豬場及外圍洗消非洲豬瘟采樣方法

1、豬場及外圍洗消非洲豬瘟釆樣方法鼻腔是豬群感染病毒或排毒的主要途徑之一，無論在口然感染或者人工造病的條 件下，豬群都可以通過鼻腔帶毒和排毒。病毒感染的早期診斷對F豬群疫病的控制至關(guān)重要， 因此開展科學(xué)、準(zhǔn)確及可執(zhí)行的監(jiān)測方案勢在必行。ASF病毒感染途徑的研究發(fā)現(xiàn)，鼻腔拭子的檢測比血液或其他采樣方法更早出現(xiàn)， 同時也具有易采集、可操作性強(qiáng)、對豬群應(yīng)激較小等優(yōu)點，從而成為臨床首選。本文參考文獻(xiàn) 報道結(jié)合臨床實際情況，對鼻腔拭子采樣做一介紹：第一步準(zhǔn)備鼻拭子采樣材料：保存緩沖液、封口膠帶、一次性注射器、一次性無菌拭子、記號筆。第二步保定豬只，將無菌棉拭子深插入豬只鼻腔內(nèi)，旋轉(zhuǎn)三次，將拭子放入保存 管中

2、，記錄豬只信息。第三步用無菌注射器注入2nd拭子保存緩沖液，封口，垂直放置，冷藏保存，48h內(nèi)盡快送檢。豬場內(nèi)環(huán)境的樣品采集涉及到固體和液體環(huán)境,結(jié)合生產(chǎn)實際情況，對豬場內(nèi)壞境 樣本采集做一介紹：一. 固體環(huán)境釆樣教程步驟一、準(zhǔn)備采樣材料：保存緩沖液、封口膠帶、一次性注射器、一次性無菌軾子、記號筆。步驟二、用無菌注射器向拭管注入2nd保存緩沖液，先浸潤無菌棉拭子。步驟三.固體環(huán)境采樣點表面呈井字采樣（詳見視頻），將拭子放入拭管屮，記錄采樣信息；封 口，垂直放置，冷藏保存，48h內(nèi)盡快送檢。二、液體環(huán)境采樣教程步驟、準(zhǔn)備采樣材料：無菌離心管、一次性無菌吸頭、保存緩沖液、 封口膠帶、一次Fir-&

3、quot;性注射器、記號筆。L_l步驟二、用無菌注射器向離心管注入4ml保存緩沖液。步驟三、用無菌吸頭吸取采樣點液體lml置r離心管中（詳見視頻）。封口，記錄釆樣信息, 冷藏保存，48h內(nèi)盡快送檢。三豬場內(nèi)環(huán)境建議采樣點豬場內(nèi)環(huán)境涉及的點和面非常多，以下建議采樣點涉及的主耍是常見污染區(qū)域或者需關(guān)注 的采樣點，供養(yǎng)殖場參考。1、物資消毒間：物資消毒架、物資進(jìn)口區(qū)域門把手、腳踏區(qū)域：2、人員消毒通道：門把手、入口處腳踏區(qū)域；3、獸藥房：藥房門把手、藥房冰箱門把；4、工作服：刮取污染的工作服上污染物；5、雨鞋：刮取雨鞋側(cè)面及鞋底的污染物；6、內(nèi)部轉(zhuǎn)運(yùn)車輛：輪胎、貨倉、司機(jī)室、腳踏、方向盤、油門及剎車

4、部位；7、內(nèi)部運(yùn)輸斗車：輪胎、手推把手：8、飼料加丄成品倉出料口：出料口、環(huán)境樣品、飼料袋：9、豬場內(nèi)門把手：豬舍及曽醫(yī)室等建筑門把手；10、道路：豬場內(nèi)道路、豬舍內(nèi)道路。以上監(jiān)測建議頻率為一周一次，各養(yǎng)殖場可根據(jù)當(dāng)?shù)匾咔閴毫φ{(diào)整監(jiān)測頻率。豬場內(nèi)環(huán)境采樣出豬臺是豬場與外界車輛直接接觸的部位，如果外面售豬車輛洗消不到位，豬場員工裝豬時， 乂沒有嚴(yán)格遵循嚴(yán)格的臟凈分離原則，直接將場內(nèi)的豬趕到拉豬車上，就很容易將洗消不徹底 的拉豬車上的病毒（包括ASFv、FMDv. PEDv等）帶入生產(chǎn)區(qū)，從而使豬 場染上新的疫病，這 也是目前豬場最容易出現(xiàn)問題的環(huán)節(jié)。據(jù)調(diào)査了解，ASFv通過離豬 場很近的裝豬臺感

5、染機(jī)率 有85%的機(jī)會。目前疫情緊張，在豬場外建獨立的售豬屮轉(zhuǎn)站（或轉(zhuǎn)運(yùn)屮心），來避免ASFv的感染是最 實用的辦法之一，可以有效的緩沖疫情的威脅。轉(zhuǎn)運(yùn)屮心可以很好避免場內(nèi)工作 人員與外界拉 豬車輛接觸，人員即使接觸也是場內(nèi)的周轉(zhuǎn)車，而場內(nèi)的周轉(zhuǎn)車輛是嚴(yán)格 按要求做好洗消烘干 工作再來裝豬的，相對來講全場的生物安全就有了保障，因此轉(zhuǎn)運(yùn)屮心現(xiàn)在變成了規(guī)模豬場的必耍設(shè)施。轉(zhuǎn)運(yùn)中心的建設(shè)，是豬場生物安全的璽耍一部分，而轉(zhuǎn)運(yùn)中心的環(huán)境是否安全關(guān)乎豬場 疫病是否發(fā)生，有案例報道，一養(yǎng)殖場在轉(zhuǎn)運(yùn)屮心監(jiān)測到相關(guān)的病原菌，因洗消工作執(zhí)行不到 位，20天后該病原菌傳播到豬場。可見轉(zhuǎn)運(yùn)屮心的洗消工作和環(huán)境安全預(yù)警

6、的重要性，洗消工 作可采用低圧沖洗、清潔劑打濕浸泡、熱水高圧清洗、晾干、消毒、烘干等步驟執(zhí)行，環(huán)境安 全預(yù)警可定期通過實驗室（按照相關(guān)部門規(guī)定執(zhí)行）監(jiān)測 環(huán)境評估。轉(zhuǎn)運(yùn)屮心環(huán)境監(jiān)測包括：外部污區(qū)、轉(zhuǎn)運(yùn)灰區(qū)及內(nèi)部凈區(qū)三個部分，本文結(jié)合實際情 況，對轉(zhuǎn)運(yùn)中心環(huán)境采樣做如下預(yù)案：一、轉(zhuǎn)運(yùn)中心采樣建議一、采樣區(qū)域按劃分的三個區(qū)域進(jìn)行采樣，包括：外部污區(qū)、轉(zhuǎn)運(yùn)灰區(qū).內(nèi)部凈區(qū)。二采樣示意圖1 外部污區(qū)選擇污區(qū)的2個區(qū)域，如圖所示。選擇區(qū)域1的左上角、右下角 采樣，選擇區(qū)域2的左下角、右上角采樣。2轉(zhuǎn)運(yùn)灰區(qū)選擇灰區(qū)的2個區(qū)域，如圖所示。選 擇區(qū)域3的左上角、右下角采樣，選擇區(qū)域4的左下角、右上角釆樣。3內(nèi)部

7、凈區(qū)選擇灰區(qū) 的2個區(qū)域，如圖所示。選擇區(qū)域5的左上角、右下角采樣，選擇區(qū)域6的左下角、右上角采三. 采樣示對象及方法1. 采樣對彖：所選釆集區(qū)域的固體表面.或者環(huán)境液體。2. 采樣方法：采用專用動物病毒采樣管套裝，按凈區(qū)灰區(qū)-污區(qū)順序釆樣。(1) 固體表面：使用棉拭子釆樣，采用“井”字形法采樣后放入保存管中。(2) 液體環(huán)境：吸取環(huán)境中的液體0. 5-lml,放入保存管中。3.現(xiàn)場監(jiān)測人員耍依照規(guī) 范 進(jìn)行操作，做好現(xiàn)場記錄。以上監(jiān)測頻率為一周一次，各轉(zhuǎn)運(yùn)中心可根據(jù)當(dāng)?shù)匾咔閴毫φ{(diào)整監(jiān)測頻率。轉(zhuǎn)運(yùn)中心釆樣視頻在當(dāng)前非洲豬瘟疫情嚴(yán)峻形勢下，豬場需加強(qiáng)生物安全體系建設(shè)，切斷病原傳播鏈條。 運(yùn)豬車輛

8、在豬場與豬場Z間、豬場與屠宰場之間、豬場與飼料廠之間交義運(yùn)輸?shù)?情況很常見， 帶來病毒交義傳播風(fēng)險。對丁豬場來說，豬只和飼料的進(jìn)出都是無法避免的，而負(fù)責(zé)運(yùn)輸?shù)妮d體一車輛，是當(dāng)前交義污染最突出的問題。被外部污染的車輛與 豬場的接觸流通是病毒從豬場外部進(jìn)入內(nèi)部的主要途徑Z。因此，提高豬場的“運(yùn)輸安全 系數(shù)”，使用徹底清洗、消毒和烘干的車輛非常重要。洗消房是洗消屮心的第一道防線，車輛經(jīng)過徹底清潔后，車輛、洗消房內(nèi)部區(qū)域環(huán)境及洗消污水 的污染與否，直接反映洗消屮心的安全系數(shù)。同時，當(dāng)前建立的洗消屮心多為區(qū)域性共用，洗 消中心的安全系數(shù)關(guān)乎是否造成運(yùn)輸車輛的二次污染，是否增加區(qū)域內(nèi)豬場的安全風(fēng)險。洗消房

9、的環(huán)境監(jiān)測涉及到車輛.內(nèi)部區(qū)域環(huán)境及污水三個部分，根據(jù)文獻(xiàn)結(jié)合實際情況，對 洗消中心-洗消房采樣做一建議：一、車輛釆樣建議 一、采樣清單序號釆樣區(qū)城運(yùn)豬車飼料畤車頭、雙側(cè)門(手把)、車尾、車身VV車輪、擋泥板、底盤V43;駛室腳踏板、方向盤、檔位桿、 座位V車廂4V/0二.采樣示意圖(1)示意車頭雙側(cè)門(手把車尾車身(2)示意(3)示意pn?nTTTrrriII（4）示意j石卜角、洗消房-內(nèi)部區(qū)域環(huán)境采樣建議一、采樣區(qū)域選擇原則：所選擇的采樣區(qū)域要具有一定的覆蓋面，越大越好。建議：取前、中、后三個區(qū)域，具 有覆蓋面，并貼合實際。二、采樣示意圖建議選擇3個區(qū)域進(jìn)行采樣，如圖所示，包括：進(jìn)入洗消間區(qū)域A、汚水道衣而區(qū)域B、洗消間區(qū)域C。區(qū)域