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1、離體蛙類心臟灌注及藥物的影響1第六次實(shí)驗(yàn)第六次實(shí)驗(yàn)離體蛙類心臟灌注及藥物的影響離體蛙類心臟灌注及藥物的影響離體蛙類心臟灌注及藥物的影響2主要內(nèi)容主要內(nèi)容離體蛙類心臟灌注及藥物的影響3 制備離體蛙心制備離體蛙心 取蛙,破壞腦和脊髓取蛙,破壞腦和脊髓 剪開胸腔和心包膜,剪開胸腔和心包膜,辨認(rèn)蛙心結(jié)構(gòu)辨認(rèn)蛙心結(jié)構(gòu) 結(jié)扎右主動(dòng)脈,結(jié)扎靜脈結(jié)扎右主動(dòng)脈,結(jié)扎靜脈(避開靜脈竇)(避開靜脈竇) 左主動(dòng)脈處結(jié)扎、切口、插管、固定、左主動(dòng)脈處結(jié)扎、切口、插管、固定、 剪斷,剪斷,蛙心離體蛙心離體 實(shí)驗(yàn)步驟:實(shí)驗(yàn)步驟:離體蛙類心臟灌注及藥物的影響4 連接實(shí)驗(yàn)裝置連接實(shí)驗(yàn)裝置 實(shí)驗(yàn)裝置參數(shù)設(shè)置實(shí)驗(yàn)裝置參數(shù)設(shè)置 給予

2、處理因素給予處理因素離體蛙類心臟灌注及藥物的影響5離子影響:離子影響:0.65%NaCl;2%CaCl2;1%KCl遞質(zhì)影響:遞質(zhì)影響:1:10000NA;1:100000Ach; 1:2000阿托品阿托品+1:100000Ach藥物影響:藥物影響:0.025%毒毛旋花子甙毒毛旋花子甙K溫度影響:溫度影響:4林格液林格液酸堿影響:酸堿影響:2.5%NaHCO3; 3%乳酸乳酸+2.5%NaHCO3離體蛙類心臟灌注及藥物的影響6記錄正常收縮曲線記錄正常收縮曲線幅幅 度:度:心臟收縮的強(qiáng)弱心臟收縮的強(qiáng)弱疏密度:疏密度:心搏頻率心搏頻率規(guī)律性:規(guī)律性:心搏的節(jié)律性心搏的節(jié)律性基基 線:線:心室舒張的

3、程度心室舒張的程度記錄記錄離體蛙類心臟灌注及藥物的影響7 制備離體蛙心標(biāo)本不要傷及靜脈竇;插管制備離體蛙心標(biāo)本不要傷及靜脈竇;插管 插入左心室后要及時(shí)將血液吸出,以防堵塞。插入左心室后要及時(shí)將血液吸出,以防堵塞。2. 2. 保持蛙心的活性,注意滴加林格液。保持蛙心的活性,注意滴加林格液。3. 3. 每次換液時(shí)蛙心內(nèi)的液面應(yīng)保持大致相每次換液時(shí)蛙心內(nèi)的液面應(yīng)保持大致相 同的高度同的高度( (負(fù)荷相同負(fù)荷相同) )。4. 4. 吸管要分開使用。吸管要分開使用。注意事項(xiàng):注意事項(xiàng):離體蛙類心臟灌注及藥物的影響85. 5. 加藥時(shí)先加加藥時(shí)先加1 1滴,出現(xiàn)效應(yīng)后應(yīng)及時(shí)更換滴,出現(xiàn)效應(yīng)后應(yīng)及時(shí)更換 為

4、林格液。為林格液。6. 6. 每次施加處理因素前應(yīng)先記錄一端正常曲每次施加處理因素前應(yīng)先記錄一端正常曲 線,做好標(biāo)記,要有恢復(fù)曲線。線,做好標(biāo)記,要有恢復(fù)曲線。7. 注意保護(hù)換能器,不要過(guò)度牽拉,液體不注意保護(hù)換能器,不要過(guò)度牽拉,液體不 要滴在上面。要滴在上面。離體蛙類心臟灌注及藥物的影響9 1. 1. 截取各種處理因素具有代表性的蛙心收縮截取各種處理因素具有代表性的蛙心收縮 曲線,制成曲線,制成單頁(yè)圖單頁(yè)圖打印出來(lái)。打印出來(lái)。2. 2. 分析各處理因素對(duì)蛙心收縮曲線影響及其分析各處理因素對(duì)蛙心收縮曲線影響及其 原理,寫出實(shí)驗(yàn)報(bào)告。原理,寫出實(shí)驗(yàn)報(bào)告。實(shí)驗(yàn)結(jié)果處理實(shí)驗(yàn)結(jié)果處理離體蛙類心臟灌注

5、及藥物的影響10離體蛙類心臟灌注及藥物的影響11 0.65% 0.65%NaCl滲透壓與林格液相同但缺滲透壓與林格液相同但缺K+,Ca2+ Ca2+減少,收縮力減弱減少,收縮力減弱 K+減少,膜對(duì)減少,膜對(duì)K+通透性降低,靜息電位絕通透性降低,靜息電位絕 對(duì)值減少對(duì)值減少 K+外流減少,外流減少,Na+內(nèi)流增加,內(nèi)流增加,4期期If增強(qiáng)增強(qiáng) 1.1.等量等量 0.65%NaCl,0.65%NaCl,收縮力減弱,心率加快收縮力減弱,心率加快離體蛙類心臟灌注及藥物的影響12 胞外胞外Ca2+濃度升高,內(nèi)流增多,心肌濃度升高,內(nèi)流增多,心肌收縮力增加,幅度增大;但胞內(nèi)收縮力增加,幅度增大;但胞內(nèi)Ca

6、2+過(guò)過(guò)多,肌鈣蛋白與多,肌鈣蛋白與Ca2+結(jié)合不能解離發(fā)生,結(jié)合不能解離發(fā)生,導(dǎo)致心肌舒張不完全,嚴(yán)重者可發(fā)生鈣導(dǎo)致心肌舒張不完全,嚴(yán)重者可發(fā)生鈣僵,圖中表現(xiàn)為收縮曲線上移。僵,圖中表現(xiàn)為收縮曲線上移。 Ca2+濃度升高,抑制濃度升高,抑制Na+內(nèi)流內(nèi)流2. 2%2. 2% CaCl2 CaCl2收縮力增加,心率減慢收縮力增加,心率減慢離體蛙類心臟灌注及藥物的影響13 胞外胞外K K+ +濃度升高,濃度升高,CaCa2+2+內(nèi)流減少(競(jìng)爭(zhēng))內(nèi)流減少(競(jìng)爭(zhēng))胞外胞外K K+ +濃度升高,靜息電位絕對(duì)值減少,濃度升高,靜息電位絕對(duì)值減少,低于低于-55-60mV-55-60mV時(shí),快時(shí),快NaN

7、a通透失活,興通透失活,興奮性下降,心率減慢,甚至停止在舒張奮性下降,心率減慢,甚至停止在舒張期期3. 1% KCl3. 1% KCl,收縮力減弱,心率減慢收縮力減弱,心率減慢離體蛙類心臟灌注及藥物的影響14 NA NA與心肌與心肌受體結(jié)合后,激活受體結(jié)合后,激活A(yù)C,Ca2+AC,Ca2+通道開放增加,正性變力、通道開放增加,正性變力、變時(shí)、變傳導(dǎo)變時(shí)、變傳導(dǎo)4.NA4.NA收縮力增加,心率加快收縮力增加,心率加快離體蛙類心臟灌注及藥物的影響15 Ach與心肌細(xì)胞膜上與心肌細(xì)胞膜上M-R結(jié)合,結(jié)合,抑制抑制AC,抑制鈣通道,同時(shí)激活,抑制鈣通道,同時(shí)激活GK蛋白,蛋白, K+外流增加,負(fù)性變

8、力、外流增加,負(fù)性變力、變時(shí)、變傳導(dǎo)變時(shí)、變傳導(dǎo) 5.Ach5.Ach收縮力減弱,心率減慢收縮力減弱,心率減慢離體蛙類心臟灌注及藥物的影響16 阿托品為阿托品為M膽堿受體拮抗劑,但離體蛙心膽堿受體拮抗劑,但離體蛙心無(wú)神經(jīng)支配,無(wú)無(wú)神經(jīng)支配,無(wú)ACh釋放,加入阿托品后無(wú)釋放,加入阿托品后無(wú)明顯作用;明顯作用; 再加入再加入Ach,由于阿托品已將,由于阿托品已將M膽堿受體膽堿受體阻斷,故阻斷,故Ach無(wú)作用。無(wú)作用。 6.6.阿托品阿托品+Ach+Ach,無(wú)明顯變化無(wú)明顯變化離體蛙類心臟灌注及藥物的影響17 抑制抑制Na+-K+ATP酶使細(xì)胞內(nèi)酶使細(xì)胞內(nèi)Na+量升量升高,高,K+下降,胞內(nèi)下降,胞

9、內(nèi)Na+升高,可促進(jìn)細(xì)胞升高,可促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)外內(nèi)外Na+-Ca2+交換交換,使細(xì)胞內(nèi)使細(xì)胞內(nèi)Ca2+增多,從增多,從而加強(qiáng)心肌細(xì)胞收縮力。而加強(qiáng)心肌細(xì)胞收縮力。 (毒(毒K的作用有賴于胞外的作用有賴于胞外 Ca2+的存在)的存在) 7.7.毒毒K K收縮力增加收縮力增加離體蛙類心臟灌注及藥物的影響18 溫度過(guò)低時(shí),肌凝蛋白頭部溫度過(guò)低時(shí),肌凝蛋白頭部ATPATP酶酶活性降低酶活性降低,代謝水平降活性降低酶活性降低,代謝水平降低,各離子通道蛋白活性降低,心低,各離子通道蛋白活性降低,心臟收縮活動(dòng)減弱,心率減慢。臟收縮活動(dòng)減弱,心率減慢。 8. 48. 4冷林格液冷林格液收縮力減弱,心率減慢收縮力減

10、弱,心率減慢離體蛙類心臟灌注及藥物的影響19 NaHCO3 NaHCO3可使細(xì)胞內(nèi)可使細(xì)胞內(nèi)H H+ +外逸,與胞外外逸,與胞外K K+ +進(jìn)行進(jìn)行H H+ +-K-K+ +交換,交換,K K+ +外流減少,細(xì)胞的膜外流減少,細(xì)胞的膜電位減小甚至興奮性完全喪失。另外,電位減小甚至興奮性完全喪失。另外, NaHCONaHCO3 3也使林格液中游離的也使林格液中游離的CaCa2+2+濃度降濃度降低(如形成低(如形成CaCOCaCO3 3沉淀),內(nèi)流沉淀),內(nèi)流CaCa2+2+減少,減少,心肌收縮力降低。心肌收縮力降低。 9. 2.5%NaHCO39. 2.5%NaHCO3收縮力減弱收縮力減弱離體蛙

11、類心臟灌注及藥物的影響20 H+可競(jìng)爭(zhēng)性抑制可競(jìng)爭(zhēng)性抑制Ca2+與肌鈣蛋白結(jié)合亞單與肌鈣蛋白結(jié)合亞單位的結(jié)合,使肌凝球蛋白位的結(jié)合,使肌凝球蛋白ATP酶活性降低酶活性降低; H+使鈣從肌漿網(wǎng)釋放量減少使鈣從肌漿網(wǎng)釋放量減少,抑制抑制Ca2+釋放釋放; 胞外胞外H+升高還能降低鈣通道的活性,使升高還能降低鈣通道的活性,使Ca2+內(nèi)流降內(nèi)流降低,心臟的收縮活動(dòng)減弱。加入低,心臟的收縮活動(dòng)減弱。加入 NaHCO3后中后中和酸,心臟活性逐漸恢復(fù)。和酸,心臟活性逐漸恢復(fù)。10. 10. 乳酸乳酸收縮力降低,再加入收縮力降低,再加入NaHCO3,NaHCO3,逐漸恢復(fù)逐漸恢復(fù)離體蛙類心臟灌注及藥物的影響21下次內(nèi)容下次內(nèi)容家兔呼吸運(yùn)動(dòng)的調(diào)節(jié)呼吸節(jié)律的形成呼吸運(yùn)動(dòng)的調(diào)節(jié)方式實(shí)驗(yàn)步驟、注意事項(xiàng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的處理、打印、分析離體蛙類心臟灌注及藥物的影響22心室心室左心房左心房右心房右心房動(dòng)脈動(dòng)脈圓錐圓錐左主動(dòng)左主動(dòng)脈脈 弓弓右主動(dòng)右主動(dòng)脈脈 弓弓離體蛙類心臟灌注及藥物的影響23背背 面面靜脈竇靜脈竇后腔后腔靜脈靜脈右前腔右前腔靜靜 脈脈左前腔左前腔靜靜 脈脈離體蛙類心臟灌注及藥物的影響24心室心室左心房左心房右心房右心房動(dòng)脈動(dòng)脈圓錐圓錐左主動(dòng)左主動(dòng)脈脈 弓弓右主動(dòng)右主動(dòng)脈脈 弓弓離體蛙類心臟灌注及藥物的影響25離體蛙類心臟灌注及藥物的影響2

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