食用菌選種育種技術(shù)

1、 食用菌的繁殖方式共有三種，即無性繁殖、食用菌的繁殖方式共有三種，即無性繁殖、 有性繁殖和準(zhǔn)性繁殖。有性繁殖和準(zhǔn)性繁殖。 第一節(jié)第一節(jié) 食用菌的繁殖方式食用菌的繁殖方式 一、無性繁殖一、無性繁殖 不通過有性生殖細(xì)胞的結(jié)合，而由親代直接產(chǎn)和新個(gè)體的生殖方不通過有性生殖細(xì)胞的結(jié)合，而由親代直接產(chǎn)和新個(gè)體的生殖方 式叫無性繁殖，食用菌的無性繁殖主要有以下幾種形式：式叫無性繁殖，食用菌的無性繁殖主要有以下幾種形式： 1.1.可以菌絲斷裂的方式繁殖：可以菌絲斷裂的方式繁殖： 2.2.以產(chǎn)和無性孢子的方式繁殖：如香菇產(chǎn)生節(jié)孢子，雙孢蘑菇產(chǎn)以產(chǎn)和無性孢子的方式繁殖：如香菇產(chǎn)生節(jié)孢子，雙孢蘑菇產(chǎn) 生次生孢子，

2、草菇產(chǎn)生厚垣孢子，黑木耳產(chǎn)生鉤狀分生孢子等。生次生孢子，草菇產(chǎn)生厚垣孢子，黑木耳產(chǎn)生鉤狀分生孢子等。 3.3.以出芽方式繁殖：以出芽方式繁殖： 二、有性繁殖二、有性繁殖 通過有性生殖細(xì)胞的結(jié)合，產(chǎn)生新個(gè)體的繁殖方通過有性生殖細(xì)胞的結(jié)合，產(chǎn)生新個(gè)體的繁殖方 式，叫有性繁殖。式，叫有性繁殖。 孢子核基因的不同就決定了其所萌發(fā)成的單核菌絲的孢子核基因的不同就決定了其所萌發(fā)成的單核菌絲的 不同性別。有性繁殖根據(jù)進(jìn)行質(zhì)配的單核菌絲的性別，又不同性別。有性繁殖根據(jù)進(jìn)行質(zhì)配的單核菌絲的性別，又 可以分為以下兩種形式。可以分為以下兩種形式。 （一）同宗結(jié)合：（一）同宗結(jié)合： 1.1.初級(jí)同宗結(jié)合初級(jí)同宗結(jié)合

3、由單個(gè)孢子萌發(fā)而形成的菌絲全，無需親和性，很快發(fā)由單個(gè)孢子萌發(fā)而形成的菌絲全，無需親和性，很快發(fā) 展成雙核菌比體，并通過鎖狀聯(lián)合增殖。每個(gè)細(xì)胞內(nèi)的兩展成雙核菌比體，并通過鎖狀聯(lián)合增殖。每個(gè)細(xì)胞內(nèi)的兩 個(gè)核沒有遺傳上的差別，均能形成子實(shí)體。個(gè)核沒有遺傳上的差別，均能形成子實(shí)體。 2.2.次級(jí)同宗結(jié)合次級(jí)同宗結(jié)合 減數(shù)分裂后減數(shù)分裂后4 4個(gè)子核，個(gè)子核，“雌雄雌雄”兩兩相配分別通過孢子兩兩相配分別通過孢子 梗（小梗）進(jìn)入孢子，形成梗（小梗）進(jìn)入孢子，形成2 2個(gè)含有異核的孢子。這種擔(dān)個(gè)含有異核的孢子。這種擔(dān) 孢子一旦萌發(fā)，初期為多核，隨之產(chǎn)生隔膜，將每一個(gè)細(xì)孢子一旦萌發(fā)，初期為多核，隨之產(chǎn)生隔膜

4、，將每一個(gè)細(xì) 胞分隔成只含有胞分隔成只含有2 2個(gè)核的細(xì)胞個(gè)核的細(xì)胞。頂端細(xì)胞核又不斷再進(jìn)行頂端細(xì)胞核又不斷再進(jìn)行 分裂，到一定程度又再被橫隔成每一細(xì)胞內(nèi)只含有分裂，到一定程度又再被橫隔成每一細(xì)胞內(nèi)只含有2 2個(gè)核個(gè)核 的菌絲，周而復(fù)始。這種雙核菌絲具有結(jié)實(shí)性，稱之為次的菌絲，周而復(fù)始。這種雙核菌絲具有結(jié)實(shí)性，稱之為次 級(jí)同宗結(jié)合。級(jí)同宗結(jié)合。 （二）異宗結(jié)合（二）異宗結(jié)合 異宗結(jié)合是一種異宗結(jié)合是一種“雌雄不同株雌雄不同株”自身不孕的有性生殖方自身不孕的有性生殖方 式。在擔(dān)子菌亞門中，異宗結(jié)合占式。在擔(dān)子菌亞門中，異宗結(jié)合占90%90%，主要有兩種形式。，主要有兩種形式。 1.1.二極性異宗

5、結(jié)合二極性異宗結(jié)合 一部分食用菌的單核菌絲有一部分食用菌的單核菌絲有“雌雌”、“雄雄”之分，通常之分，通常 用用“”、“”表示。唯有兩條性別不同的菌絲進(jìn)行交表示。唯有兩條性別不同的菌絲進(jìn)行交 配產(chǎn)生的雙核菌絲，才具有結(jié)實(shí)性配產(chǎn)生的雙核菌絲，才具有結(jié)實(shí)性。 2.2.四極性異宗結(jié)合四極性異宗結(jié)合 由同一子實(shí)體所產(chǎn)生的擔(dān)孢子萌發(fā)的菌絲間由同一子實(shí)體所產(chǎn)生的擔(dān)孢子萌發(fā)的菌絲間 進(jìn)行交配時(shí)，唯有進(jìn)行交配時(shí)，唯有1/41/4的交配組合能產(chǎn)生可孕的交配組合能產(chǎn)生可孕 的雙核菌絲。的雙核菌絲。 第二節(jié)第二節(jié) 食用菌的生活史食用菌的生活史 食用菌的生活史，是指從孢子萌發(fā)，經(jīng)歷菌絲體、子實(shí)食用菌的生活史，是指從孢

6、子萌發(fā)，經(jīng)歷菌絲體、子實(shí) 體階段，直到產(chǎn)生第二代即同一種孢子的全過程。體階段，直到產(chǎn)生第二代即同一種孢子的全過程。 一、傘菌的生活史一、傘菌的生活史 1.1.擔(dān)孢子萌發(fā)擔(dān)孢子萌發(fā) 2.2.單核菌絲（初生菌絲）開始發(fā)育。單核菌絲（初生菌絲）開始發(fā)育。 3.3.兩條可親和的單核菌絲進(jìn)行質(zhì)配。兩條可親和的單核菌絲進(jìn)行質(zhì)配。 4.4.質(zhì)配形成異核的雙核菌絲。多數(shù)種類的雙質(zhì)配形成異核的雙核菌絲。多數(shù)種類的雙 核菌絲可見鎖狀聯(lián)合，核菌絲可見鎖狀聯(lián)合， 一、傘菌的生活史一、傘菌的生活史 5.5.在適宜的環(huán)境條件下，雙核菌絲體組織化，開成各種在適宜的環(huán)境條件下，雙核菌絲體組織化，開成各種 食用菌所特有的子實(shí)體

7、。食用菌所特有的子實(shí)體。 6.6.來自兩個(gè)親本的一對(duì)交配型不同的單倍體核在擔(dān)子中來自兩個(gè)親本的一對(duì)交配型不同的單倍體核在擔(dān)子中 融合，進(jìn)行核配，形成一個(gè)雙倍體核。融合，進(jìn)行核配，形成一個(gè)雙倍體核。 7.7.雙倍體核進(jìn)行減數(shù)分裂，結(jié)果產(chǎn)生四個(gè)單倍體核，原雙倍體核進(jìn)行減數(shù)分裂，結(jié)果產(chǎn)生四個(gè)單倍體核，原 擔(dān)子變成擔(dān)子。擔(dān)子變成擔(dān)子。 8.8.各個(gè)單倍體核分別移支擔(dān)子小梗的頂端，形成擔(dān)孢子。各個(gè)單倍體核分別移支擔(dān)子小梗的頂端，形成擔(dān)孢子。 至此，一個(gè)完整的生活史結(jié)束了。至此，一個(gè)完整的生活史結(jié)束了。 二、有性生殖過程中細(xì)胞核的變化二、有性生殖過程中細(xì)胞核的變化 一是質(zhì)配后開始的異核雙核階段，即異核雙核

8、期。具有一是質(zhì)配后開始的異核雙核階段，即異核雙核期。具有 產(chǎn)生子實(shí)體的能力。產(chǎn)生子實(shí)體的能力。 二是核配后開始的短暫的雙倍核期。二是核配后開始的短暫的雙倍核期。 三是核配馬上進(jìn)行減數(shù)分裂，每個(gè)細(xì)胞中都有三是核配馬上進(jìn)行減數(shù)分裂，每個(gè)細(xì)胞中都有4 4個(gè)單倍個(gè)單倍 體核，稱為單核期，此期亦短暫。體核，稱為單核期，此期亦短暫。 第三節(jié)第三節(jié) 選種技術(shù)選種技術(shù) 一、選種的原理和方法一、選種的原理和方法 1.1.原理原理 食用菌的種性是通過菌絲體的繁衍逐代傳遞的，所以自食用菌的種性是通過菌絲體的繁衍逐代傳遞的，所以自 然選擇就側(cè)重于在不同菌株之間進(jìn)行，而不是在同一菌株然選擇就側(cè)重于在不同菌株之間進(jìn)行，而

9、不是在同一菌株 的后代中進(jìn)行。的后代中進(jìn)行。 食用菌自然選育的基本流程： 收集品種資源收集品種資源 生理性能測(cè)定生理性能測(cè)定 品種比較試驗(yàn)品種比較試驗(yàn) 擴(kuò)大、示范推廣擴(kuò)大、示范推廣 2.2.方法方法 品種資源的收集品種資源的收集. . 盡可能的收集有足夠代表性的野生菌株。確定采盡可能的收集有足夠代表性的野生菌株。確定采 種的目標(biāo)，采集點(diǎn)的地理?xiàng)l件，并做好詳細(xì)的采種的目標(biāo)，采集點(diǎn)的地理?xiàng)l件，并做好詳細(xì)的采 集記錄。集記錄。 生理性能測(cè)定生理性能測(cè)定 標(biāo)本采集后應(yīng)盡快采用多種分離方法獲取菌株，隨后，標(biāo)本采集后應(yīng)盡快采用多種分離方法獲取菌株，隨后， 立即用平板做拮抗試驗(yàn)（即分離的菌株菌絲兩兩配對(duì)接入

10、立即用平板做拮抗試驗(yàn)（即分離的菌株菌絲兩兩配對(duì)接入 同一平板培養(yǎng)基內(nèi)），適溫培養(yǎng)，經(jīng)十余日，不同菌株的同一平板培養(yǎng)基內(nèi)），適溫培養(yǎng)，經(jīng)十余日，不同菌株的 菌落內(nèi)是否出現(xiàn)拮抗線，同時(shí)還可在平板或生長測(cè)定管上菌落內(nèi)是否出現(xiàn)拮抗線，同時(shí)還可在平板或生長測(cè)定管上 測(cè)定菌絲生長速度及對(duì)溫度的反應(yīng)。測(cè)定菌絲生長速度及對(duì)溫度的反應(yīng)。 菌株比較菌株比較 比較各菌株的優(yōu)劣，詳細(xì)記錄各菌株的產(chǎn)量、菇形、溫比較各菌株的優(yōu)劣，詳細(xì)記錄各菌株的產(chǎn)量、菇形、溫 性、干鮮比、始菇期、菇潮間隔、形態(tài)等。為了試驗(yàn)的準(zhǔn)性、干鮮比、始菇期、菇潮間隔、形態(tài)等。為了試驗(yàn)的準(zhǔn) 確性，要保證菌種的質(zhì)量，培養(yǎng)基配方，接種，管理措施確性，要保

11、證菌種的質(zhì)量，培養(yǎng)基配方，接種，管理措施 等可能影響結(jié)果的因素，盡可能使之一致。試驗(yàn)還應(yīng)按生等可能影響結(jié)果的因素，盡可能使之一致。試驗(yàn)還應(yīng)按生 物統(tǒng)計(jì)原理進(jìn)行安排。物統(tǒng)計(jì)原理進(jìn)行安排。 擴(kuò)大試驗(yàn)擴(kuò)大試驗(yàn) 上述的品種評(píng)比結(jié)果僅是個(gè)階段性的成果，還應(yīng)和當(dāng)?shù)厣鲜龅钠贩N評(píng)比結(jié)果僅是個(gè)階段性的成果，還應(yīng)和當(dāng)?shù)?的當(dāng)家菌株同時(shí)進(jìn)行栽培，證實(shí)它是更優(yōu)良的菌株。的當(dāng)家菌株同時(shí)進(jìn)行栽培，證實(shí)它是更優(yōu)良的菌株。 示范推廣示范推廣 經(jīng)擴(kuò)大試驗(yàn)后，將選出的優(yōu)良品種放到有代表性的試驗(yàn)經(jīng)擴(kuò)大試驗(yàn)后，將選出的優(yōu)良品種放到有代表性的試驗(yàn) 點(diǎn)進(jìn)行示范性生產(chǎn)，待試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)一步確定之后，再由點(diǎn)點(diǎn)進(jìn)行示范性生產(chǎn)，待試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)一步確定

12、之后，再由點(diǎn) 到面推廣。到面推廣。 二、菌種分離二、菌種分離 什么是菌種的分離呢？什么是菌種的分離呢？ 將有價(jià)值的子實(shí)體的局部組織、孢子或基內(nèi)菌絲將有價(jià)值的子實(shí)體的局部組織、孢子或基內(nèi)菌絲 移接到斜面試管培養(yǎng)基上，獲得純培養(yǎng)菌絲的操移接到斜面試管培養(yǎng)基上，獲得純培養(yǎng)菌絲的操 作稱為菌種分離。作稱為菌種分離。 （一）種子資源的獲得（一）種子資源的獲得 種子資源的獲得有野外采集和栽培場(chǎng)所采集兩種種子資源的獲得有野外采集和栽培場(chǎng)所采集兩種 途徑。野外標(biāo)本的采集，主要適用于食用菌的野途徑。野外標(biāo)本的采集，主要適用于食用菌的野 生種馴化、遺傳育種、生理生態(tài)以及各種研究用生種馴化、遺傳育種、生理生態(tài)以及各

13、種研究用 的一級(jí)種的分離。而在食用菌栽培上的一級(jí)種的的一級(jí)種的分離。而在食用菌栽培上的一級(jí)種的 分離，其種菇的來源主要是從栽培場(chǎng)中經(jīng)留種獲分離，其種菇的來源主要是從栽培場(chǎng)中經(jīng)留種獲 得的。得的。 種菇（耳）的選擇種菇（耳）的選擇 分離對(duì)象應(yīng)從當(dāng)?shù)禺?dāng)家品種，或從外地引進(jìn)并經(jīng)分離對(duì)象應(yīng)從當(dāng)?shù)禺?dāng)家品種，或從外地引進(jìn)并經(jīng) 大面積栽培后表現(xiàn)出高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)的菌株中選擇。大面積栽培后表現(xiàn)出高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)的菌株中選擇。 留種種菇要求菇形理想，長勢(shì)健壯，無蟲無病的留種種菇要求菇形理想，長勢(shì)健壯，無蟲無病的 子實(shí)體。子實(shí)體。 成熟度的選擇成熟度的選擇 組織分離一般選擇幼菇，即器官分化尚未結(jié)束時(shí)組織分離一般選擇幼菇，即器

14、官分化尚未結(jié)束時(shí) 采摘。此時(shí)菇體正在生長。從最旺盛的采摘。此時(shí)菇體正在生長。從最旺盛的“生長點(diǎn)生長點(diǎn)” 挑取組織，其菌絲萌發(fā)快，長勢(shì)好，而且操作時(shí)，挑取組織，其菌絲萌發(fā)快，長勢(shì)好，而且操作時(shí)， 組織塊纖維化程度低，容易挑取。組織塊纖維化程度低，容易挑取。 （二）菌種分離（二）菌種分離 菌種分離可以分為菌種分離可以分為孢子分離孢子分離、組織分離組織分離和和基內(nèi)菌基內(nèi)菌 絲絲分離三種。分離三種。 1.1.分離前的準(zhǔn)備分離前的準(zhǔn)備 培養(yǎng)基的選擇培養(yǎng)基的選擇 通常使用通常使用PDAPDA培養(yǎng)基。特殊分離培養(yǎng)時(shí)，常采用培養(yǎng)基。特殊分離培養(yǎng)時(shí)，常采用 相應(yīng)的培養(yǎng)基。相應(yīng)的培養(yǎng)基。 種菇的預(yù)處理種菇的預(yù)處理

15、 種菇采摘后，若種菇水分太高，菇蓋沾粘，可適種菇采摘后，若種菇水分太高，菇蓋沾粘，可適 當(dāng)風(fēng)干后再進(jìn)行分離。膠質(zhì)耳只能用無菌水多次當(dāng)風(fēng)干后再進(jìn)行分離。膠質(zhì)耳只能用無菌水多次 沖洗，無菌濾紙吸干，然后讓耳片子實(shí)層上重新沖洗，無菌濾紙吸干，然后讓耳片子實(shí)層上重新 產(chǎn)生成熟的孢子供分離，這樣可降低污染率。產(chǎn)生成熟的孢子供分離，這樣可降低污染率。 2 2、組織分離、組織分離 傘菌組織分離法傘菌組織分離法 組織分離時(shí)，用組織分離時(shí)，用75%75%酒精棉球擦拭雙手及接種工具。點(diǎn)燃酒精燈，酒精棉球擦拭雙手及接種工具。點(diǎn)燃酒精燈， 將尖頭鑷子燒灼滅菌；隨后將種菇縱向撕成兩半，于菌柄、菌肉將尖頭鑷子燒灼滅菌；隨

16、后將種菇縱向撕成兩半，于菌柄、菌肉 交界處切取火柴頭大小的組織塊，迅速抖落到試管中，燒灼管口交界處切取火柴頭大小的組織塊，迅速抖落到試管中，燒灼管口 及棉塞，塞上棉塞。這些操作都是在酒精燈火焰無菌區(qū)域進(jìn)行的。及棉塞，塞上棉塞。這些操作都是在酒精燈火焰無菌區(qū)域進(jìn)行的。 膠質(zhì)菌類組織分離法膠質(zhì)菌類組織分離法 一種方法是將耳片反復(fù)用無菌水沖洗，切成一種方法是將耳片反復(fù)用無菌水沖洗，切成0.5cm0.5cm 小塊移入培養(yǎng)基，于小塊移入培養(yǎng)基，于2828下進(jìn)行培養(yǎng)；下進(jìn)行培養(yǎng)； 另一種方法是剖取尚未展開耳片的耳基團(tuán)內(nèi)的組織另一種方法是剖取尚未展開耳片的耳基團(tuán)內(nèi)的組織 塊進(jìn)行分離。塊進(jìn)行分離。 菌核的組織

17、分離法菌核的組織分離法 一些藥用菌如茯苓、豬苓、雷丸都有菌核。進(jìn)行組織一些藥用菌如茯苓、豬苓、雷丸都有菌核。進(jìn)行組織 分離時(shí)，采用含漿汁多的菌核。在無菌的條件之下，分離時(shí)，采用含漿汁多的菌核。在無菌的條件之下， 將菌核剖開，于菌核的附近，剖取蠶豆大小的菌核組將菌核剖開，于菌核的附近，剖取蠶豆大小的菌核組 織塊移入斜面培養(yǎng)基上，在織塊移入斜面培養(yǎng)基上，在26-3026-30下培養(yǎng)下培養(yǎng)。 特特特殊的組織分特殊的組織分 離離 2.2. 菌菌 索索 分分 離離 3.3. 子子 實(shí)實(shí) 層層 分分 離離 1. 1. 生生 長長 點(diǎn)點(diǎn) 分分 離離 3.3.木腐菌基內(nèi)菌絲分離木腐菌基內(nèi)菌絲分離 把分離用菇木

18、的部分或全部的表面在火焰上輕燎。把分離用菇木的部分或全部的表面在火焰上輕燎。 取小刀在火焰上滅菌，對(duì)準(zhǔn)菇木上菇柄（耳基）的著生取小刀在火焰上滅菌，對(duì)準(zhǔn)菇木上菇柄（耳基）的著生 位置切成兩半。位置切成兩半。 確定欲分離菌絲在菇木上的位置，再次用火焰滅菌過的確定欲分離菌絲在菇木上的位置，再次用火焰滅菌過的 小刀，在欲分離部位刻劃數(shù)個(gè)井字。小刀，在欲分離部位刻劃數(shù)個(gè)井字。 用火焰滅過菌的接種鉤，鉤取一小塊木屑（綠豆大小或用火焰滅過菌的接種鉤，鉤取一小塊木屑（綠豆大小或 更?。┮平佑谛泵媾囵B(yǎng)基。更小）移接于斜面培養(yǎng)基。 接種后將試管置于接種后將試管置于25252727下培養(yǎng)，促使其恢復(fù)。近風(fēng)下培養(yǎng)，促

19、使其恢復(fù)。近風(fēng) 干的種木內(nèi)菌絲常處于休眠狀態(tài)。接種后，種木吸濕，菌干的種木內(nèi)菌絲常處于休眠狀態(tài)。接種后，種木吸濕，菌 絲逐漸恢復(fù)生長。如果短期時(shí)間內(nèi)分離物未曾發(fā)，則可保絲逐漸恢復(fù)生長。如果短期時(shí)間內(nèi)分離物未曾發(fā)，則可保 留至留至4 4周后，再斷定分離是否成功。周后，再斷定分離是否成功。 孢子分離主要是指利用子實(shí)體上產(chǎn)生的成熟 有性孢子分離培養(yǎng)獲得純菌種的方法。分為多孢 分離與單孢分離兩種。 （一）多孢分離 4.孢子分離技術(shù)孢子分離技術(shù) 1. 種種 菇菇 孢孢 子子 彈彈 射射 法法 2. 帖褶法 3.褶上涂抹法： 4.空中孢子捕捉法: 5.鉤懸法 6.6.試管插割法試管插割法 此法方便快捷，成

20、功率高，是多數(shù)菌種孢子分離 的主要方法。適合于大型子實(shí)體的孢子分離。 具體操作方法是：具體操作方法是： 無菌操作迅速用無菌試管取下組織塊。無菌操作迅速用無菌試管取下組織塊。 用接種鎬將組織塊推至用接種鎬將組織塊推至距斜面培養(yǎng)基距斜面培養(yǎng)基 1cm1cm處，處，塞好棉塞。于塞好棉塞。于25-2825-28條件下條件下 見光豎立見光豎立培養(yǎng)至培養(yǎng)至1212小時(shí)左右，在無菌小時(shí)左右，在無菌 操作條件下用尖頭鑷子取出組織塊。操作條件下用尖頭鑷子取出組織塊。 繼續(xù)暗光培養(yǎng)，繼續(xù)暗光培養(yǎng)，2-32-3天后，萌發(fā)成星芒天后，萌發(fā)成星芒 狀的單孢子菌落。狀的單孢子菌落。 所謂單孢分離即從收集到的多孢子中將單所

21、謂單孢分離即從收集到的多孢子中將單 個(gè)孢子分離出來，分別培養(yǎng)，作為育種的材料個(gè)孢子分離出來，分別培養(yǎng)，作為育種的材料。 1.涂抹法：用已沾濕無菌水的接種針，從孢子印用已沾濕無菌水的接種針，從孢子印 上沾取孢子，在無菌條件下，插入盛用無菌水的上沾取孢子，在無菌條件下，插入盛用無菌水的 小試管內(nèi)振蕩稀釋成適宜濃度的孢子懸濁液。隨小試管內(nèi)振蕩稀釋成適宜濃度的孢子懸濁液。隨 后無菌條件下劃線培養(yǎng)。后無菌條件下劃線培養(yǎng)。 （二）單孢分離（二）單孢分離 2.2.梯度稀釋點(diǎn)樣法梯度稀釋點(diǎn)樣法 用同樣的方法制成濃度較高的孢子懸濁液。同時(shí)取滅菌過用同樣的方法制成濃度較高的孢子懸濁液。同時(shí)取滅菌過 的空試管數(shù)根，

22、排序編號(hào)。按無菌操作規(guī)程獲得一系列的的空試管數(shù)根，排序編號(hào)。按無菌操作規(guī)程獲得一系列的 不同濃度梯度的孢子懸浮液。再用毛細(xì)管在各個(gè)梯度孢子不同濃度梯度的孢子懸浮液。再用毛細(xì)管在各個(gè)梯度孢子 液中取樣培養(yǎng)，單孢萌發(fā)后菌絲便長入小培養(yǎng)基塊中，再液中取樣培養(yǎng)，單孢萌發(fā)后菌絲便長入小培養(yǎng)基塊中，再 將其轉(zhuǎn)移到試管斜面上培養(yǎng)獲得單孢培養(yǎng)物。將其轉(zhuǎn)移到試管斜面上培養(yǎng)獲得單孢培養(yǎng)物。 第四節(jié) 育種技術(shù) 一、雜交育種的原理一、雜交育種的原理 食、藥用菌的雜交是指不同種或種內(nèi)不同株系之食、藥用菌的雜交是指不同種或種內(nèi)不同株系之 間的交配，后者則理重要。間的交配，后者則理重要。 二、雜交育種的方法二、雜交育種的方法 1.1.選擇親本：選擇親本： 2.2.單孢子分離單孢子分離 3.3.單孢子雜交配對(duì)單孢子雜交配對(duì) 4.4.轉(zhuǎn)管繁殖轉(zhuǎn)管繁殖 將可親和的組合移入新的斜面保存?zhèn)溆?。將可親和的組合移入新的斜面保存?zhèn)溆谩?四極性的異宗結(jié)合的食用菌，由于自交不育，經(jīng)配四極性的異宗結(jié)合的食用菌，由于自交不育，經(jīng)配 對(duì)后，凡出現(xiàn)雙核菌絲的組合，并能正常結(jié)實(shí)者，即證對(duì)后，凡出現(xiàn)雙核菌絲的組合，并能正常結(jié)實(shí)者，即證 明雜交