實(shí)驗(yàn)四酶的特性實(shí)驗(yàn)

1、說明:本實(shí)驗(yàn)由四個(gè)小實(shí)驗(yàn)組成，其中第一個(gè)實(shí)驗(yàn)（酶的專一性）必做,其她三個(gè)小實(shí)驗(yàn)選做（至少做一個(gè)）寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告時(shí)，可以只寫需要做的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容！實(shí)驗(yàn)四酶的特性實(shí)驗(yàn)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康拿妇褪巧锎呋瘎矬w內(nèi)化學(xué)反應(yīng)基本上都就是在酶的催化下進(jìn)行的。通過本實(shí)驗(yàn)了解酶催化 的特異、溫度對酶活力的影響、PH對酶活力的影響、激活劑與抑制劑對酶活力的影響，對于進(jìn)一步 掌握代謝反應(yīng)及其調(diào)控機(jī)理具有十分重要的意義。二、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容本實(shí)驗(yàn)由酶的專一性實(shí)驗(yàn)、溫度對酶活力的影響、PH對酶活力的影響、激活劑與抑制劑對酶活力 的影響4個(gè)小實(shí)驗(yàn)組成。（一）酶的專一性1、實(shí)驗(yàn)原理本實(shí)驗(yàn)以唾液淀粉酶對淀粉與蔗糖的作用為例，來說明酶的專一性。淀

2、粉與蔗糖無還原性,唾液淀粉酶水解淀粉生成有還原性二糖的麥芽糖，但不能催化蔗糖的水解。用班氏試劑檢查糖的還原性。班氏試劑為堿性硫酸銅 ，能氧化具還原性的糖，生成磚紅色沉淀氧化亞銅。2、材料、儀器與試劑（1）材料：新鮮配制的唾液及其稀釋液（2）儀器：恒溫水??；沸水??；試管及試管架；試劑:2%蔗糖溶液;溶于0、3% NaCI的0、5%淀粉溶液；班氏試劑。3、實(shí)驗(yàn)操作（1）稀釋唾液的制備（D唾液的獲取用一次性杯取一定量的飲用水，漱口以清潔口腔，然后在嘴中含10-20ml飲用水，輕漱2min左右時(shí)間，即可獲得唾液的原液，內(nèi)含唾液淀粉酶。 不同稀釋度唾液的制備（用大試管）本實(shí)驗(yàn)需制備1:1、1：5、1:2

3、0、1:50、1:200等五個(gè)不同濃度的稀釋唾液。舉例說明：1：5指的就是稀釋了 5倍的唾液，制備方法為1份原液+4份蒸館水。1 ：20指的就是稀釋了 20倍的唾液，制備方法為1份1 ：5的稀釋液+3分蒸館水。（2）唾液淀粉酶最佳稀釋度的確定（嚴(yán)格按表1添加順序做實(shí)驗(yàn)，用小試管做實(shí)驗(yàn)）表1唾液淀粉酶稀釋度的確定AW 口 呂號1(1：1)2(1：5)3(1:20)4(1:50)5(1:200)0、5%淀粉溶液（滴）44444稀釋唾液（ml）1111137 C恒溫水浴中保溫5分鐘班氏試劑（ml）11111沸水浴23分鐘實(shí)驗(yàn)結(jié)果（2）淀粉酶的專一性表2淀粉酶專一性實(shí)驗(yàn)AW 口 呂號1234560、5

4、%淀粉溶液（滴）4*44-2%蔗糖溶液（滴）444最佳稀釋度唾液（ml）11煮沸過的最佳稀釋度唾液（ml）-11蒸鐳水（ml）11-37 C恒溫水浴中保溫5分鐘班氏試劑（ml）111111沸水浴23分鐘實(shí)驗(yàn)結(jié)果（二）溫度對酶活力的影響1、實(shí)驗(yàn)原理酶的催化作用受溫度的影響。在最適溫度下，酶的反應(yīng)速度最高。淀粉與可溶性淀粉遇碘呈藍(lán)色，糊精按其分子的大小，遇碘可呈藍(lán)色、紫色、暗褐色或紅色。最簡單的糊精遇碘不呈顏色，麥芽糖遇碘也不呈色，在不同溫度下，淀粉被唾液淀粉酶水的程度可由水解混合物遇碘呈現(xiàn)的顏色來判斷。2、材料、儀器與試劑(1) 材料:新鮮配制的唾液及其稀釋液(2) 儀器:試管及試管架；恒溫水浴

5、；冰浴;沸水??；試劑:溶于0、3% NaCI的0、5%淀粉溶液；KI I2碘溶液;3、實(shí)驗(yàn)操作取4支干燥的試管，編號后按下表加入試劑:表3溫度對酶活力影響實(shí)驗(yàn)加樣順序AW 口 呂號1230、5%淀粉溶液(ml)1、51、51、5最佳稀釋度唾液(ml)11煮沸過的稀釋唾液(ml)1實(shí)驗(yàn)結(jié)果搖勻后，將1、3號試管放入37C恒溫水浴中,2號試管放入冰水中。10分鐘后1、2、3管均取出 (將2號內(nèi)液體分兩半)，用KI 12溶液來檢驗(yàn)1、2、3號管內(nèi)淀粉被唾液淀粉酶水解的程度。記錄 并解釋結(jié)果。將2號管剩下的一半溶液放入37C水浴中繼續(xù)保溫10分鐘后，再用KI- 12液實(shí)驗(yàn)，記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果。(三) PH對

6、酶活力的影響1、實(shí)驗(yàn)原理酶的活力受環(huán)境PH值的影響極為顯著。不同酶的最適PH不同。本實(shí)驗(yàn)觀察PH對唾液淀粉酶活性的影響。唾液淀粉酶的最適PH約為6、8。2、材料、儀器與試劑(1) 材料:新配制的溶于0、3%NaCI的0、5%定粉溶液(2) 儀器:試管及試管架；吸管;滴管;恒溫水浴試劑:PH為5、0、5、8、6、8、8、0的緩沖溶液；KI b碘溶液;PH試紙3、實(shí)驗(yàn)操作表4 PH對酶活性的影響實(shí)驗(yàn)PH55.86.88、0緩沖液（ml）33330、5%淀粉溶液（ml）1111向第一個(gè)試管加入稀釋唾液后，置于37 C的恒溫水??；等待1 min后向第二個(gè)試管加入稀釋唾液，置于37C的恒溫水??；依次類推

7、！最佳稀釋度的唾液（ml）1111檢杳淀粉水解程度待向第四只試管加入唾液2min后，每隔1分鐘從第3管中取出1滴反應(yīng)液于白瓷板上，加碘液檢杳反應(yīng)進(jìn)行情況，直至反應(yīng)液變?yōu)榈攸S色（顏色有點(diǎn)淡即可）。即可從第一只試管依次添加碘液，時(shí)間間隔也為1 min 碘液（滴）12121212現(xiàn)象為了更好的理解表格內(nèi)容，下面對實(shí)驗(yàn)過程進(jìn)行說明各取緩沖液3ml,分別注入4支帶有號碼的試管，隨后于各個(gè)試管中添加0、5%淀粉溶液1ml與 最佳稀釋度的唾液1ml。向各試管中加入稀釋唾液的時(shí)間間隔為1分鐘。將各試管中物質(zhì)混勻”并依次置于37 C恒溫水浴中保溫。待向第4管加入唾液2ml后，每隔1分鐘由第3管取出一滴混合液，

8、置于白瓷板上，加1小滴 Kl応溶液。添加KIb溶液，檢驗(yàn)淀粉的水解程度。待混合變?yōu)榈攸S色（顏色有點(diǎn)淡即可）后,向所有試管依次添加滴KI12溶液。添加滴KI b溶液的時(shí)間間隔，從第1管起，亦 均為1分鐘。觀察各試管中物質(zhì)呈現(xiàn)的顏色，分析pH對唾液淀粉酶活性的影響。（四）唾液淀粉酶的活化及抑制1、實(shí)驗(yàn)原理酶的活性受活化劑或抑制劑的影響，氯離子為唾液淀粉酶的活化劑，銅離子為其抑制劑。2、材料、儀器與試劑（1）材料：0、5%淀粉溶液；最佳稀釋度的唾液（2）儀器:試管及試管架；恒溫水浴試劑:1%NaCI溶液;1%CuSO4溶液；KI b碘溶液；1%Na2SO4溶液3、實(shí)驗(yàn)操作（注意本實(shí)驗(yàn)的淀粉溶液為無NaCI的淀粉溶液）表4唾液淀粉酶活化及抑制實(shí)驗(yàn)AYV 口 呂號12340 5%淀粉溶液（ml）1、51、51、51、5最佳稀釋度唾液（ml）0、50、50、50、51%NaCI 溶液(ml)0、5-*1%CuS04 溶液(ml)*0、51% Na 2SO4 溶液(ml)0、5蒸館水（ml）0、537 C恒溫水浴中保溫10分鐘KI - b溶液（