脫細(xì)胞真皮基質(zhì)分析報(bào)告報(bào)告材料

1、刖言大面積深度燒傷或其他創(chuàng)傷導(dǎo)致皮膚真皮成分缺損，通過(guò)刃厚小皮片或微粒 植皮技術(shù)雖然能使創(chuàng)面愈合，但由于其缺乏真皮層，導(dǎo)致愈合后創(chuàng)面彈性差，凸 凹不平，易攣縮且不耐摩擦。移植自體皮瓣或全厚及中厚皮片固然是最好的方法， 但大面積深度燒傷后，能作為供皮區(qū)的部位已很少，供皮區(qū)又將形成同等程度的 缺損，日后形成瘢痕。為解決這一問(wèn)題，國(guó)內(nèi)外學(xué)者致力于尋找一種理想的真皮 替代品。1. 脫細(xì)胞真皮基質(zhì)概述脫細(xì)胞真皮基質(zhì)（acellular dermal matrix ADM）是用物理、化學(xué)等方法將人或動(dòng)物皮膚中的表皮層及細(xì)胞成分徹底去除僅保留真皮中含膠原網(wǎng)架的細(xì) 胞外基質(zhì)。脫細(xì)胞真皮基質(zhì)由于完全沒(méi)有了細(xì)胞成

2、分和I、U型細(xì)胞相容性抗原的主要免疫活性,故一般不會(huì)誘發(fā)排斥反應(yīng)。但脫細(xì)胞真皮基質(zhì)保留有正常膠原的三維 結(jié)構(gòu)和真皮中含膠原支架的細(xì)胞外基質(zhì)能為組織細(xì)胞的再生提供一個(gè)良好的支 架結(jié)構(gòu)，具有創(chuàng)面覆蓋、組織缺損填充、引導(dǎo)組織再生和支架等作用。脫細(xì)胞真皮基質(zhì)中無(wú)細(xì)胞成分，免疫活性低，不會(huì)誘發(fā)免疫反應(yīng)。它保留了表 皮和真皮間的基底膜，移植后可形成真皮面和基底膜面?；啄っ婵芍С?jǐn)鄬悠?片的生長(zhǎng)，這對(duì)表皮細(xì)胞的增殖分化以及移植皮的外觀和功能起著重要作用，同時(shí)也有利于種子細(xì)胞的點(diǎn)附增殖等。真皮面利于脫細(xì)胞真皮基質(zhì)的快速血管化，為成纖維細(xì)胞的增殖提供支架，有助于膠原成分改建，促使成纖維細(xì)胞排列分布 規(guī)則,形成

3、結(jié)構(gòu)形態(tài)正常的膠原纖維，此外,還有誘導(dǎo)、調(diào)節(jié)宿主細(xì)胞和新生血管 長(zhǎng)入,促進(jìn)上皮形成等作用。此外,細(xì)胞外基質(zhì)蛋白也可以促進(jìn)表皮細(xì)胞的再生。 因此，脫細(xì)胞真皮基質(zhì)可作為真皮替代品，在為燒傷創(chuàng)面提供真皮的同時(shí)，可明顯 減少瘢痕形成。是一種理想的真皮替代材料。1.1脫細(xì)胞真皮基質(zhì)的制備方法根據(jù)來(lái)源的不同脫細(xì)胞真皮基質(zhì)分為異體脫細(xì)胞真皮基質(zhì)（來(lái)源主要為尸體 皮）和異種脫細(xì)胞真皮基質(zhì)（來(lái)源為動(dòng)物皮以豬皮和牛皮為主）兩種。制備過(guò)程 都是盡可能的去除具有抗原性的細(xì)胞（表皮細(xì)胞、毛囊、皮脂腺、汗腺及真皮中血管內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等）,保留完整的膠原纖維成分和組織基本結(jié)構(gòu)。早 期人們?cè)梅磸?fù)凍融法、胰酶消化法等

4、制備ADM但由于這些方法不能完全去除真皮內(nèi)細(xì)胞成分，導(dǎo)致AD移植后引起宿主強(qiáng)烈的排異反應(yīng)，而且制備過(guò)程也 過(guò)于復(fù)雜,因而并未廣泛開(kāi)展。目前AD啲制備方法主要有Dispasell-Trit on 法、 高滲鹽-SDS法、高滲鹽-酶消化法、NaO消蝕法等。只要條件控制適度,這些方法 均可制備出合乎條件的ADMDispasell-Trit on法皮膚標(biāo)本先經(jīng)Dispasell處理（2.5 U/ml溶液，4 C下作用48 h）, 再經(jīng) TritonX2100處理（0.5%溶液，室溫下作用48 h）可將皮膚中的細(xì)胞徹底脫除。 Dispasell主要分解IV型膠原和纖維粘蛋白，能裂解基底膜中的致密層。Di

5、spasell是一種快速有效的分離表皮與真皮的酶。標(biāo)本經(jīng)Dispasell處理后，表 皮真皮間的基底膜及皮膚附屬器官周?chē)Y(jié)締組織成分均被破壞。Dispasell同時(shí)也破壞了纖維細(xì)胞和結(jié)締組織基質(zhì)間的連結(jié)，更有利于TritonX2100的浸透。TritonX2100屬于非離子型表面活性劑，在溶液中穩(wěn)定性高，不易受強(qiáng)電解質(zhì)無(wú) 機(jī)鹽存在的影響，能與生物膜中的磷脂等脂質(zhì)結(jié)合形成復(fù)合物，溶解于溶液中。 同時(shí),TritonX2100中的疏水端也能和膜蛋白破壞生物膜，從而使細(xì)胞溶解破壞。 該方法細(xì)胞脫除徹底，但同時(shí)基底膜結(jié)構(gòu)破壞大，不利于上皮細(xì)胞底黏附生長(zhǎng)。 高滲鹽-SDS法皮膚標(biāo)本先經(jīng)高滲鹽作用（1 mo

6、l/LNaCl溶液，37 C下作用24h）使錨著細(xì)絲與表 皮基底細(xì)胞的半橋粒分離，從而完整地去除表皮。然后在未改變膠原結(jié)構(gòu)的情況 下，再用破膜劑十二烷基硫酸鈉（0.5%SDS溶液，室溫下作用1h）將皮膚標(biāo)本中的 細(xì)胞脫除。該方法細(xì)胞脫除也比較徹底，基底膜完整保留，但真皮中W型膠原、纖 維結(jié)合素、彈力素、HLA-D等含量較多，因此具有相對(duì)高的抗原性。 高滲鹽-NaOH肖蝕法該方法利用高滲鹽（1 mol/LNaCl溶液，37C下作用24h）去除表皮，同時(shí)再利 用NaOH低濃度溶液，室溫下作用18h）中堿離子的吸水作用奪取組織細(xì)胞的水分 使細(xì)胞脫水而死亡；最后使用超聲清洗儀清洗除去細(xì)胞。該方法細(xì)胞徹

7、底脫除，膠原纖維結(jié)構(gòu)完整，排列較正常松散。但要注意控制NaO的作用時(shí)間，如果過(guò)長(zhǎng) （如:36h）會(huì)使膠原變性，蛋白裂解,得到的是真皮皮漿。酶消化-去垢劑法該方法用胰蛋白酶 （0.25%溶液,4 C下作用24 h）,接著用TritonX2100 （0.1%溶液,室溫下作用8 h）, 最后用Dispase（560 units/L, 4 C下作用24 h）。 Ray等 7使用胰蛋白酶（0.25%溶液，室溫下作用18 h）和SDS（0.1%液，室溫 下作用12 h）,然后用胰蛋白酶再作用12h,最后用Dispase（560 units/L, 25C下 作用12 h）,制得的基質(zhì)均無(wú)細(xì)胞成分，膠原支架完

8、整。Stepl表皮和真皮的 分離高滲鹽法酶消化法Step2細(xì)胞成分去除去垢劑 法堿性化 學(xué)試劑 法生物酶 法脫細(xì)胞真皮基質(zhì)的制備流程1.2脫細(xì)胞真皮基質(zhì)的作用機(jī)制脫細(xì)胞真皮基質(zhì)保留了真皮與表皮之間的基底膜 ，故在應(yīng)用時(shí)可形成基底 膜與真皮兩個(gè)面?；啄っ嬷С忠浦灿谄浔砻娴臄鄬悠て纳L(zhǎng) ，對(duì)表皮細(xì)胞的 分化成熟和移植皮的外觀與功能起著非常重要的作用 ，亦有利于組織工程中種子 細(xì)胞或培養(yǎng)的角朊細(xì)胞的黏附、擴(kuò)展等。真皮面有利于ADM在宿主內(nèi)快速血管化, 為成纖維細(xì)胞的生長(zhǎng)提供良好的支架，有助于對(duì)脫細(xì)胞真皮膠原成分的改建，促 使成纖維細(xì)胞形成形態(tài)結(jié)構(gòu)及排列分布正常的膠原纖維 ，還具有調(diào)節(jié)、誘導(dǎo)、促

9、進(jìn)宿主細(xì)胞長(zhǎng)入,促進(jìn)纖維細(xì)胞增生、新生血管和上皮形成等作用。真皮成分的 多寡是創(chuàng)面愈合后彈性、外觀是否良好的重要因素，瘢痕形成的量及攣縮程度與 所植皮片中真皮的含量成反比。真皮含量不足時(shí)成纖維細(xì)胞只能合成不成熟的基 質(zhì)，此種基質(zhì)經(jīng)改建后即成為瘢痕組織。脫細(xì)胞真皮基質(zhì)作為一種真皮代替物能 被宿主接納，并被改建成為自體真皮組織,減少皮片移植后的瘢痕形成及攣縮， 能與全厚皮片移植后的效果相媲美。1.3脫細(xì)胞真皮基質(zhì)的臨床應(yīng)用范圍1. 腹壁外科（1）嬰幼兒腹壁缺損（2）嵌頓性或絞窄性腹壁疝（3）腹壁缺損伴有污染或感染創(chuàng)面（4）食道裂孔疝（5）盆底腹膜修復(fù)（6）腹腔室間隔綜合癥腹腔關(guān)閉（7）全腹壁切除或

10、缺損的腹壁再造（8）其他復(fù)雜的腹壁修復(fù)情況2. 泌尿外科長(zhǎng)段尿道狹窄或缺損、先天性尿道下裂、尿痿、膀胱擴(kuò)容、腎組織修補(bǔ)3. 結(jié)直腸、肛門(mén)外科（1）非急性期的單純性高位和低位肛痿（2）陰道前庭痿（3）對(duì)肛門(mén)括約肌功能影響大的肛痿和肛周感染（4）管狀消化道痿4 口腔科（1）口腔黏膜缺損 （2）牙周手術(shù)治療 （3）腭裂修復(fù)術(shù)中修復(fù)軟組織缺損 5整形外科（1）燒傷創(chuàng)面及燒傷后期瘢痕攣縮畸形的修復(fù)（2）慢性創(chuàng)面及病理性瘢痕的修復(fù)（3）面部整形及美容：矯正鼻畸形、眼瞼，結(jié)膜層缺損的修復(fù)、隆唇6耳鼻喉科（1）鼓膜穿孔的修補(bǔ)（2）鼻中隔穿孔的修補(bǔ)（3）咽部缺損的修復(fù)（4）腦脊液鼻漏修補(bǔ)及蝶鞍的修復(fù)1.4產(chǎn)品性

11、能要求和技術(shù)可行性檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)外觀目測(cè)規(guī)格型號(hào)企標(biāo)單位面積重量企標(biāo)酸堿度企標(biāo)干燥失重企標(biāo)耐溫性企標(biāo)熾灼殘?jiān)髽?biāo)重金屬含量GB/T 14233.1-2008降解時(shí)間GB/T 16886.13-2001抑菌性能GB/T 20944.3-2008致熱性GB/T16886.11-2011 附錄 F皮內(nèi)反應(yīng)試驗(yàn)GB/T 16886.10-2005生 遲發(fā)型超敏反應(yīng)GB/T 16886.10-2005物細(xì)胞毒性試驗(yàn)GB/T 16886.5-2003學(xué)全身毒性（急性）GB/T 16886.11-2011評(píng)亞慢性毒性GB/T 16886.11-2011價(jià)遺傳毒性GB/T 16886.3-2008植入GB/T 16

12、886.6-1997血液相容性GB/T 16886.4-2003無(wú)菌試驗(yàn)GB/T 14233.2-2005注：以上產(chǎn)品性能指標(biāo)需要進(jìn)行檢測(cè)之后才能設(shè)定企業(yè)本身的產(chǎn)品性能要求。從質(zhì)量控制角度，可從有脫細(xì)胞真皮生產(chǎn)能力的廠家采購(gòu)真皮材料， 根據(jù)公 司制定的原材料檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)采購(gòu)的真皮材料質(zhì)量進(jìn)行控制，質(zhì)量合格方能進(jìn)入生 產(chǎn)，然后利用公司現(xiàn)有分切設(shè)備，包裝等設(shè)備進(jìn)行生產(chǎn)，經(jīng)過(guò)滅菌后根據(jù)產(chǎn)品企 業(yè)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢驗(yàn)，檢驗(yàn)合格后方能出廠銷(xiāo)售。從關(guān)鍵技術(shù)控制角度，可對(duì)關(guān)鍵技術(shù)指標(biāo)進(jìn)行設(shè)定，要求供應(yīng)商達(dá)到采購(gòu)設(shè)定的性能技術(shù)要求，并制定原材料檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)，根據(jù)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)采購(gòu)的真皮材料進(jìn) 行關(guān)鍵技術(shù)指標(biāo)的檢驗(yàn)，檢驗(yàn)合格后方

13、能入庫(kù)生產(chǎn)。因此，終上所述，可吸收止血紗布技術(shù)可行，產(chǎn)品質(zhì)量可控2. 國(guó)內(nèi)外上市脫細(xì)胞真皮基質(zhì)現(xiàn)況異體脫細(xì)胞真皮基質(zhì)國(guó)內(nèi)外上市的 產(chǎn)品有美國(guó)Life Cell公司推 出的 Allodern，該產(chǎn)品的異體真皮來(lái)源于尸體皮。 臨床上應(yīng)用于燒傷，瘢痕切除創(chuàng)面 取得良好的效果。而國(guó)內(nèi)上市的產(chǎn)品主要有北京桀亞萊福生物技術(shù)有限公司生產(chǎn) 的J-1型異體脫細(xì)胞真皮基質(zhì)和北京清源偉業(yè)生物組織工程科技有限公司生產(chǎn)的 脫細(xì)胞異體真皮基質(zhì)醫(yī)用組織補(bǔ)片（商品名稱：瑞諾）。雖然異體脫細(xì)胞基質(zhì)在臨 床上的應(yīng)用效果較好但也存在著不可忽視的不足 （1）異體皮供體來(lái)源有限；（2） 有傳播人類(lèi)疾病的可能性；（3）存在著倫理問(wèn)題；（

14、4）需要低溫保存，保存運(yùn) 輸不方便。而目前，異種脫細(xì)胞真皮基質(zhì)在國(guó)內(nèi)以上市的有：（1）北京瑞克倍爾醫(yī)療器械有限公司出產(chǎn)的脫細(xì)胞真皮基質(zhì)敷料，該產(chǎn)品以豬皮為主要原材料，采用新型物理、化學(xué)及生化等方法除去了豬皮內(nèi)的各種雜 質(zhì)，完整地保留了真皮細(xì)胞外基質(zhì)的形態(tài)，保持原有的三維立體網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。主要 適用于1.外傷撕脫傷創(chuàng)面；2.骨外露、肌腱外露創(chuàng)面；3.慢性潰瘍、褥瘡及肉 芽創(chuàng)面；4.中厚皮供皮區(qū)創(chuàng)面；5.刃厚皮、郵票皮、微粒皮移植手術(shù)創(chuàng)面，6.燒傷創(chuàng)面、切削痂后的創(chuàng)面。（2） 江蘇優(yōu)創(chuàng)生物醫(yī)學(xué)科技有限公司生產(chǎn)的異種脫細(xì)胞真皮基質(zhì)敷料（商品 名：東慈真皮基質(zhì)）同樣該產(chǎn)品也是以豬皮為原料，經(jīng)病毒滅活與脫細(xì)

15、胞等工藝 制備而成具有三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，主要用于淺U度燒（燙）傷創(chuàng)面、供皮區(qū)創(chuàng)面、深度 燒傷切（削）痂創(chuàng)面，肉芽創(chuàng)面等創(chuàng)面的覆蓋治療。（3）江陰奔翔生物科技有限公司生產(chǎn)的豬皮脫細(xì)胞真皮基質(zhì)敷料，同樣也是以豬皮為原料經(jīng)純化處理冷凍干燥后成型加工而成，該產(chǎn)品適用于U度燒傷創(chuàng)面、供皮區(qū)創(chuàng)面覆蓋。（4）煙臺(tái)正海生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的口腔修復(fù)膜 （商品名：海奧）和皮膚 修復(fù)膜（商品名：海孚）兩者均為牛的皮膚組織經(jīng)一系列處理后制備的異種脫細(xì)胞真皮基質(zhì)，主要成分為膠原蛋白。前者適用于：1. 口腔內(nèi)軟組織淺層缺損的修 復(fù)。2腮腺手術(shù)中預(yù)防味覺(jué)出汗(Freys)綜合征。后者適用于：真皮層缺損的 創(chuàng)面修復(fù)。上述這些一

16、種脫細(xì)胞真皮基質(zhì)的作用機(jī)理與異體脫細(xì)胞真皮基質(zhì)類(lèi)似，臨床使用效果接近于異體脫細(xì)胞真皮基質(zhì)。同時(shí)，異種脫細(xì)胞真皮基質(zhì)的來(lái)源充足， 采用凍干工藝，常溫存儲(chǔ)，有效期長(zhǎng)，運(yùn)輸和存儲(chǔ)都更為方便。3. 技術(shù)難點(diǎn)制備中如何解決既要完全脫除細(xì)胞等抗原，又能最大限度的保留基底膜 等精品文檔，你值得期待(1)有效成分。小草急急忙忙的返青依舊；細(xì)雨迷迷濛濛的飄灑依舊。盈盈月下來(lái)，照亮你的山歌依舊；燦燦星升起，白楊樹(shù)綠影婆娑依舊。好風(fēng)似水，不驚你安眠依舊；鳥(niǎo)兒呢噥，愛(ài)的春天依舊?？晌?，望盡了我的花季，望盡了長(zhǎng)長(zhǎng)的一路落英繽紛呵！岑凱倫的綿綿春雨依舊，戴望舒的深深雨巷依舊!標(biāo)泊的船，尋找一個(gè)溫馨港口；孤寂的心，渴望一聲

17、溫暖問(wèn)候。是你在我最落寞的時(shí)候，把親切放在我左右；是你在我最失意的時(shí)候，把慰藉放在我心頭。紅酥手，黃藤酒；春如舊，人空瘦。蝴蝶雙飛影孤單，淚痕紅浥鮫綃透!那一葉小舟，那一雙眼眸，望穿了幾層山水幾層樓？那一縷相思，那一縷離愁，孤獨(dú)了多少暮風(fēng)晨雨后？春風(fēng)依舊，桃花依舊；春水依舊，明月依舊；渡口依舊，時(shí)光依舊。前世的情緣，今生的守候，多少次夢(mèng)里相逢，追憶難收，點(diǎn)點(diǎn)相思堆成無(wú)言的愁。紅塵多少愛(ài)，化作春水流。時(shí)光悠悠，歲月悠悠；韶華易逝真情難留。忘情川上誰(shuí)因離恨淚流？三生石前誰(shuí)為癡情消廋？縱然我望斷天涯孤獨(dú)依舊，在桃花飄落的渡口，我依然會(huì)為你采擷相思的紅豆；在海鷗飛翔的碼頭，我依然會(huì)為你升起祝福的星斗。

18、你若微笑，我青山嫵媚；你若安好，我綠水無(wú)憂!你若想我，我春風(fēng)盈袖；你若念我，我春住心頭!實(shí)用文檔實(shí)用文檔實(shí)用文檔正所謂：“穿金戴銀能怎樣，平平凡凡又如何，只要你能知足，就什么都不缺”要知道有的人雖然貧窮，但感覺(jué)很幸福；有的人雖然富有，但浮而不實(shí)，憂慮重重。當(dāng)然，人間的一切不幸?guī)缀醵寂c錢(qián)有關(guān)，但有了錢(qián)并不代表真的幸福。樂(lè)觀者的幸福府首皆拾，悲觀者的幸福高山仰止。幸福到底是什么呢？幸福就是一家老、小、平平安安、團(tuán)團(tuán)圓圓，即使吃著粗茶淡飯，也滿口香甜；幸福就是擁有一位甘苦與共、風(fēng)雨同舟的知心朋友，可以有福同享有難同當(dāng)；幸福就是擁有一顆平常心，過(guò)著比上不足，比下有余的日子，知足常樂(lè)！要知道幸福不是你有多少的鈔票，也不是你有幾座豪華的別墅、開(kāi)什么牌子的名車(chē)，手上佩戴多少克拉的鉆戒和多么華麗的衣裳。真正幸福的人，不一定擁有很多財(cái)富，但他們內(nèi)心一定 是踏實(shí)快樂(lè)的。所謂內(nèi)心的幸福，是過(guò)著和諧的正常生活所感到的快樂(lè)，這種幸福和滿足是任何金錢(qián)換不來(lái)的。幸福，其實(shí)很簡(jiǎn)單，不一定是高官顯祿，腰纏萬(wàn)貫，而是要懂得怎樣生活。只要您不放棄對(duì)美好生活的追求，一家人