氣相色譜的內(nèi)標(biāo)法定量分析

1、實(shí)驗(yàn)一氣相色譜內(nèi)標(biāo)法定量分析、目的與要求1. 熟悉相對校正因子定義以及求取方法2. 掌握內(nèi)標(biāo)法定量公式及其應(yīng)用3. 熟悉氫火焰監(jiān)測器的特點(diǎn)和使用方法二、實(shí)驗(yàn)原理氣相色譜法是以氣體（此氣體稱為載氣）為流動相的柱色譜分離技術(shù)。其原理 是利用被分離分析的物質(zhì)（組分）在色譜柱中的氣相（載氣）和固定（液）相之間分 配系數(shù)的差異，在兩相作相對運(yùn)動時(shí)，在兩相間作反復(fù)多次（103106次）的分配, 使得原來的微小差別變大，從而使各組分達(dá)到分離的目的。根據(jù)色譜圖進(jìn)行組分的定量時(shí)，所用定量方法主要有歸一化法，內(nèi)標(biāo)法和外 標(biāo)法三種。當(dāng)試樣組分不能全部從色譜柱流出，或有些組分在檢則器上沒有信號 時(shí)，就不能使用歸一化法

2、，這時(shí)可用內(nèi)標(biāo)法。內(nèi)標(biāo)法是氣相色譜所常用的一種比較準(zhǔn)確的定量方法。當(dāng)樣品中的所有組分因各種原因不能全部流出色譜柱，或監(jiān)測器不能對各組分都有響應(yīng)，或只需測定 樣品中某幾個(gè)組分時(shí)，可采用內(nèi)標(biāo)法定量。內(nèi)標(biāo)法的基本過程是：準(zhǔn)確稱取質(zhì)量為Wm的樣品，加入質(zhì)量為 Ws的內(nèi)標(biāo)物，用溶劑配成一定濃度的溶液，進(jìn)行氣 相色譜分析，然后根據(jù)被測物和內(nèi)標(biāo)物的質(zhì)量及其在色譜圖上的峰面積比，求出被測組分的含量，計(jì)算公式如下：PiAfWAsfswm100%(1)式中Pi為組分i的百分含量；Ai, As分別是被測組分和內(nèi)標(biāo)物的峰面積； f i、 fs分別是被測組分和內(nèi)標(biāo)物的重量校正因子二者之比（fi / fs ）可由標(biāo)準(zhǔn)樣品

3、 按照上述方法進(jìn)行測試并計(jì)算得。內(nèi)標(biāo)法必須由合適的內(nèi)標(biāo)物，基本條件是：它在樣品中不存在、無化學(xué)反 應(yīng)、穩(wěn)定、性質(zhì)盡量與被測組分接近，能與樣品要互溶、色譜峰能完全分離并比 較接近被測組分的色譜峰。內(nèi)標(biāo)物的量也應(yīng)與被測組分的量相當(dāng)，以提高定量分析的準(zhǔn)確度。內(nèi)標(biāo)法不需要被測樣品中的所有的組分從色譜柱完全流出或被監(jiān)測器檢測 出，不象歸一化法存在使用上的限制；它采用了相對校正因子，使儀器和操作條 件對分析結(jié)果的影響得到校正。但對內(nèi)標(biāo)選擇的條件比較苛刻，多了一個(gè)內(nèi)標(biāo)物 增加了分離的要求。三、儀器與試劑儀器：安捷倫6890N氣相色譜儀；氫火焰離子化檢測器；色譜柱：HP-5M5I 毛細(xì)管柱（）。試劑：氫氣、氮

4、氣、壓縮空氣；氯仿（分析純）二氯苯、二甲苯標(biāo)樣；內(nèi)標(biāo)物分別為氯苯、甲苯；含上述成分未知樣品、。四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容與步驟（一）準(zhǔn)備與開機(jī)1打開主機(jī)箱門，在進(jìn)樣口和檢測器間安裝 HP-5M5I毛細(xì)管柱。2打開氮?dú)?、空氣和氫氣開關(guān)。3打開計(jì)算機(jī)電源開關(guān)，打開 GC電源開關(guān)。4雙擊桌面上的Instrument online圖標(biāo)進(jìn)入工作站系統(tǒng)。（二）樣品分析與采集數(shù)據(jù)1 在 Method and Runeontrol 界面上選擇 File Load Method，選擇分 析方法文件。也可以選擇 Method Edit Method 進(jìn)行參數(shù)修改。進(jìn)樣口 ：溫度270C，分流比10： 1色譜柱：HP-5M5I毛

5、細(xì)管柱（30m x 0.25mm x 0.25mm）,柱內(nèi)流量為 1.5ml/min 柱溫：35C（ 3min） 10/min80 卜 C 30俾生。.r（ 2min）檢測器：溫度270C，氫氣流量為30ml/min，空氣為300ml/min2 手動進(jìn)樣：在 Method and Runcontrol界面上選擇 Runcontrol Sample In formation ，依提示輸入保存路徑、文件名稱、樣品名稱、操作者等信息，進(jìn) 樣時(shí)同時(shí)按GC面板上的Start鍵，即開始樣品分析與數(shù)據(jù)采集。3樣品分析：用微量注射器分別移取上述標(biāo)樣、樣品各 0.5卩l(xiāng)進(jìn)樣分析，各 重復(fù)三次。（三）報(bào)告輸出1

6、在 Instrument offline主界面上選擇 View Data Analysis，進(jìn)入界面。2選擇所要處理的數(shù)據(jù)文件。3選擇所要選用的報(bào)告格式，輸出報(bào)告。（四）關(guān)機(jī)1待氣化室及檢測器穩(wěn)定降到150C以下、柱溫降到接近室溫，方可關(guān)機(jī)。2在Instrument Online主界面上退出色譜工作站。3依次關(guān)閉GC電源，計(jì)算機(jī)電源。4關(guān)閉氣源和總電源。五、注意事項(xiàng)1. 必須先通入載氣，再開電源，實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)應(yīng)先關(guān)掉電源，再關(guān)載氣。2. 本氣相色譜儀檢測器采用起動點(diǎn)火裝置，在點(diǎn)火后喲阿檢查氫火焰是否已經(jīng) 點(diǎn)燃，若未能成功點(diǎn)燃，須在 Edit Method Dector下點(diǎn)擊Reignite進(jìn)行重

7、新 點(diǎn)火。3. 在進(jìn)樣之前，必須修改文件的路徑，否則會沖毀上次的分析結(jié)果。4. 確保每次移取樣品的體積相同；進(jìn)樣要用手護(hù)住注射器的金屬針部分，迅速、 垂直向下，確保樣品在氣化室中瞬間氣化，以免將其扭曲甚至折斷。5. 切忌將大量氫氣排入室內(nèi)。6. 注意氣瓶溫度不要超過40C,在2米以內(nèi)不得有明火。使用完畢，立即關(guān) 閉氫氣鋼瓶的氣閥。六、數(shù)據(jù)處理1. 確定樣品中測定組分的色譜峰位置2. 計(jì)算校正系數(shù)fi / fs3. 計(jì)算樣品中測定的各組分的含量及數(shù)據(jù)的偏差。七、思考題1你認(rèn)為實(shí)驗(yàn)中所選取的內(nèi)標(biāo)物是否合適？為什么？2. 比較氣相色譜法中歸一法、內(nèi)標(biāo)、外標(biāo)法三種定量方法的優(yōu)缺點(diǎn)。3. 氫火焰檢測器的原理及其應(yīng)用范圍。附氣相色譜儀簡介氣相色譜儀典型流程圖氣相色譜儀雖然種類很多，形式也各不一樣，但主要由四