基質金屬蛋白酶抑制劑與胃癌浸潤轉移的關系

1、基質金屬蛋白酶抑制劑與胃癌浸潤轉移的關系【關鍵詞】 基質金屬蛋白酶【摘要】 目的 探討TIMP-1在胃癌中的表達與腫瘤浸潤、轉移及預后的關系。方法采用免疫組織化學技術（SP法）對63例胃癌組織的TIMP-1進行檢測，結合臨床資料進行分析。結果 胃癌組織的TIMP-1的陽性表達率為52.4%（33/63）。TIMP-1的表達強度隨著分化程度的升高而增加;在早癌組中表達良好，而在進展期癌組中表達差;在無淋巴結轉移組中表達較有淋巴結轉移組中表達好。結論 TIMP-1可作為判斷胃癌惡性行為的重要生物學指標，亦是判斷預后的重要指標。關鍵詞 胃癌 浸潤和腫瘤轉移 基質金屬蛋白酶抑制劑Expression

2、of tissue inhibitor of metalloproteinases in human gastric cancer and its invasion and metastasis . 【Abstract】 Objective The aim of this study was to investigate the relationship between presence of TIMP-1and invasion，metastasis，prognosis of gastric cancer.Methods Sixty-three specimens of gastric ca

3、ncer as control were assessed byimmunohistological method（SP method）.Results The rate of positive expressions of TIMP-1was52.4%（33/63）.The more high expression of TIMP-1in gastric cancer，the more deeply staining of histologic classification;The expression of TIMP-1in early gastric carcinoma had stro

4、ng staining，but weak staining in advanced gastric carcinoma.The positive expression of TIMP-1in no metastatic lymph nodes was higher than that in cancer of metastatic lymph nodes.Conclusion TIMP-1was negative regulator of invasion and metastasis of gastric cancer，and was new sign of biological behav

5、ior in gastric cancer.It was a sign in predicting.Key words Gastric Cancer Invasion and Metastasis Tissue Inhibitor of Metalloproteinases 胃癌是最常見的惡性腫瘤之一，其浸潤轉移是導致胃癌患者死亡的主要原因。惡性腫瘤浸潤是轉移的前提，而腫瘤的浸潤是一個極其復雜的過程，Liotta提出腫瘤浸潤的三步學說，即粘附、降解和移動，其中降解過程是關鍵，即腫瘤細胞降解破壞細胞外其質引起的浸潤是腫瘤轉移這一復雜機制的最主要過程。目前已經證明基質金屬蛋白酶（Matrix Me

6、talloproteinases，MMPs）在這一過程中起著極為重要的作用。本實驗應用免疫組織化學檢測人體胃癌及相應淋巴結轉移癌中TIMP-1和TIMP-2的表達情況，以探討二者在胃癌侵襲和轉移過程中的意義。1 資料與方法 1.1 一般資料 選取1994年4月2000年9月間，我院經病理診斷為胃癌（隨診資料完整），并行胃癌根治術的福爾馬林固定石蠟包埋標本63例，術前均未行放療、化療。男42例，女21例，男女比2:1;患者年齡3176歲，平均57.6歲;隨診時間至2003年9月，生存時間569個月，平均37個月。病理診斷按我國胃癌協(xié)作組:胃癌的組織學分型，分為乳頭狀腺癌、管狀腺癌、低分化腺癌、黏

7、液細胞癌、黏液腺癌。另外按分化程度分高、中、低分化三組。按有無淋巴結轉移分淋巴結陰性組、淋巴結陽性組。按照病期:分為早、中、晚三期胃癌 1 ，后兩者為進展期癌，本實驗亦按此分期分為兩組:早癌組和進展期癌組。首先將胃癌術后大體標本的石蠟切片行HE染色，并在顯微鏡下觀察。確定早期胃癌27例，進展期胃癌36例;高分化胃癌17例，中分化胃癌9例，低分化胃癌37例;有淋巴結轉移者22例，無淋巴結轉移者41例。 1.2 免疫組化方法 免疫組化采用鏈霉菌過氧化物酶法（SP法），一抗鼠抗人TIMP-1單克隆抗體及SP免疫試劑盒（福建邁新公司產品）。用已知乳腺癌陽性切片作陽性對照，用正常胃組織作為正常對照。 1

8、.3 結果判斷 2 根據(jù)腫瘤細胞胞漿染色的程度及染色細胞百分率進行評分:基本不著色者為0分，著色淡黃色為1分，棕色為2分，深棕色為3分。著色細胞占計數(shù)細胞百分率5%為0分，6%25%為1分，26%50%為2分，51%為3分。將每張切片著色程度得分與著色細胞百分率得分相乘，為其最后得分。01分為陰性（-），得23分為弱陽性（+），得46分為中等陽性（+），6分以上為強陽性（+）。 1.4 統(tǒng)計學方法 應用SPSS10.0統(tǒng)計軟件包，等級資料用秩和檢驗，P<0.05表示差異有顯著性，P<0.01表示差異有非常顯著性。2 結果 2.1 TIMP-1與胃癌各臨床病理指標的關

9、系 在63例胃癌組織中，TIMP-1在33例中有表達（+），其陽性率為52.4%。其中高分化組的表達為（-）2例，（+）3例，（+）3例，（+）9例;中分化組的表達為（-）4例，（+）0例，（+）2例，（+）3例;低分化組（-）24例，（+）3例，（+）3例，（+）7例。應用非參數(shù)檢驗中的秩和檢驗可見TIMP-1的表達在三組不同的分化程度中差異有非常顯著性（P=0.01），且其表達在高分化組良好，而在低分化組較差，其與分化程度呈正相關。 2.2 臨床分期 早期癌中（-）4例，（+）11例，（+）10例，（+）2例;進展期癌（-）25例，（+）8例，（+）2例，（+）1例。TIMP-1的表達在兩

10、組臨床分期中差異有非常顯著性（P<0.00），早期癌組中TIMP-1表達良好，而在進展期癌中TIMP-1表達差，隨著病期的延長表達下降。無淋巴結轉移組（-）12例，（+）5例，（+）7例，（+）17例;有淋巴結轉移組（-）18例，（+）1例，（+）1例，（+）2例。其表達在有、無淋巴結轉移中差異有非常顯著性（P<0.01），隨著淋巴結轉移的出現(xiàn)而表達下降。3 討論胃癌是消化道常見的惡性腫瘤之一，其以出現(xiàn)臨床癥狀晚、進展迅速和生存率低為特征 3 。其預后不良的原因是在確診胃癌時，通常原發(fā)灶已出現(xiàn)廣泛浸潤，并已擴散形成轉移灶，尤其易擴散至淋巴結。惡性腫瘤的浸潤和轉移是多

11、步驟和多分期的，其中降解或破壞細胞外基質是關鍵步驟 4 。MMPs（基質金屬蛋白酶）在這一過程中起著重要的作用。TIMPs（基質金屬蛋白酶抑制劑）是MMPs的天然抑制劑，它可與活化狀態(tài)的MMPs以1:1克分子比例非共價結合，這種結合是不可逆且穩(wěn)定的 5 ，從而使MMPs不能發(fā)揮其作用，是MMPs的負調控因子。TIMPs廣泛存在于組織和體液中，目前按發(fā)現(xiàn)的先后命名了4種:TIMP-1、2、3、4。它們是一組多功能的細胞因子，其中TIMP-1是一種分子量為28.5kD的可溶性糖蛋白，位于人Xp11.23-Xp11.4染色體上 6 。TIMP-1對于所有類型MMPs均有抑制作用。在生理情況下，它可參

12、與細胞外基質的改建及影響細胞生長，在病理情況下，它在肝纖維化及腫瘤細胞的侵襲和轉移中發(fā)揮了重要作用 7 。很多研究通過轉基因技術，上調TIMPs的表達及給予外源性重組TIMPs均能降低惡性腫瘤的侵襲和轉移能力 8 ，而下調TIMPs的表達則增加了腫瘤細胞的遠處轉移和胚胎干細胞的侵襲能力 9 。 本實驗應用免疫組化SP法檢測TIMP-1在63例胃癌組織中的表達，結果顯示陽性表達主要表現(xiàn)在胃癌細胞的胞漿內，呈散在、片狀或灶狀分布，在間質細胞表達較少，與Garbett EA等 10 應用免疫組化檢測TIMP-1在胃癌組織中的表達結果相同。由此可見TIMP-1在胃癌細胞中的表達存在廣泛異質性。本實驗還

13、發(fā)現(xiàn)，胃癌旁腸上皮化生和異型增生，TIMP-1的表達極佳，其染色深度部分超過胃癌細胞。目前認為，TIMPs在不同的腫瘤中來源于不同的細胞，瘤細胞和宿主間質細胞可分別表達或共同表達 11 。本實 驗陽性率TIMP-1為52.4%（33/63）。曾有報道在胃癌中TIMP-1的表達為41% 12 。以上實驗均采用免疫組化方法，說明在同一種腫瘤組織進行測定的結果亦不完全相同，目前認為其影響因素可能為:（1）抗原丟失;（2）一抗單克隆抗體濃度不同（不同的生產廠家）;（3）實驗過程中的主、客觀原因;（4）結果判斷方法的不同等。 本研究結果顯示TIMP-1的表達與胃癌的分化程度、分期及有無淋巴結轉移均有相關

14、性，且其隨著分化程度的升高而表達增強;隨著浸潤深度的增加而表達下降;隨著淋巴結轉移的發(fā)生而表達下降。但由此已可明確說明:TIMP-1是腫瘤浸潤和轉移的負調控因子之一，并可作為判斷胃癌細胞惡性行為的重要生物學指標。多數(shù)胃癌一旦發(fā)現(xiàn)即已進入晚期階段，腫瘤細胞的浸潤轉移多數(shù)已經發(fā)生，因此以抑制MMPs的活性來達到控制腫瘤發(fā)展的做法收效甚微。但通過對TIMPs的活性測定可估計患者的現(xiàn)狀和預后，并進一步指導治療。參考文獻1 張蔭昌.胃病理及胃粘膜活檢.沈陽:遼寧科學技術出版社，1988，75. 2 謝玉梅，聶青和，周永興，等.肝癌組織中TIMP-1和TIMP-2的表達意義.第四軍醫(yī)大學學報，2001，2

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