放射免疫技術(shù)課堂版

1、放射免疫技術(shù)目錄放射免疫技術(shù)1.原理及分類(lèi)2.常用的放射性核素一 放射免疫分析二 免疫放射分析三 IRMA和RIA的比較放射免疫技術(shù)放射免疫技術(shù)（radiommunoassay technique） 是以放射核素為示蹤物的一種免疫標(biāo)記是以放射核素為示蹤物的一種免疫標(biāo)記測(cè)定技術(shù)測(cè)定技術(shù)優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)：靈敏度高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好，樣品靈敏度高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好，樣品及試劑用量少，操作簡(jiǎn)便易于標(biāo)準(zhǔn)化等及試劑用量少，操作簡(jiǎn)便易于標(biāo)準(zhǔn)化等缺點(diǎn)：缺點(diǎn)：放射性元素污染放射性元素污染1.原理及分類(lèi)原理及分類(lèi)放射免疫放射免疫（RIARIA）以標(biāo)記抗原與反以標(biāo)記抗原與反應(yīng)系統(tǒng)中未標(biāo)記應(yīng)系統(tǒng)中未標(biāo)記抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合特抗

2、原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合特異性抗體來(lái)測(cè)定異性抗體來(lái)測(cè)定待檢樣品中抗原待檢樣品中抗原量。量。 免疫放射免疫放射（IRMAIRMA）以過(guò)量標(biāo)記抗體以過(guò)量標(biāo)記抗體與抗原非競(jìng)爭(zhēng)結(jié)與抗原非競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合，采用固相免合，采用固相免疫吸附載體分離疫吸附載體分離游離和結(jié)合標(biāo)記游離和結(jié)合標(biāo)記抗體?？贵w。常用的標(biāo)記核素常用的標(biāo)記核素2.常用的放射性核素常用的放射性核素（一）（一） 放射免疫分析放射免疫分析基本原理AbAb限量，限量，AgAg* *定量定量, ,AgAg* *和和AgAg的量大于的量大于AbAb結(jié)合位點(diǎn)，二者結(jié)合位點(diǎn)，二者通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)方式與通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)方式與AbAb結(jié)合；隨著結(jié)合；隨著AgAg增加，增加，AgAg* *與與Ab

3、Ab結(jié)合形成結(jié)合形成AgAg* *AbAb復(fù)合物的放復(fù)合物的放射量降低射量降低, ,二者變化二者變化成函數(shù)關(guān)系。成函數(shù)關(guān)系。 以未結(jié)合的以未結(jié)合的AgAg* *為為F F，AgAg* *AbAb復(fù)合物復(fù)合物為為B B，則，則B/FB/F或或B/(BB/(BF)F)與與AgAg的的量變存在著函數(shù)量變存在著函數(shù)關(guān)系劑量反應(yīng)關(guān)系劑量反應(yīng)曲線曲線 注：注：T即是即是B與與F的總和的總和（二）（二） 免疫放射分析免疫放射分析 Miles將放射性核素標(biāo)記胰島素將放射性核素標(biāo)記胰島素抗體，用雙抗體夾心檢測(cè)血清胰島抗體，用雙抗體夾心檢測(cè)血清胰島素，為區(qū)別放射免疫分析法，將之素，為區(qū)別放射免疫分析法，將之稱為免

4、疫放射分析。稱為免疫放射分析。基本原理單位點(diǎn)單位點(diǎn) IRMAIRMA先用先用與與待測(cè)抗原進(jìn)行反應(yīng)，形成待測(cè)抗原進(jìn)行反應(yīng)，形成抗原抗體復(fù)合物；用抗原抗體復(fù)合物；用結(jié)合未結(jié)合標(biāo)記抗體結(jié)合未結(jié)合標(biāo)記抗體并將其分離并將其分離, , 測(cè)定測(cè)定的放射量的放射量 雙位點(diǎn)雙位點(diǎn) IRMAIRMA先用先用與抗原結(jié)與抗原結(jié)合，再用合，再用與抗原的另一決定與抗原的另一決定簇結(jié)合，形成簇結(jié)合，形成復(fù)合物，復(fù)合物，洗棄剩余標(biāo)記抗體，測(cè)固洗棄剩余標(biāo)記抗體，測(cè)固相上放射性。相上放射性。 2.IRMA和和RIA的比較的比較 放射免疫分析技術(shù)的應(yīng)用 放射免疫分析技術(shù)的靈敏度高，特放射免疫分析技術(shù)的靈敏度高，特異性強(qiáng)，精密度好，常用于各種激素，異性強(qiáng)，精密度好，常用于各種激素，微量蛋白質(zhì)，腫瘤標(biāo)記物和藥物學(xué)等微微量蛋白質(zhì)，腫瘤標(biāo)記物和藥物學(xué)等微量物質(zhì)的測(cè)定量物質(zhì)的測(cè)定 但由于放射污染和危害，常用核但由于放射