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文檔簡介
1、第一章第一章 血液標(biāo)本采集與處理血液標(biāo)本采集與處理 臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)技術(shù) 第二十一章第二十一章 感染性疾病及其感染性疾病及其 免疫檢測免疫檢測 李 濤 目 錄 第一節(jié) 概述 第二節(jié) 細(xì)菌感染性疾病 第三節(jié) 真菌感染性疾病 第四節(jié) 病毒感染性疾病 第五節(jié) TORCH感染 第六節(jié) 寄生蟲感染 第七節(jié) 其他病原體感染 第一節(jié)第一節(jié) 概述概述 重點(diǎn)提示 感染和感染性疾病 機(jī)體對病原體入侵的呼應(yīng)方式 感染性疾病的免疫學(xué)標(biāo)志物及其運(yùn)用 先天性感染、TORCH綜合征和性傳播疾病 感染和感染性疾病 感染是病原體和人體之間相互作用、相互斗爭,導(dǎo)致 機(jī)體發(fā)生病理改動(dòng)的過程。 感染性疾病是指病原體破壞機(jī)體正常機(jī)能后產(chǎn)
2、生的各 種感染病癥。 機(jī)體對病原體入侵的呼應(yīng)方式 分為固有免疫和順應(yīng)性免疫。根據(jù)機(jī)體的反響不同, 免疫應(yīng)對分為維護(hù)性免疫應(yīng)對和變態(tài)反響。根據(jù)參與成分 和功能不同,免疫應(yīng)對分為體液免疫和細(xì)胞免疫。 感染性疾病的免疫學(xué)標(biāo)志物及其運(yùn)用 包括特異性標(biāo)志物和非特異性標(biāo)志物。特異性標(biāo)志物 主要是抗原、抗體和特異性免疫細(xì)胞。非特異性標(biāo)志物指 感染性疾病在內(nèi)的多種疾病均可引起其升高的標(biāo)志物。 特異性抗原是直接診斷目的;IgM抗體常作為感 染早期的間接診斷目的;IgG抗體是流行病學(xué)調(diào)查的目 的,也是機(jī)體主要的維護(hù)性抗體。 先天性感染、TORCH綜合征和性傳播疾病 先天性感染:胎兒在母體內(nèi)遭到的感染,又稱宮內(nèi)感
3、染。 TORCH綜合征:TOX、CMV、RV、HSV等病原體引起宮內(nèi) 感染時(shí),可導(dǎo)致流產(chǎn)、死胎、畸形、發(fā)育異常,或出現(xiàn)智 力低下、視聽妨礙等嚴(yán)重后果。 性傳播疾?。嚎梢越?jīng)過親密接觸傳播的傳染病。 第二節(jié)第二節(jié) 細(xì)菌感染性疾病細(xì)菌感染性疾病 重點(diǎn)提示 非特異性標(biāo)志物:降鈣素原、C-反響蛋白、白細(xì)胞介 素6 鏈球菌感染:ASO 沙門菌感染:肥達(dá)實(shí)驗(yàn) 結(jié)核分枝桿菌感染:抗TB抗體和結(jié)核感染T細(xì)胞 幽門螺旋桿菌感染:抗Hp抗體、Hp尿素酶 一、非特異性標(biāo)志物 降鈣素原:全身性細(xì)菌、真菌和寄生蟲感染時(shí),PCT 異常增高,且與感染的嚴(yán)重程度及預(yù)后相關(guān),常用ELISA 和CLIA檢測。 C-反響蛋白: 細(xì)菌
4、感染時(shí)CRP10mg/L??勺鳛榧?xì)菌 感染與病毒感染的鑒別診斷目的。 白細(xì)胞介素-6:IL-6目前主要用于感染性疾病的輔助 診斷,常用ELISA和CLIA檢測細(xì)胞外IL-6,用FCM檢測細(xì)胞 內(nèi)IL-6。 鏈球菌感染 ASO增高見于A族鏈球菌感染。常用速率散射免疫比濁 、ELISA等方法檢測,其中速率散射免疫比濁試劑可在全 自動(dòng)生化分析儀上運(yùn)用。 沙門菌感染 肥達(dá)實(shí)驗(yàn) 傷寒沙門菌抗O凝集效價(jià)1:80、抗H1:160、副傷 寒沙門菌抗H1:80才有診斷意義。 結(jié)核分枝桿菌感染 常用檢驗(yàn)工程有抗TB抗體和結(jié)核感染T細(xì)胞。 抗TB抗體常用ELISA和ICGT檢測,結(jié)核感染T細(xì)胞 運(yùn)用T-SPOT T
5、B檢測。 抗TB抗體多呈弱陽性反響。T-SPOT TB檢測結(jié) 核激活的特異性T細(xì)胞分泌的IFN-,可防止接種 BCG的影響。二者均不能區(qū)分既往感染和現(xiàn)癥感染 。 幽門螺旋桿菌感染 常用檢驗(yàn)工程有抗Hp抗體和Hp尿素酶??贵w常用 ELISA、IBT和ICGT檢測??乖S肊LISA和ICGT檢測 。 未進(jìn)展Hp根治的人群,抗體陽性反響思索Hp感染 ;進(jìn)展過Hp根治的人群,抗體陽性反響需求鑒別既往 感染與復(fù)發(fā)感染。 Hp抗原檢測陽性反響結(jié)合臨床病癥可診斷Hp感染 。 第三節(jié)第三節(jié) 真菌感染性疾病真菌感染性疾病 重點(diǎn)提示 常用檢驗(yàn)工程有G實(shí)驗(yàn)和GM實(shí)驗(yàn),常用ELISA和CLIA檢 測。 G實(shí)驗(yàn)在念珠
6、菌、曲霉菌、肺孢子菌、鐮刀菌、地霉 菌、組織胞漿菌、毛孢子菌等感染中均可升高。透析、鏈 球菌敗血癥、輸入蛋白或運(yùn)用香菇多糖和磺胺類藥物可導(dǎo) 致假陽性反響。 GM實(shí)驗(yàn)在隱球菌屬、曲霉菌屬、青霉/擬青霉等感染 中均可升高。哌拉西林/他唑巴坦、阿莫西林-克拉維酸、 食物中的GM抗原、腸道中定值的曲霉釋放GM進(jìn)入血液循環(huán) 可導(dǎo)致假陽性反響。 第四節(jié)第四節(jié) 病毒感染性疾病病毒感染性疾病 重點(diǎn)提示 病毒和病毒感染 肝炎病毒感染 呼吸道病毒感染 輪狀病毒感染 EB病毒感染 人類免疫缺陷病毒感染 病毒和病毒感染 病毒侵入機(jī)體后可引起病毒去除或病毒感染,取決于 侵入病毒的毒力和數(shù)量以及機(jī)體的易感性和免疫外形。病
7、 毒侵入機(jī)體并在體細(xì)胞內(nèi)增殖的過程稱為病毒感染。 肝炎病毒感染-分型與傳播途徑 典型的肝炎病毒有五種亞型,分別是HAV、HBV、HCV、HDV 和HEV。 傳播途徑分別是:HAV和HEV經(jīng)過污染的食物和水,HBV和 HCV經(jīng)過血液、性途徑和母嬰途徑等,HDV在HBV感染人群中傳 播。 肝炎病毒感染-HAV感染 常用檢驗(yàn)工程是抗-HAV IgM??笻AV IgM是近期感染 的標(biāo)志??笻AV IgG具有維護(hù)性,是流行病學(xué)調(diào)查的目的 。 肝炎病毒感染-HBV感染1 HBV的抗原抗體系統(tǒng)包括HBsAg與抗-HBs、HBeAg與抗- HBe、HBcAg與抗-HBc、PreS1Ag與抗-PreS1、Pre
8、S2Ag與抗 -PreS2。 肝炎病毒感染-HBV感染2 HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe和抗-HBc五項(xiàng)俗稱乙 肝五項(xiàng)或乙肝兩對半。HBsAg、抗-HBs和HBeAg常用雙抗夾 心法檢測,抗-HBe和抗-HBc常用競爭抑制法檢測,抗-HBc IgM常用捕獲法檢測。 肝炎病毒感染-HBV感染3 臨床意義HBsAg HBV感染后首先出現(xiàn)HBsAg,是早期診斷的目的。 窗口期或S基因突變可出現(xiàn)HBsAg陰性反響。 定量分析HBsAg用于動(dòng)態(tài)評價(jià)患者病情和抗病毒治療 效果有非常重要的價(jià)值。 HBsAg轉(zhuǎn)陰并出現(xiàn)抗-HBs是HBV感染治療的最終目的。 肝炎病毒感染-HBV感染4 臨床意義
9、抗-HBs 抗-HBs是HBV維護(hù)性抗體的一種,血清濃度大于 10mIU/ml才有維護(hù)作用。 陽性反響見于HBV感染恢復(fù)期、既往感染或乙肝疫苗 接種后。 肝炎病毒感染-HBV感染5 臨床意義HBeAg HBeAg普通僅見于HBsAg陽性者,陽性反響表示HBV傳 染性較強(qiáng),患者處于高感染低應(yīng)對期。 肝炎病毒感染-HBV感染6 臨床意義抗-HBe 抗-HBe可長期存在,無維護(hù)作用。HBeAg消逝伴抗- HBe出現(xiàn)稱為HBeAg的血清轉(zhuǎn)換。 肝炎病毒感染-HBV感染7 臨床意義抗-HBc 抗-HBc IgM是HBV急性感染的早期目的和病毒復(fù)制標(biāo) 志。 抗-HBc IgG是既往感染的標(biāo)志,現(xiàn)癥感染也可
10、出現(xiàn)。 肝炎病毒感染-HCV感染 常用檢驗(yàn)工程有抗-HCV和HCV中心抗原,常用 ELISA和CLIA檢測。 臨床意義:抗-HCV不是維護(hù)性抗體,僅作為HCV 感染的標(biāo)志物之一,不能區(qū)分現(xiàn)癥感染與既往感染。 HCV中心抗原檢測是HCV感染的直接證據(jù),實(shí)踐上可以 用于HCV現(xiàn)癥感染的判別。 肝炎病毒感染-HEV感染 HEV均為急性感染。常用檢驗(yàn)工程有抗HEV IgG和 抗HEV IgM,檢測方法主要是ELISA。普通以為抗HEV IgM是早期感染的目的。 呼吸道病毒感染1 常見病毒:流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞 病毒和冠狀病毒。 高危病毒:高致病性禽流感病毒H5N1、SARS 冠狀病毒。 呼
11、吸道病毒感染2 人流感病毒:特異性抗原在感染早期即可呈陽性 反響,具有診斷價(jià)值。 禽流感病毒:H5N1被稱為高致病性禽流感,IgM 抗體檢測用于近期感染的輔助診斷。 呼吸道病毒感染3 副流感病毒感染:IgG抗體無維護(hù)作用??乖?于早期診斷,IgM抗體用于近期感染的輔助診斷。 呼吸道合胞病毒感染:RSV抗原用于早期診斷, IgM抗體用于近期感染的輔助診斷。 呼吸道病毒感染4 SARS冠狀病毒引起SARS,急性期傳染性強(qiáng),埋伏 期傳染性低,康復(fù)后無傳染性。急性期到恢復(fù)期出現(xiàn) IgM抗體或者IgG抗體效價(jià)增長4倍以上,提示有近期 感染。 輪狀病毒感染 經(jīng)糞-口途徑傳播,引起嬰幼兒和成人急性胃腸 炎
12、和腹瀉。抗原檢測用于早期診斷和疫情監(jiān)測。IgM 抗體用于早期輔助診斷。 EB病毒感染 EBV抗原有EA、VCA、MA、NA和LMP。初次感染后,體 內(nèi)首先出現(xiàn)抗VCA抗體和抗MA抗體,其后出現(xiàn)抗EA抗體, 恢復(fù)期出現(xiàn)抗NA抗體。 IgA抗體與鼻咽癌關(guān)系親密,IgM抗體、短期存在的 IgG抗體和異嗜性抗體用于感染傳染性單核細(xì)胞增多癥的 輔助診斷。 人類免疫缺陷病毒感染1 HIV主要經(jīng)性接觸、血液和母嬰傳播,分為HIV-1和 HIV-2兩個(gè)型,臨床以HIV-1型最常見。 抗體檢測是HIV感染診斷的金規(guī)范,RNA和抗原檢測可 以發(fā)現(xiàn)窗口期感染者,CD4+和CD8+ T淋巴細(xì)胞檢測可用于 感染者免疫情
13、況評價(jià)。 人類免疫缺陷病毒感染2 常用檢驗(yàn)工程有抗-HIV、抗-HIV抗體確認(rèn)實(shí)驗(yàn)、HIV 抗原抗體結(jié)合檢測和HIV p24抗原??贵w初篩常用ELISA和 CLIA,抗體確認(rèn)常用IBT。 人類免疫缺陷病毒感染3 初篩實(shí)驗(yàn) 初篩實(shí)驗(yàn)陽性反響,用原有試劑和另外一種不 同原理或廠家的試劑,或另外兩種不同原理或 不同廠家的試劑進(jìn)展復(fù)檢實(shí)驗(yàn)。兩種試劑均呈陰性 反響,那么報(bào)告抗-HIV陰性;如均呈陽性反 響,或一陰一陽,需送艾滋病確證明驗(yàn)室進(jìn)展確證 明驗(yàn)。 人類免疫缺陷病毒感染4 確認(rèn)實(shí)驗(yàn) 確認(rèn)實(shí)驗(yàn)運(yùn)用HIV-1/2混合型試劑進(jìn)展檢測, 陰性反響,報(bào)告抗-HIV陰性。陽性反 響,報(bào)告抗-HIV陽性;不是陰
14、性反響, 又不滿足陽性判別規(guī)范,報(bào)告抗-HIV不確定 ,建議4周后隨訪檢測,依然不能確定者,繼續(xù) 隨訪到8周。 第五節(jié)第五節(jié) TORCH TORCH感染感染 重點(diǎn)提示 弓形蟲感染 風(fēng)疹病毒感染 巨細(xì)胞病毒感染 單純皰疹病毒感染 弓形蟲和風(fēng)疹病毒感染 TOX感染:可引起先天性TOX病。新生兒IgM陽性反響 提示宮內(nèi)感染。雙份血清IgG效價(jià)增高4倍以上或IgG低親 和力,提示近期感染。 RV感染:可導(dǎo)致先天性RV綜合征。孕齡期母親篩查從 未感染過RV的個(gè)體,注射疫苗,使其獲得免疫力,建議在 懷孕前檢測??筊V IgM作為近期感染的目的,新生兒IgM 陽性反響提示宮內(nèi)RV感染??筊V IgG單獨(dú)陽性
15、反響提示既 往感染,與抗RV IgM同時(shí)陽性反響,提示有近期感染。 巨細(xì)胞病毒和單純皰疹病毒感染 CMV感染:假設(shè)妊娠3個(gè)月內(nèi)發(fā)生宮內(nèi)感染,可引起流 產(chǎn)、死胎、早產(chǎn)、小頭、智力低下等。新生兒IgM陽性反 響提示宮內(nèi)CMV感染。雙份血清IgG效價(jià)增高4倍以上或IgG 低親和力,可輔助診斷近期活動(dòng)性感染。 HSV感染:有HSV-1和HSV-2兩個(gè)亞型,宮內(nèi)感染可引 起流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎或畸形。新生兒IgM陽性反響提示宮 內(nèi)HSV感染。急性期和恢復(fù)期雙份血清IgG效價(jià)增高4倍以 上,提示有HSV近期感染。 第六節(jié)第六節(jié) 寄生蟲感染寄生蟲感染 重點(diǎn)提示 瘧原蟲感染:外周血中瘧原蟲抗原和特異性抗體檢測 可
16、輔助診斷瘧原蟲感染,常用ELISA檢測。 血吸蟲感染:外周血抗原和抗體檢測可輔助診斷血吸 蟲感染,常用ELISA和COPT檢測。 絲蟲感染:抗原和抗體檢測用于輔助診斷。 豬囊尾蚴感染:免疫學(xué)檢測對病原學(xué)和影像學(xué)不能確 診的可疑患者有重要意義。 第七節(jié)第七節(jié) 其他病原體感染其他病原體感染 重點(diǎn)提示 梅毒螺旋體感染 支原體感染 衣原體感染 立克次體感染 梅毒螺旋體感染1 TP感染后機(jī)體產(chǎn)生特異性抗體和非特異性抗體兩類。 前者檢測抗TP抗體,常用ELISA、CLIA和PA檢測。后者檢 測反響素,常用RPR和TRUST檢測。 梅毒螺旋體感染2 臨床意義 支原體、衣原體和立克次體感染 支原體感染:檢測抗原可用于早期診斷。急性期和恢 復(fù)期雙份血清抗體效價(jià)增高4倍以上,提示有支原體近期 感染。 衣原體感染:直接抗原可用于早期診斷。急性期和恢 復(fù)期雙份血清抗體效價(jià)增高4倍以
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