FDA清潔驗(yàn)證檢查指南

1、FDA清潔驗(yàn)證檢査指南Validation of Cleaning Processes （7/93）清潔工藝驗(yàn)證清潔丄藝驗(yàn)證檢查指南注:此指南是FDA檢查官和其工作人員的參考資料。此文件不約束FDA,也不 賦予任何人任何權(quán)利，特權(quán)，利益或豁免權(quán)。介紹自從FDA的各文件，包括化學(xué)原料藥檢查指南和生物技術(shù)檢查指南簡單地提 出了清潔 驗(yàn)證這個(gè)話題之后，關(guān)于清潔工藝的驗(yàn)證已經(jīng)引發(fā)了相當(dāng)多的討論。這 些官方的文件，都清楚地確定了對于清潔工藝需要被驗(yàn)證的期望。通過討論那些已被認(rèn)為可接受的（或者不可接受的）實(shí)際情況，此指南是為了建 立檢查的連貫一致性。同時(shí)，必須意識到，與其他工藝驗(yàn)證一樣，清潔驗(yàn)證的方 法也

2、不止一種。最后，所有過程驗(yàn)證的檢查標(biāo)準(zhǔn)是，檢查其科學(xué)數(shù)據(jù)能否證明該 系統(tǒng)始終如一地達(dá)到預(yù) 期LI的，結(jié)果穩(wěn)定地符合預(yù)先制定的標(biāo)準(zhǔn)。本指南僅適用于設(shè)備的化學(xué)殘留物的清潔驗(yàn)證。背景1963年GMP法規(guī)（133.4節(jié)） 要求如下“設(shè)備需要被維持在一個(gè)清潔、 有序的 狀態(tài)”。還有一個(gè)很相似的關(guān)于設(shè)備清潔的章節(jié)是在1978年GMP法規(guī)（211.67節(jié)）。同這些法規(guī)相比，對于設(shè)備在使用前應(yīng)被清潔的要求并不是什么新要求。當(dāng) 然，對于設(shè)備FDA清潔的總的原則是為了防止產(chǎn)品污染或摻雜其它物質(zhì)。從歷史事件看來，檢查 官發(fā)FDA現(xiàn)了一些明顯的不衛(wèi)生是由于設(shè)備的清潔和維護(hù)不到位，或防塵控制系 統(tǒng)不當(dāng)。過去FDA更多的

3、關(guān)注于非青霉素類產(chǎn)品和青霉素類產(chǎn)品，或藥品與笛類產(chǎn)品和激素類產(chǎn)品之間的交義污染問題。在過去的十年中，有大量的產(chǎn)品召回事 件都是山于實(shí)際的或潛在的青霉素交義污染。1988年的召回消膽胺樹脂事件，使FDA對于潛在交義污染的問題日益重視。那次召回的原因是用于生產(chǎn)制劑的原料藥被農(nóng)業(yè)殺蟲劑生產(chǎn)中低劑量的中間體和 降解物給污染了。造成這次交義污染的原因是III于重復(fù)使用了回收溶劑引起的。 而回收溶劑被污染的原因是山于對重復(fù)使用的溶劑桶缺乏控制。這些桶之前是用 于貯存殺蟲劑生產(chǎn)線產(chǎn)生的回收溶劑，之后乂被重復(fù)地用于樹脂生產(chǎn)線使用的回 收溶劑貯存。該公司對于這些溶劑桶缺乏有效的控制，對于貯存的溶劑缺少適肖 的檢

4、測，對于溶劑桶的清潔過程也沒有進(jìn)行驗(yàn)證。一部分被殺蟲劑污染的原料藥被供給了在另一地址的廠進(jìn)行最后的制劑生產(chǎn)，這就導(dǎo)致2了該廠的流化床干燥機(jī)的袋子被殺蟲劑污染了。轉(zhuǎn)而導(dǎo)致此廠生產(chǎn)的眾多批次 產(chǎn)品被污 染，盡管該廠并不生產(chǎn)殺蟲劑。1992年， 對一家海外原料藥生產(chǎn)商發(fā)出了進(jìn)口警告。 該廠使用相同設(shè)備生產(chǎn) 強(qiáng)效FDA笛類產(chǎn)品和非笛類產(chǎn)品。因此公司是多品種原料藥生產(chǎn)廠家，F(xiàn)DA認(rèn)為潛在交 義污染的可能性很大，對公眾健康造成了嚴(yán)重的威脅。該公司只是在FDA檢查的 近期才開展了清潔驗(yàn)證工作，而FDA認(rèn)為該清潔驗(yàn)證工作是不當(dāng)?shù)?。理山之?是，工廠僅尋找沒有前一種物質(zhì)存在的證據(jù)。但是用薄層法檢測洗滌水后，找到

5、 了設(shè)備中還殘留了前一產(chǎn)品生產(chǎn)過程中反應(yīng)副產(chǎn)物和降解產(chǎn)物的殘留物?；疽驠DA期望公司建立書面的程序(SOPs)用于詳細(xì)描述設(shè)備各部件的清潔的過程。如果公司用同一程序進(jìn)行相同產(chǎn)品不同批次之間的清洗， 而使用不同程序進(jìn)行轉(zhuǎn) 產(chǎn)之間的清洗，公司的書面程序應(yīng)明確說明這些不同的情況。同樣，若水溶性殘 留物與非水溶性殘留物的清洗方法不同，則公司的書面程序也應(yīng)說明兩種情況， 并清楚地規(guī)定在何種情況下執(zhí)行哪個(gè)程序。對于化學(xué)原料藥生產(chǎn)中會產(chǎn)生柏油狀 或粘膠狀殘留物的生產(chǎn)工序，因?yàn)檫@些物質(zhì)不容易被清除，公司可以決定使用專 用設(shè)備。流化床干燥機(jī)的袋子，作為一種不容易被清洗的設(shè)備，也通常只被專用 于某一特定產(chǎn)品的

6、生產(chǎn)。對于清潔過程本身留下的殘留物（清潔劑，溶劑等），也 必須被去除。FDA期望公司建立書面的清潔工藝驗(yàn)證通則。FDA期望這個(gè)清潔工藝驗(yàn)證通則規(guī)定，驗(yàn)證執(zhí)行的負(fù)責(zé)人，批準(zhǔn)驗(yàn)證工作的負(fù) 責(zé)人，接 受標(biāo)準(zhǔn)，再驗(yàn)證時(shí)間。FDA期望對于每一個(gè)生產(chǎn)系統(tǒng)或每一個(gè)設(shè)備，公司應(yīng)預(yù)先制訂具體的書面驗(yàn)證 方案，其中應(yīng)明確規(guī)定如取樣方法、分析方法（包括方法靈墩度）等方面的問題。FDA期望公司根據(jù)方案進(jìn)行驗(yàn)證工作，并記錄歸檔驗(yàn)證的結(jié)果。FDA期望形成一個(gè)最終的驗(yàn)證報(bào)告，報(bào)告應(yīng)經(jīng)過管理層的批準(zhǔn)，并說明該清洗 方法是否有效。數(shù)據(jù)應(yīng)該能夠支持如下結(jié)論，殘留物質(zhì)已經(jīng)被降低到一個(gè)“可接 受的水平”。清潔驗(yàn)證的評估笫一步是明確驗(yàn)

7、證LI的。我們曾發(fā)現(xiàn)有一些公司沒有建立驗(yàn)證LI的。如常見一 些生產(chǎn)商，在清潔之后進(jìn)行了大量的取樣和檢測程序，而沒有真正去評估各步清 洗操作的有效性。在評估清潔工序時(shí)，有一系列的問題需要被關(guān)注。比如，到達(dá) 哪個(gè)點(diǎn)/程度，一個(gè)設(shè)備 或者系統(tǒng)算是清潔了，是不是一定要用手擦洗，用手擦洗達(dá) 到了什么效果，而只用一種溶劑清洗是達(dá)不到的，批和批之間或者產(chǎn)品和產(chǎn)品之 間，人工清洗的差異有多大，這些問題的答案，對于檢查和評估清潔過程來說是非常重要的，因?yàn)闄z查官必須要全面評估 該過程的有效性。而且這些問題的答案也 有助于省去多余的步驟，能更有效地工作，從而為公司節(jié)約資源。檢查每個(gè)設(shè)備有兒種清洗方法。理想的情況是一

8、個(gè)設(shè)備或系統(tǒng)擁有一套清洗工 藝。然而，這也取決于生產(chǎn)的品種，以及同一產(chǎn)品的不同批次之間（如大量生產(chǎn)） 或者不同產(chǎn)品的轉(zhuǎn)產(chǎn)之間是否需要清洗。當(dāng)清洗方法只用于同一產(chǎn)品的不同批次 之間（或同一中間體的不同批次之間），公司僅需要建立口視清潔”的標(biāo)準(zhǔn)。諸 如此類的批與批之間的清潔工藝，不需要被驗(yàn)證。設(shè)備的設(shè)計(jì)檢查設(shè)備的設(shè)計(jì)，尤其是使用了半自動(dòng)或全自動(dòng)在場清洗系統(tǒng)的大型生產(chǎn)系 統(tǒng)，需要重點(diǎn)關(guān)注。比如，應(yīng)使用沒有球閥的衛(wèi)生型管道系統(tǒng)。當(dāng)使用了那些非 衛(wèi)生型的球閥（這 在原料藥工業(yè)中是普遍的），清潔工序就變的更困難。若在現(xiàn)場檢查中發(fā)現(xiàn)使用了上述類型的設(shè)備系統(tǒng)，執(zhí)行清潔程序的操作人員必 須了解問題的所在，并已進(jìn)

9、行了關(guān)于系統(tǒng)和閥門清潔的特殊培訓(xùn)。檢查該操作人 員是否了解系統(tǒng)，培訓(xùn)的水平和清潔操作的經(jīng)驗(yàn)。并檢查書面的已驗(yàn)證過的清潔 程序，判定系統(tǒng)是否已經(jīng)被適當(dāng)?shù)拇_認(rèn)和驗(yàn)證過。對于大型系統(tǒng)，比如使用了很長的轉(zhuǎn)移/輸送管道的，要檢查流程圖和管道圖 紙從而確認(rèn) 需要清洗的閥門，和是否有書面清潔規(guī)程。管道和閥門應(yīng)標(biāo)記，以便 操作人員識別。有時(shí)，閥門標(biāo)識不當(dāng)，無論在打印圖紙上和實(shí)物上，都會導(dǎo)致不 正確的清潔操作。在清潔工序的相關(guān)文件中，必須檢查是否包含了關(guān)鍵因素;確認(rèn)并控制每次生 產(chǎn)結(jié)束后 至清潔開始的時(shí)間間隔。這對于局部用藥物，懸浮劑和原料藥的生產(chǎn)尤 其重要的。因?yàn)闅埩粑锔稍锖?，會直接影響清潔的效果。無論是否使

10、用了在線清潔系統(tǒng)，都應(yīng)考慮設(shè)備清潔的微生物情況。這包括大量 的預(yù)防性 的措施，而不只是在染菌之后再除菌。應(yīng)有證明，常規(guī)清潔和設(shè)備保存 不會有微生物的繁殖。比如，設(shè)備在保存之前應(yīng)該干燥，清潔后不允許有任何積 水殘留其中。對于無菌工藝的設(shè)備，或者非無菌的但有助于微生物增長的產(chǎn)品，清潔之后還 可能需滅菌或消毒。雖然滅菌或消毒程序已超出了本指南的范圍，但要注意的 是，通過適當(dāng)?shù)那鍧嵑驮O(shè)備保存來控制微生物， 是對接下來的滅菌消毒工序能夠 達(dá)到無菌水平的保證。從/6無菌工藝應(yīng)控制熱原的觀點(diǎn)來說，這一點(diǎn)也特別重要。因?yàn)樵O(shè)備滅菌工藝不一 定能夠取得顯著的滅活或去除熱原的效果。書面清洗程序程序和文件要檢查驗(yàn)證后

11、的清洗方法是否具體、詳細(xì)，檢查需要記錄的項(xiàng)訂。我們曾見過 不少通用性的SOP,同時(shí)也見過其它使用批生產(chǎn)記錄或者記錄表格系統(tǒng)的，其要 求對每一步操作做出專門的文件記錄。根據(jù)系統(tǒng)的復(fù)雜程度、清洗方法以及操作 人員培訓(xùn)程度和能力的不同，各種清洗工作或規(guī)程所需的文件數(shù)量也會有所不 同。當(dāng)需要進(jìn)行更為復(fù)雜的清洗過程時(shí)，必須對關(guān)鍵的清洗工序做出記錄（如某些 原料藥合成工序）。在這點(diǎn)上，應(yīng)有專門的設(shè)備記錄，包括清洗人員姓名、評估時(shí) 間。然而，對 于相對簡單的清洗工作，僅記錄“全部清洗工作已經(jīng)被執(zhí)行”就足 夠了。其他因素，諸如清洗歷史、清洗后測出的殘留物水平、檢驗(yàn)結(jié)果的可變性等有 時(shí)也要記錄。例如，清洗之后的

12、殘留物水平具可變性，而乂認(rèn)定該清洗方法是可 接受的，則必須 證明清洗過程和工人操作的有效性。必須對清洗方法做出適當(dāng)?shù)脑u價(jià)，尤其是當(dāng)認(rèn)為工人操作有問題時(shí)，就要求有更為廣泛的文件（指導(dǎo)）和記 錄，并進(jìn)行更多的培訓(xùn)。分析方法應(yīng)確定用于殘留物或污染物檢測的分析方法的專屬性和靈敬度。借助于先進(jìn)的 分析技術(shù)，清洗和生產(chǎn)過程中極少的殘留物或污染物也能夠被檢測出來。即使檢 測不出污染物 或殘留物水平，也并不能說明清洗之后不存在殘留污染物，而只說 明樣品中沒有超過該分析方法靈敬度或檢驗(yàn)限之外的污染物。公司應(yīng)對分析方法 進(jìn)行挑戰(zhàn)性實(shí)驗(yàn)，即證明取 樣方法能夠從設(shè)備表面取回污染物，其收率是多少， 如50%, 90%等

13、。根據(jù)取樣結(jié)果再做出結(jié)論是必須的。取樣技術(shù)不當(dāng)也可能得出相 反的結(jié)論（見下文）。取樣可接受的通用取樣方法有兩種。最好是直接從設(shè)備表面取樣，另一種方法是取 漂洗水樣。a.表面直接取樣法檢查取樣器材的類型，以及其對檢測數(shù)據(jù)的影響，因?yàn)槿悠鞑目赡軙蓴_檢 測。例如，取樣拭子上的粘膠會干擾樣品的分析。因此，在驗(yàn)證初期，必須確保 使用適當(dāng)?shù)娜咏橘|(zhì)和溶媒（用于從取樣介質(zhì)中提取樣品），并且方便使用。直接取樣法的優(yōu)點(diǎn)在于:能夠?qū)ψ铍y清洗、能夠到達(dá)的表面清潔程度進(jìn)行評 價(jià)，從而建立單位面積上殘留物/污染物的接受水平。此外，還能夠取到“干的” 或不溶性殘留物樣品。b.漂洗液樣品漂洗液取樣法具有兩點(diǎn)優(yōu)勢：能夠?qū)?/p>

14、較大表面進(jìn)行取樣；能夠?qū)Φ竭_(dá)不到的系統(tǒng) 或日常 無法拆卸的部位進(jìn)行取樣并做出評價(jià)。其缺陷是:殘留物或污染物可能是不溶性或吸藏在設(shè)備中的。此時(shí)，可使用“臟點(diǎn)”類推法進(jìn)行評價(jià)。對于“臟點(diǎn)”清洗的評估，特別是有干的殘留物的，不能只檢 測漂洗水樣，而要檢查“臟點(diǎn)”，從而確定清洗是否干凈。當(dāng)直接檢測漂洗水樣用于清洗方法驗(yàn)證時(shí)，應(yīng)檢查是否直接檢測了漂洗水樣中 的殘留物或污染物。如若僅檢測漂洗水樣的水質(zhì)情況（即使符合藥典檢測方法）， 而不測定其可能存在的污染物，這種做法是不能接受的。常規(guī)生產(chǎn)的中控C.日常生產(chǎn)的中間控制監(jiān)測:一旦某清潔方法得到驗(yàn)證之后，日常監(jiān)測可使用間接檢測法，如電導(dǎo)率 檢測。對于原料藥生產(chǎn)

15、商來說，使用的反應(yīng)罐和離心機(jī)，大型設(shè)備之間的管道連 接，只能對其漂 洗液取樣。這種情況下，必須說明間接檢測法與設(shè)備狀況的相關(guān) 性。驗(yàn)證過程中，也應(yīng)有書面證明:用間接法檢測未清洗設(shè)備時(shí)，檢驗(yàn)結(jié)果能夠證 明該設(shè)備不能使用以及未清洗。即該檢測結(jié)果能夠得出不能夠接受當(dāng)前設(shè)備狀況 的結(jié)論。（反證法）限度的建立對于清潔方法是否得到了驗(yàn)證，不打算建立統(tǒng)一的接受標(biāo)準(zhǔn)和方法。這也不切 實(shí)際，F(xiàn)DA因?yàn)樵卺t(yī)藥工業(yè)中，原料藥、制劑產(chǎn)品以及設(shè)備種類太多。公司應(yīng)根據(jù)自身對 該藥品的了解建立合理的、實(shí)際可測的殘留限度。為了建立合理的限度，確定分 析方法的靈敬度十分重要。已有工業(yè)界代表在文獻(xiàn)或公開演講上提出一些檢測限 標(biāo)準(zhǔn)

16、，如lOppm;生物活性檢測限標(biāo)準(zhǔn)，如正常治療劑量的1/1000;或感官標(biāo)準(zhǔn)， 如“無可視殘留物”等。要檢查建立殘留限量標(biāo)準(zhǔn)的方式。不同于制劑產(chǎn)品是已知?dú)埩粑锏幕瘜W(xué)成分 （如來自于活性成份、非活性成份、洗滌劑等），原料藥可能會有部份反應(yīng)物和其 他副產(chǎn)物不能得知。在建立殘留限度時(shí)，僅關(guān)注主要反應(yīng)物的殘留限是不夠的， 因?yàn)槠渌瘜W(xué)變量可能更難以除去。此時(shí)，除化學(xué)分析之外，可能還需要薄層等 其它方法。在原料藥生產(chǎn)中，尤其是強(qiáng)效化學(xué)物質(zhì)，如某些笛類物質(zhì)，若不使用 專用設(shè)備，就必須考慮副產(chǎn)物殘留的問題。檢查的LI的是確保建立任何限度的依 據(jù)都是科學(xué)合理的。其它問題安慰劑為了評估和驗(yàn)證清潔方法，有些工廠在

17、相同設(shè)備、相同操作參數(shù)下生產(chǎn)安慰劑 （無效對照劑）。然后檢測分析該批安慰劑是否受到了殘留物的污染。然而，我們 已記錄了使用安慰劑進(jìn)行清潔驗(yàn)證的兒個(gè)問題。首先，無法肯定污染物是否均勻分布于生產(chǎn)系統(tǒng)內(nèi)。如出料閥或混料機(jī)泄槽受 到了污染，分布于安慰劑中的污染物可能不均勻，通常會集中在出料最初階段的 安慰劑中。此外，如果污染物或殘留物的粒度較大，在安慰劑中的分布也可能不 均勻。有些工廠假定殘留物會均勻地?fù)p耗于設(shè)備表面，這也是無效的結(jié)論。最終，任 何分析手段的能力都會因污染物的稀釋而受到削弱。III于這些問題的存在，安慰 劑驗(yàn)證法應(yīng)與漂洗液檢測或直接取樣檢測結(jié)合使用。清潔劑re only added t

18、o facilitate cleaning during the cleaningprocess Thus, they should be easily removable Otherwise, a different detergentshould be selected 若使用清潔劑或肥皂清潔，應(yīng)考慮檢測殘留物質(zhì)時(shí)可能會遇到的困難。一個(gè)常 見問題是清潔劑的組成成分。許多清潔劑供應(yīng)商不會提供詳細(xì)的配方，使用戶無 法評估其殘留物。與藥品殘留物一樣，工廠也應(yīng)評估該清潔過程對于去除殘留清 潔劑的有效性，這十分重要。然而，與藥品殘留物要求不同的是，清洗之后不得 有任何濃度的清潔劑殘留（或?qū)τ诟哽`敏度

19、的分析方法而言，其殘留濃度必須極 低）。清潔劑不是生產(chǎn)工序中的物質(zhì)，而僅僅是用于幫助清洗而加入的物質(zhì)。因 此，清潔劑應(yīng)易于清除。否則，應(yīng)選擇另一種類型的清潔劑。檢測直到清潔有些工廠的做法是，自清洗開始就一直重復(fù)地檢測和評估多次檢測結(jié)果，直到 潔凈為止。他們對設(shè)備和系統(tǒng)進(jìn)行取樣、檢測，再取樣、復(fù)測，直至得到一個(gè)“可接受”的殘留水 平。對于采用經(jīng)過驗(yàn)證的清潔方法對設(shè)備或系統(tǒng)進(jìn)行清洗 時(shí)，不應(yīng)采取這種重復(fù)取樣的做法。這種做法只有在極少數(shù)情況下可以接受。不 斷地檢測和取樣只能說明，所采用的清潔方法沒有得到驗(yàn)證。因?yàn)椴粩嗟膹?fù)測實(shí) 際上反映并記錄了這樣一個(gè)事實(shí)，即進(jìn)行低效的清洗之后，仍有超量的殘留物污 染

20、物存在。/Chank實(shí)例解讀：作為清洗驗(yàn)證（其實(shí)是任何研究活動(dòng)），其實(shí)最核心的還是回答以下的問題：Why?為什么要做清洗操作，How to clean?怎么清洗,清洗的方法是什么？What is the criteria?清洗到什么程度，怎么判斷已經(jīng)清洗干凈，What is the analysis method?清洗的檢測方法是什么，用什么方法判斷已經(jīng) 清洗好，When and where to sample?取樣的位置是什么，什么時(shí)間去取樣,頻率和 方法，用繞這兒個(gè)核心的問題，就可以把握清洗確認(rèn)或是清洗驗(yàn)證的關(guān)鍵了。為了說明這個(gè)問題，我們先舉一個(gè)最簡單的例子。假設(shè)一個(gè)化學(xué)反應(yīng)是A+B生成C

21、,其中的A+B的反應(yīng)介質(zhì)是乙醇，都在乙 醇中AB,易溶（溶解度為一毫升乙醇可以溶解10克以上的A,.B）。但是C不能 溶于乙醇在乙醇中不溶，一毫升乙醇只能溶解0.01克Co但是C在丙酮中可以 溶解，一毫升丙酮可以溶解10克以上的C）反應(yīng)還有一個(gè)已知的朵質(zhì)D（在乙醇 中不溶，一毫升乙醇只能溶 解0.01克D,但是D在丙酮中可以微溶，一毫升丙 酮可以溶解0.1克的D）o反應(yīng)中使用300公斤的A,加上240公斤的B,反 應(yīng)用的溶劑乙醇大約1000升。得到530公斤的C,和大約10公斤的Do一般 來說每批反應(yīng)會投入過量的A,大概330公斤，所以最后混合物中還有殘留的A大約30公斤。這是這個(gè)反應(yīng)的簡單描

22、述和背景介紹。我們先假設(shè)這個(gè)反應(yīng)罐（2000升的塘玻璃罐，假設(shè)表面積達(dá)到10.5平方米）是專用于 這一步反應(yīng)的，那么我們來看看怎么回答之前的那些問題：Why?為什么要做清洗操作，我們?yōu)槭裁匆M(jìn)行清洗呢，如果我們不對這個(gè)罐進(jìn)行清洗，反應(yīng)后，殘留在系 統(tǒng)中的物質(zhì)就有:A,B,C,D,和乙醇，這些物質(zhì)對于后續(xù)批號的反應(yīng)（因?yàn)槭菍Ｓ?，就做這一步反應(yīng)）來說，都是潛在的污染物?？紤]到反應(yīng)中使用的溶媒介質(zhì)是有機(jī)溶媒（乙醇）。所以首先可以排除考慮微生 物的污染可能（因?yàn)槲⑸锊粫龠@個(gè)系統(tǒng)中生存。一般只有存在水的系統(tǒng)才考慮 微生物的污染可能性）。你看看， 可能殘留的是最大量為330-300=30公斤， 由于在

23、乙醇中的溶解度很 低，AC,D基本上都會析出固體，而被轉(zhuǎn)移出去。這樣會有在容器壁上殘留的可能。由于 用量低，B且極易溶解于反應(yīng)液中，而且不是過量的物質(zhì)，即便有少量殘留，肯 定也就在反應(yīng)后殘 留的母液中去了，可以不考慮了。對于下一個(gè)批號（批）的生產(chǎn) 來說，這些殘留的A, 02C,就是主要的污染物?？紤]到母液1000升，可以溶解至少10000公斤的A或B,殘D留的30公斤A,基本上也都會溶解在母液系統(tǒng)中去了， 所以可以排除A的 殘留可能性。就只需要考慮C和D To由于C是易溶解于丙酮的，所以即便530公斤的C都?xì)埩粝聛恚疃嘈枰?3升的丙酮 就可以完全溶解了。如果全部殘留，公斤的D需要的丙酮大概是

24、100升。比較這D10兩個(gè)物質(zhì)在丙酮的溶解性質(zhì)，我們知道至少需要153升丙酮才可以全部溶解530公斤的C和10公斤的Do但是邏輯上分析，不可能有這么多的C和D殘 留（否則就不要生產(chǎn)了都被殘留下來污染下一批的生產(chǎn)了）。我們假設(shè)由于轉(zhuǎn)運(yùn)和 操作的不方便，殘留的物，質(zhì)占全部物質(zhì)的10%,那么實(shí)際上就殘留了53公斤的C和1公斤D,那么 只需要15.3升的丙酮就可以完全清洗設(shè)備了。但是常識也告訴我們，對于一個(gè)表 面積10。平米的5設(shè)備來說，一個(gè)2000L的大罐，15.3升的溶劑量連反應(yīng)罐的 底部才勉強(qiáng)可以覆蓋怎么可能去洗滌呢,所以，我們還是會選擇反應(yīng)罐1/5-1/3的量的溶劑去洗滌也就是最少400 ,升

25、的丙酮。我們可以發(fā)現(xiàn)這樣的話。升的丙酮基本可以完全洗滌干凈殘留的東 西了。400到現(xiàn)在我們其實(shí)還沒有回答為什么要清洗。其實(shí)你想如果我們不清洗，最直接 的后果就是殘留的53公斤的C和1公斤的D會留到下個(gè)批號530公斤的C（批）中去。我們02為了降低這樣的高達(dá)10%的上個(gè)批號的殘留，所以我們必須 去清洗。如果這個(gè)真的就是一個(gè)專用設(shè)備，你想，如果我們選用了400升的丙酮清洗To公斤53那么可能殘留下去的C（批號）就是0了，而01批號C中的雜質(zhì)D,按照之前的計(jì)01算，也是不會存在的了。這樣的一個(gè)專用設(shè)備你還需要驗(yàn)證嗎,顯然是不需要 了。你最多要做的就是，用400升的丙酮清洗后，在用點(diǎn)丙酮沖洗一下設(shè)備表

26、 面，分析以下沖洗 液來確認(rèn)這個(gè)沖洗液中不含D就可以了（這里由于D和C在 丙酮中的溶解度差100被，而他們的殘留量就差53倍，所以雜質(zhì)D變成了最 差的考慮對象，只要D沒有了，自C然就沒有了。大多數(shù)的悄況下，的溶解度 不會差距這么大，如果有盡量考慮C,D CD都易溶的溶劑來清洗，這樣C就可以作為考慮的對象了）。你完成這個(gè)部分的 討論和有一個(gè)這樣的沖洗液的檢測數(shù)據(jù)，就可以結(jié)束清洗確認(rèn)的活了，沒有FDA會要求你再去 做更加驗(yàn)證的活了。如果你覺得風(fēng)險(xiǎn)已經(jīng)收到控制了，對于專用設(shè) 備，清洗方面要干的活就結(jié)束了，下面的文字你可以不看了。好了，如果你實(shí)在是沒有信心，一定要驗(yàn)證，我們就繼續(xù)回答下面的問題。How

27、 to clean?怎么清洗，清洗的方法是什么？上面的討論也可以看出來了，升的丙酮自然就可以清洗干凈系統(tǒng)了。但是一次 就夠400了的事情是否，可以再多做兒次，那當(dāng)然了。你喜歡自然可以繼續(xù)。最差的情 況就是你做一次400升的丙酮，把罐子關(guān)閉后，攪拌丙酮，盡可能的讓丙酮接觸 到這個(gè)罐子的所有面積，這樣只要?dú)埩舻奈锪弦唤佑|這個(gè)溶劑就會溶解進(jìn)去了。你是否需要做其他的呢，當(dāng)然了。如果你愿意，你可以分兒次操作（比如每次少 點(diǎn)，每次用200升，洗2-3次,按照之前的計(jì)算都是可以的也是足夠的），也可 以采用加熱和回流的方法來增加溶解度和清洗的覆蓋面（溫度越高，溶解度越 大）。這些都是你愛怎么做就怎么做的了。但

28、是不管如何，這里你需要定一個(gè)方法 出來，一個(gè)固定的清洗方法出來，這個(gè)方法會在后續(xù)的驗(yàn)證取樣，以及最好的操 作SOP中變成一個(gè)固定的操作規(guī)程。比如我們選擇的清洗方法是，笫一次采用300升的丙酮攪拌均勻30分鐘后 放料，然后 第二次采用100升的丙酮沖洗罐表面。然后我們回答下一個(gè)問題What is the criteria?清洗到什么程度，怎么判斷已經(jīng)清洗干凈，你既然洗了，你怎么知道洗到什么程度算是干凈了，是可以接受的呢，我們這里 有兒個(gè)行業(yè)的標(biāo)準(zhǔn)可以用來參考。一個(gè)就是有名的0.10%,就是說洗到殘留的01批物料占02批物料不超過02批物料總量的0.10%,這個(gè)是從ICH Q3的未知雜 質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)來的

29、。那么如果02批物料的批量是530公斤，0.10%就是0.53公斤。 殘留的01批的C不能超過0. 54公斤，當(dāng)01批的C只有0. 53公斤的時(shí)候， 其中的01批的D就只有0.01公斤了。那么請問這個(gè)時(shí)候你需要考慮這個(gè)01批的嗎，它是遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于主成分02批C的0. 10%的含D量的，所以顯然可以不考慮(這也是我一直說的，主成分的雜質(zhì)D在后續(xù)批號 的標(biāo)準(zhǔn)計(jì)算的時(shí)候可以忽略不考慮的本質(zhì)原因)。好了，0.54公斤的01批的C是我們允許的最大的殘留量，那么在10.5平 米的表面上如果這些物料時(shí)均勻分布的，他們每25平方厘米 會殘留多少量呢，那就是(0. 54*1000g*25)/(10. 5*10000

30、)=0. 128g=128 mg.好，我們先到這里，休息一 下?？纯戳硪粋€(gè)行業(yè)的標(biāo)準(zhǔn)。一般來說對于那些活性物質(zhì)的，潛在毒性乂大的物質(zhì)，我們可能會用lOppm作為清洗已經(jīng)干凈的標(biāo)準(zhǔn)，也就是說批的殘留在批的中不能超過批的量的lOppm, 01C02C02C那就是最多只能殘留530kg*10PPm=5. 4克，一樣每25平方厘米會殘留多少 量呢,那就是(5. 4*lg*25)/(10. 5*10000)=1. 28 mg.也就是和前面的數(shù)據(jù)差了100倍(其實(shí)很好理解，0. 1%和lOppm就是相差100倍)如果你不幸生產(chǎn)的物料是高活性的物料，比如抗腫瘤的東西，比如激素的東 西，你知道即便是2ppm它

31、的毒性、活性就有了，那么你的標(biāo)準(zhǔn)就要比lOppm好 要低了，就是那個(gè)數(shù)字的1/5,也就是變成了0.256 mg.這就是第三個(gè)標(biāo)準(zhǔn)，根 據(jù)你的物質(zhì)生物活性標(biāo)準(zhǔn)來確認(rèn)。那么我們一般用的LI測標(biāo)準(zhǔn)有多么精細(xì)呢，老外很較真，其實(shí)有這個(gè)數(shù)據(jù)的， 據(jù)說是4mg/cm2 (參考以下文獻(xiàn)G. L. Four man and M. V. Mullen, Determining CleaningValidationAcceptance Limits for Pharmaceutical Manufacturing Operations, Pharm. Techno 1.17 (4),54-60 (1993),那么

32、也就是lOOmg,你發(fā)現(xiàn)沒有這個(gè)和這個(gè)例子中的之前0. 1%的標(biāo)準(zhǔn)很接近。對于微生物呢，你的標(biāo)準(zhǔn)怎么定呢，等下再說。因?yàn)檫@里沒有還涉及總的來說也就是回答這個(gè)問題的時(shí)候你需要建立的標(biāo)準(zhǔn)就是以上的四個(gè)標(biāo)準(zhǔn) 了。這是計(jì)算的標(biāo)準(zhǔn)，實(shí)際上最好你使用的方法足夠敬感可以到這些限度，否則 你的標(biāo)準(zhǔn)定了也白定。所以就有了下面的一個(gè)問題需要回答了：What is the analysis method?清洗的檢測方法是什么，用什么方法判斷已經(jīng) 清洗好，知道了吧，你要選的是可以敬感到檢測到那么低濃度的C的方法才可 以。C?滴定，HPL還是TLC,這些都不重要，只要你的方法足夠敏感可以分析檢測 到你之前回答上個(gè)問題的

33、限度的方法就可以。什么指標(biāo)和方法的敬感度相關(guān)，所 以你這個(gè)方法一定要驗(yàn)LOD證LOD的指標(biāo)。你怎么確認(rèn)這點(diǎn)，這是分析方法驗(yàn)證的環(huán)節(jié)了，你配一個(gè)濃度的C, g/ml,然 后等比lm例稀釋下去，知道某個(gè)濃度比如0. 5, 0. 25. 0. 125. 0. 0625.0. 03125. 0. 016mg, 0. 00&0. 004mg/ml,你發(fā)現(xiàn)到0. OOlmg/ml的時(shí)候，信噪比到了3,那么這個(gè)濃度就 是你的LOD了。（當(dāng)然可能更低）我們怎么把這個(gè)分析方法的LOD限度和之前假設(shè)的殘留標(biāo)準(zhǔn)聯(lián)系起來呢，發(fā)現(xiàn) 沒有其實(shí)這是一個(gè)問題從兩個(gè)方向拓展出來的，我們需要把他們聯(lián)系起來了。就 要看下面的問題回

34、答了。When and where to sample?取樣的位置是什么，什么時(shí)間去取樣，頻率和方法, 因?yàn)槭球?yàn)證，所以你需要再次描述你下你設(shè)定的清洗方法：第一次采用300升的丙酮攪拌均勻30分鐘后放料，然后第二次采用100升 的丙酮沖洗罐表面。用什么方法取樣，U測，但是不能作為唯一的方法。為什么，原因很簡單，有 些0K人是近視（不是每個(gè)人都可以看到4mg/cm2）,有些地方很暗，看不清楚，有些 材質(zhì)表面反光，看不清楚。為什么不能不用這個(gè)方法，也很簡單，有些時(shí)候，你就 洗不到，有些時(shí)候物料可能結(jié)塊在某個(gè)地方了。LI測的覆蓋面會大。有不少檢查 官會要求你們有照明設(shè)施來看，并要求證明那些邊角可以看

35、到，就是這個(gè)原因。就剩下兩個(gè)方法了，一個(gè)就是擦拭，一個(gè)就是漂洗液直接取樣。對于我們設(shè)定 的方法，你喜歡什么取樣方法呢，其實(shí)隨便你用。好吧，我們先簡單的，就用漂洗 液直接取樣吧（具體來說，這個(gè)漂洗的方法也需要詳細(xì)描述，比如是否需要把罐體 關(guān)閉狀態(tài)漂洗，還 是敞開式的沖洗，取樣的時(shí)候取的樣品是漂洗后，還是沖洗期 間，這些都涉及到你具體 的取樣操作，需要在驗(yàn)證記錄中詳細(xì)的交代）。我們洗了 兩次，那就取樣兩次吧。為了操作的方便，我們每次就取100毫升漂洗液好了。 因?yàn)槭瞧吹姆椒?，所以我們殘留的量就不需要折算容器的面積了。第一次清洗，我們可能殘留的量在這100毫升溶劑中的濃度時(shí)多少呢，公斤/300升5

36、3=0. 177g/ml,如果真的這么高的濃度，我們之前設(shè)定的方法檢測得到嗎, 那當(dāng)然別忘了我們的LOD是0.004mg/ml。笫二次漂洗呢，因?yàn)镃的溶解度很 大（毫升丙酮溶解110克C,公斤相當(dāng)于只需要5.3升丙酮就可以搞定了），所以 理論上53公斤在第一53次洗滌后，基本沒有殘留了，但是要知道可能之前300升的丙酮不會全部流岀罐外，不小心留了1升丙酮溶液在罐內(nèi)，那就是殘留了177克的物料0. 177/530=0. 033%,所以第二次100升的丙酮溶解完這些殘留的物質(zhì)后，我 們的取樣濃度會是多少啊，等于1. 77mg/ml吧用我們之前的方法也是檢測得出來的 吧,是的，可以。那么假設(shè)這個(gè)東，

37、西是這么多，算是洗干凈了嗎，第一次清洗后其實(shí)就干凈了0.177/530=0. 033%，第二次假設(shè)不小心乂留下來1升丙酮，那么就是殘留了1000*1.77mg/ml=l. 77g,就是0. 00177/530=3. 3ppm除非你這個(gè)的清洗標(biāo)準(zhǔn)是低于3. 3ppm,否則顯然你 不需要在.清洗了。對于原料藥來說，這個(gè)已經(jīng)很干凈了。如果我們采用的是擦拭的方法取樣的，那這里乂有了關(guān)于擦拭的方法的有效性 和代表性能高的問題了。討論代表性的時(shí)候，你就要詳細(xì)交代，你計(jì)劃在這個(gè)設(shè) 備的什么位置進(jìn) 行取樣，為什么在這些位置，為什么你認(rèn)為這些位置可以代表整個(gè) 設(shè)備的全部，并綜合考慮到了那些最難清洗到的部分,你需

38、要把這個(gè)設(shè)備的結(jié)構(gòu)圖 畫出來，并在你訃劃取樣的位置做好圖示。有效性就涉及到你需要做個(gè)模擬的擦 拭確認(rèn)了。你要找一塊和你要洗 的設(shè)備材質(zhì)一樣的物料來（一般可以找設(shè)備制造商 提供相同的物料），然后做成25cm2這樣的一個(gè)方塊，然后根據(jù)認(rèn)為的加入已知數(shù) 量的C物質(zhì)到這個(gè)25cm2中去（一般就是溶劑溶解后噴灑在表面，然后晾干）， 然后用一個(gè)棉簽來回進(jìn)行擦拭具體的擦拭路（線，擦拭次數(shù)，棋至是用的力量大 小，都需要詳細(xì)的描述。然后將這個(gè)棉簽溶解到指）定體積的指定溶劑中去，然后去分析這個(gè)溶劑中的C的濃度，算出C被擦下 來了多少數(shù)量，這個(gè)數(shù)量和你之前噴撒的C的數(shù)量的比值就是所謂的擦拭實(shí)驗(yàn)回 收率（一般可以接受

39、的范圍是50%-130%） o當(dāng)你確認(rèn)了你的擦拭方法有可以接受的回收率的時(shí)候。你就可以在你選定的那 兒個(gè)指定的位置進(jìn)行擦拭取樣了。當(dāng)然也一樣，在第一次清洗后，你就下去取 樣，選取一個(gè)一樣 大小面積25cm2的區(qū)域，按照之詢回收率方法一樣的擦拭方法 （方向，來回次數(shù)，力道大?。缓笥靡欢w積的溶劑來溶解，然后進(jìn)行HPLC的分析。于是你就有了一系列的數(shù)據(jù)出來了。你就知道，每個(gè)你選擇的具體位置 的殘留量大小了。如果你的棉簽都是溶解在100毫升的丙酮中的，平均回收率為67%（建議你做至少三個(gè)濃度的回收率涵蓋，你設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)的濃度。這個(gè)回收率說 明，如果你在設(shè)備表面如果實(shí)際殘留了100克的東西，擦拭回來的

40、東西只有67g）那么按照之前的計(jì)算，如果你的標(biāo)準(zhǔn)設(shè)定是0. 10%,算是清洗干凈的標(biāo)準(zhǔn)就 是128mg*67%/100ml =0. 86mg,/ml.如 果 是lOppm,那 這個(gè)濃 度就是0. 0086mg/ml.按照之前假設(shè)的LOD是0. 004mg/ml的標(biāo)準(zhǔn)，這些都是在LOD之上的，所以你就不需要擔(dān)心這個(gè)分析方法不能有效的分析出來了。至此，你就完成了你的驗(yàn)證，證明用你選擇的這個(gè)方法，可以很靈墩的檢查出 你的殘留的C,也可以有效的判斷實(shí)際樣品中是否有C殘留了。你就可以按照設(shè) 定的清洗方法去，清洗三次，每次按照取樣的位置和要求去取樣，然后進(jìn)行制定方法的分析，就會得到三組數(shù)據(jù)，來支持你判斷這

41、樣的清洗是否有效的結(jié)論了。 你的清洗驗(yàn)證就結(jié)束了。到這里可能你說，我都看懂了，也很簡單，因?yàn)槟阍O(shè)想的情況很簡單，是專用 設(shè)備，乂是化合物的合成反應(yīng)，乂不需要考慮微生物的污染。產(chǎn)品乂不會降解， 多么理想的狀態(tài)啊，當(dāng)然簡單了。我的清洗驗(yàn)證顧問說，我們的問題很復(fù)雜的， 我們是非專用的設(shè)備，我們的輔料會降解，還會粘結(jié)成塊，還會滋生微生物，用 的洗滌劑還必須有效去除才可 以。我們的情況用你的方法根本沒有辦法做的。你 是簡化的情況，說起來簡單，我們做起來很難的。真的如此嗎，如果你真的認(rèn)為如此，那么你就是根本沒有學(xué)會清洗驗(yàn)證的思路，我之前教你 的你都忘記了。好，我們來看看為什么這么說吧。我們把問題開始復(fù)雜化

42、，在這個(gè)罐里我們還進(jìn)行了另一個(gè)反應(yīng)X+Y二W（是雜 質(zhì)），X, Y V在丙酮中溶解，在乙醇，水中不溶解，反應(yīng)的介質(zhì)是丙酮（一樣是1000升）。生產(chǎn)的W是溶解于水，微溶于丙酮的，雜質(zhì)是不溶解于丙酮的，易溶 于水的。好了，這個(gè)設(shè)備V不是專用的了。公斤X和220公斤Y會生產(chǎn)出490公斤W和10公斤的V雜質(zhì)。280批量也不一樣了。這兩個(gè)系列的生產(chǎn)還是交義的。你怎么清洗好，好麻煩啊，A, B, C. D和X, Y. W. V有了八個(gè)物質(zhì)，溶劑系統(tǒng)也復(fù)雜了，這么多 丙酮，乙醇，水。選哪個(gè)好，別急，你還是先回答我的第一個(gè)問題吧：Why?為什么要做清洗操作，因?yàn)樯a(chǎn)C的時(shí)候我們不希望有殘留的A, B.D和之前

43、生產(chǎn)的X, Y. W, V影 響。（這個(gè)回答和之前的就多了四個(gè)物質(zhì)罷了），考慮的時(shí)候原則還是一樣的啊。 你就去找另一個(gè)溶劑出來，正好可以溶解或是正好對這些所有的東西都有一定的 溶解性能。比如你最后發(fā)現(xiàn)，中醇正好都可以溶解或是就V最難溶于屮醇（毫升 甲醇只能溶解0.1克V,毫升中11醇可以溶解1克W）,其他的都是易溶以上 的。你就只需要考慮V了。公斤的V會10全部留下來，最差的悄況就是全部留 下來了，那么就需要100升的甲醇來洗。而假設(shè)490公斤的W都留下來，你就 要用490升的甲醇來洗。顯然還和以前一樣，你就考慮你的W就可以了。還是定 位啥，就用500升的屮醇來洗肯定可以洗好了。有人說，你這樣的情況是正好