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1、一、基因工程的工具及其操作程序一、基因工程的工具及其操作程序1 1基因工程的基本工具基因工程的基本工具限制酶限制酶DNADNA連接連接酶酶載體載體作用作用切割目的基切割目的基因和載體因和載體連接連接DNADNA片段,形成片段,形成重組重組DNADNA攜帶目的基攜帶目的基因進(jìn)入受體因進(jìn)入受體細(xì)胞細(xì)胞作用作用部位部位兩核苷酸的脫氧核糖與磷兩核苷酸的脫氧核糖與磷酸間形成的磷酸二酯鍵酸間形成的磷酸二酯鍵限制酶限制酶DNADNA連接酶連接酶載體載體作用作用特點(diǎn)特點(diǎn)( (條件條件) )(1)(1)識(shí)別特定識(shí)別特定的核苷酸序的核苷酸序列列(2)(2)在特定位在特定位點(diǎn)上切割點(diǎn)上切割(1)(1)E Ecoli

2、coli DNADNA連接酶連接酶只連接黏性只連接黏性末端末端(2)T(2)T4 4DNADNA連連接酶連接黏接酶連接黏性末端和平性末端和平末端末端(1)(1)能在宿主細(xì)能在宿主細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定存在并胞內(nèi)穩(wěn)定存在并大量復(fù)制大量復(fù)制(2)(2)有多個(gè)限制有多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)酶切割位點(diǎn)(3)(3)具有特殊的具有特殊的標(biāo)記基因標(biāo)記基因常用常用類型類型EcoREcoR限制限制酶酶SmaSma限制限制酶酶E Ecolicoli DNA DNA連接酶連接酶T T4 4DNADNA連接連接酶酶質(zhì)粒、噬菌體、質(zhì)粒、噬菌體、動(dòng)植物病毒動(dòng)植物病毒基因工程基因工程的工具的工具限制酶限制酶主要存在于原核生物中主要存在于原核

3、生物中具有專一性具有專一性(識(shí)別序列識(shí)別序列)切開(kāi)切開(kāi)DNA分子的磷酸二酯鍵分子的磷酸二酯鍵DNA連連接酶接酶連接磷酸二酯鍵連接磷酸二酯鍵種類種類E.coliDNA連接酶連接酶T4 DNADNA連接酶連接酶運(yùn)載運(yùn)載工具工具具備的具備的條件條件結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,大小適中大小適中能在宿主細(xì)胞中自能在宿主細(xì)胞中自我復(fù)制并穩(wěn)定存在我復(fù)制并穩(wěn)定存在具一個(gè)至多個(gè)限制酶切位點(diǎn)具一個(gè)至多個(gè)限制酶切位點(diǎn)具標(biāo)記基因具標(biāo)記基因質(zhì)粒、質(zhì)粒、噬菌體衍生物、動(dòng)植物病毒噬菌體衍生物、動(dòng)植物病毒1、種類:、種類:2、作用部位:、作用部位:兩類兩類Ecoli DNA連接酶連接酶(黏)(黏)T4 DNA連接酶(黏連接酶(黏,平)

4、平)磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵 基因表達(dá)載體的構(gòu)建基因表達(dá)載體的構(gòu)建核心核心 基因表達(dá)載體的組成:基因表達(dá)載體的組成: 目的基因目的基因+ +啟動(dòng)子啟動(dòng)子+ +終止子終止子+ +標(biāo)記基因標(biāo)記基因啟動(dòng)子:一段有特殊結(jié)構(gòu)的啟動(dòng)子:一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段,位于基因的首端,片段,位于基因的首端,它是它是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位,有了它才能驅(qū)動(dòng)基的部位,有了它才能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出因轉(zhuǎn)錄出mRNA,最終獲得,最終獲得所需要的蛋白質(zhì)。所需要的蛋白質(zhì)。終止子:也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的終止子:也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNADNA片段,位片段,位于基因的尾端,使轉(zhuǎn)錄在所需要的地主停止下來(lái)。于基因的尾端,使

5、轉(zhuǎn)錄在所需要的地主停止下來(lái)。目的基因目的基因載體載體限制性內(nèi)切酶限制性內(nèi)切酶限制性內(nèi)切酶限制性內(nèi)切酶T4 DNA連接酶連接酶15C重組體重組體載體自連載體自連目的基因目的基因 自連自連目的基因與運(yùn)載體結(jié)合目的基因與運(yùn)載體結(jié)合基因表達(dá)載體的構(gòu)建基因表達(dá)載體的構(gòu)建核心核心質(zhì)粒質(zhì)粒DNADNA分子分子一個(gè)一個(gè)切口切口兩個(gè)兩個(gè)黏性末端黏性末端兩個(gè)兩個(gè)切口切口獲得目的基因獲得目的基因DNA DNA 連接酶連接酶重組重組DNADNA分子(重組質(zhì)粒)分子(重組質(zhì)粒)同一種同一種 限制酶限制酶將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞方法:方法:將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞:將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞: 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法

6、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法(雙子葉植物和祼子植物)(雙子葉植物和祼子植物)、基因槍法基因槍法(單子葉植物)(單子葉植物)、花粉管通道法花粉管通道法將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞 顯微注射法顯微注射法將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞 感受態(tài)細(xì)胞(感受態(tài)細(xì)胞(用用CaCa2+2+處理);電激或熱激處理);電激或熱激目的基因的檢測(cè)與鑒定目的基因的檢測(cè)與鑒定分子水平檢測(cè):分子水平檢測(cè): 檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNADNA上是否插入上是否插入了目的基因:了目的基因: 方法方法DNADNA分子雜交分子雜交 檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNAmRN

7、A: 方法方法DNADNA分子雜交分子雜交 檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì):檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì): 方法方法抗原抗原抗體雜交抗體雜交 (如果有,表示目的基因已經(jīng)進(jìn)行了翻譯)(如果有,表示目的基因已經(jīng)進(jìn)行了翻譯)蛋白質(zhì)工程與基因工程比較蛋白質(zhì)工程與基因工程比較項(xiàng)目項(xiàng)目蛋白質(zhì)工程蛋白質(zhì)工程基因工程基因工程區(qū)區(qū)別別過(guò)過(guò)程程預(yù)期蛋白質(zhì)功能預(yù)期蛋白質(zhì)功能設(shè)計(jì)設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)推推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列找到對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸找到對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列序列獲取目的基因獲取目的基因構(gòu)建基因構(gòu)建基因表達(dá)載體表達(dá)載體將目的基因?qū)⒛康幕驅(qū)胧荏w細(xì)胞入受體細(xì)胞目的基因的目的基因的

8、檢測(cè)與鑒定檢測(cè)與鑒定實(shí)實(shí)質(zhì)質(zhì)定向改造或生產(chǎn)人類所定向改造或生產(chǎn)人類所需蛋白質(zhì)需蛋白質(zhì)定向改造生物的遺傳特性定向改造生物的遺傳特性,以獲得人類所需的生物,以獲得人類所需的生物類型或生物產(chǎn)品類型或生物產(chǎn)品結(jié)結(jié)果果生產(chǎn)自然界沒(méi)有的蛋白生產(chǎn)自然界沒(méi)有的蛋白質(zhì)質(zhì)一般是生產(chǎn)自然界已有的一般是生產(chǎn)自然界已有的蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)聯(lián)系聯(lián)系蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上延伸出來(lái)的第二蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上延伸出來(lái)的第二代基因工程。對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)的改造或制造新的蛋白代基因工程。對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)的改造或制造新的蛋白質(zhì),必須通過(guò)基因修飾或基因合成實(shí)現(xiàn)質(zhì),必須通過(guò)基因修飾或基因合成實(shí)現(xiàn)1.1.下列是對(duì)各種與基因工程有關(guān)的酶的

9、敘述,不下列是對(duì)各種與基因工程有關(guān)的酶的敘述,不正確的是(正確的是( ) A ADNADNA連接酶能將連接酶能將2 2個(gè)具有末端互補(bǔ)的個(gè)具有末端互補(bǔ)的DNADNA片段連接在一起片段連接在一起 B BPCRPCR反應(yīng)體系中引物的作用是反應(yīng)體系中引物的作用是DNADNA聚合酶聚合酶的作用的起點(diǎn)的作用的起點(diǎn) C C限制性內(nèi)切酶可識(shí)別一小段特殊的核苷酸限制性內(nèi)切酶可識(shí)別一小段特殊的核苷酸序列,并在特定位點(diǎn)切割序列,并在特定位點(diǎn)切割 DD逆轉(zhuǎn)錄酶是以核糖核苷酸為原料,以逆轉(zhuǎn)錄酶是以核糖核苷酸為原料,以RNARNA為模板合成互補(bǔ)為模板合成互補(bǔ)DNADNAD D5 5/ /3 3/ /G GG GT TC

10、C3 3/ /5 5/ /G GA AC CC C5 5/ /3 3/ /A AG G引物引物5 5/ /3 3/ /G GG G引物引物PCRPCR原理原理變性變性復(fù)性復(fù)性延伸延伸RNA-DNA雜化雙鏈雜化雙鏈 A 逆轉(zhuǎn)錄酶細(xì)胞內(nèi)復(fù)制逆轉(zhuǎn)錄酶細(xì)胞內(nèi)復(fù)制 B 試管內(nèi)合成試管內(nèi)合成cDNA逆轉(zhuǎn)錄酶逆轉(zhuǎn)錄酶: :以脫氧核苷三磷酸為底物,從5到3合成cDNA,反應(yīng)需要引物 逆轉(zhuǎn)錄酶具有逆轉(zhuǎn)錄酶具有3 3種酶活力:種酶活力:它可利用它可利用RNARNA為模板合成互補(bǔ)為模板合成互補(bǔ)DNADNA鏈,形成鏈,形成RNA-DNARNA-DNA雜化分子(雜化分子(RNARNA指導(dǎo)的指導(dǎo)的DNADNA聚合酶聚合酶

11、活活性);性);它以新合成的它以新合成的DNADNA為模板合成另一條互補(bǔ)為模板合成另一條互補(bǔ)DNADNA鏈,形成鏈,形成DNADNA雙鏈分子(雙鏈分子(DNADNA指導(dǎo)的指導(dǎo)的DNADNA聚合酶聚合酶活性);活性);具有具有核糖核酸酶核糖核酸酶活性,專門水解活性,專門水解RNA-DNARNA-DNA雜化雜化分子中的分子中的RNARNA鏈。鏈。2.2.重組人的胰島素原基因生產(chǎn)胰島素時(shí),首先重組人的胰島素原基因生產(chǎn)胰島素時(shí),首先要獲得目的基因,一般不使用下面哪種方法要獲得目的基因,一般不使用下面哪種方法A.A.利用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),擴(kuò)增所需要的目的基利用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),擴(kuò)增所需要的目的基因因B.B.

12、用化學(xué)方法合成目的基因用化學(xué)方法合成目的基因C. C. 構(gòu)建基因組文庫(kù),從文庫(kù)中調(diào)取目的基因構(gòu)建基因組文庫(kù),從文庫(kù)中調(diào)取目的基因D.D.直接從細(xì)胞總直接從細(xì)胞總DNADNA中分離目的基因中分離目的基因人教版人教版p9p9目的基因的獲取目的基因的獲取從基因文庫(kù)中獲取目的基因從基因文庫(kù)中獲取目的基因基因組文庫(kù);部基因組文庫(kù);部分基因組文庫(kù)(如分基因組文庫(kù)(如C CDNADNA文庫(kù))利用文庫(kù))利用PCRPCR技術(shù)擴(kuò)增技術(shù)擴(kuò)增目的基因目的基因, ,此外,化學(xué)方法直接合成目的基因此外,化學(xué)方法直接合成目的基因D3.3.有關(guān)載體的敘述不正確的是有關(guān)載體的敘述不正確的是A A載體將目的基因帶入到受體細(xì)胞中,

13、自我載體將目的基因帶入到受體細(xì)胞中,自我復(fù)制或整合到受體復(fù)制或整合到受體DNADNA上上 B B構(gòu)建基因文庫(kù)時(shí),含不同插入片段的載體構(gòu)建基因文庫(kù)時(shí),含不同插入片段的載體在受體菌中能夠儲(chǔ)存并克隆目的基因在受體菌中能夠儲(chǔ)存并克隆目的基因C C攜帶目的基因的載體不必有遺傳標(biāo)記基因攜帶目的基因的載體不必有遺傳標(biāo)記基因(基因表達(dá)載體不必有特殊的遺傳標(biāo)記基因)(基因表達(dá)載體不必有特殊的遺傳標(biāo)記基因)DD基因表達(dá)載體必須有基因表達(dá)載體必須有RNARNA聚合酶識(shí)別和結(jié)聚合酶識(shí)別和結(jié)合的特定部位合的特定部位C人教版人教版P12P12頁(yè)頁(yè)4. 4. 下列關(guān)于基因表達(dá)載體構(gòu)建的相關(guān)下列關(guān)于基因表達(dá)載體構(gòu)建的相關(guān)敘述

14、,不正確的是敘述,不正確的是( () )A A需要限制酶和需要限制酶和DNADNA連接酶連接酶B B必須在細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行必須在細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行C C抗生素抗性基因可作為標(biāo)記基因抗生素抗性基因可作為標(biāo)記基因DD啟動(dòng)子位于目的基因的首端啟動(dòng)子位于目的基因的首端B B5.5.近年來(lái)基因工程的發(fā)展非常迅猛,科學(xué)近年來(lái)基因工程的發(fā)展非常迅猛,科學(xué)家可以用家可以用DNADNA探針和外源基因?qū)氲姆椒ㄟM(jìn)行探針和外源基因?qū)氲姆椒ㄟM(jìn)行遺傳病的診斷和治療,下列做法中不正確的是遺傳病的診斷和治療,下列做法中不正確的是 ( ) A.A.用用DNADNA探針檢測(cè)鐮刀型細(xì)胞貧血癥探針檢測(cè)鐮刀型細(xì)胞貧血癥 B.B.用用DNADNA

15、探針檢測(cè)病毒性肝炎探針檢測(cè)病毒性肝炎 C.C.用導(dǎo)入外源基因的方法治療半乳糖血癥用導(dǎo)入外源基因的方法治療半乳糖血癥 D.D.用基因替換的方法治療用基因替換的方法治療2121三體綜合征三體綜合征D6.6.下列關(guān)于大腸桿菌的描述,不正確下列關(guān)于大腸桿菌的描述,不正確的是的是A.A.屬于原核生物屬于原核生物 B.B.是基因工程常用的載體是基因工程常用的載體 C.C.代謝類型是異養(yǎng)兼性厭氧型代謝類型是異養(yǎng)兼性厭氧型 D.D.可在人體內(nèi)增殖可在人體內(nèi)增殖浙科版選一浙科版選一P19“P19“大腸桿菌是革蘭氏陰性、兼性厭氧的大腸桿菌是革蘭氏陰性、兼性厭氧的腸道桿菌??梢郧忠u腸粘膜并產(chǎn)生毒腸道桿菌??梢郧忠u腸

16、粘膜并產(chǎn)生毒素。是基因工程技術(shù)中被廣泛采用的工具素。是基因工程技術(shù)中被廣泛采用的工具”B7.7.蛋白質(zhì)工程的基本操作程序中正確的是蛋白質(zhì)工程的基本操作程序中正確的是合成蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)合成蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu) DNADNA的脫氧核苷的脫氧核苷酸序列酸序列 mRNA mRNA 蛋白質(zhì)預(yù)期功能蛋白質(zhì)預(yù)期功能 推推測(cè)氨基酸序列測(cè)氨基酸序列 蛋白質(zhì)的預(yù)期結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)的預(yù)期結(jié)構(gòu) A A B BC C DDC7.7.蛋白質(zhì)工程的基本操作程序中正確的是蛋白質(zhì)工程的基本操作程序中正確的是合成蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)合成蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu) DNADNA的脫氧核苷酸序列的脫氧核苷酸序列 mRNA mRNA 蛋白質(zhì)預(yù)期功蛋白質(zhì)預(yù)期功能能

17、推測(cè)氨基酸序列推測(cè)氨基酸序列 蛋白質(zhì)的預(yù)期結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)的預(yù)期結(jié)構(gòu) A A B BC C D D(1 1)從生物體中分離純化目的蛋白;)從生物體中分離純化目的蛋白;(2 2)借助核磁共振和)借助核磁共振和X X射線晶體衍射等手射線晶體衍射等手段,盡可能地了解蛋白質(zhì)的二維重組和段,盡可能地了解蛋白質(zhì)的二維重組和三維晶體結(jié)構(gòu)三維晶體結(jié)構(gòu); ;(3 3)測(cè)定其氨基酸序列;)測(cè)定其氨基酸序列;(4 4)設(shè)計(jì)各種處理?xiàng)l件,了解蛋白質(zhì)的結(jié))設(shè)計(jì)各種處理?xiàng)l件,了解蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)變化,包括折疊與去折疊等對(duì)其活性構(gòu)變化,包括折疊與去折疊等對(duì)其活性與功能的影響;與功能的影響;(5 5)設(shè)計(jì)編碼該蛋白的基因改造方案,如)

18、設(shè)計(jì)編碼該蛋白的基因改造方案,如點(diǎn)突變;點(diǎn)突變;(6 6)分離、純化新蛋白,功能檢測(cè)后投入)分離、純化新蛋白,功能檢測(cè)后投入實(shí)際使用。實(shí)際使用。蛋白質(zhì)工程的主要步驟通常包括:蛋白質(zhì)工程的主要步驟通常包括:8. 8. 下列關(guān)于蛋白質(zhì)工程的說(shuō)法,正確的是下列關(guān)于蛋白質(zhì)工程的說(shuō)法,正確的是( () )A A蛋白質(zhì)工程是在分子水平上對(duì)蛋白質(zhì)分蛋白質(zhì)工程是在分子水平上對(duì)蛋白質(zhì)分子直接進(jìn)行操作子直接進(jìn)行操作B B蛋白質(zhì)工程能生產(chǎn)出自然界中不曾存在蛋白質(zhì)工程能生產(chǎn)出自然界中不曾存在過(guò)的新型蛋白質(zhì)分子過(guò)的新型蛋白質(zhì)分子C C對(duì)蛋白質(zhì)的改造是通過(guò)直接改造相應(yīng)的對(duì)蛋白質(zhì)的改造是通過(guò)直接改造相應(yīng)的mRNAmRNA來(lái)

19、實(shí)現(xiàn)的來(lái)實(shí)現(xiàn)的DD蛋白質(zhì)工程的流程和天然蛋白質(zhì)合成的蛋白質(zhì)工程的流程和天然蛋白質(zhì)合成的過(guò)程是相同的過(guò)程是相同的B9.9.限制性內(nèi)切酶能識(shí)別特定的限制性內(nèi)切酶能識(shí)別特定的DNADNA序列并進(jìn)序列并進(jìn)行剪切,不同的限制性內(nèi)切酶可以對(duì)不同行剪切,不同的限制性內(nèi)切酶可以對(duì)不同的核酸序列進(jìn)行剪切?,F(xiàn)以的核酸序列進(jìn)行剪切?,F(xiàn)以3 3種不同的內(nèi)切種不同的內(nèi)切酶(酶(X X、T T、Z Z)對(duì))對(duì)6.2kb6.2kb大小的大小的DNADNA分子分子進(jìn)行剪切,并用凝膠電泳分離各核酸片段,進(jìn)行剪切,并用凝膠電泳分離各核酸片段,結(jié)果如圖結(jié)果如圖6 6所示,則由此可推斷該片斷的酶所示,則由此可推斷該片斷的酶切圖譜是切

20、圖譜是 ( )D(1)首先根據(jù))首先根據(jù)Y的凝膠電泳結(jié)果推測(cè)的凝膠電泳結(jié)果推測(cè)Y的酶的酶切圖譜,即下圖。切圖譜,即下圖。(2)根據(jù))根據(jù)Y+Z的凝膠電泳結(jié)果推測(cè)的凝膠電泳結(jié)果推測(cè)Z的酶切的酶切圖譜。由于存在圖譜。由于存在1.0片段片段,所以所以Z切割的是切割的是5.2片段;綜合片段;綜合Z和和Y+Z的凝膠電泳結(jié)果得知的凝膠電泳結(jié)果得知3.6片段消失,則可推測(cè)片段消失,則可推測(cè)Z的一個(gè)酶切位點(diǎn),另的一個(gè)酶切位點(diǎn),另一個(gè)無(wú)法確定。一個(gè)無(wú)法確定。 (3)根據(jù))根據(jù)X+Y的凝膠電泳結(jié)果及圖的凝膠電泳結(jié)果及圖1,可推測(cè)出,可推測(cè)出X將將5.2片段切割成片段切割成3.5和和1.7兩個(gè)片段,兩個(gè)片段,1.0

21、片段則片段則被切割成被切割成0.3和和0.7兩個(gè)片段如圖兩個(gè)片段如圖3 根據(jù)根據(jù)X的凝膠電泳結(jié)果,可推測(cè)出圖的凝膠電泳結(jié)果,可推測(cè)出圖3.1正確。正確。 4)總結(jié),至此,推測(cè)結(jié)果如圖)總結(jié),至此,推測(cè)結(jié)果如圖4所示:所示:(5)根據(jù))根據(jù)X的凝膠電泳結(jié)果可推測(cè)出的凝膠電泳結(jié)果可推測(cè)出X的第的第二個(gè)酶切位點(diǎn)有兩種可能,如圖二個(gè)酶切位點(diǎn)有兩種可能,如圖5根據(jù)根據(jù)X+Z的凝膠電泳結(jié)果,由于沒(méi)有的凝膠電泳結(jié)果,由于沒(méi)有1.6片段,片段,所以可推測(cè)出圖所以可推測(cè)出圖5.1正確。正確。(6)根據(jù))根據(jù)Z和和X+Z的凝膠電泳結(jié)果,可推測(cè)的凝膠電泳結(jié)果,可推測(cè)出出Z的第二個(gè)酶切位點(diǎn)的位置。即的第二個(gè)酶切位點(diǎn)的

22、位置。即1010下圖是將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)爰?xì)菌下圖是將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)爰?xì)菌B B細(xì)胞內(nèi)制造細(xì)胞內(nèi)制造“工工程菌程菌”的示意圖。已知細(xì)菌的示意圖。已知細(xì)菌B B細(xì)胞內(nèi)不含質(zhì)粒細(xì)胞內(nèi)不含質(zhì)粒A A,也不含,也不含質(zhì)粒質(zhì)粒A A上的基因。判斷下列說(shuō)法正確的是(上的基因。判斷下列說(shuō)法正確的是( ) A.A.將重組質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌將重組質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌B B常用的方法是顯微注射法常用的方法是顯微注射法 B.B.將完成導(dǎo)入過(guò)程后的細(xì)菌涂布在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)將完成導(dǎo)入過(guò)程后的細(xì)菌涂布在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上,能生長(zhǎng)的只是導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的細(xì)菌基上,能生長(zhǎng)的只是導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的細(xì)菌 C.C.將完成導(dǎo)入過(guò)程后

23、的細(xì)菌涂布在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上,將完成導(dǎo)入過(guò)程后的細(xì)菌涂布在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上,能生長(zhǎng)的就是導(dǎo)入了質(zhì)粒能生長(zhǎng)的就是導(dǎo)入了質(zhì)粒A A的細(xì)菌的細(xì)菌 D.D.目的基因成功表達(dá)的標(biāo)志是受體細(xì)胞能在含有氨芐青霉目的基因成功表達(dá)的標(biāo)志是受體細(xì)胞能在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng) C11. 11. 科研人員通過(guò)蛋白質(zhì)工程來(lái)設(shè)計(jì)改變酶的構(gòu)象。在研科研人員通過(guò)蛋白質(zhì)工程來(lái)設(shè)計(jì)改變酶的構(gòu)象。在研究溶菌酶的過(guò)程中,得到了多種突變酶,測(cè)其酶究溶菌酶的過(guò)程中,得到了多種突變酶,測(cè)其酶50%50%發(fā)生發(fā)生變性時(shí)的溫度(變性時(shí)的溫度(TmTm),部分結(jié)果見(jiàn)下表:),部分結(jié)果見(jiàn)下表:酶酶 半胱氨酸(半胱氨酸

24、(CysCys)的位置和數(shù)目)的位置和數(shù)目 二硫鍵二硫鍵數(shù)目數(shù)目 Tm/ Tm/ 野生型野生型T4T4溶菌酶溶菌酶 Cys54, Cys97 Cys54, Cys97 無(wú)無(wú) 41.9 41.9 突變酶突變酶C C Cys21, Cys142 Cys21, Cys142 1 152.952.9突變酶突變酶F F Cys3, Cys9, Cys21, Cys97, Cys3, Cys9, Cys21, Cys97, Cys142, Cys164Cys142, Cys1643 365.5 65.5 溶菌酶熱穩(wěn)定性的提高,是通過(guò)改變?nèi)芫笩岱€(wěn)定性的提高,是通過(guò)改變和增加得以實(shí)現(xiàn)的。從和增加得以實(shí)現(xiàn)的。

25、從熱穩(wěn)定性高的酶的氨基酸序列出發(fā),利用方法獲熱穩(wěn)定性高的酶的氨基酸序列出發(fā),利用方法獲得目的基因,通過(guò)基因工程的手段,可以生產(chǎn)自然界中不存在得目的基因,通過(guò)基因工程的手段,可以生產(chǎn)自然界中不存在的蛋白質(zhì)。的蛋白質(zhì)。(注:(注:CysCys上角的數(shù)字表示半胱氨酸在肽鏈中的位置)上角的數(shù)字表示半胱氨酸在肽鏈中的位置)半胱氨酸的位置和數(shù)目半胱氨酸的位置和數(shù)目二硫鍵的數(shù)二硫鍵的數(shù)目目人工合成(化學(xué))人工合成(化學(xué))離體的植物器官、組織或細(xì)胞離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化脫分化愈傷組織愈傷組織再分化再分化芽、根芽、根植物體植物體植物組織培養(yǎng)的過(guò)程植物組織培養(yǎng)的過(guò)程融合的融合的原生質(zhì)原生質(zhì)體體ABAB再

26、再生生壁壁脫脫分分化化愈愈傷傷組組織織再再分分化化植物細(xì)胞的融合植物細(xì)胞的融合植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)植物細(xì)胞植物細(xì)胞A A植物細(xì)胞植物細(xì)胞B B原生質(zhì)體原生質(zhì)體B B原生質(zhì)體原生質(zhì)體A A雜種雜種細(xì)胞細(xì)胞AB去壁去壁去壁去壁人人工工誘誘導(dǎo)導(dǎo)雜雜種種植植株株融合完成的標(biāo)志融合完成的標(biāo)志植物體細(xì)胞雜交技術(shù)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)過(guò)程過(guò)程12.12.下列與細(xì)胞工程技術(shù)相關(guān)的表下列與細(xì)胞工程技術(shù)相關(guān)的表述中,不正確的是述中,不正確的是 A.A.植物組織培養(yǎng)技術(shù)的理論基礎(chǔ)植物組織培養(yǎng)技術(shù)的理論基礎(chǔ)是細(xì)胞的全能性是細(xì)胞的全能性B.B.植物體細(xì)胞雜交技術(shù)可以克服植物體細(xì)胞雜交技術(shù)可以克服常規(guī)的遠(yuǎn)緣雜交不親和障礙

27、常規(guī)的遠(yuǎn)緣雜交不親和障礙C.C.動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的基本原理相同融合的基本原理相同D.D.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基成分基本相同所用的培養(yǎng)基成分基本相同DD13.13.下列有關(guān)植物組織培養(yǎng)的敘述,正確的是下列有關(guān)植物組織培養(yǎng)的敘述,正確的是A A愈傷組織是一團(tuán)有特定結(jié)構(gòu)和功能的薄壁愈傷組織是一團(tuán)有特定結(jié)構(gòu)和功能的薄壁細(xì)胞細(xì)胞B B二倍體植株的花粉經(jīng)脫分化與再分化后得二倍體植株的花粉經(jīng)脫分化與再分化后得到穩(wěn)定遺傳的植株到穩(wěn)定遺傳的植株C C用人工薄膜將胚狀體、愈傷組織等分別包用人工薄膜將胚狀體、愈傷組織等分別包裝可制成人

28、工種子裝可制成人工種子 DD植物耐鹽突變體可通過(guò)添加適量植物耐鹽突變體可通過(guò)添加適量NaClNaCl的的培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選而獲得培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選而獲得D D14. 14. 某組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的愈傷組織被真菌嚴(yán)重污染,為某組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的愈傷組織被真菌嚴(yán)重污染,為查找污染原因設(shè)計(jì)了查找污染原因設(shè)計(jì)了4 4個(gè)實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)條件除圖示外其他個(gè)實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)條件除圖示外其他均相同。下列各圖表示實(shí)驗(yàn)結(jié)果,據(jù)圖得出結(jié)論不正均相同。下列各圖表示實(shí)驗(yàn)結(jié)果,據(jù)圖得出結(jié)論不正確的是確的是 ( )A A污染主要是培養(yǎng)基滅菌時(shí)間短造成的污染主要是培養(yǎng)基滅菌時(shí)間短造成的B B污染主要來(lái)源于組織培養(yǎng)所用的離體組織污染主要來(lái)源于組織培養(yǎng)所

29、用的離體組織C C調(diào)節(jié)培養(yǎng)基調(diào)節(jié)培養(yǎng)基pHpH不能解決污染問(wèn)題不能解決污染問(wèn)題DD調(diào)節(jié)培養(yǎng)溫度不能解決污染問(wèn)題調(diào)節(jié)培養(yǎng)溫度不能解決污染問(wèn)題A 1515下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)的敘述中,正確的是(下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)的敘述中,正確的是( ) A.A.培養(yǎng)基中添加蔗糖的目的是提供營(yíng)養(yǎng)和調(diào)節(jié)滲透壓培養(yǎng)基中添加蔗糖的目的是提供營(yíng)養(yǎng)和調(diào)節(jié)滲透壓 B.B.離體器官或組織細(xì)胞都須在光下才能形成愈傷組織離體器官或組織細(xì)胞都須在光下才能形成愈傷組織 C.C.同一植株不同細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)獲得的愈傷組織基因相同同一植株不同細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)獲得的愈傷組織基因相同 D.D.生長(zhǎng)素導(dǎo)致愈傷組織形成而細(xì)胞分裂素使細(xì)胞分生長(zhǎng)素導(dǎo)致愈傷組織形

30、成而細(xì)胞分裂素使細(xì)胞分化化16.16.下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)的敘述中,錯(cuò)誤的是下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)的敘述中,錯(cuò)誤的是 A.A.培養(yǎng)基中添加蔗糖的目的是提供營(yíng)養(yǎng)和調(diào)節(jié)滲透壓培養(yǎng)基中添加蔗糖的目的是提供營(yíng)養(yǎng)和調(diào)節(jié)滲透壓B.B.培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素影響愈傷組織的生長(zhǎng)和分化培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素影響愈傷組織的生長(zhǎng)和分化C.C.離體器官或組織的細(xì)胞都必須通過(guò)脫分化才能形成愈傷組織離體器官或組織的細(xì)胞都必須通過(guò)脫分化才能形成愈傷組織D.D.同一株綠色開(kāi)花植物不同部位的細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)獲得的愈傷組織同一株綠色開(kāi)花植物不同部位的細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)獲得的愈傷組織基因相同基因相同AD17.17.有關(guān)原生質(zhì)體的分有關(guān)

31、原生質(zhì)體的分離和培養(yǎng)的敘述不正離和培養(yǎng)的敘述不正確的是確的是A A將除菌后的葉片剪將除菌后的葉片剪碎放入反應(yīng)液中碎放入反應(yīng)液中B B反應(yīng)液的濃度都比反應(yīng)液的濃度都比細(xì)胞液濃度低細(xì)胞液濃度低C C反應(yīng)液中應(yīng)含有纖反應(yīng)液中應(yīng)含有纖維素酶和果膠酶維素酶和果膠酶DD可觀察胞質(zhì)環(huán)流檢可觀察胞質(zhì)環(huán)流檢測(cè)原生質(zhì)體的活力測(cè)原生質(zhì)體的活力B動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程:動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程:動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官物的組織、器官細(xì)胞懸浮液細(xì)胞懸浮液胰蛋白酶胰蛋白酶( 膠原蛋白酶)膠原蛋白酶) 10代細(xì)胞代細(xì)胞原代培養(yǎng)原代培養(yǎng)50代細(xì)胞代細(xì)胞傳代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)細(xì)胞株細(xì)胞株無(wú)限傳代無(wú)限傳代細(xì)胞系細(xì)胞系單個(gè)細(xì)胞單

32、個(gè)細(xì)胞加培養(yǎng)液加培養(yǎng)液遺傳物質(zhì)遺傳物質(zhì)未改變未改變遺傳物質(zhì)遺傳物質(zhì)已改變已改變(分解彈性纖維)(分解彈性纖維) 單克隆抗體制備過(guò)程單克隆抗體制備過(guò)程 注射抗原注射抗原B B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞融合、篩選細(xì)胞融合、篩選雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)篩選,繼續(xù)培養(yǎng)篩選,繼續(xù)培養(yǎng)足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞群特定抗體的細(xì)胞群體外培養(yǎng)體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔注射到小鼠腹腔單克隆抗體單克隆抗體1818下列有關(guān)動(dòng)植物細(xì)胞工程的敘述,不下列有關(guān)動(dòng)植物細(xì)胞工程的敘述,不正確的是(正確的是( ) A A動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程中可用滅活的病毒、動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程中可用滅活的病

33、毒、PEGPEG等等 B B動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,常用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,常用幼齡動(dòng)物幼齡動(dòng)物為材料為材料 C C植物組織培養(yǎng)過(guò)程中,需要用纖維素植物組織培養(yǎng)過(guò)程中,需要用纖維素酶、果膠酶去除細(xì)胞壁酶、果膠酶去除細(xì)胞壁 DD植物體細(xì)胞雜交過(guò)程中,需要用不同植物體細(xì)胞雜交過(guò)程中,需要用不同濃度的細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素培養(yǎng)雜種細(xì)濃度的細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素培養(yǎng)雜種細(xì)胞胞C19. 19. 下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞工程的敘述不正確的下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞工程的敘述不正確的是是 A A細(xì)胞克隆的基本要求是必須保證起點(diǎn)為單細(xì)胞克隆的基本要求是必須保證起點(diǎn)為單個(gè)或單一類型的細(xì)胞個(gè)或單一類型的細(xì)胞B B培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞的關(guān)鍵是要有一種

34、既能促培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞的關(guān)鍵是要有一種既能促進(jìn)細(xì)胞分裂又可抑制細(xì)胞分化的培養(yǎng)體系進(jìn)細(xì)胞分裂又可抑制細(xì)胞分化的培養(yǎng)體系C C用二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞的目的是用二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞的目的是促進(jìn)細(xì)胞呼吸促進(jìn)細(xì)胞呼吸DD將若干個(gè)效應(yīng)將若干個(gè)效應(yīng)B B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合后不一定得到雜交瘤細(xì)胞合后不一定得到雜交瘤細(xì)胞C 20. 20. 回答下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的問(wèn)題回答下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的問(wèn)題在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中。當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中。當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到細(xì)胞表面生長(zhǎng)到細(xì)胞表面 時(shí),細(xì)胞會(huì)停止時(shí),細(xì)胞會(huì)停止分裂增殖,這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的分裂增殖,這種現(xiàn)象稱

35、為細(xì)胞的 。此時(shí),瓶壁上形成的細(xì)胞層數(shù)是此時(shí),瓶壁上形成的細(xì)胞層數(shù)是 。要使貼壁的細(xì)胞從瓶壁上分離下來(lái),需要要使貼壁的細(xì)胞從瓶壁上分離下來(lái),需要用酶處理,可用的酶是用酶處理,可用的酶是 。隨著細(xì)胞傳代次數(shù)的增多,絕大部分細(xì)胞隨著細(xì)胞傳代次數(shù)的增多,絕大部分細(xì)胞分裂停止,進(jìn)而出現(xiàn)分裂停止,進(jìn)而出現(xiàn) 現(xiàn)象;但現(xiàn)象;但極少數(shù)細(xì)胞可以連續(xù)增殖,其中有些細(xì)胞極少數(shù)細(xì)胞可以連續(xù)增殖,其中有些細(xì)胞會(huì)因遺傳物質(zhì)發(fā)生改變而變成會(huì)因遺傳物質(zhì)發(fā)生改變而變成 細(xì)胞,細(xì)胞,該種細(xì)胞的黏著性該種細(xì)胞的黏著性 ,細(xì)胞膜表面蛋,細(xì)胞膜表面蛋白質(zhì)(糖蛋白)的量白質(zhì)(糖蛋白)的量 。相互接觸相互接觸接觸抑制接觸抑制單層(或一層)

36、單層(或一層)胰蛋白酶胰蛋白酶衰老甚至死亡衰老甚至死亡不死性不死性降低降低減少減少現(xiàn)用某種大分子染料,對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色現(xiàn)用某種大分子染料,對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色時(shí),觀察到死細(xì)胞被染色,而活細(xì)胞不染時(shí),觀察到死細(xì)胞被染色,而活細(xì)胞不染色,原因是色,原因是 檢查某種毒物是否能改變細(xì)胞染色體的檢查某種毒物是否能改變細(xì)胞染色體的數(shù)目,最好選用細(xì)胞分裂到數(shù)目,最好選用細(xì)胞分裂到 期的細(xì)期的細(xì)胞用顯微鏡進(jìn)行觀察。胞用顯微鏡進(jìn)行觀察。由于活細(xì)胞的膜具有選擇透過(guò)性,大分子染由于活細(xì)胞的膜具有選擇透過(guò)性,大分子染料不能進(jìn)入活細(xì)胞內(nèi),故活細(xì)胞不能著色料不能進(jìn)入活細(xì)胞內(nèi),故活細(xì)胞不能著色(或由于死細(xì)胞的膜喪失了選擇透過(guò)性,大

37、(或由于死細(xì)胞的膜喪失了選擇透過(guò)性,大分子染料能夠進(jìn)入死細(xì)胞內(nèi)而著色)分子染料能夠進(jìn)入死細(xì)胞內(nèi)而著色)。中中在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,通常在在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,通常在 條件下保存細(xì)胞。因?yàn)樵谶@種條條件下保存細(xì)胞。因?yàn)樵谶@種條件下,細(xì)胞中件下,細(xì)胞中 的活性降低,的活性降低,細(xì)胞細(xì)胞 的速率降低。的速率降低。給患者移植經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)形成的皮給患者移植經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)形成的皮膚組織后,發(fā)生了排斥現(xiàn)象,這膚組織后,發(fā)生了排斥現(xiàn)象,這是因?yàn)闄C(jī)體把移植的皮膚組織當(dāng)是因?yàn)闄C(jī)體把移植的皮膚組織當(dāng)作作 進(jìn)行攻擊。進(jìn)行攻擊。冷凍(或超低溫、液氮)冷凍(或超低溫、液氮)酶酶新陳代謝新陳代謝抗原抗原在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,通常在在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)

38、程中,通常在 冷冷凍(或超低溫、液氮)凍(或超低溫、液氮)條件下保條件下保存細(xì)胞。因?yàn)樵谶@種條件下,細(xì)存細(xì)胞。因?yàn)樵谶@種條件下,細(xì)胞中胞中 酶酶 的活性降低,細(xì)胞的活性降低,細(xì)胞 新陳新陳代謝代謝 的速率降低。的速率降低。給患者移植經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)形成的皮給患者移植經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)形成的皮膚組織后,發(fā)生了排斥現(xiàn)象,這膚組織后,發(fā)生了排斥現(xiàn)象,這是因?yàn)闄C(jī)體把移植的皮膚組織當(dāng)是因?yàn)闄C(jī)體把移植的皮膚組織當(dāng)作作 抗原抗原 進(jìn)行攻擊。進(jìn)行攻擊。21.21.為擴(kuò)大可耕地面積,增加為擴(kuò)大可耕地面積,增加糧食產(chǎn)量,黃河三角洲等糧食產(chǎn)量,黃河三角洲等鹽堿地的開(kāi)發(fā)利用備受關(guān)鹽堿地的開(kāi)發(fā)利用備受關(guān)注。我國(guó)科學(xué)家應(yīng)用耐鹽基因注。

39、我國(guó)科學(xué)家應(yīng)用耐鹽基因培育出了耐鹽水稻新品系。培育出了耐鹽水稻新品系。獲得耐鹽基因后,構(gòu)建重組獲得耐鹽基因后,構(gòu)建重組DNADNA分子分子所用的限制性內(nèi)切酶作用于圖中的所用的限制性內(nèi)切酶作用于圖中的 處,處,DNADNA連連接酶作用于接酶作用于 處(填處(填“a”a”或或“b”b”) 。aa將重組將重組DNADNA分子導(dǎo)入水稻受體細(xì)分子導(dǎo)入水稻受體細(xì)胞的常用方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法和胞的常用方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法和 法。法。由導(dǎo)入目的基因的水稻細(xì)胞培養(yǎng)成由導(dǎo)入目的基因的水稻細(xì)胞培養(yǎng)成植株需要利用植株需要利用 技術(shù),該技技術(shù),該技術(shù)的核心是術(shù)的核心是 和和 ?;驑尫ǎɑǚ酃芡ǖ婪ǎ┗驑尫ǎɑǚ酃芡ǖ婪?/p>

40、)植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)脫分化脫分化再分化再分化為了確定耐鹽轉(zhuǎn)基因水稻是否培為了確定耐鹽轉(zhuǎn)基因水稻是否培育成功,既要用放射性同位素標(biāo)記育成功,既要用放射性同位素標(biāo)記的的 做探針進(jìn)行分子雜交檢做探針進(jìn)行分子雜交檢測(cè),又要用測(cè),又要用 方法從個(gè)體水方法從個(gè)體水平鑒定水稻植株的耐鹽性。平鑒定水稻植株的耐鹽性。耐鹽基因(耐鹽基因( 目的基因)目的基因) 一定濃度的鹽水澆灌(移植到鹽堿地中)一定濃度的鹽水澆灌(移植到鹽堿地中) 22. 22. 動(dòng)物器官的體外培養(yǎng)技術(shù)對(duì)于研動(dòng)物器官的體外培養(yǎng)技術(shù)對(duì)于研究器官的生理、病理過(guò)程及其機(jī)制究器官的生理、病理過(guò)程及其機(jī)制意義重大。下圖是一個(gè)新生小鼠的意義重大。下圖

41、是一個(gè)新生小鼠的肝臟小塊培養(yǎng)裝置示意圖,請(qǐng)回答肝臟小塊培養(yǎng)裝置示意圖,請(qǐng)回答下列問(wèn)題。下列問(wèn)題。(1)(1)肝臟切成小薄片,這有利于肝臟細(xì)胞肝臟切成小薄片,這有利于肝臟細(xì)胞_。 (2)(2)氣室中充入氣室中充入5%CO5%CO2 2氣體的主要作用是氣體的主要作用是_。 (3)(3)培養(yǎng)液中添加抗生素是為了抑制細(xì)菌生長(zhǎng),培養(yǎng)液中添加抗生素是為了抑制細(xì)菌生長(zhǎng),但要注意選擇抗生素的但要注意選擇抗生素的 _,以保證抗生素對(duì)肝臟無(wú)害。,以保證抗生素對(duì)肝臟無(wú)害。吸收氧氣和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、排出代謝廢物吸收氧氣和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、排出代謝廢物維持培養(yǎng)液適宜的維持培養(yǎng)液適宜的pHpH種類和劑量種類和劑量 (4)(4)有機(jī)物有

42、機(jī)物X X有毒性,可誘發(fā)染色體斷裂。利有毒性,可誘發(fā)染色體斷裂。利用上圖所示裝置和提供的下列材料用具,探用上圖所示裝置和提供的下列材料用具,探究肝臟小塊對(duì)有機(jī)物究肝臟小塊對(duì)有機(jī)物X X是否具有解毒作用。是否具有解毒作用。 材料用具:材料用具: 肝臟小塊,外周血淋巴細(xì)胞,淋巴細(xì)胞培養(yǎng)肝臟小塊,外周血淋巴細(xì)胞,淋巴細(xì)胞培養(yǎng)液,植物凝集素液,植物凝集素( (刺激淋巴細(xì)胞分裂刺激淋巴細(xì)胞分裂) );顯微;顯微鏡,載玻片,蓋玻片,玻璃皿,滴管;吉姆鏡,載玻片,蓋玻片,玻璃皿,滴管;吉姆薩染液薩染液( (使染色體著色使染色體著色) ),有機(jī)物,有機(jī)物X X溶液等。溶液等。實(shí)驗(yàn)過(guò)程:實(shí)驗(yàn)過(guò)程: 在淋巴細(xì)胞培

43、養(yǎng)液中加入植物凝集素培養(yǎng)在淋巴細(xì)胞培養(yǎng)液中加入植物凝集素培養(yǎng)淋巴細(xì)胞,取淋巴細(xì)胞,取4 4等份,備用。等份,備用。 利用甲、乙、丙、丁利用甲、乙、丙、丁4 4組上圖所示裝置,按組上圖所示裝置,按下表步驟操作下表步驟操作(“”(“”表示已完成的步驟表示已完成的步驟) )。上表中還需進(jìn)行的操作是上表中還需進(jìn)行的操作是_。甲甲乙乙丙丙丁丁步驟一:加入肝臟培養(yǎng)液步驟一:加入肝臟培養(yǎng)液步驟二:加入有機(jī)物步驟二:加入有機(jī)物X X溶溶液液步驟三:放置肝臟小塊步驟三:放置肝臟小塊向乙向乙( (或丁或丁) )組裝置中放置肝臟小塊組裝置中放置肝臟小塊 培養(yǎng)一段時(shí)間后,取培養(yǎng)一段時(shí)間后,取4 4組裝置中的等組裝置中

44、的等量培養(yǎng)液,分別添加到量培養(yǎng)液,分別添加到4 4份備用的淋巴份備用的淋巴細(xì)胞培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)。細(xì)胞培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)。 一段時(shí)間后取淋巴細(xì)胞分別染色、制一段時(shí)間后取淋巴細(xì)胞分別染色、制片。在顯微鏡下觀察片。在顯微鏡下觀察_,并對(duì)比分析。,并對(duì)比分析。若丙組淋巴細(xì)胞出現(xiàn)異常,而甲組的淋若丙組淋巴細(xì)胞出現(xiàn)異常,而甲組的淋巴細(xì)胞正常,則說(shuō)明巴細(xì)胞正常,則說(shuō)明_。染色體形態(tài)和數(shù)量染色體形態(tài)和數(shù)量肝臟小塊對(duì)有機(jī)物肝臟小塊對(duì)有機(jī)物X X具有解毒作用具有解毒作用基因工程基因工程的工具的工具限制酶限制酶主要存在于原核生物中主要存在于原核生物中具有專一性具有專一性(識(shí)別序列識(shí)別序列)切開(kāi)切開(kāi)DNA分子的磷酸二酯

45、鍵分子的磷酸二酯鍵DNA連連接酶接酶連接磷酸二酯鍵連接磷酸二酯鍵種類種類E.coliDNA連接酶連接酶T4 DNADNA連接酶連接酶運(yùn)載運(yùn)載工具工具具備的具備的條件條件結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,大小適中大小適中能在宿主細(xì)胞中自能在宿主細(xì)胞中自我復(fù)制并穩(wěn)定存在我復(fù)制并穩(wěn)定存在具一個(gè)至多個(gè)限制酶切位點(diǎn)具一個(gè)至多個(gè)限制酶切位點(diǎn)具標(biāo)記基因具標(biāo)記基因質(zhì)粒、質(zhì)粒、噬菌體衍生物、動(dòng)植物病毒噬菌體衍生物、動(dòng)植物病毒蛋白質(zhì)工程與基因工程比較蛋白質(zhì)工程與基因工程比較項(xiàng)目項(xiàng)目蛋白質(zhì)工程蛋白質(zhì)工程基因工程基因工程區(qū)區(qū)別別過(guò)過(guò)程程預(yù)期蛋白質(zhì)功能預(yù)期蛋白質(zhì)功能設(shè)計(jì)設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)推推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列找到對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸找到對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列序列獲取目的基因獲取目的基因構(gòu)建基因構(gòu)建基因表達(dá)載體表達(dá)載體將目的基因?qū)⒛康幕驅(qū)胧荏w細(xì)胞入受體細(xì)胞目的基因的目的基因的檢測(cè)與鑒定檢測(cè)與鑒定實(shí)實(shí)質(zhì)質(zhì)定向改造或生產(chǎn)人類所定向改造或生產(chǎn)人類所需蛋白質(zhì)需蛋白質(zhì)定向改造生物的遺傳特性定向改造生物的遺傳特性,以獲得人類所需的生物,以獲得人類所需的生物類型或生物產(chǎn)品類型或生物產(chǎn)品結(jié)結(jié)果果生產(chǎn)自然界沒(méi)有的蛋白生產(chǎn)自然界沒(méi)有的蛋白質(zhì)質(zhì)一般是生產(chǎn)自然界已有的一般是生產(chǎn)自然界已有的蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)聯(lián)系聯(lián)系蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)

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