實驗7_種子生活力的快速測定

1、種子生活力：指種子能夠萌發(fā)的潛在能力或種胚具有的生命力。 實驗?zāi)康?實驗原理 實驗材料與設(shè)備 實驗步驟 數(shù)據(jù)處理與結(jié)果分析 注意事項 思考題了解種子生活力快速測定的方法理解TTC/BTB/染料法測定種子生活力的原理凡有生活力的種子胚部在呼吸作用過程中都有氧化-還原反應(yīng)，而無生活力的種胚則無此反應(yīng)。當TTC溶液滲入種胚的活細胞內(nèi)，并作為氫受體被脫氫輔酶（NADH或NADPH）還原時，可產(chǎn)生紅色的三苯甲腙（TTF），胚便染成紅色。如種胚死亡便不被染色；如種胚生活力下降，呼吸作用明顯減弱，脫氫酶的活性亦大大下降，染色較淺；故可根據(jù)種胚染色的部位或深淺來鑒定種子的生活力。 TTC還原反應(yīng)如下：氯化三苯

2、基四氮唑 三苯甲腙活種子活種子死種子死種子活細胞呼吸釋放CO2， CO2溶于水成H2CO3解離，使種胚周圍環(huán)境酸度增加，用BTB來反映酸度的改變；BTB變色范圍為pH6.0-7.6，酸性呈黃色，堿性呈藍色，中間經(jīng)過綠色（變色點為pH7.1）。本實驗觀察種胚周圍的黃色暈圈。有生命力種子胚細胞的原生質(zhì)膜具有半透性，有選擇吸收外界物質(zhì)的能力，一般染料不能進入細胞內(nèi)，胚部不染色。而喪失生命力的種子，其胚部細胞原生質(zhì)膜喪失了選擇吸收能力，染料可自由進入細胞內(nèi)使胚部染色。所以可根據(jù)種子胚部是否被染色來判斷種子的生命力。 活種子活種子死種子死種子（一）材料：小麥種子（二）儀器設(shè)備：1. 小燒杯；2. 刀片；

3、3. 鑷子；4. 溫箱（三）試劑： 1. 0.12-0.5TTC溶液（TTC可直接溶于水，溶于水后，呈中性，pH70.5，不宜久藏，應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配）。 2. 0.02-0.2靛紅溶液或5紅墨水（酸性大紅G） 3. BTB溶膠 煮沸的1BTB瓊脂膠約20 ml，冷卻倒膠至培養(yǎng)皿（1/3皿）；取30粒完好的小麥種子，種胚向下插入膠(不軟不硬)；將培養(yǎng)皿置于35 下培養(yǎng) 1hr，對光觀察，如種胚附近呈現(xiàn)較深黃色暈圈是活種子，否則是死種子。將種子用溫水（30）浸泡2-6h，使種子充分吸脹；隨機取小麥種子30粒，沿種胚中央準確切開，取其一半TTC備用，另一半紅墨水法備用；將TTC備用的一半種子浸于5 ml TTC 中，于恒溫箱（30-35）中保溫30min；將紅墨水法的另一半種子用5 ml紅墨水浸5 min（室溫）；染色結(jié)束后要立即進行鑒定，因放久會褪色。倒出TTC / 紅墨水，再用清水沖洗種子1-2次，觀察種胚被染色的情況。方法供試粒數(shù)有生活力種子粒數(shù)無生活力種子粒數(shù)有生活力種子占供試粒數(shù)的%TTC30紅墨水30BTB 30數(shù)據(jù)記錄與處理 沿種胚中央準確切開，同粒TTC/紅墨水法各一半 TTC溶液最好現(xiàn)配現(xiàn)用，如需貯藏則應(yīng)貯于棕色瓶中，放在陰涼黑暗處，如溶液變紅則不可再用。 染色結(jié)束后立即進行鑒定，因放久會褪色。 顯色時要使漂浮的種子全部浸入試劑中