2.1.1植物細(xì)胞工程的基本技術(shù)

1、專題2 細(xì)胞工程19961996年年7 7月月5 5日日, ,世界上第一只體細(xì)胞克隆世界上第一只體細(xì)胞克隆動(dòng)物動(dòng)物-克隆羊多利誕生于英國(guó)克隆羊多利誕生于英國(guó). .這樣的生物技術(shù)屬于何種生物工程？這樣的生物技術(shù)屬于何種生物工程？細(xì)胞工程細(xì)胞工程 細(xì)胞工程是指應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)和細(xì)胞工程是指應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)的原理和方法，通過分子生物學(xué)的原理和方法，通過細(xì)胞細(xì)胞水平水平或或細(xì)胞器水平細(xì)胞器水平上的操作，按照人上的操作，按照人們的意愿來們的意愿來改變改變細(xì)胞內(nèi)的細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)遺傳物質(zhì)或或獲得細(xì)胞產(chǎn)品獲得細(xì)胞產(chǎn)品的一門綜合科學(xué)技術(shù)。的一門綜合科學(xué)技術(shù)。什么叫細(xì)胞工程？包括哪兩什么叫細(xì)胞工程？包括

2、哪兩大領(lǐng)域？大領(lǐng)域？細(xì)細(xì)胞胞工工程程應(yīng)用的原理和方法應(yīng)用的原理和方法研究的水平研究的水平研究的目的研究的目的細(xì)胞生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)分子生物學(xué)細(xì)胞整體水平細(xì)胞整體水平或細(xì)胞器水平或細(xì)胞器水平按照人們的意愿來改按照人們的意愿來改變細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)變細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)或獲得細(xì)胞產(chǎn)品或獲得細(xì)胞產(chǎn)品概念概念分類分類植物細(xì)胞工程植物細(xì)胞工程動(dòng)物細(xì)胞工程動(dòng)物細(xì)胞工程所采用技術(shù)的理論基礎(chǔ) 植物細(xì)胞工程通常采用的技 術(shù) 手 段 植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng) 植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交植物細(xì)胞的全能性植物細(xì)胞的全能性2.12.1植物細(xì)胞工程植物細(xì)胞工程2.1.12.1.1植物細(xì)胞工程的基本技術(shù)植物細(xì)胞工程

3、的基本技術(shù)課標(biāo)要求：課標(biāo)要求：能力要求能力要求1 1、理解和掌握植物組織培養(yǎng)的操作過程、理解和掌握植物組織培養(yǎng)的操作過程內(nèi)容要求內(nèi)容要求1 1、理解植物細(xì)胞的全能性、理解植物細(xì)胞的全能性2 2、了解植物細(xì)胞脫分化和再分化的結(jié)果、了解植物細(xì)胞脫分化和再分化的結(jié)果3 3、掌握植物組織培養(yǎng)的特點(diǎn)、掌握植物組織培養(yǎng)的特點(diǎn)利用菊花花瓣微型繁殖培養(yǎng)的菊花利用菊花花瓣微型繁殖培養(yǎng)的菊花、植物細(xì)胞的花瓣怎樣長(zhǎng)成一株完整植株？、植物細(xì)胞的花瓣怎樣長(zhǎng)成一株完整植株？、為什么花瓣可以培養(yǎng)成完整的植株？、為什么花瓣可以培養(yǎng)成完整的植株？3 3、什么是細(xì)胞的全能性？、什么是細(xì)胞的全能性？4 4、全能性的大小關(guān)系？、全能

4、性的大小關(guān)系？5 5、體內(nèi)細(xì)胞為什么不表現(xiàn)全能性？、體內(nèi)細(xì)胞為什么不表現(xiàn)全能性？任務(wù)：閱讀教材第任務(wù)：閱讀教材第3333第二段第二段-34-34頁(yè)第一段頁(yè)第一段時(shí)間：時(shí)間：4 4分鐘分鐘問題：?jiǎn)栴}：花瓣屬于高度分化的組織，利用它培育新植花瓣屬于高度分化的組織，利用它培育新植株，首先要通過細(xì)胞的株，首先要通過細(xì)胞的脫分化脫分化過程，培養(yǎng)出過程，培養(yǎng)出愈傷組織愈傷組織，愈傷組織在一定的培養(yǎng)條件下，愈傷組織在一定的培養(yǎng)條件下，又可以又可以再分化再分化出幼根和芽，形成完整的小植出幼根和芽，形成完整的小植株。株。、植物細(xì)胞的花瓣怎樣長(zhǎng)成一株完整植株？、植物細(xì)胞的花瓣怎樣長(zhǎng)成一株完整植株？強(qiáng)調(diào)幾個(gè)概念：強(qiáng)

5、調(diào)幾個(gè)概念： 愈傷組織：愈傷組織：離體的植離體的植物器官、組織或細(xì)胞，在培物器官、組織或細(xì)胞，在培養(yǎng)一段時(shí)間以后，通過細(xì)胞養(yǎng)一段時(shí)間以后，通過細(xì)胞分裂，形成一種分裂，形成一種高度液泡化、高度液泡化、無定形狀態(tài)薄壁細(xì)胞無定形狀態(tài)薄壁細(xì)胞組成的組成的排列疏松無規(guī)則排列疏松無規(guī)則的組織。的組織。脫分化的實(shí)質(zhì)和結(jié)果分別是什么？脫分化的實(shí)質(zhì)和結(jié)果分別是什么？實(shí)質(zhì)實(shí)質(zhì)是使細(xì)胞恢復(fù)分裂能力。是使細(xì)胞恢復(fù)分裂能力。結(jié)果結(jié)果是形成愈傷組織。是形成愈傷組織。脫分化產(chǎn)生的愈傷組織在培養(yǎng)過程中重新脫分化產(chǎn)生的愈傷組織在培養(yǎng)過程中重新分化根或芽等器官的過程。分化根或芽等器官的過程。植物細(xì)胞的植物細(xì)胞的脫分化脫分化：就是

6、讓已經(jīng)分化的細(xì)胞，經(jīng)過誘導(dǎo)后，就是讓已經(jīng)分化的細(xì)胞，經(jīng)過誘導(dǎo)后，失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能而轉(zhuǎn)變成未分失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能而轉(zhuǎn)變成未分化細(xì)胞的過程。又稱去分化?；?xì)胞的過程。又稱去分化。植物細(xì)胞的植物細(xì)胞的再分化再分化：2 2、為什么花瓣這樣的離體器官、組、為什么花瓣這樣的離體器官、組織或細(xì)胞培養(yǎng)成完整植物體？織或細(xì)胞培養(yǎng)成完整植物體？植物細(xì)胞具有全能性。植物細(xì)胞具有全能性。3 3、什么是細(xì)胞的全能性？、什么是細(xì)胞的全能性？2 2、原理：、原理： 生物體的每一個(gè)細(xì)胞都生物體的每一個(gè)細(xì)胞都包含有該物包含有該物種所特有的全套遺傳物質(zhì)種所特有的全套遺傳物質(zhì)，都有發(fā)，都有發(fā)育成為完整個(gè)體所必需的全部基因

7、。育成為完整個(gè)體所必需的全部基因。受精卵受精卵生殖細(xì)胞生殖細(xì)胞體細(xì)胞體細(xì)胞3 3、大小：、大?。杭?xì)胞的全能性細(xì)胞的全能性植物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞植物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞 具有某種生物全部遺傳信息的任何一個(gè)細(xì)具有某種生物全部遺傳信息的任何一個(gè)細(xì)胞，都具有發(fā)育成完整生物體的潛能，也胞，都具有發(fā)育成完整生物體的潛能，也就是說每個(gè)生物細(xì)胞都具有全能性的特點(diǎn)就是說每個(gè)生物細(xì)胞都具有全能性的特點(diǎn)1 1、概念：、概念： 5 5、生物體內(nèi)的細(xì)胞為什么沒有表現(xiàn)出全、生物體內(nèi)的細(xì)胞為什么沒有表現(xiàn)出全能性，而是分化成不同的組織器官？能性，而是分化成不同的組織器官？ 6 6、已分化的細(xì)胞還有全能性嗎？、已分化的細(xì)胞還有全能性嗎？4

8、4、表現(xiàn)全能性的條件有哪些？、表現(xiàn)全能性的條件有哪些？在特定的時(shí)間和空間條件下，在特定的時(shí)間和空間條件下，基因基因選擇性的表達(dá)選擇性的表達(dá)的結(jié)果。的結(jié)果。分化的細(xì)胞遺傳物質(zhì)沒變，仍有發(fā)育成分化的細(xì)胞遺傳物質(zhì)沒變，仍有發(fā)育成完整個(gè)體的全套基因。完整個(gè)體的全套基因。 離體狀態(tài)離體狀態(tài) 有一定營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、激素和其他外界條件有一定營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、激素和其他外界條件 1 1、有關(guān)全能性的表述中，不正確的是、有關(guān)全能性的表述中，不正確的是 A.A.受精卵在自然條件下能使后代細(xì)胞形成完受精卵在自然條件下能使后代細(xì)胞形成完 整個(gè)體，因此全能性最高整個(gè)體，因此全能性最高 生物體內(nèi)細(xì)胞由于分化全能性不能表達(dá)生物體內(nèi)細(xì)胞由

9、于分化全能性不能表達(dá) 卵細(xì)胞和受精卵一樣，細(xì)胞未分化，全能卵細(xì)胞和受精卵一樣，細(xì)胞未分化，全能 性很高性很高 植物細(xì)胞離體培養(yǎng)在一定條件下能表現(xiàn)出植物細(xì)胞離體培養(yǎng)在一定條件下能表現(xiàn)出 全能性全能性C2.2.下列植物細(xì)胞全能性最高的是（下列植物細(xì)胞全能性最高的是（ ）A.A.形成層細(xì)胞形成層細(xì)胞 B.B.韌皮部細(xì)胞韌皮部細(xì)胞 C.C.木質(zhì)部細(xì)胞木質(zhì)部細(xì)胞 D.D.葉肉細(xì)胞葉肉細(xì)胞3 3下列細(xì)胞全能性最高的是（下列細(xì)胞全能性最高的是（ ）A A植物的卵細(xì)胞植物的卵細(xì)胞B B植物的精子細(xì)胞植物的精子細(xì)胞C C被子植物的受精卵被子植物的受精卵D D被子植物的的葉肉細(xì)胞被子植物的的葉肉細(xì)胞A C 要把一

10、塊組織通過培養(yǎng)得到一株完整植株, 應(yīng)該如何操作呢?這就涉及植物細(xì)胞工程中最基本的技術(shù)之一植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)、胡蘿卜組織培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)原理？、胡蘿卜組織培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)原理？、具體的方法步驟是什么？、具體的方法步驟是什么？3 3、完成完成P35P35討論題。討論題。4 4、總結(jié)出植物組織培養(yǎng)的概念？、總結(jié)出植物組織培養(yǎng)的概念？任務(wù)：閱讀教材第任務(wù)：閱讀教材第3434實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)-36-36頁(yè)第一段頁(yè)第一段時(shí)間：時(shí)間：5 5分鐘分鐘問題：?jiǎn)栴}：12345再分化再分化(愈傷組織愈傷組織)6脫分化脫分化植物組織培養(yǎng)技術(shù)植物組織培養(yǎng)技術(shù)實(shí)驗(yàn)：胡蘿卜的組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)：胡蘿卜的組織培養(yǎng)P34P34實(shí)驗(yàn)原理：實(shí)驗(yàn)原理：

11、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模郝詫?shí)驗(yàn)?zāi)康模郝圆牧嫌镁撸郝圆牧嫌镁撸郝?.1.根、莖、葉細(xì)胞具有全能性，在根、莖、葉細(xì)胞具有全能性，在一定的營(yíng)一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和激素養(yǎng)物質(zhì)和激素等條件下，可脫分化形成愈傷等條件下，可脫分化形成愈傷組織。組織。2.2.將愈傷組織轉(zhuǎn)接到含有不同激素（生長(zhǎng)將愈傷組織轉(zhuǎn)接到含有不同激素（生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素）的培養(yǎng)基上，就可再分素和細(xì)胞分裂素）的培養(yǎng)基上，就可再分化成胚狀體或叢芽，進(jìn)而發(fā)育成植株?；膳郀铙w或叢芽，進(jìn)而發(fā)育成植株。實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)步驟：將胡蘿卜根洗凈、削皮、切段將胡蘿卜根洗凈、削皮、切段消毒消毒（超凈工作臺(tái)或接種箱）：（超凈工作臺(tái)或接種箱）：制備外植體：制備外植體：選取有形成層的部位

12、選取有形成層的部位（1 1）離體組織塊的制備與消毒（制備外植體）離體組織塊的制備與消毒（制備外植體） 制備制備外植體外植體酒精溶液酒精溶液消毒消毒3030秒，秒，無菌水無菌水沖洗沖洗次氯酸鈉次氯酸鈉溶液處理溶液處理3030分鐘，沖洗分鐘，沖洗無菌濾紙吸去水分無菌濾紙吸去水分無菌解剖刀切片無菌解剖刀切片實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)步驟：將組織塊接種到培養(yǎng)基上（培養(yǎng)基成分將組織塊接種到培養(yǎng)基上（培養(yǎng)基成分見見P36“P36“小知識(shí)小知識(shí)” ），密封，貼標(biāo)簽，），密封，貼標(biāo)簽，注明材料名稱、接種日期等。注明材料名稱、接種日期等。（2 2）接種：）接種：（3 3）脫分化培養(yǎng)）脫分化培養(yǎng)條件：條件：23-2623-26

13、恒溫、避光恒溫、避光（5 5）試管苗、移栽）試管苗、移栽過程：過程：4 4天后，檢查污染情天后，檢查污染情況，況，1414天后觀察愈傷組織生天后觀察愈傷組織生長(zhǎng)狀況。繼續(xù)避光培養(yǎng)。長(zhǎng)狀況。繼續(xù)避光培養(yǎng)。（4 4）再分化培養(yǎng)）再分化培養(yǎng)一段時(shí)間后，將生長(zhǎng)良好的一段時(shí)間后，將生長(zhǎng)良好的愈傷組織轉(zhuǎn)接到分化培養(yǎng)基愈傷組織轉(zhuǎn)接到分化培養(yǎng)基上培養(yǎng)上培養(yǎng)(1)(1)在組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，為什么要強(qiáng)調(diào)所用在組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，為什么要強(qiáng)調(diào)所用器械的滅菌和實(shí)驗(yàn)人員的無菌操作？器械的滅菌和實(shí)驗(yàn)人員的無菌操作？ 植物組織培養(yǎng)中用到的培養(yǎng)基含有豐富的營(yíng)植物組織培養(yǎng)中用到的培養(yǎng)基含有豐富的營(yíng)養(yǎng)成分，有利于培養(yǎng)物的生長(zhǎng)，然而各種

14、雜菌同養(yǎng)成分，有利于培養(yǎng)物的生長(zhǎng)，然而各種雜菌同樣也可以在上面迅速生長(zhǎng)，所以植物組織培養(yǎng)過樣也可以在上面迅速生長(zhǎng)，所以植物組織培養(yǎng)過程中污染現(xiàn)象經(jīng)常發(fā)生。培養(yǎng)基程中污染現(xiàn)象經(jīng)常發(fā)生。培養(yǎng)基一旦被污染，迅一旦被污染，迅速生長(zhǎng)的各種雜菌不但會(huì)和培養(yǎng)物爭(zhēng)奪營(yíng)養(yǎng)，而速生長(zhǎng)的各種雜菌不但會(huì)和培養(yǎng)物爭(zhēng)奪營(yíng)養(yǎng)，而且這些雜菌生長(zhǎng)的過程中會(huì)生成大量對(duì)培養(yǎng)物有且這些雜菌生長(zhǎng)的過程中會(huì)生成大量對(duì)培養(yǎng)物有害的物質(zhì)，導(dǎo)致培養(yǎng)物迅速死亡。害的物質(zhì)，導(dǎo)致培養(yǎng)物迅速死亡。 造成培養(yǎng)基污染的因素有很多，一般包括：造成培養(yǎng)基污染的因素有很多，一般包括：外植體帶菌、培養(yǎng)瓶和各種器械滅菌不徹底、操外植體帶菌、培養(yǎng)瓶和各種器械滅菌不徹

15、底、操作人員操作不規(guī)范作人員操作不規(guī)范等。所以在組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中用等。所以在組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中用到的植物材料和各種器械都要進(jìn)行徹底地滅菌，到的植物材料和各種器械都要進(jìn)行徹底地滅菌，實(shí)驗(yàn)人員操作一定要規(guī)范，避免帶入雜菌。實(shí)驗(yàn)人員操作一定要規(guī)范，避免帶入雜菌。(2)(2)在本實(shí)驗(yàn)中，切取胡蘿卜塊根時(shí)強(qiáng)調(diào)要切在本實(shí)驗(yàn)中，切取胡蘿卜塊根時(shí)強(qiáng)調(diào)要切取含有形成層部分，原因是這部分容易誘導(dǎo)形取含有形成層部分，原因是這部分容易誘導(dǎo)形成愈傷組織。請(qǐng)思考一下，胡蘿卜的其他部分成愈傷組織。請(qǐng)思考一下，胡蘿卜的其他部分（如莖、葉、花），是否也能培養(yǎng)成小植株，（如莖、葉、花），是否也能培養(yǎng)成小植株，你能用實(shí)驗(yàn)的方法進(jìn)行驗(yàn)證嗎

16、？你能用實(shí)驗(yàn)的方法進(jìn)行驗(yàn)證嗎？胡蘿卜的其他部分（如莖、葉、花）也能胡蘿卜的其他部分（如莖、葉、花）也能培養(yǎng)再生形成小植株，只是誘導(dǎo)愈傷組織培養(yǎng)再生形成小植株，只是誘導(dǎo)愈傷組織比較困難。比較困難。(3)(3)請(qǐng)根據(jù)上面的實(shí)驗(yàn)過程，概括出植物組請(qǐng)根據(jù)上面的實(shí)驗(yàn)過程，概括出植物組織培養(yǎng)技術(shù)的流程簡(jiǎn)圖?？椗囵B(yǎng)技術(shù)的流程簡(jiǎn)圖。切取切取形成層形成層無菌無菌接種接種誘導(dǎo)愈傷組織誘導(dǎo)愈傷組織的形成的形成試管苗的形成試管苗的形成培養(yǎng)室培養(yǎng)培養(yǎng)室培養(yǎng)移栽移栽脫分化脫分化再分化再分化 植物組織培養(yǎng)就是在植物組織培養(yǎng)就是在無菌和人工控?zé)o菌和人工控制條件下制條件下，將，將離體離體的植物器官、組的植物器官、組織、細(xì)胞，培

17、養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)織、細(xì)胞，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予基上，給予適宜的培養(yǎng)條件適宜的培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)，誘導(dǎo)其產(chǎn)生其產(chǎn)生愈傷組織、叢芽愈傷組織、叢芽，最終形成，最終形成完整的植株完整的植株。植物組織培養(yǎng)技術(shù)植物組織培養(yǎng)技術(shù)1.1.概念概念2.2.理論基礎(chǔ)：理論基礎(chǔ)：植物細(xì)胞全能性植物細(xì)胞全能性離體的植物器官、組織或細(xì)胞離體的植物器官、組織或細(xì)胞愈傷組織愈傷組織根、芽根、芽植物體植物體外植體外植體脫分化脫分化植物激素：植物激素：細(xì)胞分裂素、生長(zhǎng)素細(xì)胞分裂素、生長(zhǎng)素再分化再分化3 3、過程、過程（需光）（需光）（避光）（避光）此過程細(xì)胞分裂為什此過程細(xì)胞分裂為什么方式？么方式？有絲分裂有絲分裂細(xì)胞

18、離體細(xì)胞離體 一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)（H2O、無機(jī)鹽、蔗糖、氨基酸等） 激素激素（生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素。比例大時(shí)形成根；比例小時(shí)形成芽）其他外界條件其他外界條件（適宜的溫度、PH、光照、無菌 ） 瓊脂瓊脂 （凝固劑形成固體培養(yǎng)基） 4.4.必要條件：必要條件：1.1.下列屬于組織培養(yǎng)的是：（下列屬于組織培養(yǎng)的是：（ ）( (多選多選) )A.A.花粉培養(yǎng)成單倍體植株花粉培養(yǎng)成單倍體植株B.B.芽發(fā)育成枝條芽發(fā)育成枝條C.C.根尖分生區(qū)發(fā)育成成熟區(qū)根尖分生區(qū)發(fā)育成成熟區(qū)D.D.未受精的卵發(fā)育成植株未受精的卵發(fā)育成植株A D2.2.在離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化形在離體的植物器官、組織或細(xì)

19、胞脫分化形成愈傷組織的過程中，下列哪一項(xiàng)條件是成愈傷組織的過程中，下列哪一項(xiàng)條件是不需要的（不需要的（ ）A.A.消毒滅菌消毒滅菌 B.B.適宜的溫度適宜的溫度C.C.充足的光照充足的光照 D.D.適宜的養(yǎng)料和激素適宜的養(yǎng)料和激素C3.3.要將胡蘿卜韌皮部細(xì)胞培養(yǎng)成完整植要將胡蘿卜韌皮部細(xì)胞培養(yǎng)成完整植株，不需要株，不需要A.A.具有完整細(xì)胞核的細(xì)胞具有完整細(xì)胞核的細(xì)胞B.B.離體狀態(tài)離體狀態(tài)C.C.導(dǎo)入外源基因?qū)胪庠椿駾.D.一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和激素一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和激素C4 4、植物組織培養(yǎng)形成的愈傷組織進(jìn)行培養(yǎng)，、植物組織培養(yǎng)形成的愈傷組織進(jìn)行培養(yǎng)， 又可以分化形成胚狀體或芽等器官，這一過

20、程又可以分化形成胚狀體或芽等器官，這一過程稱為稱為： A A、脫分化、脫分化 B B、去分化、去分化 C C、再分化、再分化 D D、脫分化或去分化、脫分化或去分化C因?yàn)椴煌N生物之間存在著生因?yàn)椴煌N生物之間存在著生殖隔離，所以用傳統(tǒng)的有性雜殖隔離，所以用傳統(tǒng)的有性雜交方法是不可能做到這一點(diǎn)的。交方法是不可能做到這一點(diǎn)的。于是，這些科學(xué)家試圖用這于是，這些科學(xué)家試圖用這兩種植物的體細(xì)胞進(jìn)行雜交，兩種植物的體細(xì)胞進(jìn)行雜交，來實(shí)現(xiàn)這一美妙的設(shè)想。來實(shí)現(xiàn)這一美妙的設(shè)想。這幅番茄這幅番茄馬鈴薯圖利用傳馬鈴薯圖利用傳統(tǒng)有性雜交方法能實(shí)現(xiàn)嗎？統(tǒng)有性雜交方法能實(shí)現(xiàn)嗎？為什么？為什么？任務(wù)：閱讀教材第任務(wù)：

21、閱讀教材第3636頁(yè)第一段頁(yè)第一段-37-37頁(yè)頁(yè)時(shí)間：時(shí)間：5 5分鐘分鐘問題：?jiǎn)栴}：1 1來自不同植物的體細(xì)胞完成融合，遇到的第一個(gè)來自不同植物的體細(xì)胞完成融合，遇到的第一個(gè)障礙是什么？如何解決？障礙是什么？如何解決？2 2融合的方法都有什么？融合的方法都有什么？3 3為什么兩個(gè)原生質(zhì)體能發(fā)生融合，這與細(xì)胞膜的為什么兩個(gè)原生質(zhì)體能發(fā)生融合，這與細(xì)胞膜的什么特性有關(guān)？什么特性有關(guān)？4 4如果兩個(gè)來源不同的原生質(zhì)體發(fā)生了融合，下一如果兩個(gè)來源不同的原生質(zhì)體發(fā)生了融合，下一步該做何處理（即融合成功的標(biāo)志是什么）？步該做何處理（即融合成功的標(biāo)志是什么）？5 5如何將雜種細(xì)胞培育成雜種植株？如何將雜

22、種細(xì)胞培育成雜種植株？6.6.什么是體細(xì)胞雜交？什么是體細(xì)胞雜交？7.7.體細(xì)胞雜交的優(yōu)勢(shì)和不足之處？體細(xì)胞雜交的優(yōu)勢(shì)和不足之處？(1)(1)(2)(3)(4)(5)植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交二、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)二、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)1 1、要想讓兩個(gè)來自不同植物的體細(xì)胞融、要想讓兩個(gè)來自不同植物的體細(xì)胞融合在一起，遇到的第一個(gè)障礙是什么？如合在一起，遇到的第一個(gè)障礙是什么？如何解決？何解決？細(xì)胞壁阻礙著細(xì)胞間的雜交細(xì)胞壁阻礙著細(xì)胞間的雜交用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁，從用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁，從而獲得具有活力的原生質(zhì)體而獲得具有活力的原生質(zhì)體2 2、融合的方法都有什么？、融合的方法

23、都有什么？人工誘導(dǎo)人工誘導(dǎo)方法方法物理法：離心、振動(dòng)、電激物理法：離心、振動(dòng)、電激化學(xué)法：一般用聚乙二醇化學(xué)法：一般用聚乙二醇（PEGPEG）作誘導(dǎo)劑）作誘導(dǎo)劑3 3、原生質(zhì)體能融合與細(xì)胞膜的什么特、原生質(zhì)體能融合與細(xì)胞膜的什么特性有關(guān)？性有關(guān)？細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性二、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)二、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)4 4、融合成功的標(biāo)志是什么？、融合成功的標(biāo)志是什么？雜種細(xì)胞再生出細(xì)胞壁雜種細(xì)胞再生出細(xì)胞壁二、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)二、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)5 5、如何將雜種細(xì)胞培育成雜種植株？、如何將雜種細(xì)胞培育成雜種植株？植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)原生質(zhì)體融合后，會(huì)形成幾種原生質(zhì)體融合后，會(huì)形成幾

24、種細(xì)胞類型？細(xì)胞類型？在實(shí)際操作過程中，是把許多馬鈴在實(shí)際操作過程中，是把許多馬鈴薯的原生質(zhì)體和許多番茄的原生質(zhì)薯的原生質(zhì)體和許多番茄的原生質(zhì)體放在一起，讓它們自由融合，再體放在一起，讓它們自由融合，再?gòu)闹泻Y選出所需的雜種細(xì)胞。從中篩選出所需的雜種細(xì)胞。A AB BB-BB-BA-BA-BA-AA-A類型類型雜雜種種植植株株融合的融合的原生質(zhì)原生質(zhì)體體ABAB再再生生出出細(xì)細(xì)胞胞壁壁脫脫分分化化愈愈傷傷組組織織再再分分化化1 1、過程、過程植物細(xì)胞的融合植物細(xì)胞的融合植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)植物細(xì)胞植物細(xì)胞A原生質(zhì)體原生質(zhì)體B原生質(zhì)體原生質(zhì)體A雜種雜種細(xì)胞細(xì)胞AB去去 壁壁去去 壁壁人人工工誘誘導(dǎo)導(dǎo)方法？方法？促進(jìn)融合促進(jìn)融合的方法？的方法？融合融合完成完成的的標(biāo)志標(biāo)志植物細(xì)胞植物細(xì)胞B二、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)二、植物體細(xì)胞雜