HIV初篩實(shí)驗(yàn)室工作制度及操作規(guī)范

1、hiv快速檢測實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)范及工作制度一、抽血標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 1、適 用 范 圍 需做血液檢測的對象。 2、試 劑 與 材 料 碘酒 、酒精棉 、棉簽 、橡皮止血帶 、注射器 （一次性采血器）、試管 、止血棉。 3、操 作 步 驟 3.1 核對被檢者姓名并標(biāo)價(jià)試管； 3.2 請被檢者入座，伸出手臂放在采血墊上； 3.3 用橡皮止血帶扎緊并請被檢者握緊拳頭； 3.4 選擇靜脈，用碘酒棉在采血部位由里向外擦拭（直徑約6cm左右）消毒； 3.5 用酒精棉脫碘； 3.6 把一次性注射器（一次性采血器）打開，在采血部位穿刺靜脈，抽取血液； 3.7 放松橡皮止血帶，拔出針頭，同時(shí)請被檢者用止血棉壓迫止血。

2、二、酒精棉球的制備1. 試劑與材料 無水乙醇（分析純） 、消毒蒸餾水若干 、消毒量筒（1000ml） 、消毒盛器2. 操作步驟2.1 把消毒棉放入消毒盛器中待用。2.2 取165ml消毒蒸餾水到入消毒好的量筒中，再加入一瓶500ml無水乙醇充分混勻。2.3 把配好的75酒精到入放有消毒棉的盛器中 三、樣品的采集和處理 1 .范圍 本章規(guī)定了用于艾滋病病毒（hiv）檢測的血清、漿和全血樣品的采集和處理方法，適用于hiv抗體檢測、抗原檢測、核酸檢測、cd4+/cd8+t淋巴細(xì)胞測定和hiv分離培養(yǎng)。2 .操作步驟2 .1樣品的采集和處理 因特殊臨床治療導(dǎo)致自發(fā)熒光的樣品不可用于熒光方法測試。2.4

3、.6 接受樣品時(shí)應(yīng)填寫樣品接受單。 四、電 熱 恒 溫 水 浴 箱 操 作 規(guī) 程1.概 述： 本電熱恒溫水浴箱主要用于科研單位、醫(yī)療單位及化驗(yàn)所檢查化驗(yàn)病理血清等用。2.技術(shù)性能： 工作環(huán)境：常溫常壓條件下正常工作。 技術(shù)指標(biāo)：溫度調(diào)節(jié)范圍：3765 溫度波動： 1 溫度均勻性： 13.使用方法：3.1使用是必須加入溫水，可縮短加熱時(shí)間和節(jié)約用電。3.2打開電源開關(guān)，電源指示燈亮表示電源接通。3.3旋轉(zhuǎn)恒溫控制器旋鈕，加熱指示燈亮表示電源接通，當(dāng)溫度表上的溫度達(dá)到所需使用的溫度時(shí)，將恒溫控制器的旋鈕調(diào)整在恒溫指示燈忽亮忽熄點(diǎn)，待數(shù)分鐘后即能自動恒溫控制。3.4恒溫控制器的刻度，僅可作溫度對照

4、指示，并非溫度指示刻度。4. 點(diǎn)檢程序：4.1 為保證水浴箱溫度的 準(zhǔn)確性必須每日使用溫度計(jì)測量水浴箱內(nèi)水溫，并做好日溫度記錄。4.2每半年由設(shè)備科檢測校正一次，且附有原始記錄。5. 注意事項(xiàng)：5.1箱外殼必須有效接地。5.2在未加水前，切勿開電源，以防止電熱管內(nèi)的電熱絲燒壞。5.3非必要時(shí)，請勿拆開右冊蓋板，以利安全。 五、生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)程 (一)、 適用范圍： 生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室分為 四個(gè)等級（本文涉及一、二級），上一級實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)程除了必須遵守 一級實(shí)驗(yàn)室的所有操作規(guī)程外還必須遵守本級所特有的操作規(guī)程。(二)、 操作步驟：一級生物安全防護(hù)要點(diǎn) 1、 常規(guī)微生物安全操作要點(diǎn) 1）

5、 禁止非工作人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，參觀實(shí)驗(yàn)室等特殊情況須經(jīng)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)后方可進(jìn)入。 2） 接觸微生物或含有微生物的物品后，脫掉手套離開實(shí)驗(yàn)室前要洗手。 3） 禁止在工作區(qū)飲食、吸煙、處理隱形眼睛、化妝及儲存食物。 4） 用移液器吸取液體，禁止口吸。 5） 應(yīng)制定尖銳器具的安全操作規(guī)程。 6） 按照實(shí)驗(yàn)室安全操作規(guī)程操作，以降低濺出和汽溶膠的產(chǎn)生。 7） 每天工作前后至少消毒一次工作臺面，活性物質(zhì)濺出后要及時(shí)消毒。 8） 所有培養(yǎng)物、儲存物及規(guī)定的廢棄物在運(yùn)出實(shí)驗(yàn)室之前必須進(jìn)行消毒，如高壓消毒。需運(yùn)出實(shí)驗(yàn)室滅活的物品必須放在 專用密閉容器內(nèi)。 9） 制定有效的防鼠防蟲措施。 2、特殊的安全操作規(guī)程

6、 無特殊的安全操作規(guī)程 二級生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室 1、常規(guī)微生物安全操作要點(diǎn) 與一級生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室（一）相同。 2、特殊的安全操作規(guī)程 1） 進(jìn)行感染性實(shí)驗(yàn)時(shí)，禁止他人進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，或必須經(jīng)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人同意后方可進(jìn)入。 2） 實(shí)驗(yàn)室主任有權(quán)決定進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作人員的名單，并負(fù)有最終責(zé)任。進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的工作人員應(yīng)了解潛在風(fēng)險(xiǎn)并符合進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的特殊要求（如，經(jīng)過免疫接種）。免疫耐受或正在使用免疫抑制劑的工作人員必須經(jīng)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人同意方可在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)工作。 3） 實(shí)驗(yàn)室入口必須貼上國際通用的生物危險(xiǎn)標(biāo)志，注明危險(xiǎn)因子、生物安全級別、需要的免疫、負(fù)責(zé)姓名和 、進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的特殊要求及離開實(shí)驗(yàn)室的程序。 4）工

7、作人員應(yīng)接受必須的免疫接種和相應(yīng)的抗體檢測（如乙型肝炎疫苗、卡介苗等）。 5）收集保留從事危險(xiǎn)性工作人員的基礎(chǔ)血清并定期檢測，如有問題及時(shí)處理。 六、移液器的使用與校準(zhǔn)的標(biāo)準(zhǔn)操作程序 一、移液器是生物實(shí)驗(yàn)室常用工具，它以使用方便、安全性好的性能適宜于各種實(shí)驗(yàn)，保養(yǎng)好移液器是 保證實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確、可靠的重要條件。因此特制定此標(biāo)準(zhǔn)操作程序： (一)、移液器的體積類別：可分為5種 0.510.0 l（分刻度為0.1 l） 540 l（分刻度為0.5 l） 40200 l（分刻度為1.0 l） 2001000 l） 15 m l （分刻度為50 l） (二)、移液器的使用方法 首先應(yīng)選擇或按說明書要求調(diào)節(jié)好

8、所需要的體積，裝上配套的加樣頭，以下所有操作都必須將移液器保持垂直狀態(tài)。 1、 前進(jìn)法 （！）將移液器按鈕壓到第一定點(diǎn)位置。 （2）將移液器加樣頭插到所需要移液樣品液面下23mm，慢慢松開。 （3）將加樣頭伸入需要樣品的容器，盡量將按鈕推至最后檔。 （4）松開按鈕，回到起點(diǎn)，退掉加樣頭。 2、倒退法 本方法適用于高黏度或易起泡沫的樣品加樣，也推薦用于極小量液體的加樣。 （1）將按鈕下壓至第二定點(diǎn)位置。 （2）將移液器的加樣頭插入所需要移液樣品液面下23mm，慢慢松開吸入液體。 （3）將加樣頭伸入需要樣品的容器，貼在容器內(nèi)壁，輕輕壓下操作按鈕至第一定點(diǎn)位置，待加樣頭中液體流凈后，撤出移液器。 （

9、4）遺留在加樣頭內(nèi)的液體可隨頭子棄去。 3、 重復(fù)操作法 可快速、簡單地重復(fù)進(jìn)行相同樣品，相同體積的加樣動作： （1）前面的3個(gè)步驟和倒退法的前3個(gè)步驟完全相同，完成第一次加樣動作。 （2）此時(shí)，移液器的按鈕保持在第一定點(diǎn)位置，重復(fù)第2、3步驟。 4、全血加樣：由于全血很粘稠 （1）按前進(jìn)法的第1和第2步操作，取出所需血樣。 （2）將移液器加樣頭伸入含有稀釋液的試管內(nèi)。 （3）用稀釋液反復(fù)數(shù)次，直到加樣頭內(nèi)液體清晰。七、酶標(biāo)儀洗板機(jī)的使用維護(hù)和校準(zhǔn) 設(shè)立常用儀器的維護(hù)及校準(zhǔn)制度，以保證儀器正常運(yùn)行。 1、每天 核對濾光片波長，檢查洗板機(jī)管道是否通暢，是否有漏夜現(xiàn)象。 2、每周 清潔儀器表面，保

10、護(hù)光學(xué)零件不沾灰塵。 3、每月 檢查洗滌時(shí)各孔是否有相應(yīng)的沖洗頭對位良好，負(fù)壓是否符合規(guī)定要求。 4、每年 檢查清洗濾光片，如果出現(xiàn)破裂或霉點(diǎn)則要更換，根據(jù)儀器內(nèi)具有的校準(zhǔn)程序或使用校準(zhǔn)板，對濾光片的精密度進(jìn)行校準(zhǔn)并保留記錄。 實(shí)驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn)異常情況，應(yīng)隨時(shí)進(jìn)行處理，可根據(jù)使用情況更換必要部件。每天實(shí)驗(yàn)后，做好使用記錄。八、廢棄物處理標(biāo)準(zhǔn)程序 為了避免實(shí)驗(yàn)室污染，hiv抗體實(shí)驗(yàn)室所廢棄物品必須按特定程序進(jìn)行清潔和消毒。 (一)、hiv抗體實(shí)驗(yàn)室所廢棄的物品 1、使用過的一次性注射器； 2、使用過的一次性試管； 3、使用過的一次性隔離服、口罩、帽子、乳膠手套、塑料手套； 4、使用過的一次性加樣頭

11、； 5、實(shí)驗(yàn)過程所用過的濾紙、棉球及實(shí)驗(yàn)用的塑料制品（如加樣反應(yīng)板等固體物質(zhì)）； 6、實(shí)驗(yàn)過程所廢棄的液體（血清、全血及尿液等）。 (二)、廢棄物的處理原則： 1、所有液體（血清、尿液、反應(yīng)液等）必須消毒。 2、所有廢棄的固體物質(zhì)，必須消毒后焚燒。對上述污染或可能造成污染的材料，在帶出hiv抗體實(shí)驗(yàn)室前應(yīng)進(jìn)行消毒后棄掉或焚燒。 (三)、廢棄物的消毒： 1、棄物缸內(nèi)要裝有10%（v/v）次氯酸鈉，（含10.000ppm有效氯）對廢棄的固體物進(jìn)行浸泡消毒。 2、生物安全柜、超凈臺、實(shí)驗(yàn)臺等臺面和儀器表面要用70%乙醇、4%甲醛水溶液或過氧乙酸等擦拭消毒。 3、溢出物用10%次氯酸鈉浸泡、擦拭。 4

12、、hiv抗體實(shí)驗(yàn)室每次做完試驗(yàn)后，紫外線燈消毒1520分鐘。 5、實(shí)驗(yàn)廢棄的固體物質(zhì)，經(jīng)消毒后裝于塑料袋或防漏器中。 6、實(shí)驗(yàn)室廢棄液體樣品（尿液、唾液、血清、血漿）100ml加漂白粉5g或二氯異氰尿酸鈉2g，1%次氯酸鈉溶液，作用6h-24h或煮沸100c20分鐘后棄入下水。 (四)、hiv抗體檢測實(shí)驗(yàn)室必備藥品與試劑： 1、次氯酸鈉 2、過氧乙酸 3、醫(yī)用酒精 4、碘氟 5、其它氯制劑 6、紫外線 7、廢棄物儲存、運(yùn)輸及消毒滅菌防漏的容器。九、hiv抗體檢測操作及報(bào)告撰寫注意事項(xiàng)1、收到樣品時(shí)應(yīng)該對樣品標(biāo)記送檢單中的內(nèi)容是否一致，尤其是編號并及時(shí)冷藏，登記科內(nèi)的標(biāo)本登記薄；2、實(shí)驗(yàn)前將所有

13、試劑從冰箱中取出，登記室內(nèi)溫度、濕度，恒溫培養(yǎng)箱及冰箱溫度，清空洗板機(jī)廢液瓶，準(zhǔn)備需要的移液器與移液頭，排列所需要檢測的樣品；3、實(shí)驗(yàn)過程中嚴(yán)格按照試劑說明書操作；4、實(shí)驗(yàn)結(jié)束后及時(shí)處理廢棄物；5、做好實(shí)驗(yàn)原始記錄（包括日期，樣品編號，實(shí)驗(yàn)結(jié)果，試劑名稱、批號、有效期、溫濕度，冰箱、培養(yǎng)箱溫度，儀器設(shè)備型號、儀器使用記錄等）；6、核對實(shí)驗(yàn)結(jié)果，撰寫報(bào)告，測試人，復(fù)核人，編制（主檢）人，校核人欄里簽名，檢品卡上部門負(fù)責(zé)人欄里簽名，送收樣室打??；7、取回報(bào)告，校對，在檢品卡校對欄中簽字（1人）；8、再送收樣事打印三份正式報(bào)告，取回三級簽發(fā)編制（主檢）審核 ，批準(zhǔn)欄簽名，日期一致，復(fù)印送檢化驗(yàn)單；9

14、一份科室存檔：化驗(yàn)單復(fù)印件和檢驗(yàn)報(bào)告； 三份報(bào)告送收樣室蓋章；10、登記報(bào)告編號存檔；11、客戶取報(bào)告并簽收。十、艾滋病篩查實(shí)驗(yàn)室常規(guī)消毒清理工作制度實(shí)驗(yàn)室為防止陽性材料造成的可能性污染，制定以下消毒制度，請以認(rèn)真執(zhí)行。 1、檢測可疑樣品時(shí)，充分準(zhǔn)備好廢棄物消毒具及消毒藥、液如：次氯酸鈉含有效氯20005000mg/l，75%乙醇和2%戊二醛。 2、實(shí)驗(yàn)室用的吸頭及時(shí)打入消毒器皿中。 3、一次性手套，隔離服更換后，應(yīng)丟棄在一次性垃圾袋內(nèi)。 4、常用消毒方法 4、1物理消毒方法 4、1、1高壓蒸汽消毒，121c，保持1520min； 4、1、2干燥空氣烘箱消毒（干烤法），140c，保持23h。

15、4、2化學(xué)消毒方法 4、2、1廢棄物缸：5000mg/l次氯酸鈉 4、2、2工作臺面及儀器表面：75%乙醇 4、2、3溢出物：5000mg/l次氯酸鈉 4、2、4污染的臺面和器具：2000mg/l次氯酸鈉也可用過氧化氫或過氧化乙酸，器械可用2%戊二醛消毒 5、實(shí)驗(yàn)室中發(fā)生可疑樣品溢出時(shí)，應(yīng)及時(shí)用消毒劑浸泡的吸水物質(zhì)覆蓋，10-15分鐘，用消毒劑清洗該地方。 6、全部實(shí)驗(yàn)工作結(jié)束后，應(yīng)對實(shí)驗(yàn)臺、儀器、設(shè)備（接觸部位）地面進(jìn)行徹底消毒處理。 7、廢棄物處理 從hiv實(shí)驗(yàn)室出來的所有廢棄物，包括不再需要的樣品，培養(yǎng)物和其他物品，均應(yīng)視為感染性廢棄物，處理應(yīng)符合實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求（gb194892

16、004）和消毒技術(shù)規(guī)范（2002年版）十一、艾滋病篩查實(shí)驗(yàn)室資料保密制度為確保實(shí)驗(yàn)室所有資料嚴(yán)格保密，應(yīng)遵守以下制度：1、與hiv/aids相關(guān)檢測項(xiàng)目的所有資料均應(yīng)嚴(yán)格保密，包括送檢單與檢測記錄的保管，報(bào)告單的發(fā)放和工作人員年度采血檢測等。2、hiv 初篩實(shí)驗(yàn)室所有人員應(yīng)具有高度的保密意識，嚴(yán)格遵守國家規(guī)定的保密制度的各項(xiàng)要求。3、工作人員不得向無關(guān)人員提供檢驗(yàn)結(jié)果，要妥善保存各種實(shí)驗(yàn)記錄。4、對初篩疑似陽性感染者不能告訴受檢者本人，更不能到處亂講。5、對初篩證實(shí)的陽性結(jié)果要以機(jī)密程序上報(bào)主管領(lǐng)導(dǎo)機(jī)構(gòu)，并對本人做好保密教育。6、初篩實(shí)驗(yàn)室的有關(guān)檢驗(yàn)資料，檔案、結(jié)果記錄其他人不得翻錄查閱，修改

17、和銷毀。7、實(shí)驗(yàn)室工作人員，不能在非正式場合對外提供任何結(jié)果、數(shù)據(jù)。8、保密制度納入年度考核，發(fā)現(xiàn)問題及時(shí)處理，并根據(jù)情況修訂保密制度。 十二、艾滋病篩查實(shí)驗(yàn)室安全防護(hù)制度為確保實(shí)驗(yàn)室人員的工作安全，防止交叉感染，請嚴(yán)格遵守安全防護(hù)制度1、工作人員要完成與工作有關(guān)的充足有效的技術(shù)培訓(xùn)，要了解hiv危害，提高全員安全意識，實(shí)驗(yàn)室安全負(fù)責(zé)人要對工作和環(huán)境的安全負(fù)責(zé)，所有工作人員都有責(zé)任保護(hù)自己和他人的安全。2、實(shí)驗(yàn)室工作人員年度采血檢測hiv抗體和備案制度。3、對有放試劑、樣品血清的冰箱應(yīng)上鎖，專人管理。 4、實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)熟練掌握操作知識和消毒技術(shù)。5、進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室應(yīng)穿隔離衣，戴手套，傳染性危險(xiǎn)大時(shí)應(yīng)

18、戴雙層手套，戴防護(hù)鏡，口罩，如防護(hù)用具破損應(yīng)及時(shí)更換，不用戴手套的手觸摸暴露的皮膚等部位。 6、實(shí)驗(yàn)期間盡量避免使用利器，易碎器皿，禁止采用口腔吸液管。 7、送檢樣品應(yīng)視為有潛在傳染性，由專人接管，登記，存放，提取。 8、對帶入和帶出實(shí)驗(yàn)室的物品都應(yīng)進(jìn)行檢查，包裹必須在下列情況下打開；人員在處理感染源方面受過訓(xùn)練；具有處理感染源設(shè)備的實(shí)驗(yàn)室；穿防護(hù)服的工作人員；用后置可消毒的容器。 9、實(shí)驗(yàn)用吸頭、手套、隔離服、污染物、廢棄物均放在指定垃圾袋中統(tǒng)一進(jìn)行消毒，焚燒到無害化處理。 10、不得在實(shí)驗(yàn)室中吃食物，化妝打扮等，不得在實(shí)驗(yàn)室會客。 11、實(shí)驗(yàn)室用品（包括工作服）不得用于其他用途，不可將私人

19、和無關(guān)的物品帶入實(shí)驗(yàn)室。 12、工作完畢，脫去手套后洗手，再脫去工作服，用肥皂和流動水洗手，洗手后離開實(shí)驗(yàn)室。 13、實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，要對工作平臺、儀器、地面進(jìn)行消毒處理。 14、遇有意外事故，應(yīng)立即口頭和書面報(bào)告上級部門，并進(jìn)行局部處理，如含氯消毒劑浸泡傷口，洗眼，漱口等，如遇高危意外事故，除進(jìn)行局部處理外，同時(shí)應(yīng)立即采取預(yù)防措施，包括對其隨訪，hiv檢測，休息并暫離崗位二個(gè)月，按醫(yī)囑服用hiv藥物等。十三、hiv實(shí)驗(yàn)室進(jìn)入情況登記表hiv實(shí)驗(yàn)室進(jìn)入情況登記表姓 名事 由進(jìn)入時(shí)間離開時(shí)間批準(zhǔn)人備注 2011年大番坡鎮(zhèn)衛(wèi)生院檢驗(yàn)科艾滋病/hiv初篩實(shí)驗(yàn)室年度工作總結(jié)為促進(jìn)艾滋病篩查實(shí)驗(yàn)室規(guī)范化管理，提高實(shí)驗(yàn)室檢測技術(shù)水平， 根據(jù)hiv篩查實(shí)驗(yàn)室的各項(xiàng)要求，我們組織全體職工認(rèn)真學(xué)習(xí)了相關(guān)文件和科室的各種規(guī)章制度，對一年來的工作進(jìn)行了認(rèn)真的分析總結(jié)，從中吸取經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)，改進(jìn)今后的工作。一、認(rèn)真學(xué)習(xí)hiv篩查實(shí)驗(yàn)室各種制度,嚴(yán)格執(zhí)行各種規(guī)章制度.二、開展hiv篩查情況全年接收hiv篩查標(biāo)本 份,無一