工藝規(guī)程中允許的最慢速度進(jìn)行灌封9、驗證內(nèi)容9.1廠房設(shè)施、公用系統(tǒng)、關(guān)鍵設(shè)備的確認(rèn)已經(jīng)完成，并且合格。廠房實施、公用系統(tǒng)、關(guān)鍵設(shè)備確認(rèn)一覽表序號驗證項目確認(rèn)結(jié)果1純化水系統(tǒng)確認(rèn)合格 不合格2注射用水系統(tǒng)確認(rèn)合格 不合格3廠房與設(shè)施（HVAC）系統(tǒng)確認(rèn)合格 不合格4壓縮空氣系統(tǒng)確認(rèn)合格 不合格5氮氣系統(tǒng)確認(rèn)合格 不合格6小容量注射劑過濾系統(tǒng)確認(rèn)合格 不合格7配液系統(tǒng)確認(rèn)合格 不合格8AS

13、MR620-48隧道式滅菌烘箱確認(rèn)合格 不合格9QCL120型立式超聲波洗瓶機確認(rèn)合格 不合格10AGF12立式灌裝封口機確認(rèn)合格 不合格11脈動真空滅菌柜確認(rèn)合格 不合格12人員進(jìn)出潔凈區(qū)更衣程序確認(rèn)合格 不合格檢查人日 期9.2進(jìn)入A/B潔凈區(qū)人員資格確認(rèn)進(jìn)入A/B潔凈區(qū)人員已按更衣程序進(jìn)行確認(rèn)，并且嚴(yán)格按人員進(jìn)出A/B級潔凈區(qū)凈化更衣操作規(guī)程更衣，不會對潔凈區(qū)及藥品質(zhì)量帶來不良影響， 消除了生產(chǎn)產(chǎn)品受更衣過程中人員所帶來污染的風(fēng)險，符合GMP規(guī)范要求。進(jìn)入A/B潔凈區(qū)人員資格確認(rèn)姓名職位確認(rèn)情況QA合格 不合格機修工合格 不合格灌封操作工合格 不合格灌封操作工合格 不合格灌封操作工合格

14、不合格確認(rèn)人日期9.3驗證可接受標(biāo)準(zhǔn)9.3.1按照藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范2010版附錄無菌藥品第47條相關(guān)規(guī)定：培養(yǎng)基灌裝容器的數(shù)量應(yīng)當(dāng)足以保證評價的有效性。批量較小的產(chǎn)品，培養(yǎng)基灌裝的數(shù)量應(yīng)當(dāng)至少等于產(chǎn)品的批量。培養(yǎng)基模擬灌裝試驗的目標(biāo)是零污染，應(yīng)當(dāng)遵循以下要求：（一）灌裝數(shù)量少于5000支時，不得檢出污染品。（二）灌裝數(shù)量在5000至10000支時：有1支污染，需調(diào)查，可考慮重復(fù)試驗；有2支污染，需調(diào)查后，進(jìn)行再驗證。（三）灌裝數(shù)量超過10000支時：有1支污染，需調(diào)查；有2支污染，需調(diào)查后，進(jìn)行再驗證。（四）發(fā)生任何微生物污染時，均應(yīng)當(dāng)進(jìn)行調(diào)查。9.3.2綜合上述標(biāo)準(zhǔn)，本次驗證數(shù)量定在80

15、00-12000支之間，灌裝量為5ml，且其污染數(shù)不得超過1支。9.4驗證活動準(zhǔn)備工作9.4.1培養(yǎng)基準(zhǔn)備經(jīng)確認(rèn)合格的胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基(TSB)250g×20瓶，經(jīng)濕熱滅菌并用橡膠塞封口的無菌取樣試管9支，接觸碟60個，沉降菌培養(yǎng)皿15個，金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌和白色念珠菌等各類菌種，經(jīng)滅菌的具塞三角瓶6個。9.4.2工器具滅菌和準(zhǔn)備將模擬灌裝活動中需要用到的生產(chǎn)工器具、潔凈服和設(shè)備提前一天進(jìn)行滅菌，按相關(guān)SOP要求儲存，將需要使用的消毒劑提前一天進(jìn)行無菌過濾準(zhǔn)備，將無菌操作區(qū)提前一天按清潔SOP要求進(jìn)行清潔消毒。9.5配料：按針劑配劑崗位操作規(guī)程操作，取適量（約20kg

16、）注射用水，加入已清潔滅菌的稀配罐中，注射用水溫度冷卻至20-25，另取注射用水約3kg，加入已清潔滅菌的不銹鋼容器中，再緩緩加入胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基(TSB)1650g攪拌使其溶解加入稀配罐內(nèi)，再補加注射用水至55kg，攪拌20分鐘使溶成均勻溶液。QA人員在稀配室取樣口用2個滅菌的具塞三角瓶分別取樣50ml，蓋塞，包好在瓶身標(biāo)明取樣位置、取樣數(shù)量、取樣時間和樣品名稱后送化驗室檢測微生物。9.6除菌過濾用經(jīng)滅菌的0.22m聚醚砜除菌過濾器，過濾上述培養(yǎng)基溶液，在A級層流保護下，取經(jīng)除菌過濾的培養(yǎng)基200ml分裝于9支10ml的無菌試管和4個無菌三角瓶中，蓋塞，包好送化驗室進(jìn)行培養(yǎng)基的微生物生

17、長實驗和培養(yǎng)基無菌性檢查。9.7洗烘瓶灌封按安瓿清洗、干燥滅菌崗位操作規(guī)程進(jìn)行洗瓶。將經(jīng)隧道烘箱滅菌合格的安瓿送入灌裝線，按灌封崗位操作規(guī)程、立式灌裝封口機操作規(guī)程開啟灌裝機，在與實際生產(chǎn)環(huán)境相同的條件下，將過濾后的培養(yǎng)基溶液灌入安瓿內(nèi)，并封口，調(diào)節(jié)裝量為5ml支，用潔凈區(qū)無菌空氣代替惰性氣體。無菌灌裝最長時間9小時（根據(jù)生產(chǎn)工藝規(guī)程制定）。全過程設(shè)備慢速運行（灌裝速度80-100支/分鐘）增加灌裝時間，增大受污染的幾率。灌裝設(shè)置前中后三個階段，每個階段約灌裝3500支，其余時間設(shè)備正常運行(不走瓶)，灌封完的樣品通過傳送帶及時傳出無菌區(qū)，每灌封一盤及時記錄好灌封時間和盤號放在裝中間產(chǎn)品的盤內(nèi)

18、。9.7.1最差灌裝條件的模擬9.7.1.1設(shè)備模擬維修在灌封正常運行過程中，停灌30分鐘，進(jìn)行設(shè)備模擬維修，保持現(xiàn)有人員在操作間內(nèi)，維修結(jié)束按立式灌裝封口機清潔操作規(guī)程的清潔SOP清潔消毒，標(biāo)記設(shè)備再次運行灌裝的樣品（約800支），并在記錄上做好備注。9.7.1.2模擬現(xiàn)場人員最大控制數(shù)根據(jù)無菌灌封室正常生產(chǎn)最多人數(shù)控制，在灌裝正常運行過程中，模擬現(xiàn)場允許進(jìn)入5人，標(biāo)記該過程中生產(chǎn)出的樣品（約800支），并在記錄上做好備注。9.7.1.3模擬灌裝針/管調(diào)整、更換在灌裝正常運行過程中，進(jìn)行緊急停機，模擬調(diào)整、更換灌裝針/管2支或以上，標(biāo)記更換針/管后灌裝的樣品（約800支），并在記錄上做好備注

19、。9.7.1.4模擬空瓶倒瓶、破瓶在灌裝正常運行過程中，模擬倒瓶，破瓶情況，停灌處理，處理結(jié)束后繼續(xù)灌裝，標(biāo)記此后灌裝的樣品（約800支），并在記錄上做好備注。9.7.1.5模擬抽樣處理的過程在灌裝正常運行過程中，模擬三次抽樣測定可見異物和裝量的過程，標(biāo)記抽樣過程中進(jìn)行灌封的樣品（約800支），并在記錄中做好備注。9.7.2灌裝過程的動態(tài)監(jiān)測潔凈區(qū)對動態(tài)的空氣懸浮粒子的標(biāo)準(zhǔn)潔凈度級別動態(tài)懸浮粒子最大允許數(shù)/立方米0.5um5.0umA級352020B級3520002900潔凈區(qū)微生物監(jiān)測的動態(tài)標(biāo)準(zhǔn)如下潔凈級別浮游菌cfu/m3沉降菌（f90mm）cfu /4小時表面微生物接觸（f55mm）cf

20、u /碟5指手套cfu /手套A級<1111B級105559.7.2.1人員表面微生物取樣：對進(jìn)入灌裝區(qū)域的所有人員離開無菌區(qū)前進(jìn)行不少于5個位置的用接觸碟進(jìn)行表面微生物取樣，取樣部位：口罩、帽兜額頭處、袖口、胸口（拉鏈中心位置）、前臂、手套。9.7.2.2沉降菌的動態(tài)監(jiān)測：灌裝全過程中應(yīng)對灌裝A級區(qū)和灌封室進(jìn)行全程動態(tài)沉降菌監(jiān)測，每過4h更換取樣碟，取樣位置設(shè)為灌裝針頭處、出瓶口處、灌封室。9.7.2.3對A級灌裝區(qū)和灌封室懸浮粒子的全程動態(tài)監(jiān)測。9.7.2.4對A級灌裝區(qū)域的動態(tài)浮游菌取樣：灌封過程中選定灌裝針頭處每4小時進(jìn)行浮游菌取樣檢測一次，B級區(qū)每班檢測一次。9.7.2.5操作

21、完成后對關(guān)鍵設(shè)備表面取樣：相關(guān)操作程序結(jié)束后，對關(guān)鍵設(shè)備表面用滅菌的0.9%氯化鈉溶液潤濕棉球（棉簽），然后用棉球（棉簽）擦拭以下各點，取樣面積為5 cm×5cm /個，再棉球放入20ml滅菌的0.9%氯化鈉溶液中，充分振搖，再按薄膜過濾法進(jìn)行微生物檢查。以排除設(shè)備污染，取樣部位包括：A 級安瓿轉(zhuǎn)盤、 A 級操作臺面、B級傳送帶表面，B級灌裝間墻面。9.7.2.6對安瓿的取樣：在驗證過程的前、中、后期用滅菌的鑷子在隧道烘箱出瓶口處隨機抽取安瓿2支×2，分別裝入足量已滅菌硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基與改良馬丁培養(yǎng)基的三角瓶內(nèi)，用硅膠塞蓋住，立即送化驗室按無菌檢測操作規(guī)程進(jìn)行無菌檢測，

22、分別在23-28與30-35培養(yǎng)14天，要求無菌生長。9.8燈檢檢查將已灌封完畢的產(chǎn)品傳入燈檢區(qū)域，翻轉(zhuǎn)三次確保培養(yǎng)基與包材內(nèi)壁充分接觸，剔除破瓶，將其余產(chǎn)品按原灌裝盤號分別裝盤送培養(yǎng)區(qū)域，每盤內(nèi)放入原灌封物料標(biāo)簽和燈檢合格數(shù)量。9.9培養(yǎng)基無菌性檢查9.9.1方法：將除菌過濾后的培養(yǎng)基裝于4個無菌三角瓶中，其中2個三角瓶在2328培養(yǎng)14天；另2個三角瓶在3035培養(yǎng)14天。9.9.1.2可接受標(biāo)準(zhǔn)：4個三角瓶中的培養(yǎng)基在14天內(nèi)應(yīng)無任何微生物生長。9.9.2培養(yǎng)基的微生物生長試驗：9.9.2.1方法：質(zhì)檢中心QC人員將QA所取的9支樣品，在2支10ml試管中接種枯草芽孢桿菌，接種量100c

23、fu/管，另取一支作為空白對照；在2支10ml試管中接種白色念珠菌，接種量100cfu/管，另取一支作為空白對照。在2支10ml試管中接種金黃色葡萄球菌，接種量100cfu/管，另取一支作為空白對照。接種后蓋塞、封口并分別在3035（金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌）和2328（白色念珠菌）培養(yǎng) 72小時。9.9.2.2可接受標(biāo)準(zhǔn)：72小時內(nèi)接種各試管的TSB培養(yǎng)基中應(yīng)出現(xiàn)明顯渾濁現(xiàn)象，且空白對照管應(yīng)澄清則判定該培養(yǎng)基微生物性能生長試驗符合要求。9.10微生物培養(yǎng)9.10.1將燈檢完的產(chǎn)品先放置在23-28環(huán)境內(nèi)培養(yǎng)7天，其后轉(zhuǎn)入30-35環(huán)境中內(nèi)培養(yǎng)7天，期間每天觀察并統(tǒng)計污染數(shù)。9.10.2培養(yǎng)

24、基陽性對照試驗因培養(yǎng)基灌裝過程中，所有樣品無菌過濾后進(jìn)行了時限儲存操作，為確保這些操作不影響培養(yǎng)基的促生長性，故從燈檢完產(chǎn)品抽取30支進(jìn)行樣品陽性對照試驗，分為3組，每組10支，其中一組接種大腸埃希菌（30-35培養(yǎng)），一組接種金黃色葡萄球菌（30-35培養(yǎng)），一組接種白色念珠菌（23-28培養(yǎng)），接種濃度均小于100cfu/支，分別在相應(yīng)溫度下培養(yǎng)72小時。接種安瓿培養(yǎng)基中應(yīng)有明顯的接種微生物生長。9.11潔凈工作服及工器具轉(zhuǎn)運方法驗證已滅菌的工衣，在層流保護下裝入滅菌過的潔凈袋內(nèi)標(biāo)識后，送至三更；器具、維修工具通過脈動真空滅菌柜滅菌后轉(zhuǎn)入到B級區(qū)，取樣方法潔凈服內(nèi)袋、灌注針頭、活塞用接觸法

25、取樣，維修工具、緩沖瓶外壁用測試法取樣。9.12 生產(chǎn)結(jié)束配液系統(tǒng)按配液系統(tǒng)清潔滅菌操作規(guī)程清潔，取終洗水檢測PH、電導(dǎo)率、TOC，微生物限度。 可接受標(biāo)準(zhǔn)：PH：5.0-7.0電導(dǎo)率：1.0s/ cm（溫度25）TOC：0.50mg/L 微生物限度：5cfu/100ml9.13檢驗記錄潔凈區(qū)潔凈服檢測記錄（一）培養(yǎng)基灌封驗證批號規(guī)格生產(chǎn)日期 人員姓名取樣部位左手指右手指帽兜額頭處口 罩胸口（拉鏈中心位置）左前臂右前臂左袖口右袖口取樣人日 期檢驗人日 期復(fù)核人日 期潔凈區(qū)潔凈服檢測記錄（二）培養(yǎng)基灌封驗證批號規(guī)格生產(chǎn)日期 人員姓名取樣部位左手指右手指帽兜額頭處口 罩胸口（拉鏈中心位置）左前臂右

26、前臂左袖口右袖口取樣人日 期檢驗人日 期復(fù)核人日 期潔凈區(qū)潔凈服檢測記錄（三）培養(yǎng)基灌封驗證批號規(guī)格生產(chǎn)日期 人員姓名取樣部位左手指右手指帽兜額頭處口 罩胸口（拉鏈中心位置）左前臂右前臂左袖口右袖口取樣人日 期檢驗人日 期復(fù)核人日 期沉降菌動態(tài)監(jiān)測記錄（一）培養(yǎng)基批號規(guī) 格生產(chǎn)日期開始時間結(jié)束時間位置沉降菌標(biāo)準(zhǔn)(CFU/4小時)實測結(jié)果結(jié) 論出瓶口1灌封段1出瓶口1灌封段1灌封室15灌封室25灌封室15灌封室25取樣人日 期檢測人日 期沉降菌動態(tài)監(jiān)測記錄（二）培養(yǎng)基批號規(guī) 格生產(chǎn)日期開始時間結(jié)束時間位置沉降菌標(biāo)準(zhǔn)(CFU/4小時)實測結(jié)果結(jié) 論出瓶口1灌封段1出瓶口1灌封段1灌封室15灌封室2

27、5灌封室15灌封室25取樣人日 期檢測人日 期沉降菌動態(tài)監(jiān)測記錄（三）培養(yǎng)基批號規(guī) 格生產(chǎn)日期開始時間結(jié)束時間位置沉降菌標(biāo)準(zhǔn)(CFU/4小時)實測結(jié)果結(jié) 論出瓶口1灌封段1出瓶口1灌封段1灌封室15灌封室25灌封室15灌封室25取樣人日 期檢測人日 期浮游菌動態(tài)檢測記錄（一）培養(yǎng)基批號規(guī) 格生產(chǎn)日期級別開始時間結(jié)束時間 標(biāo)準(zhǔn)浮游菌（cfu/m3）實測結(jié)果結(jié) 論 A級11B級10取樣人日 期檢測人日 期浮游菌動態(tài)檢測記錄（二）培養(yǎng)基批號規(guī) 格生產(chǎn)日期級別開始時間結(jié)束時間 標(biāo)準(zhǔn)浮游菌（cfu/m3）實測結(jié)果結(jié) 論 A級11B級10取樣人日 期檢測人日 期浮游菌動態(tài)檢測記錄（三）培養(yǎng)基批號規(guī) 格生產(chǎn)

28、日期級別開始時間結(jié)束時間 標(biāo)準(zhǔn)浮游菌（cfu/m3）實測結(jié)果結(jié) 論 A級11B級10取樣人日 期檢測人日 期設(shè)備表面微生物檢測記錄（一）培養(yǎng)基批號規(guī) 格生產(chǎn)日期取樣部位合格標(biāo)準(zhǔn)（CFU/25cm2）實測結(jié)果結(jié) 論A 級安瓿轉(zhuǎn)盤1A 級操作臺面1B級傳送帶表面5B級灌裝間墻面5取樣人日 期檢測人日 期設(shè)備表面微生物檢測記錄（二）培養(yǎng)基批號規(guī) 格生產(chǎn)日期取樣部位合格標(biāo)準(zhǔn)（CFU/25cm2）實測結(jié)果結(jié) 論A 級安瓿轉(zhuǎn)盤1A 級操作臺面1B級傳送帶表面5B級灌裝間墻面5取樣人日 期檢測人日 期設(shè)備表面微生物檢測記錄（三）培養(yǎng)基批號規(guī) 格生產(chǎn)日期取樣部位合格標(biāo)準(zhǔn)（CFU/25cm2）實測結(jié)果結(jié) 論A

29、級安瓿轉(zhuǎn)盤1A 級操作臺面1B級傳送帶表面5B級灌裝間墻面5取樣人日 期檢測人日 期TSB培養(yǎng)基過濾前微生物限度檢查（一）培養(yǎng)基灌封驗證批號生產(chǎn)日期試驗方法將 ml的TSB分別在2328培養(yǎng)120h，在3035培養(yǎng)72h，觀察培養(yǎng)基是否渾濁。培養(yǎng)時間24h48h72h96h120h23-28培養(yǎng)30-35培養(yǎng)備注(打“-”表示不長菌，打“+”表示長菌)結(jié)論合格 不合格檢驗人檢驗日期復(fù)核人復(fù)核日期TSB培養(yǎng)基過濾前微生物限度檢查（二）培養(yǎng)基灌封驗證批號生產(chǎn)日期試驗方法將 ml的TSB分別在2328培養(yǎng)120h，在3035培養(yǎng)72h，觀察培養(yǎng)基是否渾濁。培養(yǎng)時間24h48h72h96h120h23

30、-28培養(yǎng)30-35培養(yǎng)備注(打“-”表示不長菌，打“+”表示長菌)結(jié)論合格 不合格檢驗人檢驗日期復(fù)核人復(fù)核日期TSB培養(yǎng)基過濾前微生物限度檢查（三）培養(yǎng)基灌封驗證批號生產(chǎn)日期試驗方法將 ml的TSB分別在2328培養(yǎng)120h，在3035培養(yǎng)72h，觀察培養(yǎng)基是否渾濁。培養(yǎng)時間24h48h72h96h120h23-28培養(yǎng)30-35培養(yǎng)備注(打“-”表示不長菌，打“+”表示長菌)結(jié)論合格 不合格檢驗人檢驗日期復(fù)核人復(fù)核日期TSB培養(yǎng)基無菌性檢查記錄（一）培養(yǎng)基灌封驗證批號生產(chǎn)日期培養(yǎng)天數(shù)123456789101112131423-28培養(yǎng)30-35培養(yǎng)備注(打“-”表示不長菌，打“+”表示長菌

31、)結(jié)論合格（培養(yǎng)14天后均無任何微生物生長） 不合格檢驗人檢驗日期復(fù)核人復(fù)核日期TSB培養(yǎng)基無菌性檢查記錄（二）培養(yǎng)基灌封驗證批號生產(chǎn)日期培養(yǎng)天數(shù)123456789101112131423-28培養(yǎng)30-35培養(yǎng)備注(打“-”表示不長菌，打“+”表示長菌)結(jié)論合格（培養(yǎng)14天后均無任何微生物生長） 不合格檢驗人檢驗日期復(fù)核人復(fù)核日期TSB培養(yǎng)基無菌性檢查記錄（三）培養(yǎng)基灌封驗證批號生產(chǎn)日期培養(yǎng)天數(shù)123456789101112131423-28培養(yǎng)30-35培養(yǎng)備注(打“-”表示不長菌，打“+”表示長菌)結(jié)論合格（培養(yǎng)14天后均無任何微生物生長） 不合格檢驗人檢驗日期復(fù)核人復(fù)核日期培養(yǎng)基微生物

32、生長試驗（一）培養(yǎng)基灌封驗證批號生產(chǎn)日期菌種名稱菌種信息培養(yǎng)條件試管1試管2空白結(jié)論大腸埃希菌白色念珠菌金黃色葡萄球菌備注“+”表示陽性，“-”表示陰性結(jié)論合格（所有接種管出現(xiàn)明顯的所接種的微生物的生長，空白管顯陰性）不合格檢驗人檢驗日期復(fù)核人復(fù)核日期培養(yǎng)基微生物生長試驗（二）培養(yǎng)基灌封驗證批號生產(chǎn)日期菌種名稱菌種信息培養(yǎng)條件試管1試管2空白結(jié)論大腸埃希菌白色念珠菌金黃色葡萄球菌備注“+”表示陽性，“-”表示陰性結(jié)論合格（所有接種管出現(xiàn)明顯的所接種的微生物的生長，空白管顯陰性）不合格檢驗人檢驗日期復(fù)核人復(fù)核日期培養(yǎng)基微生物生長試驗（三）培養(yǎng)基灌封驗證批號生產(chǎn)日期菌種名稱菌種信息培養(yǎng)條件試管1試

33、管2空白結(jié)論大腸埃希菌白色念珠菌金黃色葡萄球菌備注“+”表示陽性，“-”表示陰性結(jié)論合格（所有接種管出現(xiàn)明顯的所接種的微生物的生長，空白管顯陰性）不合格檢驗人檢驗日期復(fù)核人復(fù)核日期安瓿無菌檢查記錄（一）培養(yǎng)條件：將三角瓶分別在至23-28與30-35培養(yǎng)14天。培養(yǎng)觀察（天）硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基改良馬丁培養(yǎng)基陰性對照供試品陰性對照供試品1234567891011121314培養(yǎng)溫度備注(打“-”表示陰性，打“+”表示陽性)結(jié)論合格 不合格檢驗人日期復(fù)核人日期安瓿無菌檢查記錄（二）培養(yǎng)條件：將三角瓶分別在至23-28與30-35培養(yǎng)14天。培養(yǎng)觀察（天）硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基改良馬丁培養(yǎng)基陰性對照

34、供試品陰性對照供試品1234567891011121314培養(yǎng)溫度備注(打“-”表示陰性，打“+”表示陽性)結(jié)論合格 不合格檢驗人日期復(fù)核人日期安瓿無菌檢查記錄（三）培養(yǎng)條件：將三角瓶分別在至23-28與30-35培養(yǎng)14天。培養(yǎng)觀察（天）硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基改良馬丁培養(yǎng)基陰性對照供試品陰性對照供試品1234567891011121314培養(yǎng)溫度備注(打“-”表示陰性，打“+”表示陽性)結(jié)論合格 不合格檢驗人日期復(fù)核人日期模擬灌封樣品培養(yǎng)檢測記錄（一）培養(yǎng)基灌封驗證批號生產(chǎn)日期培養(yǎng)日期至盤號長菌數(shù)發(fā)現(xiàn)日期盤號長菌數(shù)發(fā)現(xiàn)日期16273849510檢驗人檢驗日期復(fù)核人復(fù)核日期評價本次驗證總共灌封

35、支，燈檢不合格品_支，實際培養(yǎng) 支，先于 下培養(yǎng)_天,再于 下培養(yǎng)_天，共有 支長菌。長菌的產(chǎn)品中，經(jīng)檢查安瓿瓶破損數(shù)為_支。評價人評價日期模擬灌封樣品培養(yǎng)最終結(jié)果記錄（二）培養(yǎng)基灌封驗證批號生產(chǎn)日期培養(yǎng)日期至盤號長菌數(shù)發(fā)現(xiàn)日期盤號長菌數(shù)發(fā)現(xiàn)日期16273849510檢驗人檢驗日期復(fù)核人復(fù)核日期評價本次驗證總共灌封 支，燈檢不合格品_支，實際培養(yǎng) 支，先于 下培養(yǎng)_天,再于 下培養(yǎng)_天，共有 支長菌。長菌的產(chǎn)品中，經(jīng)檢查安瓿瓶破損數(shù)為_支。評價人評價日期模擬灌封樣品培養(yǎng)最終結(jié)果記錄（三）培養(yǎng)基灌封驗證批號生產(chǎn)日期培養(yǎng)日期至盤號長菌數(shù)發(fā)現(xiàn)日期盤號長菌數(shù)發(fā)現(xiàn)日期16273849510檢驗人檢驗日期

36、復(fù)核人復(fù)核日期評價本次驗證總共灌封 支，燈檢不合格品_支，實際培養(yǎng) 支，先于 下培養(yǎng)_天,再于 下培養(yǎng)_天，共有 支長菌。長菌的產(chǎn)品中，經(jīng)檢查安瓿瓶破損數(shù)為_支。評價人評價日期培養(yǎng)基微生物陽性對照培養(yǎng)結(jié)果（一）培養(yǎng)基灌封驗證批號生產(chǎn)日期試驗方法其中一組接種大腸埃希菌（30-35培養(yǎng)），一組接種金黃色葡萄球菌（30-35培養(yǎng)），一組接種白色念珠菌（23-28培養(yǎng)），接種濃度均小于100cfu/支，分別在相應(yīng)溫度下培養(yǎng)72小時。菌種名稱菌種信息培養(yǎng)條件有無微生物生長（瓶號）生長微生物的瓶號生長微生物比例（%）結(jié)論有無大腸埃希菌金黃色葡萄球菌白色念珠菌結(jié)論合格（接種的TSB培養(yǎng)基中應(yīng)出現(xiàn)明顯的所接種

37、的微生物的生長）不合格檢驗人檢驗日期復(fù)核人復(fù)核日期培養(yǎng)基微生物陽性對照培養(yǎng)結(jié)果（二）培養(yǎng)基灌封驗證批號生產(chǎn)日期試驗方法其中一組接種大腸埃希菌（30-35培養(yǎng)），一組接種金黃色葡萄球菌（30-35培養(yǎng)），一組接種白色念珠菌（23-28培養(yǎng)），接種濃度均小于100cfu/支，分別在相應(yīng)溫度下培養(yǎng)72小時。菌種名稱菌種信息培養(yǎng)條件有無微生物生長（瓶號）生長微生物的瓶號生長微生物比例（%）結(jié)論有無大腸埃希菌金黃色葡萄球菌白色念珠菌結(jié)論合格（接種的TSB培養(yǎng)基中應(yīng)出現(xiàn)明顯的所接種的微生物的生長）不合格檢驗人檢驗日期復(fù)核人復(fù)核日期培養(yǎng)基微生物陽性對照培養(yǎng)結(jié)果（三）培養(yǎng)基灌封驗證批號生產(chǎn)日期試驗方法其中一組接種大腸埃希菌（30-35培養(yǎng)），一組接種金黃色葡萄球菌（30-35培養(yǎng)），一組接種白色念珠菌（23-28培養(yǎng)），接種濃度均小于100cfu/支，分別在相應(yīng)溫度下培養(yǎng)72小時。菌種名稱菌種信息培養(yǎng)條件有無微生物生長（瓶號）生長微生物的瓶號生長微生物比例（%）結(jié)論有無大腸埃希菌金黃色葡萄球菌白色念珠菌結(jié)論合格（接種的TSB培